一种预防肠道菌群失调的组合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种预防肠道菌群失调的组合物及其制备方法和应用，包括低聚异麦芽糖28份‑40份、菊粉15份‑20份、乳糖醇8份‑12份、低聚果糖5份‑10份、植物乳杆菌4份‑6份、臭灵丹酸5份‑8份、抗性糊精5份‑10份。本发明提供的组合物通过各组分协同作用，有效改善肠道菌群失调引起的腹泻、腹痛、腹胀、便秘、过敏等症状，且所得组合物从益生菌在肠道内的定值与肠粘膜屏障损伤的修复等原因入手，通过各组分的相互配合，协同作用，达到有效调节与改善肠道菌群失调相关疾病的目的，本发明不添加蔗糖、麦芽等辅料，同时添加益生元、膳食纤维，促进益生菌在肠道定植，安全可靠，可作为长期食用改善肠道菌群失调疾病的功能性食品，且抗菌消炎效果显著。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种预防肠道菌群失调的组合物及其制备方法和应用。

背景技术

人体肠道菌群从婴儿出生开始就与人类相伴，组成了人体不可或缺的功能强大的微生态系统，在人类营养、代谢、疾病等各个方面发挥着巨大的作用，影响着人类的发育和健康，人的一生中胃肠道正常菌群几乎变化不大，正常成年人胃肠道菌群型态是相当稳定的，只有患病或用药时才被干扰，发生紊乱，当从青壮年过渡到老年，随着梭菌、乳杆菌和肠杆菌的增加，双歧杆菌逐渐减少，人体衰老也逐渐表现出来；随年龄增长，与肠道菌群紊乱相关疾病的发生率增高，正常生理状态下，肠道菌群与机体处于动态平衡状态，但当正常菌群受到来自于机体内外的理化、生物因素的刺激时，就会导致肠道菌群失衡，进而引发疾病，导致肠道菌群失调的原因很多，主要有饮食改变、疾病及抗生素的使用等，菌群失衡时致病菌分泌的肠毒素使肠黏膜通透性增高，其分泌的免疫抑制性蛋白可致黏膜免疫失调，目前国内调节肠道菌群失调的产品多集中在增加有益菌的摄入量，达到调节肠道菌群失调的目的，忽略了有益菌在肠道的定值及对肠粘膜屏障损伤的修复，抑菌效果不理想，因此，亟需一种预防肠道菌群失调的组合物及其制备方法和应用来解决以上问题。

发明内容

针对上述存在的技术不足，本发明的目的是提供一种预防肠道菌群失调的组合物及其制备方法和应用，以解决背景技术中提出的问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种预防肠道菌群失调的组合物，包括低聚异麦芽糖28份-40份、菊粉15份-20份、乳糖醇8份-12份、低聚果糖5份-10份、植物乳杆菌4份-6份、臭灵丹酸5份-8份、抗性糊精5份-10份、乳双歧杆菌0.8份-1份、两岐双歧杆菌0.5份-0.8份、嗜酸乳杆菌0.8份-1份、长双歧杆菌0.5份-1份、短双歧杆菌0.4份-0.8份和鼠李糖乳杆菌1份-1.5份。

优选地，包括低聚异麦芽糖30份-35份、菊粉16份-18份、乳糖醇8份-10份、低聚果糖6份-8份、植物乳杆菌5份-6份、臭灵丹酸6份-8份、抗性糊精6份-8份、乳双歧杆菌0.8份-1份、两岐双歧杆菌0.6份-0.8份、嗜酸乳杆菌0.9份-1份、长双歧杆菌0.6份-1份、短双歧杆菌0.5份-0.6份和鼠李糖乳杆菌1.1份-1.3份。

优选地，一种预防肠道菌群失调的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、植物乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的植物乳杆菌冰浴溶解后，培养复壮，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到植物乳杆菌冻干粉；

S2、嗜酸乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的嗜酸乳杆菌取出培养，获得新鲜的生产菌株，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到植物乳杆菌冻干粉；

S3、鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的鼠李糖乳杆菌取出培养，获得新鲜的生产菌株，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到鼠李糖乳杆菌冻干粉；

S4、臭灵丹酸干粉的制备：将臭灵丹酸联合砂仁干燥并粉碎，经碱液浸取并酸化，得沉淀物；收集沉淀物，浓缩萃取液，得浓缩物；浓缩物再洗脱，得到臭灵丹酸富集流份，再浓缩上柱，洗脱，回收试剂，浓缩干燥即得臭灵丹酸干粉；

S5、混合：将植物乳杆菌冻干粉、水苏糖、抗性糊精、乳双歧杆菌、两岐双歧杆菌、嗜酸乳杆菌冻干粉、臭灵丹酸干粉、长双歧杆菌、短双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌冻干粉均匀混合，再加入低聚异麦芽糖、菊粉、乳糖醇和低聚果糖混合均匀，得到混合物，即得到所述预防肠道菌群失调的组合物。

优选地，所述步骤S1中植物乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的植物乳杆菌保菌管，置于冰盒中冰浴溶解后，使用接种环挑取种子液在固体培养基上划线，置于36℃恒温培养箱中培养26～45h，使菌种复壮；挑取单菌落接种于5mL液体MRS培养基中，在37℃恒温培养箱中培养18～24h；在化料罐中加入培养基，搅拌6-15min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度110-115℃，时间12-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-50℃，发酵时间30-40h；待发酵pH值4.0-5.0，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到植物乳杆菌冻干粉。

优选地，所述步骤S2中嗜酸乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的嗜酸乳杆菌保菌管，加入新鲜的脱脂乳培养基中，并置于36℃恒温培养箱中培养8h，凝乳后即获得新鲜的生产菌株；将获得的新鲜菌株培养物以3％的量加入装有100mL种子培养基的250mL三角瓶中，混匀后置于36℃恒温培养箱中培养18～24h，得到种子液；在化料罐中加入培养基，搅拌5-20min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度105-115℃，时间20-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间22-25h；待发酵pH值5.0-6.0，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到嗜酸乳杆菌冻干粉。

优选地，所述步骤S3中鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的鼠李糖乳杆菌保菌管，加入新鲜的脱脂乳培养基中，并置于36℃恒温培养箱中培养9h，凝乳后即获得新鲜的生产菌株，将获得的新鲜菌株培养物以3％的量加入装有100mL种子培养基的250mL三角瓶中，混匀后置于36℃恒温培养箱中培养18～24h，得到种子液；在化料罐中加入培养基，搅拌5-20min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度105-115℃，时间10-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间20-30h；待发酵pH值5.5-6.5，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到鼠李糖乳杆菌冻干粉。

优选地，所述步骤S4中臭灵丹酸干粉的制备方法如下：将臭灵丹酸联合砂仁干燥并粉碎至40-50目，经碱液浸取，将浸取液酸化至pH2-3，得沉淀物；收集沉淀物，以有机溶剂萃取1-2次，浓缩萃取液，得浓缩物；浓缩物再经大孔吸附树脂柱，先以乙酸乙酯-甲醇洗脱，得到臭灵丹酸富集流份，再浓缩上柱，用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，回收试剂，浓缩干燥即得臭灵丹酸干粉。

优选地，所述碱液为氢氧化钠溶液、碳酸氢钠溶液、饱和石灰水、氨水等碱性水溶液，所述酸为盐酸、醋酸，所述有机溶剂为氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、乙醚。

优选地，一种预防肠道菌群失调的组合物在制备用于预防肠道菌群失调药物中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明提供的组合物通过各组分协同作用，有效改善肠道菌群失调引起的腹泻、腹痛、腹胀、便秘、过敏等症状，且所得组合物从益生菌在肠道内的定值与肠粘膜屏障损伤的修复等原因入手，通过各组分的相互配合，协同作用，达到有效调节与改善肠道菌群失调相关疾病的目的，本发明不添加蔗糖、麦芽等辅料，同时添加益生元、膳食纤维，促进益生菌在肠道定植，安全可靠，可作为长期食用改善肠道菌群失调疾病的功能性食品，且抗菌消炎效果显著。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。

实施例：

本发明提供了一种预防肠道菌群失调的组合物，包括低聚异麦芽糖28份-40份、菊粉15份-20份、乳糖醇8份-12份、低聚果糖5份-10份、植物乳杆菌4份-6份、臭灵丹酸5份-8份、抗性糊精5份-10份、乳双歧杆菌0.8份-1份、两岐双歧杆菌0.5份-0.8份、嗜酸乳杆菌0.8份-1份、长双歧杆菌0.5份-1份、短双歧杆菌0.4份-0.8份和鼠李糖乳杆菌1份-1.5份。

进一步的，包括低聚异麦芽糖30份-35份、菊粉16份-18份、乳糖醇8份-10份、低聚果糖6份-8份、植物乳杆菌5份-6份、臭灵丹酸6份-8份、抗性糊精6份-8份、乳双歧杆菌0.8份-1份、两岐双歧杆菌0.6份-0.8份、嗜酸乳杆菌0.9份-1份、长双歧杆菌0.6份-1份、短双歧杆菌0.5份-0.6份和鼠李糖乳杆菌1.1份-1.3份。

长双歧杆菌来自健康人体肠道，高活性菌种，具有健胃整肠、抗过敏、提升免疫力等多重作用。

嗜酸乳杆菌经过胃、肠的消化能够大量存活下来；分泌的抗菌素等代谢产物能有效抑制或杀灭大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，通过在肠道上皮细胞形成一层生物屏障，阻止有害菌的入侵；同时有较强的胆盐水解酶活性，通过降解胆盐促进胆固醇的分解代谢，调节胆固醇在血液和肝脏的再分配，从而降低血液中胆固醇含量；还具有抗过敏作用。

低聚异麦芽糖对有益菌(双歧杆菌、乳杆菌、类杆菌等)有显著的增殖作用，而对有害菌(大肠杆菌、梭菌、拟杆菌等)有显著的抑制作用。

双歧杆菌和乳杆菌的增殖会导致有害菌的生长受到抑制。

低聚果糖能够促进小肠蠕动，加快肠道内腐败物质的降解与排除，起到润肠通便、改善粪便性状、预防和减轻便秘的作用，同时低聚果糖能迅速增殖双歧杆菌，在肠粘膜形成菌膜致使病菌难于定植，双歧杆菌在被培育的同时又大量降解低聚果糖，从而产生短链脂肪酸，降低肠腔pH值，直接抑制致病菌的生长，并加快肠腔推进运动。

菊粉有膳食纤维和益生元双重作用，由于人和动物体内都缺乏分解菊粉的酶类，所以菊粉被人体摄入后，不能被胃和小肠吸收，但会被结肠中的双歧杆菌、乳酸菌发酵，从而促进肠道益生菌的产生，具有双歧杆菌增殖因子的作用。

水苏糖被人体肠道内的双歧杆菌吸收利用后可促进生长，继而抑制大肠埃希菌和产气荚膜梭菌等腐败菌的增殖，水苏糖还可被双歧杆菌等肠道有益菌分解生成醋酸和乳酸，使肠内pH下降，从而抑制肠道内有害菌的生长，保持肠道内微生态平衡。

臭灵丹酸具有多方面的药理活性，尤其在抗菌消炎应用上具有广阔的发展前景，具有较好的抗菌消炎作用。

进一步的，一种预防肠道菌群失调的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、植物乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的植物乳杆菌冰浴溶解后，培养复壮，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到植物乳杆菌冻干粉；

S2、嗜酸乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的嗜酸乳杆菌取出培养，获得新鲜的生产菌株，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到植物乳杆菌冻干粉；

S3、鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备：将冷冻的鼠李糖乳杆菌取出培养，获得新鲜的生产菌株，再经发酵后，进行蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，最后冻干，得到鼠李糖乳杆菌冻干粉；

S4、臭灵丹酸干粉的制备：将臭灵丹酸联合砂仁干燥并粉碎，经碱液浸取并酸化，得沉淀物；收集沉淀物，浓缩萃取液，得浓缩物；浓缩物再洗脱，得到臭灵丹酸富集流份，再浓缩上柱，洗脱，回收试剂，浓缩干燥即得臭灵丹酸干粉；

S5、混合：将植物乳杆菌冻干粉、水苏糖、抗性糊精、乳双歧杆菌、两岐双歧杆菌、嗜酸乳杆菌冻干粉、臭灵丹酸干粉、长双歧杆菌、短双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌冻干粉均匀混合，再加入低聚异麦芽糖、菊粉、乳糖醇和低聚果糖混合均匀，得到混合物，即得到所述预防肠道菌群失调的组合物。

进一步的，步骤S1中植物乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的植物乳杆菌保菌管，置于冰盒中冰浴溶解后，使用接种环挑取种子液在固体培养基上划线，置于36℃恒温培养箱中培养26～45h，使菌种复壮；挑取单菌落接种于5mL液体MRS培养基中，在37℃恒温培养箱中培养18～24h；在化料罐中加入培养基，搅拌6-15min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度110-115℃，时间12-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-50℃，发酵时间30-40h；待发酵pH值4.0-5.0，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到植物乳杆菌冻干粉。

进一步的，步骤S2中嗜酸乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的嗜酸乳杆菌保菌管，加入新鲜的脱脂乳培养基中，并置于36℃恒温培养箱中培养8h，凝乳后即获得新鲜的生产菌株；将获得的新鲜菌株培养物以3％的量加入装有100mL种子培养基的250mL三角瓶中，混匀后置于36℃恒温培养箱中培养18～24h，得到种子液；在化料罐中加入培养基，搅拌5-20min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度105-115℃，时间20-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间22-25h；待发酵pH值5.0-6.0，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到嗜酸乳杆菌冻干粉。

进一步的，步骤S3中鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法如下：从冰箱取出冷冻的鼠李糖乳杆菌保菌管，加入新鲜的脱脂乳培养基中，并置于36℃恒温培养箱中培养9h，凝乳后即获得新鲜的生产菌株，将获得的新鲜菌株培养物以3％的量加入装有100mL种子培养基的250mL三角瓶中，混匀后置于36℃恒温培养箱中培养18～24h，得到种子液；在化料罐中加入培养基，搅拌5-20min，保持料液温度55-60℃；将料液杀菌后打入发酵罐，巴氏杀菌温度105-115℃，时间10-30min；将种子液接种至灭菌后的料液中进行发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间20-30h；待发酵pH值5.5-6.5，进行发酵罐内搅拌；蝶式离心、乳化包埋、液氮深冷造粒，冻干，得到鼠李糖乳杆菌冻干粉。

进一步的，步骤S4中臭灵丹酸干粉的制备方法如下：将臭灵丹酸联合砂仁干燥并粉碎至40-50目，经碱液浸取，将浸取液酸化至pH2-3，得沉淀物；收集沉淀物，以有机溶剂萃取1-2次，浓缩萃取液，得浓缩物；浓缩物再经大孔吸附树脂柱，先以乙酸乙酯-甲醇洗脱，得到臭灵丹酸富集流份，再浓缩上柱，用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，回收试剂，浓缩干燥即得臭灵丹酸干粉。

进一步的，碱液为氢氧化钠溶液、碳酸氢钠溶液、饱和石灰水、氨水等碱性水溶液，酸为盐酸、醋酸，有机溶剂为氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、乙醚。

进一步的，一种预防肠道菌群失调的组合物在制备用于预防肠道菌群失调药物中的应用。

本发明提供的组合物通过各组分协同作用，有效改善肠道菌群失调引起的腹泻、腹痛、腹胀、便秘、过敏等症状，且所得组合物从益生菌在肠道内的定值与肠粘膜屏障损伤的修复等原因入手，通过各组分的相互配合，协同作用，达到有效调节与改善肠道菌群失调相关疾病的目的，本发明不添加蔗糖、麦芽等辅料，同时添加益生元、膳食纤维，促进益生菌在肠道定植，安全可靠，可作为长期食用改善肠道菌群失调疾病的功能性食品，且抗菌消炎效果显著。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围，这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。