一种利用改良CTAB法提取铁皮石斛茎基因组DNA的方法

摘要

本发明涉及CTAB法提取植物基因组DNA技术领域，具体是指一种利用改良CTAB法提取铁皮石斛茎基因组DNA的方法，具体包括以下步骤：(1)材料研磨：取200mg铁皮石斛茎置于提前预冷的研钵中研磨成粉末，将研磨后的粉末转移到2.0ml的离心管中；(2)去多糖处理；(3)提取液萃取；(4)DNA抽提；(5)DNA沉淀；(6)DNA沉淀的洗涤和溶解。本发明的有益效果是：以DTT代替有毒试剂β‑巯基乙醇，大大提高了实验的安全性，在CTAB裂解细胞前，先用溶液A进行数次的去多糖处理，能有效地提高后续DNA提取的质量，同时在溶液A中加入Sorbitol，能有效稳定渗透压，并优化细胞裂解液的配方，加入适量的PVP为了多酚的去除，加入SDS为了更好地去除蛋白质，最终使得DNA质量好。