积雪草三萜类成分在用于制备抗颅脑损伤产品中的应用

摘要

本发明涉及积雪草三萜类成分在用于制备抗颅脑损伤产品中的应用，即积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸在制备治疗颅脑创伤及其后遗症药物中的新用途。经动物实验证实，积雪草苷及积雪草酸、羟基积雪草苷及羟基积雪草酸显示了显著的生物活性，药理作用较强，具有治疗颅脑创伤、防止及缓解脑创伤后遗症(如抑郁、痴呆)的用途。其性质稳定，原料来源丰富、价廉，安全低毒，为预防、诊断、检测、保护、治疗和研究颅脑创伤、防止及缓解颅脑创伤后遗症等直接相关疾病提供了一种新的药物来源；制备工艺简单，得率高，适于工业化生产，且容易推广应用，对开发利用我国的药用植物资源具有重要价值。

说明书

技术领域

本发明涉及医药、食品、饮料等技术领域，具体地说是涉及中药提取物中化合物的新用途，更具体地说是涉及一种中药积雪草提取物中积雪草三萜类成分的新用途，再具体地说是涉及积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸在制备抗颅脑损伤产品中的新应用。 

背景技术

(一)积雪草历史研究的概况 

1、概述 

积雪草(Asiatic Pennywort Herb或Centella，中药材学名：Herba Centellae/Centella asiatica)为《中国药典》收载的常用中药，始载于《神农本草经》，为双子叶植物伞形科Umbelliferae积雪草Centella asiatica(L.)Urban的干燥全草或带根全草。夏秋二季采收，除去泥沙杂质，洗净，切段，晒干。 

积雪草原植物为多年生匍匐草本植物，高可达50cm。常卷缩成团状，其茎葡萄、细长，节上生根，根圆柱形，长2～4cm，直径1～1.5mm，表面浅黄色或灰黄色，无毛或稍有毛，并沿着匍匐茎生根延伸。有长的浅红色的茎，细长弯曲，有细纵皱纹，节上常着生须状根，长茎上有圆形叶片，叶片鲜绿色，为杯状叶，叶缘具圆齿，茎节产生小的叶簇和根。单叶互生；叶柄长2～15cm，基部鞘状；叶片肾形或近圆形，长1～3cm，宽1.5～5cm，基部阔心形，边缘有钝锯齿，两面无毛或在背面脉上疏生柔毛；常状脉5～7。单伞形花序单生，或2～4个聚状；花瓣卵形，紫红色或乳白色。果实圆球形，基部心形或平截，长2～3m，宽2～3.5mm，每侧有纵棱数条，棱间有明显小横脉，网状，平滑或稍有毛。花、果期4～10月。 

原产于印度，现广泛分布于世界热带、亚热带区，在中国主要分布于西南及长江以南各省：陕西、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖北、湖南、广东、广西等地。积雪草生于海拔200～1990m的阴湿草地、田边、沟边，阳光和较湿润的环境：河岸、沼泽、草地中。陶弘景曰：此草以寒凉得名，其性大寒，故名积雪草。 

别名：连钱草、地钱草、马蹄草、老公根、葵蓬菜、崩口碗、落得打、地棠草、大马蹄草、土细辛、崩大碗、雷公根、刚果龙、缺碗草芋子草、马脚迹、芽黄草、草如意、蚶壳草、含壳草、乞食碗、老豺碗、大水钱、破铜钱草、铜钱草、老鸭确定、铁灯盏、半边碗、透骨草、跳破碗、雷公碗、地细辛、地排草。 

2、生药历史研究的基本现状 

【性状鉴别】干燥全草多皱缩成团，根圆柱形，长3～4.5cm，直径1～1.5mm，淡黄色或灰黄色，有纹皱纹。茎细长、弯曲、淡黄色、在节处有明显的细根残迹或残留的细根、叶多皱缩破碎，灰绿色，完整的叶圆形或肾形，直径2～6cm，边缘有钝齿，下面有细毛；叶柄长1.5～7cm，常扭曲，基部具膜质叶鞘。气特异，叶淡微辛。 

【显微鉴别】茎横切面：表皮细胞类圆形或近方形。皮层为7～9列薄壁细胞，外侧数列细胞的壁呈不均匀增厚。外韧维管束6～7个，排列成环；韧皮部外侧国微木化的纤维群；木质部导管约6～10个；束内形成层为2～3列细小细胞。髓部由较大的类圆形薄壁细胞组成。皮层和射线中分布圆形的油管，直径24～24μm，周围分泌细胞5～7个。 

【理化鉴别】(1)取本品粉末1g，加己醇适量，热提10分钟，滤过，滤液浓缩至干，残潭用氯仿溶解至约1ml，加1ml硫酸，氯仿层显红棕色。(检查三萜类化合物)(2)取本品粉末1g，加己醇适量，热提10min，滤过，滤液浓缩至干，残潭溶于醋酐中，加入1滴硫酸，醋酐层显绿以。(检查三萜类化合物) 

【栽培技术】用种子分株繁殖。种子繁殖：于春、秋季条播，覆土2～3cm。分株繁殖：在早春进行。苗期勤除杂草，旱季注意浇水。 

【植物特征】与本植物外形相似有： 

(1)天胡荽(Hedrocotole sibthorpioides Lain.)，伞形科植物；叶较小，长0.5～2.5厘米，掌状浅裂，用手揉之有芹菜香味，民间称小金钱草，效用类似。 

(2)连钱草(Glechoma headeracea L.)，唇形科植物；茎有四棱，叶对生，在叶腋单生唇形花。常易混淆，但效用不同。 

(3)黄疸草(Dichondra repens Forst.)，旋花科植物；叶在匍匐茎上互生，较小，长0.6～1.5厘米，先端钝圆或微凹，全缘；春季在叶腋生白色小花。效用不同，应予区别。 

【药性】味苦；辛；性寒； 

【归经】入肝，脾，肾经。 

【功效】清热解毒，利湿消肿。是东方人的长寿药，可益脑提神。研究表明具有滋补、消炎、愈合伤口、利尿通便和镇定作用。对麻风病、溃疡也有疗效，对血液净化及免疫力有激活作用，因其可刺激深层皮肤细胞的更替。它是神经滋补剂，能提高记忆力，减轻精神疲劳；还可降血压，治疗肝病等。 

【主治病症】湿热黄疸，中暑腹泻，砂淋血淋，痈肿疮毒，跌扑损伤。 

【用法用量】内服：煎汤，9～15g(鲜者15～30g)，或捣汁。外用：适量，捣敷或绞汁涂。剂量过大会引起眩晕。 

【药物配伍】(1)配茵陈蒿，利湿清热并举，相辅相成，功效倍增。 

(2)配葛根，治暑泻，其效用以其升清，清热解毒，燥湿故也。 

(3)配海金沙，治砂淋属于热者。 

(4)配白头翁，共奏止痢之功。 

(5)配生地，用治热在血分，迫血妄行，咯血，衄血，呕血皆宜。 

(6)配紫花地丁，相须为用，功效大增，一切痈疽，发背，疔肿，瘰疬，无名肿毒皆可应用。 

(7)配玄参，软坚散结，常用治瘰疬，鼠疮。 

【药方选录】(1)治湿热黄疸：积雪草一两，冰糖一两。水煎服(《江西民间草药》)。 

(2)治中暑腹泻：积雪草鲜叶搓成小团，嚼细开水吞服一、二切(《浙江民间常用草药》)。 

(3)治砂淋：积雪草一两。第二次的淘米水煎服(《江西民间草药验方》)。 

(4)治血淋：积雪草头、草益根各一把。捣烂绞汁和冰糖一两，一次炖服(《闽东本草》)。 

(5)治小便不通：鲜积雪草一两，捣烂贴肚脐，小便通即去药(《闽东本草》)。 

(6)治肝脏肿大：崩大碗每次约八两至一斤。煎水服(《岭南草药志》)。 

(7)治麻疹：积雪草一至二两。水煎服(广州部队《常用中草药手册》)。 

(8)治乳痈初起：老公很茎叶和槟榔衣一个，酒煎服(《岭南采药录》)。 

(9)治疔疮： 

①鲜积雪草，洗净，捣烂敷患处(《江西民间草药》)。 

②鲜积雪草一至二两。水煎服(《福建中草药》)。 

(10)治缠腰火丹：鲜积雪草，洗净，捣烂绞汁，同适量的生糯米粉碉成稀糊状，搽患处(《江西民间草药》)。 

(11)治跌打损伤：积雪草八钱至一两，和红酒半斤至十二两，炖一小时，内服；渣捣烂后贴伤部(《福建民间草药》)。 

(12)治刀伤出血：崩大碗，酌量，捣烂外敷伤口(《岭南草药志》)。 

(13)治臁疮：鲜积雪草洗净，捣烂敷患处，一日一换(《江西民间草药》)。 

(14)治目赤肿痛：鲜积雪草捣烂敷寸口处，或捣烂绞汁点患眼，一日三、四次(《江西民间草药》)。 

(15)治麦粒肿：鲜积雪草洗净捣烂，掺红糖敷之(《泉州本草》)。 

(16)治咽喉肿痛：鲜积雪草二两。洗净，放碗中捣烂，开水冲出汁，候温，频频含咽(《江西民间草药》)。 

(17)治百日咳：崩大碗三两，瘦猪肉一两。同煎一小时，分两次服，连服数天。 

(18)治误食砒霜或其他食物中毒：老公根四两，胆矾一钱。煎水服。此方亦治钩吻及蕈中毒。 

(19)治骨鲠：老公根煎水内服，服时须慢慢咽下(17～19方均出《岭南草药志》)。 

(20)解大茶药中毒：取崩大碗捣烂，加茶油灌服。 

(21)解木薯中毒：取崩大碗捣烂，温开水冲服。 

(22)解毒蕈中毒：崩大碗四两，片糖二两。煎水内服；或崩大碗四两，萝卜一斤，捣烂榨汁内服(20～22方均出《南方主要有毒植物》)。 

(23)治咳血、吐血、鼻出血：鲜积雪草二至三两。水煎或捣汁服(《福建中草药》)。 

(24)治跌打肿痛：鲜积雪草捣烂绞汁一两，调酒，炖温服；渣敷患处(《福建中草药》)。 

(25)治外感暑热、鼻咽：积雪草、旱莲草、青蒿(均鲜)各适量，共捣烂取什，用冷开水冲服。 

(26)治外感风热：鲜积雪草60克，白颈蚯蚓4条，共捣烂，水煎后取汁，一日分3次服。 

【各家论述】 

(1)《本经》：主大热，恶疮，痈疽，浸淫，赤熛，皮肤赤，身热。 

(2)《药性论》：治瘰疬鼠漏，寒热时节来往。 

(3)《唐本草》：捣敷热肿丹毒。 

(4)《日华子本草》：以盐挪贴，消肿毒并风疹疥癣。 

(5)《滇南本草》：治子午潮热，眩晕，怕冷，肢体酸困，饮食无味，男妇童疳，虚劳发热不退者用之，利小便，水牛肉为引。 

(6)《纲目》：研汁点暴赤眼。 

(7)《本草求原》：除热毒，治白浊，浸疳疮，理小肠气。 

(8)《民间常用草药汇编》：利水和脾。治水泻及赤白痢。 

(9)《陆川本草》：解毒，泻火，利小便。治热性病，头痛，身热，口渴，小便黄赤。

(10)《四川中药志》：祛风散寒。治肺热咳嗽，消瘿瘤，涂痈疮肿毒，消食积饱胀。 

(11)《闽东本草》：治暑热痧气，腹痛腹胀。 

(12)《广东中药》Ⅱ：清暑热，去湿热。治肝肿大，肋膜炎，双单喉蛾，防治麻疹，并解钩吻中毒。 

(二)积雪草的现代研究进展 

积雪草在中国已经有两千多年的药用历史，临床上多用于治疗跌打损伤、皮肤病等。其在印度传统草药中被广泛用于精神病、癫痫及癔病的治疗，迄今为止尚未发现有关积雪草三萜类成分积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸用于治疗 颅脑损伤的报道。 

1、化学成分 

积雪草目前已知的化学成分主要有三萜类、黄酮类、多炔烯类、挥发油类、甾醇类、木脂素类和香豆素类，下面主要从三萜类、多炔烯烃类、挥发油类等成分来归纳。 

(1)三萜类：积雪草主要含大量的三萜皂苷类成分，包括三萜皂甙和三萜酸，即三萜苷及其苷元。 

三萜皂甙有积雪草苷(积雪草甙，Asiaticoside，madecassol)、羟基积雪草苷(羟基积雪草甙，Madecas-soside)、玻热模苷(落得打三糖甙，Brahmoside)及玻热米苷(落得打四糖甙，Brah-minoside)，又谓参枯尼苷(含参枯甙，Thankuniside)及异参枯尼苷(异参枯甙，Isothankuniside)、斯理兰卡积雪草苷(centello2side)(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：，81.)、积雪草二糖苷(asiaticodiglycoside)(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)等，均为五环三萜皂苷。最近报道发现新的三萜类成分，积雪草皂苷B(centellasaponin B)，积雪草皂苷C(centellasaponin C)，积雪草皂苷D(centellasaponin D)。 

三萜酸有积雪草酸(asiatic acid)、羟基积雪草酸(破热米酸，Brahmic acid，madecassic acid)、异羟基积雪草酸(isobrahmic acid)、桦皮酸(be-tulinic acid)、异参枯尼酸(isothankunic acid)和Ternomilic acid(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：，81.)，马达积雪草酸(Madasiatic acid)，centic acid，Centoic acid，cenellic acid，indocenticacid(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)，6-羟基积雪草酸(6-β-O-Hhydroxyasiatic acid)(Shukla YN，Srivas tava Ritu，Tripathi AK，et al.Charicterization of an Ursane triterpenoid from Centella asiatica with growth inhibitory activity against Sp ilarictia oblique Pharm Biol[J].(LisseNeth)，2000，38(4)：262.)等。 

(2)多炔烯烃类：积雪草中还含有多炔烯烃类成分，如：C₁₆H₂₁O₂，C₁₉H₂₇O₄，C₁₉H₂₇O₃，C₁₅H₂₀O₂(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)，C₁₉H₂₈O₂，C₁₇H₂₄O₃和11-oxoheneicosanyl-cyclohexane和dotriacont-8-en-1-oic acid，3-isoocladecanyl-4-hydroxy-a-pyrone(Srivastava Ritu，Shukla YN.A disubstituted pyrone from Centella Asiati2 ca[J].Indian Chen，Sect B：Org Chem Incl Med Chem，1997.36B(10)：963.)，3-o-[a-L-ara2binopyranosyl]-2a，3a，6a，23a-tetrhydroxyurs-12-ene-28-oic acid(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)等。 

(3)挥发油类：秦路平等(秦路平，丁如贤，张卫路，等.积雪草挥发油类成分分析及其抗抑郁作用研究[J].第二军医大学学报，1998，19(2)：186.)应用GC-MS分析，从积雪草中鉴定了45个长链的挥发油类成分，其中含量较高的有石竹烯(caryophyllene)、法尼烯(farnesol)、榄香烯(elemene)、长叶烯(longifolene)等。 

(4)其他成分：除上述化学成分外，积雪草中还含有其他成分，Srivastava R(Srivastava Ritu，Shukal YN，Tripathi AK.Antifeedant compounds fromCentella asiatica[J].Fitoterap ia，1997，68(1)：93.)在积雪草提取物中分离得到Stigmasterol、Stigmasterone和Stigmasteroi-B-glucopyranoside。Holeman等(HolemanM，Theron E，Pinel R.Centella asiatica：Analysis by GC-MS and IRMS[J].CosmetAromes，1994，120：52.)从积雪草中分离得到了倍半萜类成分。何明芳等(何明芳，孟正木.沃联群积雪草化学成分的研究[J].中国药科大学学报，2000，31(2)：91.)在积雪草中分离得到了胡萝卜苷(daucosterol)、香草酸(vanfllic acid)。 

另外在积雪草中还发现含有内消旋肌醇(Meso-inositol)、积雪草糖(积雪草低聚糖，Centellose，一种寡糖)、胡萝卜烃类(Carotenoids)、叶绿素、山萘酚、β-谷甾醇、谷氨酸、天冬氨酸、维生素B₁、生物碱以及鞣质等成分。 

另含山柰素和槲皮素及其甙、积雪草碱(hydrocotyline)、黄酮甙、谷甾醇、维生素C、胡萝卜素、绿色挥发油及树脂状物质。 

2、药理作用 

2.1抗抑郁的作用 

其中所含的甙对小鼠、大鼠有镇静、安定作用，此作用主要是对中枢神经系统中的胆碱能系统的影响。醇提取物无镇痛作用。 

陈瑶等(陈瑶，韩婷，芮耀诚，等.积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的影响[J].中药材，2005，6(6)：492.)给长期未预知应激刺激致大鼠抑郁模型灌胃给药，结果与正常大鼠比较，抑郁症模型组动物血浆促肾上腺皮质激素(简称：ACTH)、血清促甲状腺激素(简称：TSH)、甲状腺素(简称：T₄)、和3，3’，5-三碘甲状腺原氨酸(简称：rT₃)浓度显著降低，血清三碘甲状腺原氨酸(简称：T₃)浓度显著升高；积雪草总苷各剂量组血浆ACTH水平、血清TSH、T₄和rT₃水平不同程度增加，血清T₃水平减少。结果表明积雪草总苷在对下丘脑-垂体-甲状腺轴(简称：HPTA)，有促进垂体血清促TSH的合成与分泌，改善甲状腺功能的异常的作用；在对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(简称：HPAA)，不同程度提高ACTH的水平，并对下丘脑促肾上腺素皮质激素释放激素(简称：CRH)和糖皮质激素有影响。积雪草总苷可能是通过提高机体对各种非特异性刺激的抵抗力，避免过度应激刺激所致机体HPAA和HPTA等调节功能紊乱而发挥抗抑郁作用的。 

早期的研究资料(秦路平，丁如贤，张卫东，等.积雪草挥发油成分分析及其抗抑郁作用研究[J].第二军医大学学报，1998，19(2)：186.)表明，积雪草的挥发油和乙醇初提液具有抗抗抑郁作用。近期研究报道表明积雪草的抗抑郁作用是通过降低单胺氧化酶的活性，调节脑内氨基酸的含量(陈瑶，韩婷，秦路平，等.积雪草总苷对小鼠抑郁行为和脑内氨基酸含量的影响[J].中药材，2003，26(12)：870.)；抑制血清皮质酮水平的升高，增强脑内单胺类神经递质的传递(陈瑶，韩婷，芮耀诚，等.积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的 影响[J].中药材，2005，6(6)：492.)等而发挥作用的。 

2.2抗胃溃疡作用 

乐锦茂等(乐锦茂，浦培英，雷颖.复方积雪草浸膏对大鼠慢性实验性胃溃疡及微循环的影响[J].江苏中医，1992，13(3)：42.)发现复方积雪草浸膏治疗胃溃疡两周以后，大鼠血流加快，血流呈流线型或线粒型，血细胞聚集减少，胃溃疡愈合面积达99.5％。发现复方积雪草浸膏对组胺所致的胃液分泌、胃液游离酸和总酸、胃蛋白酶均有一定的抑制作用。 

随着积雪草对胃溃疡的临床和药理作用的研究不段深入，近几年有许多研究证实积雪草对胃溃疡有治疗作用。如：发现积雪草提取物对乙醇胃黏膜具预防作用；对乙酸胃溃疡具有治疗作用；可以降低过氧化物(简称：MPO)、丙二醛(简称：MDA)、IL8的产生；可以增加胃黏膜細胞的存活率(陈宝雯，纪宝安，张学智，等.积雪草提取物对胃粘膜的保护作用及其机制探讨[J].中华消化杂志，1999，8(19)：4，246.)。通过加强黏膜的自身阻碍以及减少自由基的损害来抗小鼠乙醇所致的胃黏膜损害(Cheng CL，KooMWL.Effect of Centella asiatica on ethanolinduced gastric mucosal lesionsin rats[J].Life Sci，2000，67(21)：2647.)；通过增加粘蛋白和糖蛋白的分泌，增强胃黏膜的屏障作用而发挥抗溃疡作用(Sairam K.Electrosp ray characterization of selected medicinal plant extracts[J].Journal of Pharmaceutical and Bioadical，2001，39(2)：39.)。 

2.3对纤维细胞合成的影响 

谢举临等(谢举临，利天增，祁少海，等.积雪草苷对体外培养的成纤维细胞的作用[J].中山医科大学学报，2001，22(1)：41.)研究了积雪草苷对纤维细胞核DNA合成和胶原蛋白合成的影响，发现积雪草苷可以影响成纤维细胞的超微结构，表现为核分裂相较少，核仁变细小或缺失，使成纤维细胞的增殖变得不活跃，合成和分泌蛋白的活性能力减弱。积雪草苷还可以抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成。 

王瑞国等(王瑞国，王锦菊，于祥彬，等.积雪草苷对成纤维细胞DNA合成与胶原旦白合成的影响[J].福建中医学院学报，2001，11(2)：41.)发现积雪草苷在一定剂量范围内能促进小鼠成纤维细胞DNA合成和胶原蛋白合成，并呈剂量依赖关系。汤丽霞等(汤丽霞，杨光，谭家驹.积雪草酸抑制HSC2T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达[J].第四军医大学学报，2007，28(13)：1178.)也有积雪草酸抑制肝星状细胞HSC-T₆细胞Ⅰ型胶原蛋白表达的报道。潘姝等(潘姝，利天增，祁少海，等.积雪草苷对瘢痕成纤维细胞增殖与磷酸化Smad2和Smad7表达的影响[J].世界临床药物，2004，25(2)：99.)积雪草苷可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期，减少成纤维细胞中的磷酸化Smad2的含量，增加细胞中Smad7的含量。此外，章庆国等(章庆国，王磊，吕洛，等.羟基积雪草甙对体外培养人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响[J].江苏医药杂志，2003，29(2)：91.)，黄茂芳等(黄茂芳，陈明春，曾凡钦，等.3种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长影响研究[J].中国热带医学，2007，7(1)：24.)研究积雪草提取物对人成纤维细胞增殖及 胶原合成的影响，也得到了同样的结论。 

2.4对皮肤系统的作用 

积雪草甙能治疗皮肤溃疡，如顽固性创伤、皮肤结核、麻风等。对小鼠、豚鼠、兔肌肉注射或皮下植入可促进皮肤生长、局部白细胞增多、结缔组织血管网增生、粘液分泌增加、毛及尾的生长加速等。曾有报告用含积雪草0.25～1％醇提取物(含积雪草酸、积雪草甙)的乳霜剂(其中尚含胚胎的或年幼的牛、猪或羊皮肤、肝、脑的水醇提取物)治疗皮肤病，获良好效果。 

张涛等(张涛，利天增，祁少海，等.积雪草苷对烧伤创面愈合中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原表达的影响[J].中华实验外科杂志，2005，22(1)：41.)报道了积雪草苷在烧伤创面愈合过程中能有效促进细胞周期蛋白B₁和增殖细胞核抗原的表达，使细胞周期的S+G₂期明显提前，从而加快细胞增殖，促进创面愈合。毛维翰等(毛维翰，方丽，吴伊旋.积雪苷治疗皮肤病的临床多中心实验[J].新药与临床床，1997，16(3)：133.)对积雪草苷作了治疗皮肤病的临床多中心开放性研究，结果发现，积雪草苷对皮肤溃疡治疗有效率为91.7％，对瘢痕疙瘩的有效率为67.9％，对局限性硬皮病的有效率为89％，对皮肤淀粉样变形的有效率为76％，对萎缩性硬化性苔藓等其他一些皮肤病也有较好的治疗作用。 

此外还有用积雪草配成的烧伤膏用于治疗浅Ⅱ度及深Ⅱ度烧伤，发现患者疼痛缓解快、创面渗出少、愈合周期短、瘢痕形成率低(崔文华，刘光亮，李尧宾，等.积雪草治疗烧伤的止痛、防瘢痕疗效观察[J].中国临床康复，2002，6(6)：839.)。还有积雪草苷可直接作用于黑素细胞，抑制黑素合成，是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂(刘栋，朱文元.积雪草苷对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2004，3(1)：7.)。 

2.5对肾的作用 

复方积雪草在长期的临床实践中显示能改善慢性肾功能衰竭CRF患者症状，降低血肌酐、尿素氮及24h尿蛋白量(王永钧.治疗慢性肾功能衰竭的实践和体会[J].浙江中医学院学报，2003，27(2)：1.)。实验研究提示能抑制系膜细胞增殖，减少细胞外基质沉积，下调肾组织中Ⅳ型胶原、纤连蛋白(简称：FN)、层黏蛋白(简称：LN)以及转化生长因子β₁(简称：TGF-β₁)和基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达，降低血清和肾组织匀浆丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶活性，抑制脂质过氧化(朱晓玲，王军，周大为，等.复方积雪草防治肾小球硬化的实验研究[J].中华肾脏病杂志，2001，17(3)：199.；朱晓玲，王永钧，王军，等.复方积雪草对肾小球系膜细胞及细胞外基质的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2002，3(11)：632.)；能够下调α-SMA、Vimentinm RNA表达水平(马丽娟，杨汝春，鲁盈.复方积雪草对UUO小鼠肾组织细胞转分化与肾纤维化的影响[J].浙江中医药大学学报，2006，30(6)：614.)；阻止系膜细胞由G₁ 期进入S期；下调佛波酯刺激的系膜细胞清道夫受体表达(陈洪宇，童孟立，王永钧，等.加减下瘀血汤对人肾小球系膜细胞清道夫受体表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2003，4(2)：67.)；抑制炎性细胞因子TNF-α上调所致的肾局部补体C₃过度产生(朱晓玲，王永钧，杨汝春，等.复方积雪草有效组分对人肾小管上皮细胞补体C₃表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2007，8(3)：131.)。 

王军等(王军，程晓霞，杨汝春，等.复方积雪草对局灶硬化性肾小球肾炎模型小鼠肾组织内细胞因子表达的调控作用[J].中国临床药理学与治疗学，2003，8(6)：638.)用基因表达谱芯片检测表明：复方积雪草可抑制PDGF-α、PDGF-β、PDGF受体、VEGFm RNA的表达；能抑制IL-9、IL-7R2、MIP等因子的mRNA的表达；经复方积雪草刺激后，肾组织中癌基因c-Myc，Jun表达被抑制；覃志成等(覃志成，陈洪宇.复方积雪草对高IgA血清诱导小鼠肾足细胞表达VEGF的影响[J].中国中医药科技，2006，13(5)：307.)研究发现复方积雪草可以明显减低高IgA血清刺激足细胞表达的VEGFmR2NA；张边江等(张边江，黄怀鹏，徐华洲，等.积雪草总苷对大鼠系膜细胞游离钙的影响[J].中国中医基础医学杂志，2006，12(1)：22.)报道了积雪草提取物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下的大鼠肾小球系膜细胞(简称：MC)增殖和Ca²⁺水平有抑制和降低作用。 

2.6抗肿瘤作用 

Bahu T.D等(Babu T.D，Kuttan G，Padikkala J.Cytotoxic and antitumour p roperties of certain taxa of Umbelliferae with special refernce to Centella asiatica(L.)Urban[J].Journal of Ethnopharmacology，1995，48(1)：53.)报道积雪草纯化物体外对肿瘤细胞增殖有抑制的作用，并显示一定的剂量依赖关系。同时他们还发现，口服积雪草提取物或经层析法获得的积雪草纯化物，能抑制小鼠腹水瘤的生长并延长这些耐受小鼠的寿命，而且还发现它对人体正常的淋巴细胞没有毒副作用。 

1996年有人报道了积雪草具有抗癌作用，之后陆续出现了很多积雪草提取物抗肿瘤作用的研究报道，如：积雪草的醇提取物有抗艾滋病毒逆转录酶的活性(何明芳，孟正木.沃联群积雪草化学成分的研究[J].中国药科大学学报，2000，31(2)：91.)；积雪草苷对体外培养的L₉₂₉细胞和CNE细胞的增殖有抑制作用，对移植S₁₈₀细胞的增殖也有抑制作用，同时能提高荷S₁₈₀小鼠的存活时间(王锦菊，王瑞国，王宝奎，等.积雪草甙抗肿瘤作用的初步实验研究[J].福建中医药，2001，32(4)：39.)；积雪草苷对B₁₆细胞的生长有丝分裂过程有明显抑制作用，能够诱导细胞凋亡或死亡，提示积雪甙有抗黑素瘤细胞生长作用(桑红，倪容之，沈献平，等，积雪甙对黑素瘤细胞生长影响的实验研究[J].中华皮肤科杂志，2004，37(2)：71.)；积雪草苷可诱导肿瘤细胞凋亡并与长舂新碱显示协同作用，有可能作为生化调节剂应用于肿瘤化疗(黄云虹，张胜华，甄瑞贤，等.积雪草苷诱导肿瘤细胞凋亡及增强长舂新碱的抗肿瘤作用[J].癌症，2004，23(12)：1599.)。 

积雪草苷对宫颈癌Hela细胞的生长有显著抑制作用并且呈浓度和时间依赖性；可能通过抑制Survivin表达，促进Capase-3表达而在诱导宫颈癌细胞凋亡过程中发挥重要作用(孙盛梅，李佩玲，吴雅冬，等.积雪草甙诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制的探讨[J].黑龙江医药科学，2007，30(2)：42.)。 

2.7对心血管系统作用 

醇提取物能松弛大鼠离体回肠。甙部分能降低家兔及大鼠离体回肠的张力及收缩幅度，并能轻度抑制乙酰胆碱的作用。对麻醉犬，静脉注射可轻度兴奋呼吸，心率变慢及中度的降低血压，后二者不能被阿托品阻断。有报道积雪甙对麻风病有治疗作用。 

有人报道(Cui FG The application of asiatic acid and its derivatives in treatment of cardio cerebrovascular disease[P].CN：1582946，2005-02-23.)将积雪草总苷用于制备防治冠心病、心肌梗塞、脑血栓形成、脑梗塞等心血管疾病药物中的新用途。 

周建燮等(周建燮，蒋宏伟，衣蕾，等.积雪草甙防治PCI术后再狭窄的实验研究[J].西安交通大学学报(医学版)，2005，26(5)：491.)也有积雪草苷促进内皮细胞生长、内膜修复的作用，初步提示其具有治疗PCI术后再狭窄的作用的报道。 

Cesarone，M.R(Cesarone，M.R.Flightmicroangiopathy inmedium to long-distance fights：Prevention of eedema and micro-circulation alterationswith total triterpenic fraction of Centella asiatica[J].Angiology，2001，52(S2)：33.)研究发现，积雪草的三萜类成分可以增加患者的毛细血管通透性，改善微循环，改善结缔组织血管壁功能，减轻踝部水肿，可以治疗静脉高血压。 

Incandela L(Incandela L.Total triterpenic fraction of Centellaasiatica in chronic venous in sufficiency and in high-perfusion microangiopathy[J].Angiology，2001，52(S2)：9.)研究发现，积雪草的三萜类成分具有调节静脉管壁成纤维细胞的作用，能增加胶原蛋白和组织蛋白的合成，刺激静脉壁周围胶原的重塑，可以用于治疗静脉功能障碍。 

李桂桂等(L IGui-gui，B IAN Guang-xing，REN Jian-ping，et al.Protective effect ofmadecassoside against reperfusion injury after regional ischemia in rabbit heart in vivo[J].Acta Pharmaceutica Sinica 2007，42(5)：475.)对兔心肌缺血再灌注损伤(简称：MIR I)模型研究，发现羟基积雪草苷(简称：MC)可明显减小左心及全心心肌梗塞面积；对心电图有一定的改善作用；并能明显改善心功能，降低LDH及CK的升高程度。并且，MC可明显降低CRP升高程度；升高SOD酶活性，减少MDA含量；可明显抑制MIR I引起的心肌细胞凋亡，使Bcl-2表达上调。MC对心肌缺血再灌注损伤具有明显的预防和保护作用，作用机制可能与抗脂质过氧化物产生、提高SOD活力、抗炎以及抗心肌细胞凋亡有关。 

2.8抗病原微生物作用 

积雪草水提物有抗菌和抗病毒作用，对金黄色葡萄球菌和变形杆菌有抑菌作用，对绿 脓杆菌、大肠杆菌、副大肠杆菌、宋氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌和炭疽杆菌均无抑菌作用(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：81.)。 

张胜华等(张胜华，余兰香.积雪草苷的抗菌作用及对小鼠实验性泌尿系统感染的治疗作用[J].中国新药杂志，2006，15(20)：1746.)报道了积雪草苷对37株标准及临床分离菌株显示较强抗菌活性，尤其对各种耐药细菌，包括耐甲氧西林的金葡球菌(简称：MRSA)、表葡菌(简称：MRSE)，耐5种氨基糖苷类抗生素、产钝化酶的粪肠球菌、产β-内酰胺酶的大肠埃希菌。肺炎克雷伯杆菌和醋酸钙不动杆菌，以及耐哌拉西林的铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度值与三金片相近。积雪草苷对小鼠膀胱上行性肾感染大肠埃希菌26的清除细菌作用较强，可知积雪草苷具有良好的体内外抗菌活性，尤其对于泌尿系统感染。 

积雪草幼芽的水提取物也有抗菌作用。积雪草甙能治疗麻风，有人认为其作用为溶解细菌的蜡膜，从而被其他药物或机体防御机能所消灭。 

2.9增强记忆的作用 

孙峰等(孙峰，刘颖菊，肖小华，等.羟基积雪草甙对慢性铝中毒痴呆小鼠的治疗作用[J].中国老年学杂志，2006，26(10)：1363.)通过对慢性铝中毒痴呆小鼠模型的研究，羟基积雪草甙可明显减轻铝过负荷所致的海马神经元损伤，明显缩短小鼠寻找平台潜伏期，降低小鼠脑组织中MAO-B活性，对慢性铝中毒小鼠的海马神经元具有保护作用，从而改善学习记忆能力，产生对拟痴呆模型的治疗作用。 

陈明亮等(陈明亮，房娜，葛振英，等.复方积雪草对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响[J].河南外科学杂志，2007，13(4)：6.)用复方积雪草连续灌胃30d阿尔茨海默病(简称：AD)模型大鼠，做跳台实验和Y迷宫实验发现治疗组学习记忆能力显著升高。 

2.10对肝的作用 

明志君等(明志君，刘世增，曹莉，等.积雪草总苷抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用[J].中国中西医结合杂志，2004，24(8)：731.)用二甲基亚硝氨(简称：DMN)制备的大鼠肝纤维化模型研究积雪草总苷抗实验性大鼠肝纤维化的作用，发现积雪草总苷能改善肝功能，并且肝组织病理学检查显示具有抗肝纤维化作用，可知积雪草总苷对DMN诱导的大鼠慢性肝纤维化具有良好的治疗作用。抑制肝纤维化可以通过抑制肝星状细胞(简称：HSC)的增殖，促进HSC细胞的凋亡。 

汤丽霞等(汤丽霞，杨光，谭家驹.积雪草酸抑制HSC₂T₆细胞Ⅰ型胶原蛋白表达[J].第四军医大学学报，2007，28(13)：1178.)的研究表明积雪草酸能抑制活化的HSC-T₆细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达水平。马葵芬等(马葵芬，张相宜，齐罗扬，等.三萜类化合物对化学损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用[J].浙江大学学报(医学版)，2007，36(3)：247.)也报道了积雪草酸对化学损伤原代培养大鼠肝细胞有保护作用。 

2.11其他作用 

除以上综述的药理活性之外还有许多作用如：调节免疫和降低血糖的作用(王雪松，郑芸，方积年.积雪草中降血糖多糖的研究[J].中国药学杂志，2005，40(22)：1697.)，抗炎作用(明志君，孙萌.积雪草总苷抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技，2002，9(1)：62.)，抗乳腺增生的作用(明志君，朱路佳，薛洁，等.积雪草总苷抗实验性大鼠乳腺增生[J].中国新药与临床杂志，2004，23(8)：510.)，降温作用(章卓，万敬员，罗福玲，等.羟基积雪草苷与积雪草苷对LPS诱导大鼠发热模型的影响[J].时珍国医国药，2007，18(8)：1799.)等。 

积雪草为中国常用中药，近20年来对积雪草的研究主要集中在它的化学成分及药理作用两方面。在提高实验技能和更新实验方法、加快对其有效成分的研究的同时，更要注药理活性的检验和临床实验，以便更好地利用积雪草的生物活性，促进积雪草在多领域的应用，以便更合理地综合利用积雪草资源。 

3、毒理学 

醇提取物对大鼠腹腔注射的半数致死量为1.93g/kg。 

甙部分毒性较小，大鼠腹腔注射2g/kg也不引起死亡。 

积雪草甙对小鼠、兔皮下注射0.04～0.05g/kg能产生中毒症状；0.2～0.25g/kg则增加出血时间，导致出血。口服lg/kg对小鼠、兔皆能耐受。 

4、临床应用 

(1)用于止痛：取积雪草晒干研细，每日1～1.5钱，3次分服。治疗脑、背及腰部外伤性疼痛42例，27例止痛，14例好转，1例无效。 

(2)治疗传染性肝炎：取鲜积雪草4两，加水500ml，浓煎成250ml，趁热加入冰糖2两溶化，分2次空腹服，7天为一疗程。治疗10例，服药4天黄疸消退、食欲改善、恶心呕吐消失者3例，服药1同黄疸消退、消化道症状好转、胃纳增进者5例。肝肿大于服药二疗程消退2例，三疗程消退5例，四疗程消退3例。 

(3)处理流行性脑脊髓膜炎：带菌者取积雪草(干)1000g，水煎2次，合并滤液，浓缩至1000ml，加防腐剂，pH调至6左右。每服10ml，5岁以下儿童减半，每日3次，空腹服，连服3天。处理30例流脑带菌者，3天后连续3次作鼻咽分泌物采样培养，结果转阴24例，较磺胺噻唑对照组的转阴率高。 

5、化妆品/护肤品领域的应用 

积雪草可以紧致表皮与真皮连接部分，能使皮肤变柔软，有助于解决皮肤松弛现象(尤其产后妈妈)，是皮肤光滑有弹性；帮助促进真皮层中胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生，重新连接起来，从根本上消除妈妈纹，使肌肤达到紧致光滑的效果。还可帮助受损的组织愈合及紧实肌肤。既能促进表皮与真皮之间的密切连接，又能抑制脂肪细胞的增加，防止皮 肤水肿、出现肥胖。在化妆品配方列表里，它可能叫“积雪草苷”或“积雪草酸”。 

很多美容成分在被现代科学发现前，已经在传统草药界占据强势地位，貌不惊人的积雪草很早以前就被证明在处理皮肤疾病上有良好功效。《中药大辞典》记载：“落得打(积雪草)，药性苦、寒，入脾经，其功效为活血、消肿、止痛，并有清热解毒、利水等用途。”而在印度，它也是阿育吠陀医学的重要组成部分，涂抹在皲裂、刮伤、手术创伤、烧伤的伤口上，能加速伤口愈合。在斯里兰卡，它还被用来改善早期的静脉曲张症状，并且积雪草对抗皮肤炎症的效果很早之前也被发现了，是治疗皮肤湿疹的重要草药。 

而现在，积雪草更成为护肤品中的标志性成分，首先，积雪草提取物中丝毫不含咖啡因或其他刺激性成分，这让它可以适用于几乎任何皮肤类型和皮肤状况(部分红血丝皮肤或者敏感性皮肤或特干性皮肤是不能接受任何细小的外界刺激)。在功能上，它能促进血液循环；改善痤疮性皮肤；防止色素沉淀；促进皮肤的胶原蛋白生成、改善皮肤弹性，延缓肌肤老化；紫外线照射后的晒后修复都被证实有显著效果，因此在不同类型的美容产品中，都能见到积雪草的身影。 

尽管在中国、印度、巴基斯坦、斯里兰卡、马达加斯加和南非都有积雪草生长，但护肤品配方中，源自斯里兰卡和南非的积雪草提取物被公认功效最佳。 

积雪草为《中国药典》收载的常用中药，为伞形科积雪草属植物积雪草(Centella asiatica L.Urban.)的干燥全草，始载于《神农本草经》，主要分布于南方地区，性寒、味苦、辛，具有清热利湿，解毒消肿之功效，在中国已经有两千多年的药用历史。临床上多用于治疗跌打损伤、皮肤病等。 

(三)一种积雪草提取物 

【中文名称】积雪草总甙(Asiaticosides)，别名：亚细亚皂甙； 

【分子式、分子量及结构式】C₄₈H₇₈O₁，959.12； 

【熔点】：235℃～238℃； 

【CAS号】16830-15-2； 

【溶解度】不溶于水，溶于酒精和吡啶； 

【产品来源】伞形科雷公根属植物积雪草的全草，经提取制得的三萜皂甙。 

【化学成分】该产品含有多种三萜类，其中包含α-香树脂醇结构。主要成分为积雪草甙、积雪草酸和羟基积雪草酸。 

【产品性状】外观棕黄色至白色精细粉末，口感微苦。 

【产品规格】积雪草单甙10％～30％～40～90％％；积雪草总甙10％～80％HPLC； 

【用药剂量】积雪草的一般剂量为每天3次，每次20～40mg标准含40％积雪草甙的提取物。 

含超过70％总三萜类化合物的标准提取物一般每次服用60mg，每天1至2次。 

【应用剂型】栓剂、洗剂、注射液、片剂、胶囊等。 

【产品保存】置于阴凉干燥、避光，避高温处。 

(四)常用中草药有效成分的提取分离方法 

1、溶剂提取法 

(1)原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。当溶剂加到中草药原料(需适当粉碎)中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质，而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，如此多次往返，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出，继续多次加入新溶剂，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为亲水性有机溶剂及亲脂性有机溶剂，被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同。有机化合物分子结构中亲水性基团多，其极性大而疏于油；有的亲水性基团少，其极性小而疏于水。各类溶剂的性质，同样也与其分子结构有关。这样，发明人就可以通过对中草药成分结构分析，去估计它们的此类性质和选用的溶剂。总的说来，只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当，就会在其中有较大的溶解度，即所谓“相似相溶”的规律。这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分的依据之一。 

(2)溶剂的选择：运用溶剂提取法的关键，是选择适当的溶剂。溶剂选择适当，就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等。常见的提取溶剂可分为以下三类： 

①水：水是一种强的极性溶剂。中草药中亲水性的成分，如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及苷类等都能被水溶出。为了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及碱水作为提取溶剂。 

②亲水性的有机溶剂：也就是一般所说的与水能混溶的有机溶剂，如乙醇(又称：酒精)、甲醇(又称：木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好，对中草药细胞的穿透能力较强。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。难溶于水的亲脂性成分，在乙醇中的溶解度也较大。还可以根据提取物质的性质，采用不同浓度的乙醇进行提取。用乙醇提取比用水量较少，提取时间短，溶解出的水溶性杂质也少。乙醇为有机溶剂，虽易燃，但毒性小，价格便宜，来源方便，有一定设备即可回收反复使用，而且乙醇的提取液不易发霉变质。由于这些原因，用乙醇提取 的方法是历来最常用的方法之一。甲醇的性质和乙醇相似，沸点较低(64℃)，但有毒性，使用时应注意。 

③亲脂性的有机溶剂：也就是一般所说的与水不能混溶的有机溶剂，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。这些溶剂的选择性能强，不能或不容易提出亲水性杂质。但这类溶剂挥发性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，价格较贵，设备要求较高，且它们透入植物组织的能力较弱，往往需要长时间反复提取才能提取完全。如果药材中含有较多的水分，用这类溶剂就很难浸出其有效成分，因此，大量提取中草药原料时，直接应用这类溶剂有一定的局限性。 

(3)提取方法：用溶剂提取中草药成分，常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等。同时，原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率，必须加以考虑。 

①浸渍提取法(简称：浸渍法)：浸渍法系将中草药粉末或碎块装入适当的容器中，加入适宜的溶剂(如乙醇、稀醇或水)，浸渍药材以溶出其中成分的方法。本法比较简单易行，但浸出率较差，且如用水为溶剂，其提取液易发霉变质，须注意加入适当的防腐剂。 

②渗漉提取法(简称：渗漉法)：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断添加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种浸出方法。当溶剂渗进药粉、溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速，在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于原药材重的10倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀浸出液作为另一批新原料的溶剂之用。 

③煎煮提取法(简称：煎煮法)：煎煮法是中国最早使用的传统的浸出方法。所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿，不宜用铁锅，以免药液变色。直火加热时最好时常搅拌，以免局部药材受热太高，容易焦糊。有蒸汽加热设备的药厂，多采用大反应锅、大铜锅、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加热。还可将数个煎煮器通过管道互相连接，进行连续煎浸。 

④加热回流提取法：应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材约为容量的20％～60％，溶剂浸过药材表面约1～2cm。在水浴中加热回流，一般保持沸腾3～6小时，放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。 

⑤连续回流提取法：应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成分，不论小型实验或大型 生产，均以连续提取法为好，而且需用溶剂量较少，提取成分也较完全。实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器。连续提取法，一般需数小时才能提取完全。提取成分受热时间较长，遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法。 

2、分离和纯化方法 

上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。 

(1)溶剂分离法：一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。水浸膏或乙醇浸膏常为胶状物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌入适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。 

(2)溶剂萃取法 

①萃取法：溶剂提取萃取法又简称萃取法，是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法。萃取时如果各成分在溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高；如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行萃取，如果有效成分是偏于亲水性的物质，在亲脂性溶剂中难溶解，就需要改用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性。提取黄酮类成分时，多用乙酸乙脂和水萃取。提取亲水性强的皂苷则多选用正丁醇、异戊醇和水作萃取。不过，一般有机溶剂亲水性越大，与水作萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大。 

②逆流连续萃取法：是一种连续的溶剂萃取法。其装置可具有一根、数根或更多的萃取管。管内用小瓷圈或小的不锈钢丝圈填充，以增加溶剂萃取时的接触面。如果一种中草药的水浸液需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取，则需将水提浓缩液装在萃取管内，而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内。萃取是否完全，可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查。 

③逆流分配法：逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法与溶剂逆流萃取法原理一致，但加样量一定，并不断在一定容量的溶剂中，经多次移位萃取分配而达到混合物的分离。 

④液滴逆流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法。为近年来在逆流分配法基础上改进的溶剂萃取法。对溶剂系统的选择基本同逆流分配法，但要求能在短时间内分离 成，并可生成有效的液滴。由于移动相形成液滴，在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面，促进溶质在溶剂中的分配，故其分离效果往往比逆流分配法好。 

(3)大孔吸附树脂法：大孔吸附树脂是20世纪60年代发展起来的一类有机高聚物吸附剂，具有良好的吸附性能，近十余年来逐渐被应用于中草药化学成分的提取分离和中药新药的开发研制。 

大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结合的分离材料。它的吸附性是由于范德华引力或生成氢键的结果。筛选原理是由于其本身多孔性结构所决定。由于吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。这使得有机化合物尤其是水溶性化合物的提纯得以大大简化。大孔吸附树脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯缩聚而生成，由于改性剂的加入，大孔吸附树脂的极性发生改变，按照树脂的表面性质，吸附树脂一般分为非极性、中极性和极性三类。 

非极性吸附树脂是由偶极矩很小的单体聚合物制得的不带任何功能基的吸附树脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯体系的吸附树脂，如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附树脂。 

中极性吸附树脂指含酯基的吸附树脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯与双甲基丙烯酸酯等交联的一类共聚物。它是在非极性大孔吸附树脂的基础上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈缩聚而成，如中国国内经常使用的AB-8大孔吸附树脂。 

极性吸附树脂是指含酰胺基、腈基、酚羟基等含氮、氧、硫极性功能基的吸附树脂。此外，有时把含氮、氧、硫等配体基团的离子交换树脂称作强极性吸附树脂，强极性吸附树脂与离子交换树脂的界限很难区别。极性大孔吸附树脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亚砜类缩聚而成，如日本三菱化工的Diaion HP 2MG、美国Rohm-hass公司的XAD-10，XAD-9大孔吸附树脂。 

与活性炭和其它吸附剂相比，大孔吸附树脂具有很多的优点，如对某种物质的吸附选择性较高；物理化学稳定性和机械强度较好；品种规格较多，可根据需要改变树脂物理或化学结构；吸附树脂一般为球状颗粒，流体阻力较小等等。因而被广泛应用于化工、医药等领域，近年来关于大孔吸附树脂在天然产物提取分离中的应用研究报道越来越多。大孔吸附树脂对中草药化学成分如生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些苷类成分都有一定的吸附作用。对糖的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强。 

(4)沉淀法：是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀，以获得有效成分或除去杂质的方法。如铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一。由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中，能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀，故 可利用这种性质使有效成分与杂质分离。然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气体，使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。 

(5)盐析法：盐析法是在中草药的水提液中，加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。常用作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。 

(6)透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制。 

(7)结晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分，研究其化学结构，必须首先将中草药成分制备成单体纯品。在常温下，物质本身性质是液体的化合物，可分别用分馏法或层析法进行分离精制。一般地说，中草药化学成分在常温下多半是固体的物质，都具有结晶体的通性，可以根据溶解度的不同用结晶法来达到分离精制的目的。 

3、常用干燥方法 

(1)真空干燥：是基于这样一基本原理：水的饱和蒸气压与温度紧密相关，在真空状态下，水的沸点降低，即在真空下操作也就是在低温下操作，可避免在高温下营养成分如维生素等的破坏，同时提高了干燥速度。真空干燥在食品、制药、化工等行业有广泛的应用，中国也开发和引进了各种真空干燥设备，其结构形式多种多样。常用的形式主要有箱式真空干燥器、双锥式真空干燥器、带式真空干燥器等。这些传统的真空干燥装置主要采用热风，蒸汽或电等加热，利用热传导、对流或辐射原理将热量从外部传到物料内部。真空干燥具有干燥温度低，干燥室内相对缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐变等一系列优点，适合于热敏感性食品物料的干燥，此外设备成本、干燥费用也相对较低。 

(2)喷雾干燥：是流化技术用于液态物料干燥的一种方法。因是瞬间干燥，特别适用于热敏性物料，故所得产品质量好，保持原来的色香味，且易溶解。利用喷雾干燥来制备微囊的研究正在进行，它是将心料混悬在衣料的溶液中，经离心喷雾器将其喷入热气流中，所得的产品是衣料包心料而成的微囊，这种微囊粉末可采用于直接压片，也可制备胶囊剂、糖浆剂或混悬剂。 

(3)冷冻干燥：是将干燥液体物料冷冻成固体，在低温减压条件下利用冰的升华性能，使物料低温脱水而达到干燥的一种方法。由于物料在高度真空及低温条件下干燥，故对某些极不耐热物品的干燥很适合。王大林报道了一种喷雾通气冻干新技术，是利用冷的空气或氮气作为介质，迅速流经冻结物使水升华，喷雾冻干制得的产品微粒小、干燥快、时间短、均匀、流动性好，并具良好的速溶性。近年来，对膏状物料和粘稠物料干燥的研究取得了较大进展，流态化技术、喷射技术、惰性载体技术，则是在此研究基础上发展起来的。 旋转闪蒸干燥机、热喷射气流干燥机、惰性载体干燥机均适合热敏性物料和膏状物料的干燥。这些新的研究成果用于中药制剂生产，将大大改善中药加工的技术水平，提高生产效率。 

(4)远红外加热干燥法：是一项新的干燥技术，其干燥原理是将电能转变为远红外辐射，从而被药材的分子吸收，产生共振，引起分子和原子的振动和转动，导致物体变热，经过热扩散、蒸发和化学变化，最终达到干燥的目的。远红外干燥可节省电能20％～50％，效果较好。 

(5)微波干燥法：是一项20世纪60年代迅速发展起来的新技术，微波干燥实际上是通过感应加热和介质加热，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它转变为热量从而达到干燥的目的。微波干燥可杀灭微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中国生产的微波加热成套设备有915mhz和2450mhz两个频率。 

4、超临界CO₂萃取方法 

(1)有关动、植物成分的提取方法有：水煮法、水媒分离法、分子蒸馏和减压蒸馏法、金属加合法、萃取结晶法、分盘冷冻压榨法和有机溶剂法等。 

采用水煮加热法，因加热时间长、温度高，易使对热不稳定的挥发成分发生变化，如一些不饱和脂肪酸的氧化。水媒分离法，此分离法的明显优点是消除了有机溶剂法造成的高费用和公害，但是这种技术的缺点是得到的提取物的纯度或级别不如有机溶剂分离法高。分子蒸馏和减压蒸馏法为减少热变性，需用尿素加合物等方法来除去大部分提取物，在得到的产品中必须将其除去；虽然可得到较纯的提取物，但需几步才能达到目标，较费时、费力，增加了生产成本。金属加合法分离需要较低的低温处理，最后还要设法去除金属离子，清除不尽还会造成金属离子污染。萃取结晶法得到提取物纯度较高，在较低的温度下进行，能防止提取物的氧化，但时间较长，不太适用于大规模的工业化生产。分盘冷冻压榨法缺点是，安放盘架和液压机的冷冻室需要数千平方米的面积和庞大的冷却系统，大的设施需要多人操作，劳动强度高，分离速度缓慢，效率低，不能连续操作。有机溶剂法是采用石油醚或乙醚有机溶剂在水浴上加热情况下，进行回流循环提取；由于所采用的有机溶剂如石油醚或乙醚等均为一种低沸点物质，易燃易爆，同时，有机溶剂的使用一方面会污染环境，另一方面有机溶剂有可能在提取物中有残留，会影响提取物在医药上的进一步应用。 

(2)有关动、植物成分的超临界CO₂萃取方法：一种流体当处在其临界温度和压力状态时，被称为超临界流体。由于超临界流体的密度接近于液体，具有与液体溶剂相当的萃取能力。又具有与气体相当的低粘度，扩散能力比液体要大100倍，因而具有较高的传质性。采用超临界萃取的时候，利用超临界流体的这些性质，使之与待分离的物质相接触 穿透基体，从中萃取出目标物质。然后利用降压和/或升温的办法降低其密度，从而降低溶质在其中的溶解度，使被萃取物与溶剂分离。因为不同的物质在相同的萃取条件下溶解度是不同的，因而有可能借助这种差异将它们进一步分开。超临界流体萃取常常选用CO₂等临界温度低且化学惰性的物质为萃取剂，它特别适用于热敏物质和易氧化物质的分离，因此非常适用于对于动物有效成分的提取分离。因此，本发明采取该方法，能够制备高纯度的提取物。 

超临界CO₂萃取方法是这样提取的：把干燥的提取物的粗粉放在超临界萃取设备中用CO₂进行萃取，减压后即得提取物，室温条件下呈浅黄色透明状；提取物中有效成分的纯度在40％以上，优于其他提取方法。 

超临界CO₂萃取提取物的方法包括如下步骤： 

(1)将干燥的提取物粉碎至10～30目后，置于超临界萃取釜中，连续地通入超临界状态下的CO₂进行萃取，优选的条件一般是：CO₂流量10～55kg/h·kg原料、压力5～50Mpa、温度15～75℃、时间0.5～6h；进一步优选的条件一般是：CO₂流量45kg/h·kg原料、压力35Mpa、温度50℃、时间1h； 

(2)将萃取了提取物的CO₂减压至1～12MPa，即可获得在室温条件下提取物，提取物中有效成分的纯度在40％以上，萃取物的理化性状和纯度都优于其他提取方法。 

萃取条件的选择是通过以下办法实现的：首先选定四因素、三水平，根据正交设计方法，按L9(3⁴)交设计表安排实验(正交实验设计安排参考郭祖超主编的《医学统计学》，人民军医出版社，1999年第一版)。从正交实验结果，分析得到萃取工艺条件。 

对超临界CO₂萃取的提取物进行甲酯化后，进行气相色谱-质谱分析。 

超临界CO₂萃取提取物的制备方法不使用有机溶剂等物质，不会污染环境，也不存在有害溶剂残留等问题，而且操作简便、萃取时间短、产品纯度高，使用的CO₂廉价而且可重复循环使用，工业生产成本低廉。 

(五)颅脑损伤治疗的研究概况 

1、概述 

脑是神经中枢，脑组织最脆弱，难再生修复。颅脑损伤是一种急危重症，是40岁以下病人最常见的死亡原因。多合并有多发伤、失血性休克，这些伤员的救治非常困难，伤后数小时是死亡的高峰。其主要死亡原因是出血、窒息、呼吸心跳停止。 

由外界暴力而造成大脑的损害，称为急性颅脑损伤，或简称：颅脑损伤或颅脑伤。急性颅脑损伤有时也称颅脑战创伤，平战时都十分常见，容易造成伤员死亡、留下残疾，死残率高，是威胁人类生命的主要疾患之一。 

急性颅脑损伤死亡原因主要是：颅内出血、脑挫裂伤和急性脑积水等，这些病理改变 相互关联，均会发展形成脑疝。脑疝形成2～3小时则可造成伤员致残，时间越长，抢救成功的机会越少，脑疝超过6小时的，救活的机会渺茫。脑出血的疗效优于脑挫裂伤，而脑出血中的硬膜外血肿疗效最佳，抢救及时可完全恢复。 

目前治疗脑创伤的方法有：亚低温疗法、激素疗法、颅内高压治疗等。 

2、颅脑损伤的临床分型 

颅脑损伤的临床分型是一个重要而复杂的课题，多年来一直缺乏世界通用的统一分型体系，给有关颅脑损伤的科学研究和临床工作造成了相当的困难，也影响了相关的国际学术交流。1974年和1976年英国格拉斯哥大学的Jennett及Teasdale等提出格拉斯哥昏迷分级法，以此为基础对急性颅脑损伤分型。尽管存在一些不足之处，但很快被各国学者接受并推广应用至今，大大方便了国际学术交流。以下对国际和中国所采用的主要分类标准做一简介。 

根据临床应用进行分类： 

该方法主要应用于临床诊断，以颅脑损伤部位和损伤的病理形态改变为基础。首先根据损伤部位分为颅伤和脑伤两部分，二者又分为开放性和闭合性损伤。脑损伤依据硬脑膜是否完整，分为开放性颅脑损伤(Open Craniocerebral Injury)和闭合性颅脑损伤(Closed Craniocerebral Injury)。前者的诊断主要依据硬脑膜破裂，脑脊液外流，颅腔与外界交通。颅底骨折合并脑脊液漏者又称之为内开放性脑损伤。闭合性脑损伤又可以分为原发性和继发性两类脑损伤。 

根据病情轻重进行分类： 

临床应用分型只能对颅脑损伤患者进行受伤部位和病理类型做出诊断和分型，而无法对患者病情的轻重进行判断。1997年9月天津召开的全国第二次颅脑损伤学术研讨会上修订了较为完善的中国公认标准：按昏迷时间、阳性体征和生命体征将病情分为轻、中、重、特重4型。 

(1)轻型①伤后昏迷时间0～30分钟；②有轻微头痛、头晕等自觉症状；③神经系统和CSF检查无明显改变。主要包括单纯性脑震荡，可伴有或无颅骨骨折。 

(2)中型①伤后昏迷时间12小时以内；②有轻微的神经系统阳性体征；③体温、呼吸、血压、脉搏有轻微改变。主要包括轻度脑挫裂伤，伴有或无颅骨骨折及蛛网膜下腔出血，无脑受压者。 

(3)重型①伤后昏迷12小时以上，意识障碍逐渐加重或再次出现昏迷；②有明显神经系统阳性体征；③体温、呼吸、血压、脉搏有明显改变。主要包括广泛颅骨骨折、广泛脑挫裂伤及脑干损伤或颅内血肿。 

(4)特重型①脑原发损伤重，伤后昏迷深，有去大脑强直或伴有其他部位的脏器伤、 休克等；②已有晚期脑疝，包括双侧瞳孔散大，生命体征严重紊乱或呼吸已近停止。 

3、颅脑损伤的精神症状 

颅脑损伤发生于许许多多的情况，交通事故、地震灾害、摔伤、工伤、战争……。颅脑损伤必然会伴发精神上的不正常，只是轻重不同而已。从疾病的发展过程来看，颅脑损害所伴发的精神障碍可分为急性和慢性两种。 

急性颅脑损伤中最轻的是脑震荡，这是头颅受到外界暴力作用而引起的一过性大脑功能障碍。较轻时，仅有短暂的神志恍惚，脑力活动迟钝，经常几秒钟或者十几分钟即可完全恢复。较重时，常有短时间的意识丧失(不省人事)、面色苍白、脉搏减弱、血压下降、出冷汗等表现。一般几分钟或者半个多小时即可清醒。醒后记不清受伤时的经过，情绪不稳定，容易激动，精神活动迟钝，显得呆傻。经一两周之后，以上症状逐渐消失。 

脑震荡时，由于脑部血液循环障碍，以及脑组织肿胀和水肿，病人可有头痛、眩晕、怕光、怕声响、易兴奋等表现。 

急性颅脑损伤中，脑挫伤较脑震荡为重。其病变主要在大脑半球前半部的凸面，在大脑皮层的表面可以见到出血点。脑挫伤时，常伴有裂伤；而裂伤则又必然伴有程度不同的挫伤，因此可合称为“脑挫裂伤”。 

脑挫裂伤的病人在头部受伤后，意识会立即丧失。其时间依损伤严重程度及损伤部位而定。意识恢复过程缓慢。起初，病人朦朦胧胧、迷迷糊糊，历时几个小时到几天，神志才能完全清醒。在意识清醒之后，病人多伴有头痛、眩晕、嗜睡、情绪不稳、躁动不安、容易激惹、怕光、怕声、注意力涣散、睡眠障碍等症状，不少病人出现恶心、呕吐，有些病人有癫痫发作。 

颅脑损伤的后果可能影响病人终生，有以下的表现形式： 

①颅脑损伤后综合征这是大脑闭合性外伤后常见的一种后遗症，常在脑震荡经过一个阶段的无症状期(往往一个月以上)之后才出现。最多见的症状为头痛。这种头痛安静时减轻，活动时、情绪不悦时、劳累时加重。其他常见的症状有头晕、失眠、多梦、情绪不稳、容易激惹、容易伤感、怕吵、畏光、注意力不集中、记忆力减退、思维迟钝、疲乏无力、缺乏主动性及进取心。病人常诉说心悸、胸闷、耳鸣、多汗、性功能障碍等不适。有的病人还会有癔症样发作。 

以上这些症状的发生及其严重程度，既与颅脑损伤的严重性相对应，也与精神因素、神经类型、个性特征、躯体状况，以及个人对脑外伤的态度和认识有关。 

②癫痫多在伤后数月至数年出现。这是由于损伤部位疤痕形成及脑组织萎缩粘连所致，可表现为全身抽动，或其他不同的发作形式。 

③人格改变这往往是较为严重的颅脑损伤所致的后遗症。表现为易发脾气、好与人争 吵、缺乏责任感、自私、幼稚、难与人相处，有时会有偷窃等违法行为。 

④痴呆病人逐渐呆傻，思维缓慢，反应迟钝，分析、理解、领悟、计算等能力明显下降。 

⑤颅脑损伤后脑病病人出现许多神经系统活动障碍，如失语、肢体瘫痪等。精神症状有情感淡漠、精神萎靡，有些病人还可有幻觉、妄想以及离奇古怪的行为举止。 

颅脑损伤，自然应当以预防为主，严格执行各种安全措施，尽量避免发生颅脑外伤。发生颅脑损伤后，则要预防和减少后遗症和慢性疾患的发生。急性期应严格卧床1～2周，在采取医疗措施的同时进行心理治疗，消除不必要的顾虑。一旦病情许可，即应安排病人逐渐过渡到正常的生活中去。 

4、颅脑损伤的诊断和治疗 

从事基础和临床的神经科学工作者在探讨颅脑伤发病机理和颅脑伤救治方面进行了卓有成效的工作。二十世纪八十年代以来，随着颅脑伤基础研究不断进展，不少新技术、新概念和新疗法已应用于临床救治工作中，并且已经取得令人满意的临床疗效。 

(1)颅脑外伤的现场抢救 

在抢救现场中除了大出血的伤员之外，应首先把头部有伤的伤员挑出来。如刚发生车祸或战伤后，昏迷的伤员一般是头部受伤；脉搏微弱的伤员是休克伤员；休克也会意识不清，但休克伤昏迷稍晚于头部伤。这些伤员要马上送到就近的医院。被送的伤员要平卧，伤员呕吐需及时处理，因为昏迷伤员会将呕吐物误吸入肺中，堵塞气道，造成窒息，使伤情加重，甚至呼吸停止。 

出现如下情况容易耽误抢救：许多颅脑损伤的伤员，头发未剃光之前看不清伤痕，有些旋转伤的颅脑损伤伤员甚至全身完好无损，若无人目击受伤过程，缺少经验的医生常会考虑其他疾病而误诊。 

颅脑损伤的抢救一定要快速及时，就近治疗。 

(2)颅骨骨折的诊断与治疗 

头颅受到强烈的外力打击时，易发生骨折。外力打击的方向、形式、强度以及打击面等不同，可出现各种不同类型的颅骨骨折。外力一般作用于颅骨的着力点部分，颅骨向内凹陷，先形成内板骨折，同时出现向两侧方的分力，则形成骨折线。如力量再大些，则骨折呈凹陷状态。若外力更加大，则形成粉碎骨折。 

颅骨骨折从性质上，可分为单纯性骨折及复杂性骨折。从形状上，可分为线状骨折、凹陷骨折、粉碎骨折。成年人的骨缝分离，也可视为骨折的一种。从部位可分为穹窿部骨折及颅底骨折。从有无头皮的断裂损伤，又分为开放和闭合性骨折。某些尖锐物体致伤，又可造成穿通性骨折。 

颅骨骨折多发生在着力点和骨板较薄的部位，如颞骨、颅中凹、颅前凹等颅底部，这些部位除骨质脆弱外，尚有较多的神经、血管的孔道，易造成线状骨折。 

颅骨骨折与四肢骨折不同，除严重的粉碎骨折，可因颅脑损伤，造成生命危险外，颅骨骨折本身在临床上无特殊重要意义。有人认为颅骨骨折，可以缓冲一部分外界对脑的打击力量，所以不能以有无颅骨骨折来判断颅脑损伤的轻重，而忽略了对颅脑损伤的严密细致的检查。 

颅骨骨折常伴有板障血管断裂，发生颅板内外血肿，易使头皮局部肿胀，或有擦伤、挫伤等，有时因头皮肿胀，头颅变形，易误诊为凹陷性骨折，值得注意。 

颅前凹底骨折，常出现眼窝内出血，导致眼球突出，球结膜出血，眼睑血肿，呈现瘀血斑着色，似熊猫样外观，称作眼镜样血肿。有时因视神经受损，出现视力障碍。筛板骨折，则有鼻出血，嗅觉障碍或出现脑脊液鼻漏。 

颅中凹底骨折常因骨折线波及到中耳、中耳道或发生鼓膜破裂等，出现外耳道出血，耳后部皮下瘀血斑及脑脊液耳漏等。 

颅后凹底骨折常形成咽后壁粘膜下血肿，项部肿胀及瘀血斑等。这些瘀血斑多于伤后2～3日较为明显。 

穹窿部颅骨骨折，有时可损伤硬脑膜进入静脉窦或脑膜动脉等血管，出现硬膜外血肿。颅底骨折则易损伤某些颅神经，如骨折在颅前凹可损伤第Ⅰ、Ⅱ颅神经；颅中凹可损伤Ⅶ、Ⅷ颅神经；颅后凹可损伤Ⅸ～Ⅻ颅神经等。 

穹窿部骨折，一般通过单纯的各种位置的X线拍片便可诊断，多不困难。颅底骨折，由于其解剖学上多数管孔的影响，X线检查常不能显示出清楚的骨折线，多以临床表现作为诊断依据。 

单纯的线状骨折，一般不作特殊处理，如出现硬膜外血肿时，则必须及时行血肿清除手术。凹陷骨折，如下陷约1.0cm，则可造成脑受压或下陷的内板形成骨折片，造成硬膜或脑损伤时，以及小儿凹陷骨折，有妨碍脑发育可能等，均为手术治疗的适应证。尤其伴有颅内组织损伤、出血，或粉碎骨折者应作紧急手术处理。颅底骨折，在急性期按照开放性颅脑损伤的保守治疗原则处理，严防感染。如有脑脊液漏，则严禁腰椎穿刺，如发现视神经管骨折，伤后出现急剧的视力障碍，应及时开颅行视神经管减压术。对脑脊液漏的处理，除严防感染外，常以头高位卧床，多可自然闭合治愈。 

(3)脑震荡的诊断与治疗 

即轻型闭合性颅脑损伤。根据损伤的程度有轻重之分，但总的临床特点有二：①意识障碍一般不超过30min，如果意识障碍时间延长，则可能有脑挫伤。也有少数病例并无意识障碍，但必须有头痛、眼震、乏力、植物神经功能紊乱的症状。②外伤后病人出现逆行 性健忘症。具备以上两个特点，诊断脑震荡是充分的。 

所有脑震荡病人，都未见到局灶性症状和颅内压增高症状，但绝大多数症例都具有植物神经功能障碍。所以脑震荡可以认为是脑生物电和脑血液动力学的改变，脑功能障碍是可以恢复的。如伴有单纯性颅骨骨折，则要除外脑挫伤。 

脑震荡主要是对症治疗，如镇静、镇痛、安眠、避免精神经刺激和给一定的精神鼓励等，一般不遗有任何症状。因个体差异，也有个别病人演变成外伤性神经官能症者，则治疗时间将会拖长。 

(4)脑挫裂伤的诊断与治疗 

较重的闭合性颅脑损伤。发生脑解剖学的变化，如脑血管破裂、组织坏死等。在临床上出现中枢神经的局灶性症状。轻症者意识障碍多在2h以上，可出现轻微的颅内压增高症状，肢体的肌张力、肌力、腱反射等不对称及有颅骨骨折和血性脑脊液等。如意识障碍持续6～12h，且程度较深，更有单瘫、偏瘫或失语等局灶症状，说明脑挫伤较为严重。感觉障碍常可因意识障碍而被掩盖。意识障碍超过12h，持续加深，颅内压增高和局灶症状也逐渐加重，则说明外伤引起了严重的脑代谢、脑血液循环的障碍，病人常可丧失生命。如有脑干延髓损伤，受伤当时病人即陷入深昏迷状态，并有呼吸、心血管功能障碍。故重症颅脑损伤，不仅由于损伤的程度，与损伤的部位也有一定关系。 

脑挫裂伤一般应安静卧床，积极地止血、脱水和适当地抗感染治疗，并密切观察经过。如创伤继续出血，或出现急性脑水肿，则很快形成危及生命的颅内压增高。在这种情况下，除上述一般治疗外，需要紧急施行手术探查、开颅减压等以挽救生命。 

(5)外伤性颅内血肿的诊断与治疗 

常伴随脑挫裂伤同时出现，但也有时不合并脑挫裂伤者，如矢状窦破裂、脑膜血管断裂等均可形成颅内血肿。颅内血肿直接压迫脑组织，使脑循环和脑脊液循环受阻，使脑受压更加严重，形成恶生循环。 

脑受压的症状，不仅和出血的量有关，而且和出血的速度有关，如动脉出血则病情急剧，静脉出血则症状发展缓慢。 

颅内出血量占正常颅腔容积8％～15％以下时，不出现脑受压现象，此称为储备腔，腔的大小有个体差异。超过上述范围可出现脑受压症状。颅内出血开始时，颅腔内脑脊液被压向穹窿及脑底，最后被挤向脊髓蛛网膜下腔，这一过程被认为是颅内血肿的中间清醒期。中间清醒期的长短，与出血的速度和脑损伤的程度和部位等有关，如静脉出血则中间清醒期可长些，动脉出血合并重症脑挫裂伤或脑干损伤，有时可不出现中间清醒期，伤后直接陷入昏迷状态，且逐渐加重。 

颅内血肿从发生部位可分为硬膜外、硬膜下、脑内、脑室内和复合性血肿，后者系指 两个部位以上的血肿。从受伤到发生症状的时间，可分为伤后3日内发现的急性血肿，伤后3日到3周以内发现的亚急性血肿及伤后3周以上出现的慢性血肿。慢性血肿几乎都位于硬膜下。慢性硬膜下血肿，多以颅内压增高，疑为颅内肿瘤而就医，常为CT脑扫描而确诊。 

①急性硬脑膜外血肿 

据大多数文献报道，占颅脑损伤的1％～3％，普遍经CT检查之后会更有所增加。此种血肿易发生在较轻的颅脑损伤，有中间清醒期者居多。临床主要表现为头痛、呕吐等颅内压增高征。很快出现睫反射、瞳孔大小、病理反射等左右不同的偏侧症状，直到完全偏瘫。如X线头颅平片显示有骨折线通过脑膜中动脉、静脉窦等时，首先应想到此症。如病人情况允许应积极进行脑血管造影，或CT检查以进一步明确诊断，病人危重不宜进行特殊检查时，应根据临床定位诊断直接钻孔探查。 

早期诊断、早期手术为本症的治疗原则。清除血肿、止血、减压以完全解除脑受压和脑水肿为手术的主要目的。手术后与一般闭合性颅脑损伤处理相同。 

②急性硬脑膜下血肿 

占颅脑损伤的3％。常发生在较重的颅脑损伤，故较少出现中间清醒期，多表现为外伤后意识障碍逐渐加重，或躁动之后陷入昏迷状态。常因病情进展较急性硬脑膜外血肿缓慢，故颅内压增高征常表现出典型的过程，如血压逐渐升高，脉搏逐渐减慢(40次/min左右)，呼吸逐渐变慢(10次/min左右)，其他临床表现与硬脑膜外血肿大致相同，治疗也与硬脑膜外血肿一致。 

本症约有1/4病人合并脑水肿，在诊断和治疗应多加考虑。应强调，硬脑膜下血肿可占急性颅脑损伤的10％～15％左右，同时尚可出现双侧性血肿，故在手术治疗时，若一侧血肿清除后，颅内压增高仍不见好转时，应考虑有无多发性颅内血肿的可能。 

③脑内血肿 

占颅脑损伤的1％～2％。可分为少量的点状出血和较大量的出血。少量点状出血者，多由于外伤直接震动和脑循环障碍而出现的脑血管通透性改变所致。较大量的出血，一般出血灶直径在5～10mm以上，多发生在颞叶、额叶，其他部位较少见，有时也出现在双侧。小出血灶逐渐液化形成小囊泡，大量出血者则形成血肿。根据血肿存在的部位，出现各种临床表现，如血肿位于一侧大脑，则可出现面部、肢体的不全瘫痪或偏瘫、失语，也可以逐渐出现意识障碍或癫痫发作等，与硬脑膜内、外血肿症状大致相同。 

脑内血肿，一般颅内压增高征不如硬脑膜内、外血肿明显，早期诊断，主要依靠CT检查或脑血管造影。 

脑内血肿的治疗，以开颅清除血肿为原则，手术不发生危险者，也常残留某些后遗症。 

(6)颅脑损伤性脑积水的诊断与治疗 

脑积水(Hydrocophalus)是指由于脑脊液的生成或循环吸收过程发生障碍时出现的产生量大于吸收量而致脑脊液量过多，压力增高，扩大了正常脑脊液所占有的空间，从而继发颅压增高、脑室扩大的总称。脑脊液是由侧脑室、第三脑室、第四脑室的脉络丛分泌，每天分泌约500ml，脑脊液循环总量约150ml，脑脊液经脑室系统向尾侧流动，在第四脑室经Luschka和Magendie孔流出而进入蛛网膜下腔，然后向下达脊髓周围。向上经天幕裂孔和脑表面的脑脊液被硬膜的蛛网膜粒吸入静脉系统。 

脑积水的病理改变为脑室系统逐渐扩大，第三脑室向下方隆起压迫垂体及视神经交叉部，透明隔可穿破，脑实质变薄，以额叶处最明显，甚至穿破侧脑室与蛛网膜下腔相通。胼胝体、锥体束、基底节、四叠体、脉络丛及脑干等处均可因长期受压而萎缩。白质脱髓鞘变，神经轴受压变形，胶质增生及神经细胞退行性变等。 

脑积水临床表现 

临床症状并不一致，与病理变化出现的年龄、病理的轻重、病程的长短有关。胎儿先天性脑积水多致死胎，出生以后脑积水可能在任何年龄出现，多数于生后6个月出现。年龄小的患者颅缝未接合，头颅容易扩大，故颅内压增高的症状较少。脑积水主要表现为婴儿出生后数周或数月后头颅快速、进行性增大。正常婴儿在最早六个月头围增加每月1.2～1.3cm，本症则为其2～3倍，头颅呈圆形，额部前突，头穹窿部异常增大，前囟扩大隆起，颅缝分离，颅骨变薄，甚至透明，叩诊可出现“破壶声”(Maceen)征。颞额部呈现怒张的静脉，眼球下旋，上巩膜时常暴露(日落征)。病婴精神萎靡，头部不能抬起，严重者可伴有大脑功能障碍，表现为癫痫、视力及嗅觉障碍、眼球震颤、斜视、肢体瘫痪及智能障碍等。由于婴儿头颅呈代偿性增大，因此，头痛、呕吐及视神经乳头水肿均不明显。 

脑积水病因 

其原因大多是脑脊液循环通路某些部位阻塞所致，而生过多者则较少见。多发生在两岁之内的婴儿，可分为交通性和非交通性脑积水两类，交通性是指脑脊液在脑表面的吸收受阻而言；非交通性是指脑室系统内的脑脊液循环阻塞。脑积水病因很多，常见的有以下几种原因： 

①先天畸形：如中脑导水管狭窄、膈膜形成或闭锁，室间孔闭锁畸形(第四脑室正中孔或侧空闭锁)，脑血管畸形，脊柱裂，小脑扁桃体下疝等。 

②感染：胎儿宫内感染如各种病毒、原虫和梅毒螺旋体感染性脑膜炎未能及早控制，增生的纤维组织阻塞了脑脊液的循环孔道，或胎儿颅内炎症也可使脑池、蛛网膜下腔和蛛网膜粒粘连闭塞。 

③出血：颅内出血后引起的纤维增生，产伤颅内出血吸收不良等。 

④肿瘤：可阻塞脑脊液循环的任何一部分，较多见于第四脑室附近，或脉络丛乳头状瘤。 

⑤其他：某些遗传性代谢病、围产期及新生儿窒息、严重的维生素A缺乏等。 

颅脑损伤性脑积水是指外伤后引起的脑水肿。其主要特征是脑室和脑室周围脑组织脑脊液增多。急性脑积水是在外伤后3周内，最早伤后3天即可出现。慢性脑积水在伤后3～6周形成，有的在数月后才出现。 

外伤后脑积水的发病率文献报道差异较大，介于0.7％～9％不等. 

引起外伤性脑积水的原因可能有： 

①蛛网膜下腔出血后，由于血凝块及其后的纤维增生使脑脊液流动阻塞而引起脑积水。可能表现在基底池，蛛网膜颗粒的粘连和梗阻(阻塞性脑积水)或红细胞堵塞蛛网膜粒妨碍脑脊液吸收(交通性脑积水)。 

②另外脑内出血如，血液进入脑脊液，或小脑或脑干的血肿阻塞脑脊液向导水管和第四脑室的流动，亦可出现脑积水。 

③脑凸面梗阻性脑积水：是由蛛网膜下腔出血或脑室扩大引起的蛛网膜下腔压迫。脑挫伤、水肿、外伤性颅内血肿与脑梗塞也被认为是导致脑凸面梗阻性脑积水的原因。 

颅脑损伤性脑积水主要有两种类型脑积水，即非交通性脑积水和交通性脑积水： 

非交通性脑积水(梗阻性脑积水)是由于脑脊液在脑室系统内或脑室出口处流动受到限制，常见于外伤后脑室系统积血等原因引起的。 

交通性脑积水是由于蛛网膜下隙出血致使蛛网膜颗粒粘连造成脑脊液回流受阻引起的。急性脑积水易导致颅内压急骤增高，造成脑疝而死亡。故一旦确诊，宜及早行脑室外引流术。创伤性蛛网膜下隙出血刺激脑膜引起无菌性炎症反应而形成粘连，红细胞溶解后脑脊液中蛋白含量明显增多，脑挫伤坏死组织碎解产物，均可影响蛛网膜颗粒的吸收功能，使脑脊液的循环和吸收受阻，形成交通性脑积水，脑萎缩加重进行性痴呆。 

脑积水发展过程中脑室结构、脑组织损害出现的一系列病理生理变化中，如不及时采取有效的措施，将会导致更严重的神经功能损害，皮层神经元的凋亡和白质广泛的胶质增生是造成脑积水不可逆性损害的主要原因。因此，对创伤性脑积水早期干预能使此时的脑积水病变得以控制和尽早恢复。 

颅脑损伤性脑积水的治疗：无论是颅内高压脑积水还是正常颅压脑积水都应采用单向阀门分流管行分流术。但有时急性脑积水的病人如果在头外伤后早期即施行颅内压监护，并及时排出血性脑脊液也有可能减少后期脑积水的发生率。 

无论如何在疑有外伤性脑积水时，即应早作影像学检查及时明确诊断，尽快施行分流手术，以缓解由脑积水而引起的进行性脑组织萎缩。 

重型颅脑损伤后脑积水是引起患者持续昏迷、高致残率、病死率的主要原因之一，严重颅脑损伤患者易发生外伤性脑积水，尤其是急性恶性脑积水，往往造成患者死亡。 

(7)开放性颅脑损伤的诊断与治疗 

凡头皮、颅骨、硬脑膜均已破裂，脑组织与外界交通者，称为开放性颅脑损伤。常伴发复杂性颅骨骨折，颅内异物，脑组织外溢，脑脊液漏，出血等。容易造成颅内感染形成脑脓肿、脑膜炎、硬脑膜外脓肿等严重的并发症及偏瘫、失语、癫痫等后遗症。 

重症开放性颅脑损伤，多伴有大出血、昏迷或处于休克状态。如不能及时有效地阻止出血纠正休克，则很快有生命危险。 

开放性颅脑损伤的治疗，首先应尽量改善全身状态，争取及早清创及减压手术，同时积极进行抗感染、抗脑水肿、增强全身疗法，以防止严重的并发症及减少后遗症。当一般情况好转后，应尽早进行系统的功能锻炼及对偏瘫、失语的康复训练。 

5、重型颅脑伤救治的后期治疗原则 

(1)颅脑伤后高血糖与补液原则 

长期以来，临床医师一直采用不同浓度葡萄糖溶液治疗重型颅脑伤，并且使用50％高渗葡萄糖渗透性脱水治疗创伤性脑水肿。平衡液或生理盐水被视为治疗重型颅脑伤脑水肿病人的禁忌症。但经过数年大量实验和临床研究证明上述观点是错误的。恰恰相反，近代观点认为重型颅脑伤病人伤后早期应该首选平衡液，不应使用5％或10％葡萄糖溶液，禁忌使用50％高渗葡萄糖溶液。其依据包括： 

①颅脑伤后血糖越高，死残率越高； 

②平衡液与葡萄糖溶液治疗颅脑伤对比研究发现葡萄糖溶液动物死残率高于平衡液； 

③胰岛素治疗能提高颅脑伤救治效果； 

④颅脑伤后葡萄糖溶液治疗会增加脑组织内乳酸堆积，加重脑水肿和神经元损害。当然，临床医生要根据病人血糖和血浆电解质含量动态监测及时调整补液种类和补液量。 

(2)糖皮质激素治疗创伤性脑水肿的疗效评价 

糖皮质激素一直被临床医生用于治疗创伤性脑水肿病人，但其疗效至今有争议。经典观点主张采用地塞米松或氢化可的松治疗重型颅脑伤脑水肿病人，现仍广泛应用于临床病人。但不少学者认为糖皮质激素对创伤性脑水肿疗效不确切。八十年代人们发现甲基强的松龙的疗效较地塞米松或氢化可的松好。由于糖皮质激素存在众所周知的副作用，人们已研制出非糖皮质激素21-氨基类固醇，它不但具有很强的抗脂质过氧化反应和降低脑水肿的效能，而且务任何糖皮质激素副作用。21-氨基类固醇及其衍生物已开始应用于临床治疗重型颅脑伤病人，并且已经取得显著疗效。 

至于糖皮质激素应用剂量也有争议。经典方法是采用常规剂量糖皮质激素，如：氢化 可的松100～200mg/日，地塞米松20～40mg/日，甲基强的松龙40～100mg/日。国际和中国有人主张采用大剂量糖皮质激素，如：地塞米松5mg/Kg/6H×2次，1mg/Kg/6H×6次，随后逐渐减量。但大多数中国外临床大宗前瞻性随机双盲对照研究表明大剂量糖皮质激素并不能改善重型颅脑伤病人治疗效果。也有报道大剂量地塞米松能显著提高重型颅脑伤病人预后。所以，目前国际和中国大多数学者不主张采用大剂量激素治疗重型颅脑伤病人，甚至不提倡用激素。 

(3)去大骨瓣减压术的优缺点 

对于严重脑挫裂伤合并脑内血肿病人，长期以来临床医生采取颅内血肿清除术后行去大骨瓣减压术。理由是去大骨瓣减压术能使脑组织向减压窗方向膨出，以减轻颅内高压对重要脑结构的压迫，尤其是脑干和下丘脑，以挽救病人生命。但越来越多的临床实践证明去大骨瓣减压术不但没有降低重型颅脑伤病人死残率，而且可能会增加重型颅脑伤病人残死率。其理由包括： 

①去大骨瓣减压术会导致膨出的脑组织在减压窗处嵌顿、嵌出的脑组织静脉回流受阻、脑组织缺血水肿坏死，久之形成脑穿通畸形； 

②去大骨瓣减压术不缝合硬脑膜会增加术后癫痫发作； 

③去大骨瓣减压术会导致脑室脑脊液向减压窗方向流动，形成间质性脑水肿； 

④去骨瓣减压术不缝合硬脑膜，使手术创面渗血进入脑池和脑室系统，容易引起脑积水； 

⑤去大骨瓣减压术不缝合硬脑膜会导致脑在颅腔内不稳定，会引起再损伤； 

⑥去大骨瓣减压术不缝合硬脑膜会增加颅内感染、切口裂开机会等。 

(4)过度通气降颅压的疗效评价 

二十世纪七十年代以来，临床医师一直主张采用过度通气治疗药物难以控制性高颅压。按照动脉CO₂含量将过度通气分为轻度过度通气(PaCO 35～30mmHg)、中度过度通气(PaCO 30～25mmHg)、重度过度通气(PaCO＜25mmHg)。早期实验研究的临床观察发现PaCO含量越低，脑血管收缩越明显，降颅压作用越强。但随着实验研究不断深入，人们发现持续低动脉CO分压，会导致脑血管收缩，甚至痉挛，继而加重脑缺血程度，加重继发性脑损害。所以，九十年代初有人开始提倡采用短时程(＜24小时)轻度过度通气(PaCO 35～30mmHg)，这样不但可以降低颅内压，而且不会导致和加重脑缺血。直至九十年代中期，由于脑组织氧含量直接测定技术的问世，人们发现短时程轻度过度通气亦不能提高脑组织氧含量，相反会降低脑组织氧含量。所以，国际和中国学者已不主张采用任何形式过度通气治疗颅内高压，而采用正常辅助呼吸，维持动脉血CO分压在正常范围为宜。 

(5)重型颅脑伤病人的营养支持 

重型颅脑伤病人伤后早期营养支持尚无十分理想方法。营养支持主要包括两个途径，即经胃肠道营养和胃肠道外营养。胃肠道营养优点是方法简单，价格便宜，缺点是由于应激性溃疡、伤后早期肠蠕动消失，容易引起返流误吸，腹胀腹泻，尤其是应用呼吸机病人更不宜使用经胃肠道营养。胃肠道外营养优点是营养全面，缺点是容易引起高糖血症、感染、补液量过多加重脑水肿等。目前临床医师多根据病人具体情况，选择使用经胃肠道或经胃肠道外补充营养。至于伤后早期选择补给营养种类的主要依据是在补充足够热量和营养素外，尽量不要选用会引起高血糖的品种。 

重型颅脑伤病人由于昏迷时程长，热卡消耗增加，伤后长期营养支持尤为重要。除目前临床常用的葡萄糖、脂肪乳、氨基酸、维生素、电解质、微量元素、胶晶体液、血或血制品外，必须加强胃肠道营养。国际和中国已研制出不同浓度的高热量、营养全面、能促进脑细胞恢复的要素饮食。它不但能有效地保证各种营养成份补给，减少低蛋白血的发生率，还能有助于促进脑功能恢复，提高重型颅脑伤救治效果。 

(6)重型颅脑伤病人预防性使用抗癫痫药的效果 

至于重型颅脑伤病人是否需要使用预防性抗癫痫药争议颇大。中国许多医师仍坚持使用预防性抗癫痫药，疗程1～3年。但越来越多的临床研究表明使用预防性抗癫痫药不但不会降低颅脑伤后癫痫发生率，而且会加重脑损害和引起严重毒副作用。近年来有报道采用预防性抗癫痫药的病人伤后癫痫发生率高于安慰剂组病人，其机理尚不清楚。但无论如何，长期预防性服用抗癫痫药有害无益，不宜提倡。严重脑挫裂伤脑内血肿清除术后是否常规服用预防性抗癫痫药争议更大。大多数临床医师赞同使用预防性抗癫痫药，但至今尚无任何临床研究支持这一观点。越来越多的国外学者开始提倡不使用预防性抗癫痫药。当然，若颅脑伤病人一旦发生癫痫，则应该正规使用抗癫痫药治疗。 

(7)颅内压监测技术的改进 

颅内压监测对于判断重型颅脑伤病人病情变化、指导治疗、判断预后有重要价值。多年来临床医师采用脑室穿刺接压力监测装置，或硬膜外放置传感器方法监测颅内压。但存在*作损伤大、准确性不高、容易引起颅内感染等缺点。所以，临床一直缺乏简单确切、无副作用的颅压监测技术。直至八十年代末期国外研制出光纤颅压监测技术。该方法操作简单、创伤性小、准确、无任何副作用。基本上满足临床颅内压监护要求，已在国外推广普及使用。中国亦已引进该技术用于临床。 

(8)迟发性外伤性颅内血肿的概念 

由于CT扫描技术的问世，人们提出了迟发性外伤性颅内血肿这一概念。即颅脑伤后首次CT扫描未检出颅内血肿，而再次CT扫描证实的颅内血肿称迟发性外伤性颅内血肿。迟发性外伤性颅内血肿的临床意义在于引起临床医师高度重视，伤后早期首次CT扫描未 发现颅内血肿不等于不会再发生颅内血肿。要根据病人的病情变化定期作CT随访，若病情恶化应立即行CT扫描，以尽早诊断和处理迟发性外伤性颅内血肿。表明延误诊治所造成的病人死亡或残疾。 

(9)亚低温脑保护的临床疗效 

二十世纪八十年代以来，大量动物实验研究证明33～35℃亚低温能显著降低颅脑伤动物死亡率，减轻脑水肿、保护血脑屏障。国际和中国已将该技术用于临床治疗重型颅脑伤病人，也已取得肯定疗效。在欧洲、美国、日本等国家已推广使用。但由于亚低温治疗需要使用肌松剂和呼吸机持续使用，目前中国中小医院尚难以开展此项技术。 

(六)颅脑伤的早期治疗 

据以往战伤资料统计颅脑战伤的发生率约占全身各部位伤的10％～17％，仅次于四肢战伤；但其阵亡率、伤死率、伤残率均居各部位伤的首位。以往历次战争中，针对特重型颅脑损伤，由于没有及时的开放、引流措施，导致病情延误发展至脑疝，直接危及了伤员的生命安全，院前死亡率高达70～80％。 

在平时，中国颅脑外伤的发病率已超过100/10万人口，每年有10万人口死于颅脑损伤，交通伤、坠落伤已逐渐成为颅脑损伤的主要原因；同时颅脑损伤也是自然灾害，如地震等中最主要的致死原因之一。平时特重型颅脑损伤的院前死亡率约为60％。 

经过大鼠的动物实验已经证明：针对特重型颅脑损伤的大鼠，早期颅骨钻孔减压，可以确实减少老鼠的死亡率。大量的临床资料也证实，对颅内血肿行超早期手术治疗，能大大降低患者的死亡率。 

但目前对于颅脑损伤伤员，还缺乏针对性的急救手术器械，尤其是特重型颅脑损伤合并脑疝伤员无法早期(1～2h)实施开颅减压手术，对于急性恶性脑积水伤员无法在早期进行快速的脑室外引流术，致使颅脑战创伤死亡率和致残率居高不下。伤员往往由于颅内血肿导致颅内压增高，最终在后送的途中、120急救车内、低级别医院甚至大型医院急诊室内就已死亡。 

虽然现代钻孔引流术对于颅内血肿伤员的治疗效果明显，也出现了一批专门用于血肿引流的设备与装置，但是由于其器材复杂、需要交流供电、本身不配有光源、需要负压吸引装置、体积大、携带不便，因此目前只配备于大型医院的手术室，很难在抢救第一线(后送的途中、120急救车内、低级别医院甚至大型医院急诊室内)发挥作用，进一步导致失去了最佳救治时机。而现有移动式动力钻主要用于工业范围，无法适配于特殊型号的开颅钻头。因此，加强院前和野战救治已成为颅脑战创伤救治当务之急。 

有些国家的军队主要是通过野战手术车实现医院的前伸，做到救治的前伸，但这不适合中国军队的现实情况，中国目前只能通过装备的集成化，形成装备箱，做到救治前伸。 中国仍没有适合神经外科院前急救的专业急救箱，更无法在院外、野战条件下开展神经外科手术。 

有的专家、医务人员已经逐渐认识到这个问题，目前已有人提出了一套切实可行的解决方法以及一套相应的颅脑损伤急救手术器械。 

(七)颅脑损伤的后期治疗 

1、概述 

脑损伤后综合征，是颅脑损伤后最多见的一种后遗症。约有20％的病人伤后有此症。病人的症状多种多样，主要的有头痛、眩晕、失眠、多梦、注意力不能集中、健忘、不能耐受噪声、耳鸣、眼花、步伐不稳、疲乏、无力、食欲不振、人格改变、消极悲观、郁抑寡欢、颈项酸痛等，往往一人身兼症状十数种之多。 

但从体格检查、腰椎穿刺、神经系统检查以及X线头部摄片、CT等方面，则无客观异常可见。根据统计，本症发生于轻型颅脑损伤较重型者为多，因此可以推测它与脑部的器质性病变可能无关。 

2、发病机制 

脑外伤会留下后患。在精神科的临床实践中医生们发现，许多癫痫、癫痫样精神病、儿童精神病患者，在排除了二系三代亲属中的遗传因素外，均有儿时头颅跌伤的病史。所以说，在一些儿童头颅跌伤后，虽然当时没有症状出现，但不等于脑组织就没有受到震荡损伤，家长要密切观察一段时间。幼儿在习步时期，由于肢体平衡性能较差，故常跌倒，跌伤头颅，出现头部血肿或头皮青紫瘀血，轻则日后出现儿童多动症，智力低下，学习差劲，重则大脑受伤，导致癫痫、瘫痪、精神病或其他神经病的发生。 

儿童护颅的方法：一是保健保护法。如保证充足的睡眠，常洗头、梳头、按摩头皮，做头颈部生理保健操等。二是用具保护法。笔者提倡儿童一年四季均应戴通风透气的帽子以保护头颅。三是防范日常生活中的各种意外。四是教育儿童在紧急情况下(如遇车祸或从高处跌下时)迅速用双臂双手抱紧头部。 

对于此症的发病机制尚不清楚，多数学者认为是脑部血管运动功能障碍的结果。治疗方面采用综合疗法，包括各种治疗措施，如气功、太极拳、平衡体操、针灸、静脉普鲁卡因注射、静脉镁盐疗法、理疗、内服各种镇静镇痛剂等，并配合对病人作浅近的病情介绍，调整病人的起居作息时间，开展个人及集体文娱生活，使病人消除悲观失望的情绪，改变精神面貌。总的来说，本症尚缺乏特效疗法，但多数经治疗后能康复。急性颅脑损伤病例在早期应有足够的卧床静养，仍应予以强调。 

3、颅脑损伤的后期治疗与康复 

创伤性颅脑损伤(简称：TBI)后的并发症和后遗症长期困扰病人，影响其生活质量。 

(1)康复期的护理 

颅脑损伤病人恢复期应尽量减少脑力活动，少思考问题不阅读长篇读物，少看刺激性电影、电视节目，可适当听些轻音乐，以绥解紧张情绪；对头痛、失眠较重者，可在医生的指导员下酌情服用镇静剂及镇静催眠药物。 

恢复期病人常有头痛、恶心、耳呜、失眠等症状，一般在数周至数月逐渐消失，但如存在长期头昏、失眠、烦躁、注意力不集中和记忆力下降等症状且超过3～6个月仍无好转时，应到医院进一步检查，必要时可口服维生素B类药物以帮助改善植物神经功能。 

对脑外伤后综合症的病员，首先要消除顾虑，放松思想，要树立信心，积极地参加体育锻炼，量力而行地参加一些体育活动。对于外伤性癫痫的病员应坚持口服抗癫痫药物，一般常用苯妥及丙酸钠，需服用1～2年时间，并定期检查肝功能、血白细胞，以防抗癫痫药物引起的肝功能损害及继发性白细胞下降。对于颅骨缺损的病人应保护好颅骨缺损的部件，在适当的时候来医院行颅骨修补。 

(2)功能锻炼 

同时，要防止并发症，加强护理：早期应以预防肺部和尿路感染为主，晚期则需保证营养供给，防止褥疮和加强功能训练等。 

尽可能早期进行功能锻炼对颅脑损伤的病人有重要的意义。肢体瘫痪疾病功能康复训练，注意由小关节到大关节，先轻后重，由被动到主动，由近心端及远心端，先下肢后上肢，循序渐进。早期先在床上锻炼，以后逐渐离床，随后锻炼行走。 

训练期间需有人在旁边保护。失语病人的语言功能康复训练应从最简单的“啊”音开始，然后说出生活中实用的单词，如吃、喝、水、尿等，反复强化训练，一直到能用完整的语句表达需要想法。对于小便失禁的患者，留置导尿要注意关闭导尿管。每隔2～4小时，有尿意时开放一次，每次放尿量以200～300毫升为宜。逐渐锻炼其排尿功能，争取早日拔除尿管。平时多饮水，保持尿色清亮，注意防止泌尿系感染。 

因此，结合中国现有的临床常见的颅脑损伤的医疗救治技术，从抗颅脑损伤产品的研发上进行改进和完善，特别是从抗颅脑损伤产品的有效性、安全性和稳定性等方面进行探索，具有非常重要的意义。 

经文献检索等，到目前为止，尚未发现有新的积雪草三萜类成分产品在治疗颅脑损伤及其后遗症方面的应用报道。 

发明内容

本发明所需要解决的技术问题是提供了积雪草三萜类成分的新用途，即积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸在治疗颅脑损伤及其后遗症产品中的应用，以克服现有技术存在的上述缺陷。 

也就是说，本发明针对现有技术的不足，通过动物实验和临床试验等实践研究和理论探索，目的意在明确一种医药类产品的新用途，即提供一种治疗颅脑损伤及其后遗症的产品，既能明显降低和改善颅脑损伤及其后遗症，又能保证产品质量稳定能用于大规模工业生产的积雪草三萜类成分产品。 

(一)本发明所采用的定义 

本发明所述的积雪草三萜类成分是中药积雪草提取物中的积雪草三萜类成分，即积雪草α-香树脂醇型的三萜类成分，包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸等中的一种或多种。 

本发明所述的颅脑损伤是包括由外界暴力而造成的各种大脑损害，或称：急性颅脑损伤或颅脑战创伤，简称：颅脑损伤或颅脑伤；战争时期，颅脑损伤一般称为颅脑战伤；在平时，颅脑损伤一般称为颅脑外伤，有时合并简称：颅脑战创伤。 

本发明所述的颅脑损伤是包括开放性颅脑损伤和闭合性颅脑损伤，所述的闭合性脑损伤包括原发性闭合性脑损伤和继发性闭合性脑损伤。 

本发明所述的抗颅脑损伤产品是直接用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的产品。 

本发明所述的抗颅脑损伤产品是包括医药领域中的一种或多种产品，优选药物、试剂、添加剂、食品或饮料中的一种或多种，进一步优选药物。 

本发明所述的闭合性颅脑损伤是包括轻型闭合性颅脑损伤、中型闭合性颅脑损伤、重型闭合性颅脑损伤和特重型闭合性颅脑损伤。 

本发明所述的严重闭合性颅脑损伤是包括重型闭合性颅脑损伤和特重型闭合性颅脑损伤中的一种或多种。 

本发明所述的重型颅脑损伤是指：①伤后昏迷12小时以上，意识障碍逐渐加重或再次出现昏迷；②有明显神经系统阳性体征；③体温、呼吸、血压、脉搏有明显改变。主要包括广泛颅骨骨折、广泛脑挫裂伤及脑干损伤或颅内血肿。④GCS评分5～8分。 

本发明所述的特重型颅脑损伤是指：①脑原发损伤重，伤后昏迷深，有去大脑强直或伴有其他部位的脏器伤、休克等；②已有晚期脑疝，包括双侧瞳孔散大，生命体征严重紊乱或呼吸已近停止。③GCS评分5分以下。 

本发明所述的抗严重闭合性颅脑损伤产品是直接用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究严重闭合性颅脑损伤的产品。 

本发明所述的颅脑损伤的治疗作用是抑制颅脑损伤时炎症过程，减少炎症细胞因子的产生，减少脑组织乳酸堆积从而减少脑细胞坏死等方面的作用。 

(二)技术构思 

自主开发创新药物是中国目前的一项紧迫任务，中国中医药学具有悠久的历史，用中草药预防和治疗疾病方面也积累了丰富的经验，因此从中药中寻找有效的活性成分或发现现有成分的新药理活性、探索和改进现有的药物，特别是发现现有成分的新用途、研究和改进现有药物的剂型或给药途径，能够大幅度提高临床用药途径、治疗效果、降低药物不良反应，将有利于减轻越来越重的社会压力和医疗负担，有利于社会的稳定和谐，也是中国医药研制的优势与有效的快捷途径之所在，同时也是中国医药创新发展的基础性工作和一个重要发展趋势。 

发明人通过对单味积雪草药材的提取物进行系统的化学成分研究，在对具有抗颅脑损伤及其后遗症作用的天然药物活性成分进行筛选中，根据文献检索，通过大量实验研究，筛选发现并证明该提取物具有多种显著的药理活性，特别发现其中一个重要的活性：对颅脑损伤及其后遗症有较好的活性和防治作用。 

经过化学成分研究，也证明积雪草活性部位积雪草提取物中的主要成分为积雪草三萜类成分。发明人从而推测积雪草的在预防、诊断、保护和治疗颅脑损伤及其后遗症等方面活性的临床药效，也应主要是通过活性部位积雪草提取物特别是积雪草三萜类成分的药效来发挥的，研究结果也证明和证实了积雪草提取物特别是积雪草三萜类成分具有显著的药理活性。 

颅脑战创伤院前死残率一直较高，是个世界性难题。颅脑损伤及其后遗症临床非常多见，是个普遍性问题，在中国疾病总负担的排名居前，严重影响中国医院临床救治效果和患者的生存质量。研制治疗颅脑损伤及其后遗症药物，尤其是预防、诊断、保护和治疗颅脑损伤及其后遗症等方面产品特别是药物，将有利于减轻越来越重的社会压力和医疗负担，有利于社会的稳定和谐和提高军队的士气，特别是平时的重大自然灾害如强烈地震、海啸等，以及战争期间。无论是平时还是战时，研制和改进颅脑战创伤的救治技术，特别是颅脑损伤及其后遗症的防治具有显著的社会效益、经济效益。本发明的目的就是要研制一种安全、高效的颅脑损伤及其后遗症的防治药物。 

根据此想法和思路，发明人通过反复的实验研究与分析和理论探索，已成功验证了积雪草三萜类成分的新用途，为临床应用产品提供了相应的药物来源。 

(三)积雪草三萜类成分新的药理活性 

本发明对积雪草三萜类成分在预防、诊断、检测、保护、治疗和研究临床常见的颅脑损伤进行了多方面的试验和研究。 

本发明通过如下技术方案得以实现。 

1、对颅脑损伤后脑组织的保护作用 

选择实验性大鼠制作重型弥漫性颅脑创伤模型进行动物实验。 

假手术组给予与药物组等体积的生理盐水，模型组给予与药物组等体积的生理盐水，积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)均3个剂量组。 

实验方法是按照Marmamrou方法制备重型弥漫性颅脑创伤模型。 

将麻醉后大鼠俯卧位固定，以酒精消毒术区后，沿中线矢状切开头皮并剥离骨膜，显露冠状缝及人字缝，将二不锈钢垫固定在大鼠冠状缝与人字缝之间。将大鼠头部固定于致伤架下，铜棒沿垂直玻璃管自由落下致伤。大鼠头皮伤口消毒、缝合。假手术组仅给予麻醉及头皮切开、缝合，但不致伤。 

撞击后随机取模型大鼠、假手术大鼠处死。大体观察显示：模型组大鼠皮质表面、蛛网膜下腔、挫裂伤灶周围皮质及皮质下白质均有不同程度出血；假手术组肉眼观察脑组织表面光滑，沟回整齐、清晰，无充血、水肿及出血灶。模型制造成功。 

颅脑创伤后定时静脉输注给药，最后一次后处死，冰上取脑，测生化指标。 

从实验结果发现：积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)三个剂量组均能增加脑组织中超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶、一氧化氮合酶的含量，提高总抗氧化能力，减少脑中脂质过氧化终产物。 

此数据证明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)均能够抑制脑创伤时氧自由基的产生、抵抗自由基堆积和抗脂质过氧化作用，减少脑组织乳酸堆积从而减少脑细胞坏死，这对颅脑创伤的治疗和防治颅脑创伤后遗症有重要意义。 

2、对颅脑损伤后脑水肿的影响 

选择实验性大鼠制作重型弥漫性颅脑创伤模型进行动物实验。 

假手术组给予与药物组等体积的生理盐水，模型组给予与药物组等体积的生理盐水，积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)3个剂量组。 

实验方法是按照Marmamrou方法制备重型弥漫性颅脑创伤模型。 

将麻醉后大鼠俯卧位固定，以酒精消毒术区后，沿中线矢状切开头皮并剥离骨膜，显露冠状缝及人字缝，将二不锈钢垫固定在大鼠冠状缝与人字缝之间。将大鼠头部固定于致伤架下，铜棒沿垂直玻璃管自由落下致伤。大鼠头皮伤口消毒、缝合。假手术组仅给予麻醉及头皮切开、缝合，但不致伤。 

撞击后随机取模型大鼠、假手术大鼠处死。大体观察显示：模型组大鼠皮质表面、蛛网膜下腔、挫裂伤灶周围皮质及皮质下白质均有不同程度出血；假手术组肉眼观察脑组织表面光滑，沟回整齐、清晰，无充血、水肿及出血灶。模型制造成功。 

伤后定时静脉输注给药，最后一次给药后，用水合氯醛深麻大鼠，迅速取出全脑，用滤纸吸干脑表面液体和血迹，切取离胶原酶注入点以后4mm远以外为起点的2mm厚冠状脑片，分离出血侧皮质及基底节，置浓硫酸处理过的称量杯。用电子天平称取湿重，置小玻璃瓶中，烤箱烤干，直到称重为恒重为止。根据Eliott公式计算脑组织含水量(Water Content，简称：WC)，WC(％)＝(湿重-干重)÷湿重×100％。 

积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)3个剂量组在颅脑创伤后均能降低脑含水量，其中积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)的高剂量组与模型相比差异均有显著性(P＜0.05)，即积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)利于创伤后水肿坏死组织的清除，能够减轻颅脑创伤后的脑损害，这与其抗炎作用和抗自由基堆积作用密切相关，可作为颅脑创伤的治疗药物及颅脑创伤后遗症预防和治疗药物。 

3、积雪草三萜类成分及其组合物的临床应用 

积雪草三萜类成分及其组合物主要用于颅脑损伤，优选闭合性颅脑损伤，包括轻型闭合性颅脑损伤、中型闭合性颅脑损伤、重型闭合性颅脑损伤或特重型闭合性颅脑损伤等中的一种或多种；进一步优选重型闭合性颅脑损伤；但是，根据颅脑损伤的治疗原则，越早用药越有利于患者的康复；当患者处于特重型闭合性颅脑损伤时期，配合其他抢救用药一并使用，积雪草三萜类成分及其组合物也能够明显改善患者的症状。 

积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)可以采用本领域公知的方法制成各种剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、乳剂、溶液剂、注射剂等，采取口服或注射(包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射)、粘摸透析等给药途径来用于颅脑创伤的治疗与颅脑创伤后遗症的防治。 

本发明所述及的积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)可以以组合物的形式施用于需要治疗的患者，所说的组合物包括治疗有效量的积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)和医药学上可接受的载体。 

实验证明，本发明的积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸)以及其药物组合物是一种安全、高效、稳定、价廉的治疗颅脑创伤，改善其后遗症的药物。 

用于患者时，剂量根据患者的年龄、体重、给药途径以及症状的状况决定。 

(四)积雪草三萜类成分的用途 

1、概述 

本发明的目的是提供一种用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品，包括药物、试剂、食品等中的一种或多种，优选药物。 

通过药理活性筛选证明，积雪草三萜类成分为其预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的活性部位。 

经实验研究表明，积雪草三萜类成分体外能够显著延缓相关疾病的发展。已完成的急性毒性实验证明，小鼠灌胃给药对该活性部位的最大耐受量超过1.0g/kg，相当于临床推荐用药剂量的200倍以上，表明该有效部位安全可靠，解决了中药复方中成分复杂、有效成分含量低且含有有毒成分的问题。 

综上所述，发明人对积雪草三萜类成分进行了理论探索，经过大量的实验研究特别是长期的药理学试验，发现所述及的积雪草三萜类成分有显著的预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的活性。 

因此，积雪草三萜类成分及其组合物可用于制备抗颅脑损伤产品，优选以本发明积雪草三萜类成分为原料制备而成的药物。 

2、积雪草三萜类成分及其组合物的使用方法与要求 

本发明积雪草三萜类成分可以单独或与其它活性组分联合使用，包括用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品，包括药物、试剂、食品或饮料等，尤其是药物。 

在具体使用方面，本发明所述的积雪草三萜类成分能够单独使用，例如以活性部位、其衍生物或药用盐的形式应用，还能够与其他许多化学物质一起使用。无论这些化学物质是否具有生物活性或具有治疗疾病的功能，包括辅助功能如协同放大作用、拮抗或缓解积雪草三萜类成分的副作用等，这些化学物质是包括医药学上可接受的载体、食品、天然产物、化学合成药物或人类用药等中的一种或多种；优选包括医药学上可接受的载体或者食品等中的一种或多种；进一步优选医药学上可接受的载体。 

本文使用的“医药学上可接受的载体”包括任何和所有的生理适用的溶剂、分散介质、胞衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂或吸收延迟剂等中的一种或多种。医药学上可接受载体的例子包括一种或多种的水、盐水、磷酸缓冲盐水、葡萄糖、甘油或乙醇等及其组合物中的一种或多种。在许多情况下，在该组合物中最好包括等渗剂，例如，糖、诸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化钠等中的一种或多种。医药学上可接受载体还可以包含少量的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲液等中的一种或多种，它们增强了该积雪草三萜类成分的有效期或效力。 

从具体的分类上看，所说的医药学上可接受的载体是指医药学领域常规的药物载体，包括润滑剂，如滑石粉、聚乙二醇或硬脂酸镁等中的一种或多种；崩解剂，如微晶纤维素 等；填充剂，如淀粉、糊精或乳糖等中的一种或多种；粘合剂，如预胶化淀粉、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或多种；渗透压调节剂，如氯化钠、葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一种或多种；pH调节剂，如盐酸、氢氧化钠等酸或碱中的一种或多种；溶剂，如水、缓冲液、乙醇或丙二醇等中的一种或多种等；抗氧剂和络合剂，如亚硫酸钠、EDTA等中的一种或多种；表面活性剂，如季铵化合物、十六烷醇等；吸附载体，如高岭土或皂粘土等中的一种或多种；高分子骨架剂，如环糊精、聚乙二醇、泊洛沙姆等中的一种或多种；另外，还可以在组合物中加入其它辅剂，如香味剂、防腐剂或甜味剂等中的一种或多种。 

例如，将活性组分积雪草三萜类成分溶解、混悬或乳化于适宜的水性溶剂中(例如，蒸馏水、生理盐水或格林溶液等中的一种或多种)或油性溶剂中(例如，植物油例如橄榄油、芝麻油、棉籽油、玉米油或丙二醇等中的一种或多种)中，即可制得注射制剂，其中溶剂中可含有增溶剂(例如，聚山梨酯80、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚维酮、环糊精、泊洛沙姆、聚乙二醇、苯甲醇、氯代丁醇或苯酚等中的一种或多种)、渗透压调节剂(例如，氯化钠、甘油、D9-甘露糖、D-山梨醇或葡萄糖等中的一种或多种)。在这种情况下，如有必要，可加入添加剂，例如稳定剂(例如，人血清白蛋白等)、止痛剂(例如，盐酸普鲁卡因或利多卡因等中的一种或多种)等。 

本发明所述及的积雪草三萜类成分还可以以组合物的形式联合使用，特别是与用其它化学物质如药物对动物尤其是哺乳动物包括人或其他动物进行治疗所用的组合物或者是类似的组合物。所述哺乳动物，包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、猪、马、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、猕猴或恒河猴等中的一种或多种，优选人、小鼠、大鼠、猴、猪、兔或犬等中的一种或多种，进一步优选人、大鼠或猴等中的一种或多种。例如，可以将本发明积雪草三萜类成分加入适于给与受治疗者的药用组合物中。通常，该药用组合物包含本发明积雪草三萜类成分和药学上可接受的载体。 

积雪草三萜类成分的组合物特别是药物组合物可以有各种形式，包括例如液体、半固体和固体等剂量形式中的一种或多种；其中所说的药物组合物包括治疗有效量的积雪草三萜类成分为活性成分，以及一种或多种医药学上可接受的载体。 

本发明所述的积雪草三萜类成分或其药物组合物能够可以采用本领域公知的常规生产方法制成任何一种适合于实验、研究或临床上应用的剂型，包括固体制剂如胶囊、片剂、颗粒制剂等，液体制剂如口服液或者注射剂等。 

例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。所述的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂等中的一种或多种，采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种)、粘 膜透析等中的一种或多种给药途径进行抗颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的预防、诊断、检测、保护、治疗或科学研究。 

药物组合物优选含有重量比为0.5％～99％的活性成分积雪草三萜类成分，进一步优选含有重量比为1％～95％的活性成分积雪草三萜类成分，最优选含有重量比为5％～90％的活性成分积雪草三萜类成分。 

积雪草三萜类成分的药物组合物一般必须无菌且在生产储存条件下稳定。可以将该组合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂质体或其它适合于高药物浓度的有序结构。通过将所需量的该积雪草三萜类成分与所需上述成分的一种或组合一起加入适当的溶剂中并接着进行除菌过滤制备无菌注射液。一般而言，通过将该积雪草三萜类成分加入含有基本分散介质和所需的上述其它成分的无菌溶媒中制备分散液。在用于制备无菌注射液的无菌粉剂的情况下，推荐的制备方法是真空干燥和冷冻干燥剂。例如，通过诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过保持所需颗粒大小和通过使用表面活性剂，可以保持溶液的适当流动性。 

该组合物中可包括延迟吸收的药剂，例如单硬脂酸盐或明胶，以达到注射组合物的延长吸收；可包括高分子聚合物载体，如羟丙甲基纤维素或聚氧乙烯，以达到口服组合物的延长释放。 

用于患者时，本发明所述的积雪草三萜类成分剂量为5～20mg/kg·d，可以分一次或多次使用，该剂量或用量通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定。 

本发明积雪草三萜类成分及其药用组合物可以包括“治疗有效量”或“预防有效量”的本发明积雪草三萜类成分。“治疗有效量”是指在必要的剂量和时间下有效达到所需治疗效果的量。积雪草三萜类成分的治疗有效量可以根据诸如个体的病况、年龄、性别和体重以及该积雪草三萜类成分在该个体引起所需反应的能力等因素而变化。治疗有效量亦指该积雪草三萜类成分的有益治疗效果超过其任何毒性或有害效果的量。 

“预防有效量”是指在必要剂量和时间下有效达到所需预防效果的量。因为预防剂量用于患病前或疾病早期的受治疗者，预防有效量通常小于治疗有效量。本发明积雪草三萜类成分的治疗或预防有效量的典型的非限制性范围是5～20mg/kg，更优选为5～10mg/kg。应注意，剂量值将根据欲减轻的疾病类型和严重性变化，也就是说用于患者时，本发明所述的积雪草三萜类成分剂量或用量，通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定。 

另外，应理解，对于任何特定受治疗者，应随着时间根据个体需要和给与或监督给与所述组合物的人的专业判断调整特定剂量制度，并且本文设定的剂量范围仅为例证性的， 并不会限制要求保护的组合物的范围或实践。 

也就是说，需要根据治疗的对象、给药途径、所治疗疾病和状况等，变化本发明积雪草三萜类成分的每次和/或每日的剂量或用量。例如，经静脉给予哺乳动物，尤其是成年人(如体重60kg)，所述积雪草三萜类成分的单剂量约为50～1200mg，优选约100mg，优选每日给药1～3次。可以调整剂量单位，以提拱最佳所需反应(例如，治疗或预防应答)。 

例如，可以单次大剂量给药，可以在一段时间内给予几个均分量或根据治疗情况的迫切性按比例降低或增加剂量。配制易于给药和剂量统一的剂量单位形式的非肠道组合物尤其有利。本文使用的剂量单位形式，指适于欲治疗的哺乳动物受治疗者的单元剂量的物理分离单位；每个单位含有预定量的计算用于与所需药用载体一同产生所需治疗效果的活性物积雪草三萜类成分。本发明的剂量单位形式的规格，由以下确定并直接取决于以下(a)该积雪草三萜类成分的独特特征和欲达到的特定治疗或预防效果，和(b)在混合这种用于治疗个体敏感性积雪草三萜类成分的技术中的内在限制。 

3、积雪草三萜类成分及其组合物的药物剂型和给药途径 

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物制备的用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品，其中按照饮料、食品技术领域的要求制备的产品能够用于预防、保护和治疗抗颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病；按照医药技术领域的要求制备的产品能够用于患者的治疗或保健，既能够单独直接用于制备治疗或保健的药物，也能够与许多化学物质进行混合或组合，直接或间接用于制备治疗或保健的药物。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。 

在本发明中，所需物料包括本发明的原料、上述配套使用的化学物质等，均应根据实际情况和需要，采用食品级或药用级的物料。 

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物，可以用本领域已知的各种方法给药，尽管在许多治疗用途中推荐的给药途径/给药方式是喷雾剂或口服给药。但是，技术人员会理解给药途径/给药方式随所需的结果而变化。在某些具体实施中，该活性化合物可以与保护该化合物免于快速释放的载体一同制备例如空释制剂，包括移植物传递系统、透皮贴传递系统或微囊传递系统等中的一种或多种。此外，还可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羟基乙酸、胶原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一种或多种。制备这种制剂的许多方法均已申请专利或一般为本领域技术人员所知(例如Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R.Robinson编辑，Marcel Dekker，Inc.，纽约，1978)。 

本发明所述的积雪草三萜类成分或其药物组合物中，可以含有本领域公知的医药学上可接受的载体和其它任选成分。载体包括羧甲基淀粉、淀粉、纤维素、明胶、碳酸氢钠、 丙二醇或吐温-80等。任选成分例如是着色剂、甜味剂、抗氧剂等。 

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物，通常通过口服、直肠或肠胃外给药等中的一种或多种方式，施用于需要这种治疗的患者。 

本发明所述的积雪草三萜类成分、其衍生物或药用盐、组合物特别是药物组合物可以制成任何一种适合于临床上应用的剂型，包括固体制剂，如胶囊、片剂、颗粒制剂等，半固体制剂如软膏等，液体制剂如口服液、混悬剂、乳剂等，或者注射剂。采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种)、粘膜透析等中的一种或多种给药途径进行颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的预防、诊断、检测、保护、治疗或科学研究。 

用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂或胶囊等中的一种或多种。在实施时，本发明积雪草三萜类成分可以与例如惰性稀释剂或可同化的食用载体一同口服。该积雪草三萜类成分(和共它成分，如果需要)亦可以包于硬或软壳明胶胶囊、压制成片剂或直接加入受治疗者的膳食中。关于口服治疗给药，可以将所述积雪草三萜类成分与赋形剂一起加入并以可食片剂、颊含片剂、锭剂、胶囊、悬液、糖浆或糯米纸囊剂等等中的一种或多种形式使用。 

为了以非肠道给药之外给予本发明积雪草三萜类成分，可能需要用防止其失活的材料对该积雪草三萜类成分包衣或与该积雪草三萜类成分一同给予。亦可以将补充的活性化合物加入该组合物中。在具体实施时，将本发明积雪草三萜类成分与一种或多种可以用于治疗疾病的其它治疗药物共配制和/或共给予。这种联合使用，可以优越地利用较低剂量的该给予的治疗药物，因此避免可能的毒性或与各种单一疗法相关的并发症。 

制成液体制剂如水剂、油悬浮剂或其它液体制剂中的一种或多种，如糖浆、酊剂或酏剂等中的一种或多种；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液剂、水剂或油性悬浮剂等中的一种或多种。 

以上药物或药物组合物能够使用各种途径，在所述的使用形式中，优选的形式是口服制剂(如片剂、包衣片剂、胶囊、溶液或混悬液等中的一种或多种)、非肠道给予剂型(如注射剂、软膏或贴剂等中的一种或多种)等中的一种或多种，进一步优选片剂、胶囊或注射剂等中的一种或多种，特别优选片剂或注射剂中的一种。 

此外，积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等在某些情况下也能够单独直接用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品，也能够与许多化学物质进行混合或组合，以组合物的形式直接或间接用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。 

例如，积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末用于制备用于抗颅脑损伤预防、诊断、保护和治疗产品特别是药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅料用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品尤其是药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品如药物一起用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品如药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅助药物一起用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品如药物的各种剂型，如片剂、胶囊剂或混悬剂等中的一种或多种，优选胶囊剂。 

所述的方法之一是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末灌装为胶囊剂，方法之二是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品如药物一起灌装为胶囊剂，方法之三是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅助药物一起灌装为胶囊剂；方法之四是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅料一起按常规方法直接压为片剂，方法之五是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末、有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品如药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂，方法之六是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末、有关的辅助药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂等。 

除上述的六种基本方法外，还能够选择积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的其他形式或对积雪草三萜类成分所使用的药材原料进行本领域公知的方法处理后，制备各种剂型的含有积雪草三萜类成分所使用的药材原料的产品如药物。但是，需要注意的是，在上述直接使用积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的时候，应先根据所使用的积雪草三萜类成分的剂量要求，换算得到所需要使用的积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的用量。 

综上所述，本发明积雪草三萜类成分及其组合物可用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗颅脑损伤产品，优选药物和食品，进一步优选药物。 

(五)技术特长 

本发明为预防、诊断、检测、保护、治疗和研究颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病提供了一种新的医药类产品，从而拓展了积雪草三萜类成分的临床应用。 

与现有的颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病的治疗药物相比，本发明积雪草三萜类成分在治疗颅脑损伤及其后遗症等直接相关疾病方面的应用，具有以下显著特点： 

(1)提纯的积雪草三萜类成分提高了产品的临床医疗效果和患者的生活质量，安全有效，适用人群多，应用范围广，患者群体广泛，赋予了其更高的临床医生用药方便性，是一种有良好应用前景的颅脑损伤及其后遗症治疗药物； 

(2)积雪草三萜类成分具有良好的热稳定性和更长的有效期，可高温热压灭菌，对储存温度要求也低，可常温(10℃～30℃)保存，降低了其储存成本，能够更好地保证产品储存和运输的稳定性； 

(3)积雪草三萜类成分制备工艺简单，质量控制简便；原药材价廉，生产成本较低，使之具备工业化生产的可能，已适合于药厂大规模生产和临床大规模使用，可用于颅脑损伤及其后遗症的长期治疗，研制和改进该抗颅脑损伤产品具有显著的社会效益、经济效益。 

总之，本发明积极适应了现代医疗和科研领域的工作需要和人性化服务的需要，本发明为研究开发抗颅脑损伤产品特别是药物提供了新的药品来源，对改进和提高现有的临床医疗救治效果具有重要价值。 

具体实施方式

本发明研究了现有的积雪草提取物，提供了一种积雪草三萜类成分，便于医疗行业的安全使用。 

积雪草三萜类成分及其组合物的常用药物制剂的制备方法 

本发明制备粉针剂一般采用常规的冷冻干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取积雪草三萜类成分，加入赋形剂，加水溶解，调节pH，加入活性炭，过滤除菌，灌装，半轧塞，冷冻干燥，压塞轧盖即可。所用的赋形剂选自甘露醇、水解明胶、葡萄糖、乳糖、右旋糖苷、白蛋白、pH调节剂等中的一种或几种。每瓶含积雪草三萜类成分1～100mg。 

本发明制备粉针剂也可采用喷雾干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取积雪草三萜类成分，加或不加赋形剂(赋形剂同上)，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，喷雾干燥，无菌分装，压塞轧盖即可。每瓶含积雪草三萜类成分10～100mg。 

本发明制备小针剂时，以注射用水作为溶媒配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸、二甲基乙酰胺、pH调节剂、表面活性剂、环糊精、抗氧剂、金属离子络合剂、抑菌剂中的一种或几种。注射剂可以配制成溶液、微乳液、乳液、脂质体、微球、微囊或其它适合于高药物浓度的有序结构，其中可包括延迟吸收的药剂，例如单硬脂酸盐、明胶、乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羟基乙酸、胶原蛋白、聚正酯或聚乳酸等，以达到注射组合物的延长吸收。每支含积雪草三萜类成分1～100mg。 

本发明制备葡萄糖输液或氯化钠输液，以注射用水作为溶媒，加入适量葡萄糖或氯化 钠配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸、二甲基乙酰胺、pH调节剂、表面活性剂、抗氧剂、环糊精、金属离子络合剂、抑菌剂中的一种或几种。每瓶含积雪草三萜类成分1～100mg。 

本发明制备片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等口服制剂，辅料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸盐等，按常规技术制备。可包括高分子聚合物载体，如羟丙甲基纤维素或聚氧乙烯等，以达到口服组合物的延长释放。 

本发明最终需要制备成积雪草三萜类成分的制剂进行应用，下面将列举实施例进行进一步说明。如有问题，可以与发明人直接联系18964515296。上述提供的一些实验数据以及下列实施例中按前述发明内容给出几种积雪草三萜类制剂制备方法及一些试验研究内容，但应该理解本发明并不仅限于此处所列出的研究内容，还应该理解此处所使用的术语仅用于描述特定的实施例，而并不是对本发明的限定。 

在本发明中，以上所述的具体实施方式和以下所述的实施例均是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制发明的范围。 

下面通过实施例对本发明作详细描述。 

实施例1、积雪草三萜类成分粉针剂的制备 

取积雪草三萜类成分10g，加入右旋糖苷30g，加1500ml注射用水，调节pH至9.0，搅拌使其溶解；加注射用水至2000ml，加3.0g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。 

实施例2、积雪草三萜类成分粉针剂的制备 

取积雪草三萜类成分50g，加入甘露醇60g，加5000ml注射用水，调节pH至8.0，搅拌使其溶解；加注射用水至6000ml，加1g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。 

实施例3、积雪草三萜类成分粉针剂的制备 

取积雪草三萜类成分1g，加入葡萄糖50g，加900ml注射用水，调节pH至8.5，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。 

实施例4、积雪草三萜类成分小针剂的制备 

取积雪草三萜类成分5g，加900ml注射用水，调节pH至9.0，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.0g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶10ml。 

实施例5、积雪草三萜类成分小针剂的制备 

取积雪草三萜类成分10g，加入乙醇600ml，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加0.5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶5ml。 

实施例6、积雪草三萜类成分葡萄糖输液的制备 

取积雪草三萜类成分2g，加入聚乙二醇10g，加入葡萄糖500g，加4500ml注射用水，搅拌使其溶解；加5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；加注射用水至5000ml；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶500ml，热压灭菌。 

实施例7、积雪草三萜类成分氯化钠输液的制备 

取积雪草三萜类成分1g，加入氯化钠90g，加9000ml注射用水，搅拌使其溶解；加10g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；加注射用水至10000ml；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶250ml，热压灭菌即可。 

实施例8、积雪草三萜类成分片剂的制备 

(1)处方 

包衣液处方：胃溶薄膜衣料：85G61235，上海卡乐康包衣技术有限公司 

(2)制备工艺 按以上处方分别称取处方量的主药与辅料，按等量递加法混合均匀，5％PVP无水乙醇制软材、干燥、整粒，加入硬脂酸镁混匀，测定含量，计算片重后压片，控制裸片硬度5～7kg，共制得片剂9698片，成品率为96.98％。 

采用常规高效包衣锅包衣，工艺如下：将裸片(硬度5～7kg)放入包衣锅中，启动搅拌装置和鼓风加热装置，待裸片温度升至40℃时，开始打开喷枪对准片床的上1/3处喷入包衣液包衣，控制片床温度38～42℃，气磅压力6kg，包衣液流速为50mL/min，包衣膜重占包衣片重的3％。 

实施例9、积雪草三萜类成分片剂的制备 

(1)处方 

(2)制备工艺 取原辅料分别过80目筛，混合均匀，用适量10％PVP溶液制软材，干燥，加入硬脂酸镁3g，整粒，压片，制成1000片。 

实施例10、积雪草三萜类成分胶囊剂的制备 

(1)处方 

(2)制备工艺 分别取原料药积雪草三萜类成分及处方中其它辅料分别过100目筛，置60℃烘干，称取处方量积雪草三萜类成分与微晶纤维素、淀粉等量递加法混合均匀，用适量无水乙醇制软材，30目筛制粒，50～60℃干燥2小时，用30目筛整粒，加入处方量的滑石粉混合均匀，填充。 

实例11、积雪草苷注射剂的制备 

处方： 

工艺： 

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方 量积雪草苷加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含积雪草苷300mg的注射剂。 

实例12、积雪草酸注射剂的制备 

处方： 

工艺： 

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量积雪草酸加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含积雪草酸300mg的注射剂。 

实例13、羟基积雪草酸注射剂的制备 

处方： 

工艺： 

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量羟基积雪草酸加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含羟基积雪草酸300mg的注射剂。 

实例14、羟基积雪草苷注射剂的制备 

处方： 

工艺： 

取20℃醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量羟基积雪草苷加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含羟基积雪草苷300mg的注射剂。 

实例15、积雪草苷胶囊剂的制备 

处方： 

积雪草苷                    600g 

淀粉                        140g 

微粉硅胶                    10g 

制成                        1000粒 

工艺： 

取处方量积雪草苷，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg积雪草苷的胶囊剂。 

实例16、积雪草苷元积雪草酸胶囊剂的制备 

处方： 

积雪草酸                    600g 

淀粉                        140g 

微粉硅胶                    10g 

制成                        1000粒 

工艺： 

取处方量积雪草酸，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg积雪草酸的胶囊剂。 

实例17、羟基积雪草苷胶囊剂的制备 

处方： 

羟基积雪草苷                600g 

淀粉                        140g 

微粉硅胶                    10g 

制成                        1000粒 

工艺： 

取处方量羟基积雪草苷，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg羟基积雪草苷的胶囊剂。 

实例18、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸胶囊剂的制备 

处方： 

羟基积雪草酸                600g 

淀粉                        140g 

微粉硅胶                    10g 

制成                        1000粒 

工艺： 

取处方量羟基积雪草酸，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg羟基积雪草酸的胶囊剂。 

实例19、对实验性大鼠脑损伤后脑组织的保护作用 

1、组别 

假手术组：给予与药物组等体积的生理盐水，15只 

模型组：给予与药物组等体积的生理盐水，15只 

积雪草苷及其苷元(积雪草酸)、羟基积雪草苷及其苷元(羟基积雪草酸)3个剂量组，各10只，分别为25、50，100mg/kg。 

2、方法：按照Marmamrou方法制备重型弥漫性颅脑创伤模型。 

将麻醉后大鼠俯卧位固定，以75％酒精消毒术区后，沿中线矢状切开头皮约15mm并剥离骨膜，显露冠状缝及人字缝，将二不锈钢垫固定在大鼠冠状缝与人字缝之间。将大鼠头部固定于致伤架下，重450g、直径18mm的铜棒沿垂直玻璃管1.5m高度自由落下致伤。 大鼠头皮伤口消毒、缝合。假手术组仅给予麻醉及头皮切开、缝合，但不致伤。 

撞击后2小时随机取5只模型大鼠5只假手术大鼠处死。大体观察显示，模型组大鼠皮质表面、蛛网膜下腔、挫裂伤灶周围皮质及皮质下白质均有不同程度出血。假手术组肉眼观察脑组织表面光滑，沟回整齐、清晰，无充血、水肿及出血灶。模型制造成功。 

颅脑创伤后72h内静脉输注给药6次，每12h给一次，最后一次给药1h后处死，冰上取脑，测生化指标。 

3、结果 

从表1可以看出积雪草苷及其苷元(积雪草酸)、羟基积雪草苷及其苷元(羟基积雪草酸)三个剂量组均能增加脑组织中超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶、一氧化氮合酶的含量，提高总抗氧化能力，减少脑中脂质过氧化终产物。此数据证明积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸能够抑制脑创伤时氧自由基的产生、抵抗自由基堆积和抗脂质过氧化作用，减少脑组织乳酸堆积从而减少脑细胞坏死，这对颅脑创伤的治疗和防治颅脑创伤后遗症有重要意义。 

表1、积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸对重型弥漫性颅脑创伤模型脑组织内部分生化指标的影响 

^*与模型组比较P＜0.05 

实例20、对实验性大鼠脑损伤后脑水肿的影响 

1、组别 

假手术组：给予与药物组等体积的生理盐水，15只 

模型组：给予与药物组等体积的生理盐水，15只 

积雪草苷及其苷元(积雪草酸)、羟基积雪草苷及其苷元(羟基积雪草酸)3个剂量组，各10只，分别为25、50，100mg/kg。 

2、方法：按照Marmamrou方法制备重型弥漫性颅脑创伤模型。 

将麻醉后大鼠俯卧位固定，以75％酒精消毒术区后，沿中线矢状切开头皮约15mm并剥离骨膜，显露冠状缝及人字缝，将二不锈钢垫固定在大鼠冠状缝与人字缝之间。将大鼠头部固定于致伤架下，重450g、直径18mm的铜棒沿垂直玻璃管1.5m高度自由落下致伤。大鼠头皮伤口消毒、缝合。假手术组仅给予麻醉及头皮切开、缝合，但不致伤。 

撞击后2小时随机取5只模型大鼠5只假手术大鼠处死。大体观察显示，模型组大鼠皮质表面、蛛网膜下腔、挫裂伤灶周围皮质及皮质下白质均有不同程度出血。假手术组肉眼观察脑组织表面光滑，沟回整齐、清晰，无充血、水肿及出血灶。模型制造成功。 

伤后72h内静脉输注给药6次，每12h给一次，最后一次给药1h后，用10％水合氯醛深麻大鼠，迅速取出全脑，用滤纸吸干脑表面液体和血迹，切取离胶原酶注入点以后4mm远以外为起点的2mm厚冠状脑片，分离出血侧皮质及基底节，置浓硫酸处理过的称量杯。用电子天平称取湿重，置小玻璃瓶中，105℃烤箱烤干24～48h以上，直到称重为恒重为止。根据Eliott公式计算脑组织含水量(Water Content，WC)，WC(％)＝(湿重-干重)÷湿重×100％。 

3、结果 

如表2所示，积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸3个剂量组在颅脑创伤72h后均能降低脑含水量，其中积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸的高剂量组与模型相比差异均有显著性(P＜0.05)，即积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸利于创伤后水肿坏死组织的清除，能够减轻颅脑创伤后的脑损害，这与其抗炎作用和抗自由基堆积作用密切相关，可作为颅脑创伤的治疗药物及颅脑创伤后遗症预防和治疗药物。 

表2、颅脑创伤72h后脑含水量 

^*与模型组比较P＜0.05。