构建瘦肉率高、生长快、繁殖力高且抗系列流行病的优质猪核移植供体细胞的方法及其应用

摘要

本发明公开了构建瘦肉率高、生长快、繁殖力高且抗系列流行病的优质猪核移植供体细胞的方法及其应用。一种用于猪MSTN、SST、INHA、CD163及pAPN五基因编辑的CRISPR/Cas9系统，包含Cas9表达载体、分别针对猪MSTN、SST、INHA、CD163、pAPN基因的gRNA表达载体；所述的Cas9表达载体质粒全序列如SEQ ID NO.2所示。本发明分别针对MSTN、SST、INHA、CD163及pAPN基因的不同靶点设计了相应的gRNA表达载体，通过筛选获得具有较高编辑效率的gRNA及其表达载体。配合本发明改造的Cas9高效表达载体进行基因编辑，编辑效率比原载体有了显著的提高。