一种尿酸酶保护液及其在血液灌注器辐射灭菌、储存中的应用

摘要

本发明公开了一种尿酸酶保护液，所述尿酸酶保护液的组分如下：抗氧化剂1～3wt％，温度保护剂2～5wt％，甘露醇0.05～0.5wt％，氯化钙0.5～1.5wt％，pH稳定剂，余量为溶剂。与现有技术相比，本发明的保护液中可以显著降低辐射、高低温对尿酸酶的损伤，可用于尿酸酶制剂在生产过程中需要辐射灭菌处理时的保护液和在运输储存过程中需要抵抗高温、低温时的保护液。

说明书

技术领域

本发明属于医疗器械生产领域，具体涉及一种尿酸酶保护液及其在血液灌注器辐射灭菌、储存中的应用。

背景技术

血液灌流器是进行血液净化时净化物质与血液中被净化物质反应、吸附的场所，以固载尿酸酶的树脂作为血液灌注器的净化物质不仅能起到一般树脂所具有吸附的作用，还能利用尿酸酶对尿酸具有特异性催化作用，达到净化尿酸的目的。尿酸酶可通过传统的吸附法、包埋法、交联法等固定化方法固载到树脂上，形成树脂固定化尿酸酶。血液灌流器作为医疗器械，成为合格的产品在出厂前需要进行辐射灭菌，当菌落达到合格要求时，才能出售使用。但在辐射灭菌的过程中尿酸酶的结构不可避免的受到辐射破坏，导致其活性降低。同时产品在运输储存过程中，高低温的变化也会降低尿酸酶的活性，虽然采用恒温运输储存设备可以避免该问题，但恒温设备成本较高。

虽然已有将尿酸酶与其它成分配制成液体试剂的现有技术，但对于用保护剂降低尿酸酶在辐射、高低温下活性损伤的研究较少。

发明内容

基于上述现有技术的不足，本发明提供一种尿酸酶保护液。

本发明实现上述目的所采用的技术方案如下：

一种尿酸酶保护液，其组分如下：

抗氧化剂1～3wt％，

温度保护剂2～5wt％，

甘露醇0.05～0.5wt％，

氯化钙0.5～1.5wt％，

pH稳定剂，

余量为溶剂。

优选地，所述尿酸酶保护液的组分如下：

抗氧化剂1.5～2.5wt％，

温度保护剂2.5～4wt％，

甘露醇0.1～0.2wt％，

氯化钙0.8～1.2wt％，

pH稳定剂，

余量为溶剂。

更优选地，所述尿酸酶保护液的组分如下：

抗氧化剂2wt％，

温度保护剂3.1wt％，

甘露醇0.1wt％，

氯化钙1wt％，

pH稳定剂，

余量为溶剂。

优选地，所述抗氧化剂由维生素C和维生素E组成。

优选地，所述抗氧化剂由质量比为0.8～1.2:1的维生素C和维生素E组成。

更优选地，所述抗氧化剂由质量比为1:1的维生素C和维生素E组成。

优选地，所述温度保护剂由磷酸二甘油酯、聚乙烯吡咯烷酮和蔗糖组成。

优选地，所述温度保护剂由质量比为16～24:8～12:1的磷酸二甘油酯、聚乙烯吡咯烷酮和蔗糖组成。

更优选地，所述温度保护剂由质量比为20:10:1的磷酸二甘油酯、聚乙烯吡咯烷酮和蔗糖组成。

优选地，所述pH稳定剂为pH＝8～8.5的磷酸盐溶液。

更优选地，所述pH稳定剂为pH＝8.2的磷酸盐溶液。

磷酸盐由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成，优选地，保护液中磷酸氢二钠的浓度为1～3mol/L，更优选地，保护液中磷酸氢二钠的浓度为2mol/L。

可采用水作为溶剂。优选地，当尿酸酶固载在树脂上并作为血液灌流器的净化物质时，所述溶剂采用与人体血浆渗透压基本相等的生理盐水。

上述尿酸酶保护液的用途，所述尿酸酶保护液在尿酸酶制剂的辐射灭菌和/或运输储存中的应用。

优选地，所述尿酸酶制剂为树脂固定化尿酸酶。

一种尿酸酶制剂辐射灭菌和/或运输储存的方法，将所述尿酸酶制剂置于如上所述的尿酸酶保护液中，然后进行辐射灭菌和/或运输储存。

优选地，所述尿酸酶制剂为树脂固定化尿酸酶。

一种血液灌注器辐射灭菌和/或运输储存的方法，所述血液灌注器装填的净化物质为固载尿酸酶的树脂，将如上所述的尿酸酶保护液注入所述的血液灌注器中，然后进行辐射灭菌和/或运输储存。

有益效果

与现有技术相比，本发明的保护液中可以显著降低辐射、高低温对尿酸酶的损伤，可用于尿酸酶制剂在生产过程中需要辐射灭菌处理时的保护液和在运输储存过程中需要抵抗高温、低温时的保护液。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明。

实施例1

原料的准备：

①生理盐水：浓度为0.9wt％的氯化钠水溶液；

②pH稳定剂：pH＝8.2的磷酸盐溶液(按磷酸二氢钠0.4mol/mL，磷酸氢二钠4mol/mL，将磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶于生理盐水)；

③抗氧化剂：将维生素C和维生素E溶于生理盐水，配制成含维生素C10wt％、维生素E10wt％的溶液，备用；

④温度保护剂：将磷酸二甘油酯、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)和蔗糖溶于生理盐水，配制成含磷酸二甘油酯20wt％、PVP 10wt％、蔗糖1wt％的溶液，备用；

⑤甘露醇将甘露醇溶于生理盐水，配制成浓度为1wt％的溶液，备用；

⑥氯化钙将氯化钙溶于生理盐水，配制成浓度为10wt％的溶液，备用。

制备过程：将上述生理盐水、pH稳定剂、抗氧化剂、温度保护剂、甘露醇和氯化钙按体积比为1:5:1:1:1:1，混合均匀，即得到保护液。

保护试验

采用传统吸附法将尿酸酶固载到树脂上，得到树脂固定化尿酸酶。

将固载尿酸酶的树脂装填到血液灌流器中，再将本发明的保护液注入血液灌注器中，使树脂完全浸没即可，经辐射、温度胁迫后，测试血液灌流器对尿酸的净化效果，同时用未加注保护液和加注超纯水的血液灌注器分别作对照实验。每百克(不含水)树脂固定化尿酸酶对1.5L 800μmol/L的尿酸清除率如下：

如试验结果可以看出:

1、树脂固定化尿酸酶在不浸润保护液的情况下，25kGy辐射后对尿酸的清除率由无辐射无温度胁迫时的86.6％下降至19.4％，37℃下保存一周后对尿酸的清除率下降至42.4％，-20℃下保存一周后对尿酸的清除率下降至58.4％。从胁迫前后清除率的下降幅度看，辐射对尿酸酶活性的损伤影响最大，其次是高温(37℃)，最后是低温(-20℃)。另外，用超纯水虽能保持树脂湿润使结构不发生改变，但从对照实验看，在超纯水中尿酸酶在辐射、温度胁迫下其活性反而下降的更严重。

2、采用本发明的保护液对树脂固定化尿酸酶进行保护后，25kGy辐射后树脂固定化尿酸酶对尿酸的清除率可由未保护时的19.4％恢复到80.8％，37℃下保存一周后清除率可由未保护时的42.4％恢复到81.2％，-20℃下保存一周后清除率可由未保护时的58.4％恢复到81.6％，基本恢复到胁迫前的水平。

实施例2

原料的准备：

①生理盐水：浓度为0.9wt％的氯化钠水溶液；

②pH稳定剂：pH＝8.2的磷酸盐溶液(按磷酸二氢钠0.4mol/mL，磷酸氢二钠4mol/mL，将磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶于生理盐水)；

③抗氧化剂：将维生素C和维生素E溶于生理盐水，配制成含维生素C12wt％、维生素E10wt％的溶液，备用；

④温度保护剂：将磷酸二甘油酯、PVP和蔗糖溶于生理盐水，配制成含磷酸二甘油酯24wt％、PVP 12wt％、蔗糖1wt％的溶液，备用；

⑤甘露醇将甘露醇溶于生理盐水，配制成浓度为1wt％的溶液，备用；

⑥氯化钙将氯化钙溶于生理盐水，配制成浓度为10wt％的溶液，备用。

制备过程：将上述生理盐水、pH稳定剂、抗氧化剂、温度保护剂、甘露醇和氯化钙按体积比为1:5:1:1:1:1，混合均匀，即得到保护液。

实施例3

原料的准备：

①生理盐水：浓度为0.9wt％的氯化钠水溶液；

②pH稳定剂：pH＝8.4的磷酸盐溶液；

③抗氧化剂：将维生素C和维生素E溶于生理盐水，配制成含维生素C8wt％、维生素E10wt％的溶液，备用；

④温度保护剂：将磷酸二甘油酯、PVP和蔗糖溶于生理盐水，配制成含磷酸二甘油酯16wt％、PVP 8wt％、蔗糖1wt％的溶液，备用；

⑤甘露醇将甘露醇溶于生理盐水，配制成浓度为1wt％的溶液，备用；

⑥氯化钙将氯化钙溶于生理盐水，配制成浓度为10wt％的溶液，备用。

制备过程：将上述生理盐水、pH稳定剂、抗氧化剂、温度保护剂、甘露醇和氯化钙按体积比为1:5:1:1:1:1，混合均匀，即得到保护液。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。