基于基因编辑技术检测日本乙型脑炎病毒核酸的检测试剂盒及应用

摘要

本发明公开了基于基因编辑技术检测日本乙型脑炎病毒核酸的检测试剂盒及应用，本发明筛选得到一条活性较高的crRNA和一对具有高灵敏性和高特异性的扩增引物，利用CRISPR‑Cas12a检测系统结合一种双标记荧光探针(ROX)，在加热型保温杯中即可完成扩增反应。最终能够实现检测结果直接裸眼可视或荧光可视，针对日本乙型脑炎病毒核酸的检测灵敏度为9拷贝/微升，且能特异区分出猪易感的其他病毒，例如ASFV、PRRSV、PDCoV、TGEV等。本发明操作便捷且设备简易，具有成本低、省时高效、高特异性和高灵敏性等优点，可广泛应用于各大生猪养殖企业，提高养殖业经济效益、为早期诊断提供便利。