一种基于DNA质粒转染的拯救PEDV ZJU/G2/2013株的反向遗传系统

摘要

本发明公开了一种基于DNA质粒转染的拯救PEDV ZJU/G2/2013株的反向遗传系统，包括：包含猪流行性腹泻病毒G2基因亚型ZJU/G2/2013株全基因组cDNA的重组表达载体，其中ORF3区被替换为GLuc报告基因；包含猪流行性腹泻病毒G2基因亚型ZJU/G2/2013株N基因的辅助质粒，所述猪流行性腹泻病毒G2基因亚型ZJU/G2/2013株的全基因组序列GenBank号为KU558701.1。本发明构建的感染性克隆带有GLuc报告基因，拯救的重组病毒在感染动物和细胞时会产生分泌型Gaussia荧光素酶，非常易于检测，在病毒毒力分析等实验研究方面有很强的应用价值。同时，由于ORF3区被替换为GLuc报告基因，本系统拯救的重组病毒可制成新型标记疫苗，通过检测猪血清中是否有Gaussia荧光素酶，快速区别疫苗株免疫和野毒株感染，实用价值很高。