一种基于相分离研究磷酸化p53稳定性以及细胞内定位的方法

摘要

本发明公开了一种基于相分离研究磷酸化p53稳定性以及细胞内定位的方法。本发明构建一种体系，所述体系包括：MED1‑IDR蛋白、Pol II蛋白、p53蛋白和、p53靶DNA、相分离诱导剂。通过体系诱导p53液滴，监测p53对DNA损伤后修复进程的调控作用，模拟DNA损伤后所形成的修复隔室，可以研究某一个位点的翻译后修饰对p53参与的DNA修复隔室形成的影响，也可以检测其在细胞内的定位，从而解决细胞内p53信号通路复杂、结果不易判定的问题。相分离液滴在局部增加了蛋白的浓度，更加真实的模拟体内不均匀分布的环境；通过标签蛋白，过程和结果可视化。