6,9‑双(2‑氨基乙基)氨基苯并g异喹啉‑5,10‑二酮二马来酸盐及其合成工艺

摘要

一种6,9‑双[(2‑氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉‑5,10‑二酮二马来酸盐的合成工艺，涉及抗肿瘤药的合成技术领域，该合成工艺先将3,4‑吡啶羧酸酐与对苯二酚在催化剂的作用下反应，得到第一中间体；其次将第一中间体与N‑叔丁氧羰基乙二胺反应，得到第二中间体；接着对第二中间体进行脱保护，与马来酸成盐，得到产物。制得的产物纯度大于99.5％，已知单个杂质和未知单个杂质含量均小于0.1％，该合成工艺所涉及的重要中间体性质稳定，便于储存，而且该合成工艺的反应条件温和、简单、成本低，适合工业化生产。本发明还提供一种马来酸匹杉琼，可制成注射用冻干粉针剂，用于治疗成人复发难治、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤药的合成技术领域，且特别涉及一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐及其合成工艺。

背景技术

马来酸匹杉琼(Pixantrone Dimaleate)的化学名称为6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，化学结构式为分子量为557.5，性状为深蓝色结晶粉末。马来酸匹杉琼的制剂形式多为注射用冻干粉针剂，每支含29mg匹杉琼，复溶后每毫升溶液含匹杉琼5.8mg，可作为单一治疗药用于治疗成人复发难治、侵袭性非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)。

其中，匹杉琼是一种具有细胞毒性的氮杂蒽二酮类抗生素类药物，和获批使用的蒽环类抗生素(多柔比星及其他)以及蒽二酮(米托蒽醌)不同，匹杉琼是一种弱拓扑异构酶II抑制剂，直接烷基化形成稳定的DNA加合物。另外，由于匹杉琼不含酮基，而且结合单杂原子进入环结构，因此，匹杉琼不可能生成活性氧化产物，不会像蒽环类抗生素一样，结合离子形成可能引起心脏毒性的醇类代谢产物。正是由于匹杉琼这种独特的结构，与多柔比星和米托蒽醌相比，匹杉琼在动物试验中产生的心脏毒性程度最低。注射用匹杉琼于2012年5月10日在欧盟获准用于作为单一疗法治疗多次复发难治、侵袭性B细胞NHL，商品名为Pixuvri，是欧盟首个被批准用于该病人群体的药物。临床III期研究PIX 301的研究结果显示：患者对Pixuvri联合利妥昔单抗(rituximab)治疗方案的完全应答率(20％)明显高于标准治疗方案(吉西他滨联合利妥昔单抗治疗)的完全应答率(6％)，同时，采用Pixuvri联合利妥昔单抗(rituximab)的治疗组的无疾病进展期(平均为10.2个月)比采用标准治疗方案的治疗组的无疾病进展期(平均为7.6个月)长。

基于匹杉琼对侵袭性B细胞NHL的治疗效果显著，马来酸匹杉琼的化学合成方法备受重视。目前，马来酸匹杉琼的合成方法归纳起来主要有以下四条路线。

路线一：

路线二：

路线三：

路线四：

其中，路线一和路线二是以3,4-吡啶二羧酸为起始原料，与醋酸酐反应制备成3,4-吡啶羧酸酐；再与对氟二苯反应，制备成关键中间体6,9-二氟苯并[g]异喹啉-5,10-二酮；再与乙二胺或N-叔丁氧羰基乙二胺反应，制备成匹杉琼；再转化为马来酸匹杉琼。路线一和路线二存在以下缺点：(1)3,4-吡啶羧酸酐与对二氟苯反应时要用到大量强酸腐蚀性的无水三氯化铝和高沸点的致癌溶剂硝基苯，该反应为非均相反应体系，搅拌困难，难以进行工业化放大生产；(2)制备中间体6,9-二氟苯并[g]异喹啉-5,10-二酮时，要用20％的发烟硫酸为反应试剂和溶剂，条件剧烈，污染严重；(3)虽然合成的马来酸匹杉琼产物纯度能够达到99％，未知结构的单个杂质含量小于0.2％，但可能还是不符合注射冻干粉针越来越严格的质量要求。

路线三和路线四是以3,4-吡啶二酰氯为起始原料，与对苯二酚或1,4-二甲氧基苯反应制备成中间体6,9-二羟基苯并[g]异喹啉-5,10-二酮Ⅳ，经异构转化之后，再与乙二胺反应生成匹杉琼，之后与马来酸成盐马来酸匹杉琼。路线三和路线四的缺点为：3,4-吡啶二酰氯与对苯二酚反应制备Ⅳ的转化率很低，纯化困难，导致收率很低，且3,4-吡啶二酰氯极易变质，需要现制现用。另外，Ⅳ异构转化之后，与乙二胺反应会生成较多杂质，且匹杉琼在反应体系中稳定性较差，除去杂质时，游离的匹杉琼又会生成新的杂质，使得此步骤中生成的匹杉琼含有较多杂质，纯化成本很高。

综上所述，目前还没有一种适合工业化生产马来酸匹杉琼的工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的合成工艺，反应条件温和、简单，纯度高、成本低，适合工业化生产。

本发明的另一目的在于提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，可制成注射用冻干粉针剂，用于治疗成人复发难治、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的合成工艺，其包括以下步骤：

将3,4-吡啶羧酸酐与对苯二酚在催化剂的作用下反应，得到第一中间体，催化剂为负载量为40％～50％的硅胶负载磷酸，第一中间体为6,9-二羟基苯并[g]异喹啉-5,10-二酮；

将第一中间体与N-叔丁氧羰基乙二胺反应，得到第二中间体，第二中间体为N,N-叔丁氧羰基匹杉琼；

对第二中间体进行脱保护，与马来酸成盐，得到6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐。

进一步地，在本发明较佳实施例中，3,4-吡啶羧酸酐和对苯二酚的摩尔比为1：0.8～1.2；3,4-吡啶羧酸酐和催化剂的重量比为1：1～1.4。

进一步地，在本发明较佳实施例中，催化剂的具体制备过程为：

将40-100目的硅胶置于二甲苯中，加入三乙胺和醋酸锌，硅胶、三乙胺和醋酸锌的重量比为1：0.015～0.025：0.004～0.006，搅拌加热，回流得第一溶液；于0.4h-0.6h内在第一溶液中滴加浓磷酸，硅胶与浓磷酸的重量比为1：0.8～1.2，回流分水2h～3h后，降温至8℃～12℃，抽滤、干燥，即得。

进一步地，在本发明较佳实施例中，第一中间体的具体合成工艺为：

在容器中加入3,4-吡啶酸酐、对苯二酚和环己烷，再加入催化剂，加热回流分水4h～6h，冷却至温度为10℃以下，过滤得第一滤液，洗涤第一滤液得到有机相，减压有机相，得油状物；在油状物中加入异丙醚，搅拌析出第一固体，过滤，重结晶，即得。

进一步地，在本发明较佳实施例中，采用四氢呋喃对过滤后的第一固体进行重结晶。

进一步地，在本发明较佳实施例中，第二中间体的具体合成工艺为：

将第一中间体与N-叔丁氧羰基乙二胺置于N-甲基吡咯烷酮中，加入碳酸钾，第一中间体、N-叔丁氧羰基乙二胺和碳酸钾的摩尔比为1：1.5～2.5：0.8～1.2，加热至55℃～65℃，反应4h～6h，降温，得到第二溶液，将第二溶液加入到去离子水中，第一中间体和去离子水的重量比为1：17～23，搅拌析出第二固体，过滤，重结晶，即得。

进一步地，在本发明较佳实施例中，采用体积比为1:1的甲醇和二氯甲烷的混合液对过滤后的第二固体进行重结晶。

进一步地，在本发明较佳实施例中，6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的具体合成工艺为：

于氮气保护下，将第二中间体和三氟醋酸加入到二氯甲烷中，室温搅拌11h～13h，加入乙醇，在不超过60℃下减压浓缩，加入去离子水溶解，调节pH值为4～4.5，过滤得第二滤液，在第二滤液中加入3M马来酸溶液，调节pH值为3.2～3.6，搅拌11h～13h，过滤得第三固体，重结晶，即得。

进一步地，在本发明较佳实施例中，采用95％乙醇对第三固体进行重结晶。

本发明还提出一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，采用上述的合成工艺制得。

本发明实施例的6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐及其合成工艺的有益效果是：该合成工艺首先是将3,4-吡啶羧酸酐与对苯二酚在催化剂的作用下反应，得到第一中间体；其次将第一中间体与N-叔丁氧羰基乙二胺反应，得到第二中间体；接着对第二中间体进行脱保护，与马来酸成盐，得到马来酸匹杉琼。制得的产物纯度高于文献值，纯度大于99.5％，已知单个杂质和未知单个杂质含量均小于0.1％，该合成工艺所涉及的重要中间体性质稳定，便于储存，而且该合成工艺的反应条件温和、简单、成本低，适合马来酸匹杉琼的工业化生产；制得的马来酸匹杉琼，可制成注射用冻干粉针剂，用于治疗成人复发难治、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例的6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐及其合成工艺进行具体说明。

本发明实施例提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的合成工艺，其反应方程式为：

该6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的合成工艺包括以下步骤：

S1合成第一中间体：将3,4-吡啶羧酸酐作为起始原料，与对苯二酚在催化剂的作用下反应，得到第一中间体，催化剂为负载量为40％～50％的硅胶负载磷酸，即为40％～50％硅胶负载磷酸，其中磷酸的重量占硅胶重量的40％～50％，第一中间体为6,9-二羟基苯并[g]异喹啉-5,10-二酮(反应方程式中的Ⅳ)，3,4-吡啶羧酸酐和对苯二酚的摩尔比为1：0.8～1.2；3,4-吡啶羧酸酐和催化剂的重量比为1：1～1.4。本实施例采用硅胶负载磷酸为催化剂，使得3,4-吡啶酸酐和对苯二酚的反应容易进行，收率高，条件温和。而且3,4-吡啶酸酐可以直接在市场购买，避免采用3,4-吡啶二酰氯等不稳定原料，因此较易实现工业化生产。

第一中间体的具体合成工艺如下：

将3,4-吡啶酸酐、对苯二酚和溶剂环己烷加入到容器，比如三口烧瓶中，再加入催化剂40％～50％硅胶负载磷酸，加热回流分水4h～6h，冷却至温度为10℃以下，过滤得第一滤液，先用水洗涤，再用10％的碳酸氢钠溶液洗涤第一滤液，洗涤得到有机相，减压蒸干有机相，得油状物；在油状物中加入异丙醚，搅拌析出第一固体，过滤，优选采用四氢呋喃对过滤后的第一固体进行重结晶，即得。

其中，催化剂40％～50％硅胶负载磷酸是采用下述合成工艺提前制得：

将40-100目的硅胶置于二甲苯中，加入三乙胺和醋酸锌，硅胶、三乙胺和醋酸锌的重量比为1：0.015～0.025：0.004～0.006，机械搅拌加热，回流得第一溶液；于0.4-0.6h内在第一溶液中滴加浓磷酸，硅胶与浓磷酸的重量比为1：0.8～1.2，回流分水2h～3h后，降温至8℃～12℃，抽滤、干燥，即得。

S2合成第二中间体：将第一中间体与N-叔丁氧羰基乙二胺反应，得到第二中间体，第二中间体为N,N-叔丁氧羰基匹杉琼，又名6,9-双[(2-N-叔丁氧羰基氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮(反应方程式中的(N-Boc)匹杉琼)，本实施例的第一中间体6,9-二羟基苯并[g]异喹啉-5,10-二酮与N-叔丁氧羰基乙二胺反应，反应条件温和，转化率高，杂质少，得到的第二中间体N,N-叔丁氧羰基匹杉琼纯度很高。

第二中间体的具体合成工艺如下：

将第一中间体与N-叔丁氧羰基乙二胺置于N-甲基吡咯烷酮中，加入碳酸钾，第一中间体、N-叔丁氧羰基乙二胺、碳酸钾的的摩尔比为1：1.5～2.5：0.8～1.2，加热至55℃～65℃，反应4h～6h，降温，得到第二溶液，将第二溶液缓慢加入到去离子水中，第一中间体和去离子水的重量比为1：17～23，搅拌析出第二固体，过滤，优选采用体积比为1:1的甲醇和二氯甲烷的混合液对过滤后的第二固体进行重结晶，即得。

S3合成6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，即马来酸匹杉琼：对第二中间体进行脱保护，与马来酸成盐，得到6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐。本实施例的第二中间体N,N-叔丁氧羰基匹杉琼在氮气保护下脱保护，直接由三氟醋酸盐转化为马来酸盐，操作简单，有效避免了杂质的生成。

马来酸匹杉琼的具体合成工艺如下：

于氮气保护下，将第二中间体和三氟醋酸加入到二氯甲烷中，室温搅拌11h～13h，加入乙醇，用于稀释反应液，在真空、不超过60℃下减压浓缩，加入去离子水溶解，用20％的氢氧化钾调节pH值为4～4.5，过滤得第二滤液(其中的主要成分为反应方程式中的三氟醋酸匹杉琼)，在第二滤液中加入3M马来酸溶液(3mol/L的马来酸水溶液)，用20％的氢氧化钾溶液调节pH值为3.2～3.6，室温搅拌11h～13h，过滤得第三固体，采用95％乙醇对第三固体进行重结晶，即得。

本发明实施例提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，采用上述的合成工艺制得。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

实施例1提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，其按照以下工艺步骤合成：

制备催化剂45％硅胶负载磷酸：往500mL三口烧瓶中加入40g40-100目的硅胶、200ml二甲苯、0.8g三乙胺和0.2g醋酸锌(硅胶、三乙胺和醋酸锌的重量比为1：0.02：0.005)，机械搅拌加热，回流得第一溶液，于0.5h内向第一溶液中滴加40g浓磷酸(硅胶与浓磷酸的重量比为1：1)，之后回流分水2.5h；降温至10℃，抽滤，再用二甲苯洗涤两次后抽干，干燥，即得72.0g45％硅胶负载磷酸。

合成第一中间体：将14.9g(0.10mol，1eq.)3,4-吡啶酸酐、11.0g(0.10mol，1eq.)对苯二酚和100mL环己烷加入到250mL三口烧瓶中(3,4-吡啶羧酸酐和对苯二酚的摩尔比为1:1)，再加入17.9g催化剂45％硅胶负载磷酸(3,4-吡啶羧酸酐和催化剂的重量比为1：1.2)，加热回流分水5h，冷却至10℃以下，过滤得第一滤液，先各用30mL水洗涤2次第一滤液，再用30mL的10％碳酸氢钠溶液洗涤一次第一滤液，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，减压蒸干干燥后的有机相，得黄色油状物；往油状物中加入150mL异丙醚，室温搅拌析出黄色第一固体，过滤，用异丙醚洗涤两次滤饼，减压60℃干燥4h，得21.3g呈土黄色粉末状的第一固体，再用85.2mL四氢呋喃重结晶，于0℃过滤固体，得16.5g呈浅黄色固体粉末状的第一中间体，收率67.8％，纯度98.5％。

合成第二中间体：将上步制得的12.0g(0.05mol，1eq.)第一中间体、16.0g(0.1mol，2eq.)N-叔丁氧羰基乙二胺、6.9g(0.05mol，1eq.)碳酸钾和60mL N-甲基吡咯烷酮加入反应瓶内(第一中间体、N-叔丁氧羰基乙二胺、碳酸钾的的摩尔比为1：2：1)，加热至60℃反应5h，在反应过程用HPLC法检测第一中间体的残留量，当残留率＜1％，反应即可结束，得到第二溶液，待第二溶液稍降温，将第二溶液缓慢倒入240mL去离子水中(第一中间体和去离子水的重量比为1：20)，搅拌析出大量呈宝蓝色的第二固体，室温过滤，滤饼用水洗涤3次，再用120mL甲醇和二氯甲烷(V/V＝1:1)的混合溶剂重结晶，于0～5℃过滤，得第二中间体，收率80％，纯度99.5％。

所得第二中间体中的6,9-双[(2-N-叔丁氧羰基氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮难溶于水，其HPLC检测方法如下：

色谱柱：Alltima C18 4.6×150mm，5um；

流动相：

流速：1.0ml/min；波长：242nm；柱温：40℃；进样量：20μl；

t_R：18.7min；t_R(原料)：4.3min(RRT0.23)；

检测器结束时间：50min；LC结束时间：60min；

供试品溶液：0.2mg/ml(乙腈)。

合成6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐：于氮气保护，将上步制得的10.6g(0.02mol，1eq)的第二中间体和23.0g(0.2mol，10eq)三氟醋酸加入到106mL二氯甲烷中，室温搅拌12h，加入53mL乙醇，在不超过60℃下减压浓缩，得到深蓝色残余物，加入42.4mL去离子水溶解后，再用20％的氢氧化钾调节pH值至4.2，得到深蓝色的溶液，过滤除掉少量不溶物之后得到第二滤液，在第二滤液中加入20mL(0.06mol，3eq)3M马来酸溶液，用20％的氢氧化钾溶液调节溶液pH值至3.4，室温搅拌12h后，过滤得呈深蓝色的第三固体，用53mL95％乙醇对第三固体进行重结晶，得6.5g马来酸匹杉琼晶体，收率58％，纯度99.7％，其中马来酸含量为40.2％(即马来酸个数为1.93)。

所得马来酸匹杉琼晶体中的马来酸匹杉琼检测方法如下：

色谱柱：Alltima C18 4.6×150mm，5um；

流动相：20mM庚烷磺酸钠，用水-乙腈-二氧六环(75：20：5)溶解，磷酸调节pH为3.0；

流速：1.0ml/min，波长：247nm，柱温：40℃，进样量：20μl，

供试品溶液：0.5mg/ml(流动相)；

运行时间：60min；

所得马来酸匹杉琼晶体中马来酸液相含量的最终检测方法为：

色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×250mm，5um；

流动相：(0.1M磷酸二氢钠，磷酸调节pH至3.0)-甲醇(95：5)；

波长：210nm；流速：1ml/min；柱温：35℃；进样量：20μl；

供试品溶液：0.12mg/ml(50％甲醇)；

马来酸溶液：0.05mg/ml(50％甲醇)；

t_R(马来酸)：5.5min；

运行时间15min。

实施例2

实施例2提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，其按照以下工艺步骤合成：

制备催化剂40％硅胶负载磷酸：往500mL三口烧瓶中加入40g40-100目的硅胶、200ml二甲苯、0.6g三乙胺和0.16g醋酸锌(硅胶、三乙胺和醋酸锌的重量比为1：0.015：0.004)，机械搅拌加热，回流得第一溶液，于0.4h内向第一溶液中滴加32g浓磷酸(硅胶与浓磷酸的重量比为1：0.8)，之后回流分水2h；降温至8℃，抽滤，再用二甲苯洗涤两次后抽干，干燥，即得70.0g 40％硅胶负载磷酸。

合成第一中间体：将14.9g(0.10mol)3,4-吡啶酸酐、8.8g(0.08mol)对苯二酚和100mL环己烷加入到250mL三口烧瓶中(3,4-吡啶羧酸酐和对苯二酚的摩尔比为1:0.8)，再加入14.9g催化剂40％硅胶负载磷酸(3,4-吡啶羧酸酐和催化剂的重量比为1：1)，加热回流分水4h，冷却至10℃以下，过滤得第一滤液，先各用30mL水洗涤2次第一滤液，再用30mL的10％碳酸氢钠溶液洗涤一次第一滤液，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，减压蒸干干燥后的有机相，得黄色油状物；往油状物中加入150mL异丙醚，室温搅拌析出黄色第一固体，过滤，用异丙醚洗涤两次滤饼，减压60℃干燥4h，得21.1g呈土黄色粉末状的第一固体，再用85.2mL四氢呋喃重结晶，于0℃过滤固体，得16.2g呈浅黄色固体粉末状的第一中间体，收率67.6％，纯度98.2％。

合成第二中间体：将上步制得的12.0g(0.05mol)第一中间体、16.0g(0.075mol)N-叔丁氧羰基乙二胺、5.5g(0.04mol)碳酸钾和60mL N-甲基吡咯烷酮加入反应瓶内(第一中间体、N-叔丁氧羰基乙二胺、碳酸钾的的摩尔比为1：1.5：0.8)，加热至55℃反应4h，得到第二溶液，将第二溶液缓慢倒入204mL去离子水中(第一中间体和去离子水的重量比为1：17)，搅拌析出大量呈宝蓝色的第二固体，室温过滤，滤饼用水洗涤3次，再用120mL甲醇和二氯甲烷(V/V＝1:1)的混合溶剂重结晶，于0～5℃过滤，得第二中间体，收率80％，纯度99.5％。

合成6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐：于氮气保护，将上步制得的10.6g(0.02mol)的第二中间体和23.0g(0.2mol)三氟醋酸加入到106mL二氯甲烷中，室温搅拌12h，加入53mL乙醇，在不超过60℃下减压浓缩，得到深蓝色残余物，加入42.4mL去离子水溶解后，再用20％的氢氧化钾调节pH值至4.2，得到深蓝色的溶液，过滤除掉少量不溶物之后得到第二滤液，在第二滤液中加入20mL(0.06mol)3M马来酸溶液，用20％的氢氧化钾溶液调节溶液pH值至3.4，室温搅拌11h后，过滤得呈深蓝色的第三固体，用53mL95％乙醇对第三固体进行重结晶，得6.3g马来酸匹杉琼晶体，收率56％，纯度99.6％，其中马来酸含量为40.5％。

实施例3

实施例3提供一种6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐，其按照以下工艺步骤合成：

制备催化剂50％硅胶负载磷酸：往500mL三口烧瓶中加入40g40-100目的硅胶、200ml二甲苯、1g三乙胺和0.24g醋酸锌(硅胶、三乙胺和醋酸锌的重量比为1：0.025：0.006)，机械搅拌加热，回流得第一溶液，于0.6h内向第一溶液中滴加48g浓磷酸(硅胶与浓磷酸的重量比为1：1.2)，之后回流分水3h；降温至12℃，抽滤，再用二甲苯洗涤两次后抽干，干燥，即得72.3g50％硅胶负载磷酸。

合成第一中间体：将14.9g(0.10mol)3,4-吡啶酸酐、13.2g(0.12mol)对苯二酚和100mL环己烷加入到250mL三口烧瓶中(3,4-吡啶羧酸酐和对苯二酚的摩尔比为1:1.2)，再加入20.8g50％硅胶负载磷酸(3,4-吡啶羧酸酐和催化剂的重量比为1：1.2)，加热回流分水6h，冷却至10℃以下，过滤得第一滤液，先各用30mL水洗涤2次第一滤液，再用30mL的10％碳酸氢钠溶液洗涤一次第一滤液，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，减压蒸干干燥后的有机相，得黄色油状物；往油状物中加入150mL异丙醚，室温搅拌析出黄色第一固体，过滤，用异丙醚洗涤两次滤饼，减压60℃干燥4h，得21.3g呈土黄色粉末状的第一固体，再用85.2mlmL四氢呋喃重结晶，于0℃过滤固体，得16.8g呈浅黄色固体粉末状的第一中间体，收率67.7％，纯度98.4％。

合成第二中间体：将上步制得的12.0g(0.05mol)第一中间体、20g(0.125mol)N-叔丁氧羰基乙二胺、8.3g(0.06mol)碳酸钾和60mL N-甲基吡咯烷酮加入反应瓶内(第一中间体、N-叔丁氧羰基乙二胺、碳酸钾的的摩尔比为1：2.5：1.2)，加热至65℃反应6h，得到第二溶液，将第二溶液缓慢倒入276mL去离子水中(第一中间体和去离子水的重量比为1：23)，搅拌析出大量呈宝蓝色的第二固体，室温过滤，滤饼用水洗涤3次，再用120mL甲醇和二氯甲烷(V/V＝1:1)的混合溶剂重结晶，于0～5℃过滤，得第二中间体，收率79％，纯度99.4％。

合成6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐：于氮气保护，将上步制得的10.6g(0.02mol，)的第二中间体和23.0g(0.2mol)三氟醋酸加入到106mL二氯甲烷中，室温搅拌13h，加入53mL乙醇，在不超过60℃下减压浓缩，得到深蓝色残余物，加入42.4mL去离子水溶解后，再用20％的氢氧化钾调节pH值至4.5，得到深蓝色的溶液，过滤除掉少量不溶物之后得到第二滤液，在第二滤液中加入20mL(0.06mol)3M马来酸溶液，用20％的氢氧化钾溶液调节溶液pH值至3.6，室温搅拌13h后，过滤得呈深蓝色的第三固体，用53mL95％乙醇对第三固体进行重结晶，得6.7g马来酸匹杉琼晶体，收率57％，纯度＞99.6％，其中马来酸含量为40.6％。

综上所述，本发明实施例的6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐的合成工艺制得的产物纯度高于文献值，纯度大于99.5％，已知单个杂质和未知单个杂质含量均小于0.1％，该合成工艺所涉及的重要中间体性质稳定，便于储存，而且该合成工艺的反应条件温和、简单、成本低，适合马来酸匹杉琼的工业化生产。另外制得的马来酸匹杉琼，可制成注射用冻干粉针剂，用于治疗成人复发难治、侵袭性非霍奇金淋巴瘤。

以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。