一种MON1A表达水平检测试剂在制备卵巢癌干性诊断试剂中的应用

摘要

本发明公开了一种MON1A表达水平检测试剂在制备卵巢癌干性诊断试剂中的应用。MON1A在细胞内蛋白质运输的过程中发挥重要作用，其mRNA和蛋白在卵巢癌细胞中的表达水平可用于鉴定卵巢癌细胞的干性，而卵巢癌的干性与卵巢癌恶性程度及预后相关，因此，本发明可用于对卵巢癌恶性程度的判断和对患者预后的判断。

说明书

技术领域

本发明涉及医学分子检验诊断领域，具体涉及一种MON1A表达水平检测试剂在制备卵巢癌干性诊断试剂中的应用。

背景技术

卵巢癌通常起病隐匿，诊断时2/3的患者已处于中晚期，伴有腹水和转移，故而复发率高达70％，五年生存率仅为30％-40％，在女性生殖系统恶性肿瘤中致死率居首，严重威胁女性的生命健康。

肿瘤干细胞是肿瘤组织中一类具有干细胞样功能的细胞，不仅能够自我更新，还可以通过分化形成新的肿瘤组织。因其具有这样的特性，故而肿瘤干细胞有极强的侵袭和迁移能力，并且对化疗药物有更强的耐受性，是肿瘤耐药、进展、复发和转移的重要原因。卵巢癌通常伴有腹水，腹水中含有丰富的炎症因子和生长因子，并且有悬浮的生长环境，利于卵巢癌干细胞的生长，同时可伴随腹水在盆腹腔内广泛播散，在卵巢癌的进展、耐药和复发中发挥至关重要的作用，而临床上尚未建立卵巢癌干性的诊断方法。

MON1A(MON1 homolog A,secretory trafficking associated)在Pubmed数据库中的ID为 84315，在人类染色体中的位置为Chromosome 3,NC_000003.12(49908873-49929811)。 MON1A在细胞内蛋白质运输的过程中发挥重要作用，其与细胞动力蛋白的相互作用在新合成的蛋白从内质网向高尔基体的转运过程中不可或缺。申请人在研究中发现，MON1A的表达水平与卵巢癌干性程度呈反比，与患者的生存期呈正比，提示MON1A具有抑制卵巢癌干细胞干性的作用。因此MON1A表达水平的检测可用于判断卵巢癌的干性程度，进一步判断患者的生存期。所以，本发明提供了一种判断卵巢癌干性程度的新方法，可用于对卵巢癌恶性程度的判断及对患者生存预后的判断。

发明内容

本发明的目的在于提供一种MON1A表达水平检测试剂在制备卵巢癌干性诊断试剂中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种MON1A表达水平检测试剂在制备卵巢癌干性诊断试剂中的应用。

本发明优选的，所述MON1A全称为MON1 homolog A,secretory traffickingassociated，在Pubmed数据中的ID为84315，在人类染色体中的位置为Chromosome 3,NC_000003.12 (49908873-49929811)。

本发明优选的，所述MON1A表达水平指细胞中MON1A的mRNA表达量和蛋白表达量。

本发明优选的，所述检测MON1A mRNA表达的试剂所采用的方法包括探针法、qRT-PCR 法和测序法。

本发明优选的，所述检测MON1A蛋白表达的试剂所采用的方法包括western blot、免疫组化、质谱。

本发明优选的，所述卵巢癌干性指原位、转移灶、腹水和腹膜上的卵巢癌细胞的干性，也包括原代培养卵巢癌细胞、卵巢癌细胞系细胞的干性。

本发明优选的，所述卵巢癌干性的临床检测意义为卵巢癌细胞干性程度高应代表卵巢癌细胞恶性程度高。

本发明优选的，所述卵巢癌干性对临床的诊断意义为卵巢癌干性高应代表相应患者群体的平均生存期短。

本发明优选的，所述卵巢癌干性的体外特征是卵巢癌细胞干性与其成微球能力成正比。

本发明优选的，所述卵巢癌干性标志物为NOTCH2、CD9、TOP、CD29、DKK2、BMI1。

本发明的有益效果在于：本发明首次公开了检测MON1A表达水平的试剂可用于制备卵巢癌干性诊断试剂的用途。检测MON1A mRNA表达水平的试剂所采用的方法包括探针法、 qRT-PCR法和测序法。检测MON1A蛋白表达水平的试剂所采用的方法包括westernblot、免疫组化、质谱。本发明试剂可实现原位卵巢癌组织细胞、卵巢癌腹水中的卵巢癌细胞、卵巢癌腹膜上的卵巢癌细胞、卵巢癌转移于其它人体部位的卵巢癌组织和细胞、原代培养卵巢癌细胞、卵巢癌细胞系细胞的干性程度的检测。本发明提供了卵巢癌干性程度检测的一个新途径。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为MON1A表达水平与卵巢癌患者生存的相关性分析结果；

图2为MON1A高表达鉴别卵巢癌患者5年内死亡的准确性分析结果；

图3为MON1A表达水平鉴别卵巢癌干性的准确性分析结果。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，实施例中未注明具体条件实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。所举实施例不作为对本发明的限定。

实施例1、MON1A在TCGA数据库卵巢癌组织样本中的表达与患者生存期成正比。

自TCGA(The cancer genome atlas)数据库中下载卵巢癌患者mRNA、miRNA表达数据，从中提取MON1A的表达数据和患者随访数据，进行数据清洗和处理后，根据MON1A的表达水平将患者分为高表达组和低表达组，使用Kaplan-Meier方法分析MON1A的表达与患者长期生存的相关性，结果如图1所示。结果显示，MON1A的低表达与患者的不良预后相关

实施例2、MON1A高表达鉴别卵巢癌患者5年内死亡的准确性分析。

自TCGA(The cancer genome atlas)数据库中下载卵巢癌患者mRNA、miRNA表达数据，从中提取MON1A的表达数据和患者随访数据，根据患者生存期将患者划分为两组，分别为生存期＞5年，及生存期＜5年，绘制ROC曲线，结果如图2所示，cut-off值为-0.02954时，灵敏度为62.76％，特异性62.26％。验证了MON1A表达水平作为预测卵巢癌患者生存期的新标志物的可行性。

实施例3、MON1A表达水平鉴别卵巢癌干性的准确性分析结果

自TCGA(The cancer genome atlas)数据库中下载卵巢癌患者mRNA、miRNA表达数据，从中提取MON1A的表达数据和干性标志物NOTCH2、CD9、TPO、CD29、DKK2、BMI1 的表达数据，进行数据处理后，根据表达量四分位，分别将数据划分为干性标志物高表达组和低表达组，绘制ROC曲线，结果如图3所示。结果显示，MON1A表达水平验证NOTCH 阳性样本的Cutoff值为0.05664,敏感性为63.38％，特异性为60.56％；MON1A表达水平验证CD9阳性样本的Cutoff值为0.4870,敏感性为85.92％，特异性为40.85％；MON1A表达水平验证TPO阳性样本的Cutoff值为-0.3775,敏感性为53.52％，特异性为69.01％；MON1A 表达水平验证CD29阳性样本的Cutoff值为-0.1554,敏感性为66.20％，特异性为70.42％； MON1A表达水平验证DKK2阳性样本的Cutoff值为0.6764,敏感性为86.21％，特异性为 41.38％；MON1A表达水平验证BMI1阳性样本的Cutoff值为0.5171,敏感性为84.51％，特异性为38.03％。该结果验证了MON1A表达水平作为检测卵巢癌干性程度的新标志物的可行性。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。