泛素

摘要： RNF180是具有泛素连接酶活性的一类环指蛋白,可通过参与泛素-蛋白酶体系统影响细胞增殖、分化及凋亡等多种生理过程。研究表明,RNF180在肿瘤中多呈低表达,可抑制胃癌细胞的增殖侵袭,影响胃癌淋巴结转移及预后。RNF180的启动子甲基化引起的基因表达沉默是导致RNF180蛋白在肿瘤中低表达的主要原因,重要甲基化位点与癌前病变、胃癌淋巴结转移及患者预后相关。故RNF180具有成为胃癌肿瘤生物标志物的潜力。

摘要： 泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用。为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(Et Ub)基因,将其亚克隆至原核表达载体pET28a(+),转入大肠杆菌BL21,诱导表达制备rEt Ub蛋白,用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。用qPCR和Western blot方法检测柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段EtUb基因的转录和蛋白质翻译水平。结果显示:EtUb基因在柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中的转录和翻译水平均高于未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子阶段;间接免疫荧光实验显示该蛋白主要分布于子孢子和第二代裂殖子的顶端表面;抗体入侵抑制实验显示兔抗rEt Ub-IgG能明显抑制子孢子入侵BHK细胞,浓度为300μg/mL时,抑制率达到36%;免疫共沉淀实验共筛选出10个与Et Ub潜在互作的虫体蛋白,包括Myosin A、Microneme protein 3等。研究结果为深入研究EtUb基因在球虫中的功能奠定了基础。

摘要： 蛋白质合成与降解的动态平衡是维持心脏稳态所必需的。因此,蛋白酶体功能的受损可能与心脏疾病的发生密不可分。蛋白酶体降解机制潜藏在心血管生物学和疾病中,这些细胞通路被认为是与临床疾病治疗相关的靶点。本综述总结了有关心脏生物学中涉及的特异性E3连接酶的最新研究,以及蛋白酶体在心脏疾病中调节蛋白质控制的基本机制,讨论泛素蛋白酶体系统的功能在心脏疾病中的干预及治疗的可能。

摘要： 2022年7月,南开大学王宁宁教授团队在《Plant,Cell and Environment》上发表了题为“N7-SSPP fusion gene improves salt stress tolerance in transgenic Arabidopsis and soybean through ROS scavenging”的研究论文。研究发现,过表达SSPP能够显著提高转基因植物在盐胁迫条件下对活性氧的清除能力,进而增强植株对高盐胁迫的耐受性,但明显抑制营养生长速度,导致该基因无法被直接应用于转基因作物新品种的培育。该团队前期还发现,乙烯合成关键酶AtACS7蛋白N末端由14个氨基酸构成的短肽(命名为N7)具有转录后调控功能,通过26S泛素/蛋白酶体途径促进与之融合的多种蛋白降解,且N7介导的蛋白降解受盐胁迫和衰老信号负调控。

摘要： 近年来,蜱媒疾病的不断发生威胁着人类的健康和公共卫生安全。明确病原体与蜱媒唾液腺细胞相互作用的信号调控元件及通路、揭示蜱媒病原传播的分子基础,有助于阻断蜱媒疾病的传播、制定和优化蜱媒传染病的防控策略。本文通过对蜱类主要细胞免疫系统信号通路(如Toll、IMD、JAK/STAT等)及其泛素化(特别是E3泛素连接酶)机制在蜱类调控信号通路和免疫逃逸方面的作用进行回顾,以期探讨E3泛素连接酶对于蜱媒病原的感染、定植和传播的生物学意义,为科学阻断蜱媒病原传播、制定蜱媒传染病的防控策略提供技术支持。

摘要： 泛素是一种真核细胞信号分子,主要参与蛋白质降解和DNA修复等生命活动.泛素Ser65位被磷酸化之后,在溶液中呈现两个稳定的溶液构象,这两种构象的比例能够被pH调控,本研究利用NMR进一步发现它还受到温度影响.基于该发现,对磷酸化泛素进行了19F化学标记,利用19F NMR方法表征了不同温度下磷酸化泛素两种构象的比例,发现两者比例变化与温度之间的关系可以通过线性方程来描述,利用该方程可以通过构象比例计算样品内部温度,因此可以作为一种基于NMR检测的温度传感器.本文所开发的基于19F化学标记磷酸化泛素的温度传感器不仅能够作为体外样品温度检测的有力工具,还有望用于检测细胞内部的温度.从而有助于揭示生物学特性和功能.

摘要： 将193 nm激光与傅里叶变换离子回旋共振(FT-ICR)质谱仪结合,研究了不同价态的泛素蛋白离子的紫外光解离质谱.结果表明,在光解离过程中向分析池内引入适量的碰撞气,不仅能增加母体离子的裂解率,也能提高碎片离子的捕获效率.相对于碰撞辅助解离(CAD)中产生的b和y离子,紫外光解离(UVPD)方法能够产生更为丰富的不同种类碎片离子.其中,对于+11价泛素离子,蛋白质序列的覆盖率接近80％,远高于对应的CAD实验结果.与已往报道不同的是,裂解覆盖率呈现出较强的电荷相关性.因此,如何进一步提高较低电荷态的蛋白离子的解离效率和序列覆盖率还需深入研究.

摘要： 去泛素化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一,它影响了靶蛋白在细胞内的定位、稳定性和功能,以及相应的细胞周期、分化、凋亡调节、内吞、自噬和损伤后DNA修复等细胞生理活动.综合国内外有关去泛素化酶的研究文献进行分析和总结,重在阐述去泛素化酶的复杂功能.去泛素化酶可与多个靶蛋白相互作用,而细胞内多个其他蛋白又可以修饰或影响同一个去泛素化酶.去泛素化酶之间、去泛素化酶与靶蛋白之间、细胞内其他蛋白与去泛素化酶之间形成了一个复杂的相互作用网络.论文可以为去泛素化酶的功能研究提供参考.

摘要： 去泛素化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一,它影响了靶蛋白在细胞内的定位、稳定性和功能,以及相应的细胞周期、分化、凋亡调节、内吞、自噬和损伤后DNA修复等细胞生理活动。综合国内外有关去泛素化酶的研究文献进行分析和总结,重在阐述去泛素化酶的复杂功能。去泛素化酶可与多个靶蛋白相互作用,而细胞内多个其他蛋白又可以修饰或影响同一个去泛素化酶。去泛素化酶之间、去泛素化酶与靶蛋白之间、细胞内其他蛋白与去泛素化酶之间形成了一个复杂的相互作用网络。论文可以为去泛素化酶的功能研究提供参考。

摘要： 泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome system, UPS)参与了许多精子相关的获能和受精过程,并在获能和受精中起到一定作用。本文综述了精子获能过程中UPS的参与以及发生的相关变化,包括一系列已知的蛋白酶体相关的精子蛋白,并讨论了这些蛋白质与蛋白酶体之间的关系。蛋白酶体抑制剂能显著改变获能并阻止顶体反应,26S蛋白酶体降解AKAP3部分调节导致获能的蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的释放。此外,在整个获能过程中,20S核心亚基的定位和丰度发生变化。

摘要： @@细胞周期蛋白Cyclin D1是作用于细胞周期G1期的重要细胞周期蛋白，主要调节细胞向S期的转变。Cyclin D1过度表达或降解失常可使细胞失去对生长因子的依赖，使Gl/S调控点失控，细胞不停进入细胞周期，从而造成恶性增生发生癌变。因此，一些药物调节的Cyclin D1泛素-蛋白酶体降解被认为是该药物的肿瘤化学预防一个重要机制。

摘要： 目的：构建结核杆菌Ag85A抗原DNA疫苗(pA)和泛素基因与Ag85A抗原基因融合的DNA疫苗(pUA),观察疫苗在小鼠中的免疫应答。方法：分别将构建的DNA疫苗肌肉注射免疫BALB／c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γ、IL-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应,比较融合基因DNA疫苗和单基因DNA疫苗诱导的免疫应答的强度。结果：pA组小鼠血清IgG水平高于puA组(P<0.01),但IgG2a／IgG1比值低于pUA组((4.16±0.2)vs(7.88±0.3),P<0.01)。与pA组相比,pUA组小鼠IFN-γ分泌水平增高(P<0.01),IL-4分泌水平下降(P<0.01);pUA组的CTE活性高于pA组。结论：融合基因DNA疫苗诱生的抗原特异的体液免疫应答不及单基因DNA疫苗,但其能诱导更强的细胞免疫应答。表明泛素-Ag85A融合基因DNA疫苗对于防治结核病可能比单基因DNA疫苗更为有效。

摘要： 细胞内蛋白质的降解在过去一个相当长的时间内为许多人所忽略。溶酶体的发现仅仅解决了细胞外蛋白质通过胞饮作用被降解及胞内非特异降解的过程。蛋白在细胞内降解的另一条途径-泛素-蛋白酶体(ubiquitin-proteasome)的发现，为这个领域带来了革命性的影响,也为新药研究注入了新思想。本文介绍了泛素-蛋白酶体以及蛋白酶体抑制剂的各种性质。

摘要： 目的：研究泛素(ubiquitin)和细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及其临床意义。rn 方法：应用免疫组化法(SP)检测20例正常卵巢组织、20例上皮性良性卵巢肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中ubiquitin和cyclinB1的表达情况，结合上皮性卵巢癌的组织学类型、病理分级、临床分期及淋巴结转移情况进行分析，并研究两指标问的相关性。rn 结果：①ubiquitin在上皮性卵巢癌、正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤中的阳性表达率分别为34%(17/50)、5%(1/20)、10%(2/20);而cyclinBl的阳性表达率分别为42%(21/50)、5%(1/20)、15%(3/20)。两者在卵巢癌中的阳性表达率均显著高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤(P<0.05)，有统计学意义;后两者相比无显著性差异。②ubiquitin和cyclinB1在上皮性卵巢癌中的阳性表达率随细胞分化程度的降低、临床分期增加而增高(P<0.05);伴区域淋巴结转移者，其表达增高(P<0.05)。③ubjquitin和cyclinB1在卵巢癌中的表达呈正相关性(r=0.301，P0.05)。rn 结论：Ubiquitin和cyclinBl表达水平与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关，有可能成为评估上皮性卵巢癌恶性程度及判定患者预后的重要指标。

摘要： 本文就蛋白泛素/酶体途径的组成及生化特性,泛素/蛋白酶体途径的一些生物学功能,研究泛素/蛋白酶体途径的一些技术和方法,泛素/蛋白酶体途径与高等植物有性生殖等方面作了较全面论述.

摘要： 利用SOE技术将PRRSV M基因与小鼠泛素(Ubiquitin,Ub)基因融合,并将融合后的基因克隆至真核表达载体pVAX1中,构建真核表达质粒pVAX1-U-M。利用真核表达质粒DNA免疫小鼠,通过检测体液免疫反应与细胞免疫反应进一步研究pVAX-U-M的免疫效果。IFA试验结果表明,真核表达质粒pVAX1-U-M 能够在BHK-21细胞内成功表达目的基因,小鼠免疫试验结果表明,真核表达质粒pVAX1-U-M能够在小鼠体内诱生PRRSVELISA抗体与细胞免疫反应。但是,ELIsA抗体水平比较低,而细胞免疫的水平则相对较高。这说明泛素在一定程度上可以促进PRRSV M基因诱导细胞免疫反应,但对体液免疫未见到同样作用。本研究的结果为进一步探讨PRRSVM蛋白在免疫中的作用、泛素的功能,也为PRRS新型疫苗的研究提供基础数据。

摘要： 本发明公开了一种修饰泛素并抑制泛素化通路的方法。该修饰是由革兰氏阴性菌中由III型分泌系统分泌的效应蛋白家族实现的。该家族的效应蛋白是一类二磷酸腺苷(ADP)核糖基转移酶，特异性地对真核生物内泛素分子第66位的苏氨酸残基进行单ADP核糖基化修饰，并且对类泛素蛋白SUMO和NEDD8无修饰作用。这种对泛素的修饰作用不能被真核细胞内去ADP核糖基化修饰的水解酶可逆地去修饰，从而有效破坏了宿主细胞内泛素介导的信号通路，该方法将在杀死肿瘤细胞以及改变细胞信号通路等发挥重要作用。

摘要： 本发明涉及包含泛素或泛素样蛋白、膜易位序列和生物活性分子的融合蛋白及其用途。具体地，本发明涉及包含泛素或泛素样蛋白、与该泛素或泛素样蛋白的C-末端连接的膜易位序列、和与该膜易位序列的C-末端连接的生物活性分子的跨膜融合蛋白，编码所述跨膜融合蛋白的多核苷酸，包含所述多核苷酸序列的重组表达载体，由所述重组表达载体转化的细胞，和使用所述跨膜融合蛋白将所述生物活性分子递送至细胞中的方法。

摘要： 本发明提供了产生用于评价类泛素或泛素蛋白去修饰酶活性的生化工具的方法，包括：在蛋白酶Lbpro的存在下，使成熟化类泛素或泛素蛋白或其变体与甘氨酰化工具分子接触，从而获得所述用于评价类泛素或泛素蛋白去修饰酶活性的生化工具。

摘要： 本公开的特征为用于靶向泛素活化酶(E1)的结构稳定化肽和/或具有弹头的结构稳定化肽抑制剂。还公开了在治疗表达E1或依赖E1的癌症或疾病中使用所述结构稳定化肽和具有弹头的结构稳定化肽的方法。还提供了用于治疗表达E1或依赖E1的疾病的包括所述结构稳定化肽和/或具有弹头的结构稳定化肽的组合疗法。

摘要： 本发明公开了一种修饰泛素并抑制泛素化通路的方法。该修饰是由革兰氏阴性菌中由III型分泌系统分泌的效应蛋白家族实现的。该家族的效应蛋白是一类二磷酸腺苷(ADP)核糖基转移酶，特异性地对真核生物内泛素分子第66位的苏氨酸残基进行单ADP核糖基化修饰，并且对类泛素蛋白SUMO和NEDD8无修饰作用。这种对泛素的修饰作用不能被真核细胞内去ADP核糖基化修饰的水解酶可逆地去修饰，从而有效破坏了宿主细胞内泛素介导的信号通路，该方法将在杀死肿瘤细胞以及改变细胞信号通路等发挥重要作用。

摘要： 本发明尤其提供了重组工程化的去泛素化酶(DUB)和用于治疗或缓解受试者中的遗传性离子通道病，例如长QT综合征、Brugada综合征或囊性纤维化的方法。进一步提供了用于从导致这类遗传性离子通道病的突变中筛选出可通过本文公开的重组工程化的DUB治疗的运输缺陷突变的方法。

摘要： 一种从蛋白乳中提取泛素及类泛素的方法。？？？？本发明为生物技术领域，是一种从动物或植物的蛋白乳中提取泛素和类泛素的方法：将植物热磨制浆，或者将动物的组织、皮、肉清洗、绞碎后湿磨制浆，离心分离，得到的蛋白乳加热后过滤，得到粗提液和沉淀；将沉淀清洗后再次过滤，所得滤液与粗提液合并，加入活性炭搅拌后除去活性炭，得到的上清液经离心机分离，得到的固相进行喷雾干燥，得到泛素及类泛素，得到的液相与前述蛋白乳合并，再次提取。该方法工艺流程短，操作简单，不引入不安全物质，减少能源消耗，同时综合利用动物或植物，制得的泛素和类泛素可应用在医药、保健品等领域。

摘要： 本发明公开了一种从动物提取泛素及类泛素的方法，包含如下步骤：首先将节肢动物、环节动物、刺胞动物、可食用鱼类或家禽的组织、皮、肉及家畜的组织、皮、肉清洗干净，得到原料；然后将原料绞碎后湿磨，得到浆液；混匀浆液，加入碳酸氢钠或氢氧化钠，搅拌、离心收集上清液；将所述上清液浓缩至原体积的1/10～1/25，得到蛋白浓缩液；加入乙醇，静置后离心收集沉淀；用Tris-Gly缓冲液溶解沉淀配成溶液，将溶液经两次过滤收集分子量在6000～14000之间的截留液，即所述泛素及类泛素。该方法生产工艺简单、成本低，能制得安全性高、营养价值好的泛素及类泛素产品。

摘要： 本发明公开了一种利用单细胞菌体蛋白提取泛素及类泛素的方法，包括如下步骤：将菌株接种到完全培养基的斜面上制成斜面种子；然后将斜面种子上的单菌落或孢子一次接种到摇瓶、一级种子培养基中进行培养；其次按照发酵罐体积的1～3%取一级种子接种于发酵罐内进行发酵得到一次发酵营养液；再将一次发酵营养液用膜过滤或离心分离的方式处理得到菌体，将所述菌体加入PBS缓冲液中，加酶混匀后进行高压匀浆得到细胞破碎混合液；然后将其用膜过滤或离心的方法处理得到粗蛋白液；再将粗蛋白液用梯度离心分离或两次超滤膜过滤，得到所述泛素及类泛素。该方法选用原料价格低廉，有效降低生产价格，且制备过程简单，可用于大规模生产。

摘要： 本发明公开了一种从植物中提取泛素及类泛素的方法，包含如下步骤：1）将植物根茎、叶、种子或果实经清洗、消毒、洗涤去除消毒剂，得到原料；2）将原料粉碎，使其满足胶体磨的使用条件；3）若原料是植物种子，那么先经浸泡再用胶体磨进行湿磨；若是植物根茎、叶或果实则直接进行湿磨，得到植物粗浆液；4）利用纤维素酶处理植物粗浆液，得到粗浆处理液；5）将粗浆处理液细磨为细浆；6）将细浆离心分离，收集上清液得到粗蛋白液；7）将粗蛋白液多次用不同孔径膜过滤，得到泛素及类泛素。该方法工艺简单，操作过程中不引入不安全物质，减少能源消耗；同时综合利用植物；其制得的蛋白质即泛素及类泛素，具有较高的利用价值。