治疗烧烫伤的中药外用制剂及其制备、质量检测方法

摘要

本发明属于中药制剂领域，涉及一种治疗烧烫伤的中药外用制剂及其制备、质量检测方法，具体涉及烧烫伤搽剂的制备和质量检测方法，建立了新的烧烫伤搽剂的质量控制方法，该方法采用薄层色谱法对其中的大黄、冰片、紫草进行鉴别，采用高效液相色谱法对其中的冰片中龙脑进行含量测定。本发明的优点在于：(1)该质量控制方法全面，精密度、灵敏度、稳定性均好，而且方法更简捷，能保证产品质量稳定可控；(2)建立了烧烫伤搽剂全面的质量检测方法，能全面检测制剂质量，确保临床用药安全有效。

说明书

技术领域

本发明属于中药制剂领域，涉及一种治疗烧烫伤的中药外用制剂及其制备、质量检测方 法，具体涉及烧烫伤搽剂的制备和质量检测方法。

背景技术

烧烫伤搽剂是一种已经上市的中药复方制剂，具有清热止痛，凉血祛腐的作用。临床上 主要用于I、II度烧烫伤和酸碱灼伤的治疗；但现有烧烫伤制剂标准检测指标不完善，现有 技术的质量检测方法不能全面控制烧烫伤搽剂的质量，从而将影响产品的生产质量控制和用 药安全。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗烧烫伤的中药外用制剂及其制备、质量检测方法，特别是 提供一种质量检测方法使其能够全面控制烧烫伤搽剂的质量，从而确保产品的生产质量和用 药安全。

本发明所述的一种治疗烧烫伤的中药外用制剂，由以下原料药配制而成：马尾连 85～102g、紫草56～69g、黄芩85～102g、地榆56～69g、大黄56～69g和冰片4～6g。

其中，优选技术方案如下：由以下原料药配制而成：马尾连93g、紫草62.4g、黄芩93g、 地榆62.4g、大黄62.4g和冰片5g。

本发明所述的治疗烧烫伤的中药外用制剂的制备方法，取马尾连、大黄、紫草、地榆和 黄芩用1170～1430g的香油浸泡18～36小时后炸至枯黄，过滤，立即加入15～25g的蜂蜡，当 温度降至55～65℃时，加入冰片，搅拌使其溶解，降至室温时，加入4～5ml的苯酚，搅拌均 匀，灌装即得。

本发明所述的治疗烧烫伤的中药外用制剂的质量检测方法，包括以下方面的质量检测：

(1)大黄的薄层鉴别：

取治疗烧烫伤的中药外用制剂10ml，用乙醇萃取3次，每次10ml，合并乙醇液，置水 浴上蒸干，残渣加乙醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取大黄酚对照品，加乙酸乙酯制 成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法检验，吸取供试品溶液5～10μl，对照品 溶液2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为15∶5∶1 的石油醚、甲酸乙酯和甲酸混合物为展开剂，展开，取出，晾干，在365nm的紫外光灯下检 视，其中，石油醚的沸点为30～60℃；

大黄的薄层鉴别合格标准为：供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光斑点。

(2)冰片的薄层鉴别：

取治疗烧烫伤的中药外用制剂10ml，用乙醇萃取3次，每次10ml，合并乙醇液，置水 浴上蒸干，残渣加乙醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取冰片对照品，加乙醇制成每1ml 含5mg的溶液，作为对照品溶液；

照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法检验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液 2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为9∶1的石 油醚和乙酸乙酯混合物为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1wt％香草醛硫酸溶液，热风吹干 至斑点清晰进行检视，其中，石油醚的沸点为60～90℃；

冰片的薄层鉴别合格标准为：供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。

(3)紫草的薄层鉴别：

取治疗烧烫伤的中药外用制剂20ml，用乙醇提取3次，每次20ml，合并乙醇液蒸干， 残渣加乙醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；另取紫草对照药材lg，加乙醇10ml浸渍2小 时，滤过，取滤液1ml作为对照品溶液；

照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法检验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液 2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为5∶5∶0.5∶ 0.1的环己烷、甲苯、乙酸乙酯和甲酸混合物为展开剂，展开，取出，晾干，进行检视；

紫草的薄层鉴别合格标准为：供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点，喷以10％氢氧化钾甲醇溶液后，斑点变为蓝色。

(4)冰片中龙脑的含量测定：

色谱条件与系统适用性试验：30m×0.53mm×1.00μm的Rtx-Wax毛细管柱，聚乙二醇 PEG-20M为固定相；氢火焰离子化检测器；进样口、检测器温度均为210℃；柱温150℃； 柱流量8ml/min；分流进样，分流比9∶1；理论塔板数按龙脑峰计算应不低于6000；

内标溶液的制备：精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.8mg的 溶液，备用；

对照品溶液的制备：精密称取龙脑对照品，加内标溶液1ml，用乙酸乙酯定容至10ml， 制成每1ml含0.05mg的溶液，备用；

供试品溶液的制备：取治疗烧烫伤的中药外用制剂0.5g，精密称定，置10ml容量瓶中， 加内标溶液1ml，用乙酸乙酯定容至10ml，混匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，备用；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。

冰片中龙脑的含量的检测合格标准为：本品含冰片以龙脑计，不得少于0.9mg/g。

本发明的优点在于：(1)该质量控制方法全面，精密度、灵敏度、稳定性均好，而且方 法更简捷，能保证产品质量稳定可控；(2)建立了烧烫伤搽剂全面的质量检测方法，能全面 检测制剂质量，确保临床用药安全有效。

附图说明

图1为实施例1大黄的薄层鉴别图谱，图中，1、2、3为供试品溶液4、对照品溶液 5、阴性溶液；

图2为实施例1冰片的薄层鉴别图谱，图中，1、2、3为供试品溶液4、对照品溶液 5、阴性溶液；

图3为实施例1紫草的薄层鉴别图谱A，图中，1、2、3为供试品溶液4、对照品溶 液5、阴性溶液；

图4为实施例1紫草的薄层鉴别图谱B；图中，1、2、3为供试品溶液4、对照品溶 液5、阴性溶液；

图5为实施例1中阴性对照试验的龙脑对照品溶液全程高效液相色谱图；

图6为实施例1中阴性对照试验的冰片药材溶液全程高效液相色谱图；

图7为实施例1中阴性对照试验的阴性对照液全程高效液相色谱图；

图8为实施例1中阴性对照试验的烧烫伤供试品溶液全程高效液相色谱图；

图9为龙脑的标准曲线。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明做进一步说明。

实施例1：

配方：马尾连93g、紫草62.4g、黄芩93g、地榆62.4g、大黄62.4g和冰片5g。

制备方法：取马尾连、大黄、紫草、地榆和黄芩用1300g的香油浸泡24小时后炸至枯黄， 过滤，立即加入20g的蜂蜡，当温度降至60℃时，加入冰片，搅拌使其溶解，降至室温时， 加入4.5ml的苯酚，搅拌均匀，灌装即得。

按照上述要求得到荣昌制药(淄博)有限公司060301、060302、060303三批药品，并以 此分别用做下述质量检测。

(1)大黄的薄层鉴别：

供试品溶液的制备：取药品10ml，用乙醇萃取3次，每次10ml，合并乙醇液，置水浴 上蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，按照此方法，制备3批供试品溶液。

对照品溶液的制备：取大黄酚对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照 品溶液。

阴性溶液的制备：将配方中的大黄除去，其它五味按质量标准中的制法项进行制备阴性 对照样品；然后照供试品溶液的制备方法同法制备。

薄层板：自制的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板，规格为10×20cm，涂布 厚度为0.3mm。

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液10μl、对照品溶液5μl。 阴性溶液的点样量10μl。

展开剂：石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(质量比15∶5∶1)。

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为10cm。

显色与检视：紫外光灯(365nm)下检视

结果：供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干 扰。三批样品的色谱图结果见图1。

(2)冰片的薄层鉴别：

供试品溶液的制备：取药品10ml，用乙醇萃取3次，每次10ml，合并乙醇液，置水浴 上蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。按照此方法，制备3批供试品溶液。对 照品溶液的制备：取冰片对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性溶液的制备：将配方中的冰片除去，其它五味按质量标准中的制法项进行制备阴性 对照样品；然后照供试品溶液的制备方法同法制备。

薄层板：自制的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板，规格为10×20cm，涂布 厚度为0.3mm。

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液10μl、对照品溶液5μl。 阴性溶液的点样量10μl。

展开剂：石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(质量比9∶1)。

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为10-12cm。

显色与检视：喷以1％香草醛硫酸溶液，热风吹干至斑点清晰。

结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无 干扰。三批样品的结果见附图2。

(3)紫草的薄层鉴别：

供试品溶液的制备：取烫伤油20ml，用乙醇提取3次，每次20ml，合并乙醇液蒸干，残 渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。按照此方法，制备3批供试品溶液。

对照药材溶液的制备：取紫草对照药材1g，加乙醇10ml浸渍2小时，滤过，取滤液1ml 作为对照药材溶液。

阴性溶液的制备：将配方中的紫草除去，其它五味按质量标准中的制法项进行制备阴性 对照样品；然后照供试品溶液的制备方法同法制备。

薄层板：自制的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板，规格为10×20cm，涂布 厚度为0.3mm。

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液10μl、对照品溶液5μl。 阴性溶液的点样量10μl。

展开剂：环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(质量比5∶5∶0.5∶0.1)。

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为10-12cm。

显色与检视：喷以10％氢氧化钾甲醇溶液后，斑点变为蓝色。

结果：供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，喷以10％氢氧 化钾甲醇溶液后，斑点变为蓝色，阴性对照无干扰。三批样品的结果见图3、图4。

(4)冰片中龙脑的含量测定：

1)仪器与试药

仪器：日本岛津GC-2014气相色谱仪，毛细管柱Rtx-Wax(30m×0.53mm×1.00μm)， 聚乙二醇PEG-20M为固定相，氢火焰离子化检测器(FID)，Gcsolution数据处理软件，startorius  BP211D电子分析天平d＝0.01mg，startorius BS124S电子分析天平d＝0.1mg。

试剂：水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。

龙脑对照品(110881-200504，20mg，中国药品生物制品检定所，供含量测定用)。

水杨酸甲酯对照品(707-200106，1ml，中国药品生物制品检定所，供含量测定用)。

2)色谱条件的选择

采用日本岛津GC-2014气相色谱仪，分流进样，分流比9∶1，进样口、检测器温度均为 210℃，进样量1μl。考虑到柱温和柱流量对色谱峰影响较大，故对柱温和柱流量进行了试验选 择。

3)对照品、供试品溶液的制备

内标溶液：精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.8mg的溶液， 即得。

对照品溶液：精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液1ml，用乙酸乙酯定容至10ml，制 成每1ml含0.05mg的溶液，即得。

供试品溶液：取060302批批装量差异项下的本品0.5g，精密称定，置10ml容量瓶中， 加内标溶液1ml，用乙酸乙酯定容至10ml，混匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

4)柱温选择

将柱温分别设为130℃、140℃、150℃、160℃，对同一对照品和烧烫伤供试品溶液进 行了试验，结果柱温为150℃时龙脑峰和水杨酸甲酯峰峰形好，分离度均大于2.0，且出峰 时间较短，故确定柱温为150℃。

5)柱流量选择：

将柱流量分别设为6ml/min、8ml/min、10ml/min，对同一对照品和烧烫伤供试品溶液进 行了试验，结果柱流量为8ml/min时龙脑峰和水杨酸甲酯峰峰形好，分离度均大于1.5，且出 峰时间较短，比柱流量为10ml/min节省载气，故确定柱流量为8ml/min。

6)阴性对照试验：

取不含冰片的烧烫伤阴性样品0.5g，冰片药材细粉5mg，同前法处理后，分别制得阴性 对照液和冰片药材溶液，分别取对照品溶液、冰片药材溶液、阴性对照液、烧烫伤供试品溶 液各1μl注入气相色谱仪，记录色谱图，由图5～图8可以看出，在阴性对照图谱中龙脑峰无 干扰。

6)精密度试验：

精密吸取龙脑对照品溶液(龙脑0.070mg/ml，内标0.0735mg/ml)重复进样6次，每次 各1μl，记录峰面积并计算f值及RSD，结果见表1。

表1：精密度试验结果

结果表明：f值的RSD为0.51％，证明本方法精密性良好。

6)线性范围考察：

精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液(含水杨酸甲酯0.077mg/ml)制成0.34mg/ml的对照 品溶液。精密吸取1ml对照品溶液用上述内标溶液稀释到2ml，依次梯度稀释；各取1μl注 入气相色谱仪测定。以龙脑浓度为横坐标，龙脑峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标绘制标准 曲线，计算得回归方程y＝19.831x-0.0525，相关系数r＝0.9998，如图9所示。表明龙脑浓度 在0.022～0.340mg/ml范围内线性关系良好。

表2：线性范围考察结果(n＝2)

  龙脑峰面积/内标峰面积   6.7319   3.2209   1.6450   0.8176   0.4102   龙脑浓度(mg/ml)   0.340   0.170   0.085   0.043   0.022

7)稳定试验：

取060302批同一份供试品溶液，分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时进样， 记录结果并计算龙脑峰与水杨酸甲酯峰面积比。结果见表3。

表3：样品稳定性试验结果(n＝1)

结果表明：供试品在8小时内龙脑峰与水杨酸甲酯峰面积比RSD为1.57％，供试品溶液 在8小时内稳定性良好。

8)重现性试验：

取060302批样品5份，分别按供试品制备项下方法制备，测定峰面积，结果见表4。

表4：重现性试验结果(n＝2)

结果表明：5份供试品的平均含量为1.22mg/g，RSD为1.70％，证明本试验方法的重现 性良好。

9)回收率试验(采用加样回收法)：

精密称取060302批(已知龙脑含量为1.22mg/g)样品0.25g，共取5份，分别精密加入 0.3mg的龙脑对照品，同前法制备供试品溶液，测定总含量，计算回收率。回收率＝(总量- 样品中量)/加入纯品量×100％。结果见表5。

表5龙脑回收率试验结果(n＝2)

结果表明：龙脑平均回收率为99.9％，RSD为0.85％，加样回收率良好。

10)样品测定：

取荣昌制药(淄博)有限公司生产的烧烫伤搽剂，按发明方法测定，龙脑含量见表6。

表6：龙脑含量测定结果

结果表明：产品含量均在0.9mg/g以上，相对比较稳定，证明该发明方法能很好的控制 产品的质量。