2-吡啶-2-基-吡唑-3(2H)-酮的衍生物、其制备和作为HIF激活剂的治疗用途

摘要

本发明涉及式(I)化合物，其中R为-SO

说明书

本发明涉及新的取代的二氢吡唑啉酮衍生物，涉及它们的制备以及它们 作为转录因子HIF的活化剂的治疗用途。

缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factor，HIF)(HIF1α)为在所有组织中组 成性表达的转录因子。该蛋白由Gregg Semenza于1994年在研究EPO基因 的调节序列的过程中发现。他鉴定了位于EPO启动子的非编码3’位的序列， 其具有“缺氧应答元件(hypoxia response element)”(HRE)的名称且其为允许 EPO转录激活的蛋白HIF1α的结合位点。之后，HRE序列还位于超过70个 其它基因上，如VEGF(血管内皮生长因子)或Glut1(葡萄糖载体1)。该转录 复合物HIF-1最小为由蛋白HIF1α或HIF2α和另一转录因子ARNT(之前已 知为HIF1β)形成的杂二聚体。ARNT组成性且稳定地在细胞中表达，且转录 复合物调节的主要部分与细胞中存在的HIF1α的量相关，因此其为限制因 子。

在常氧条件下，蛋白HIF1α快速降解(半衰期为5分钟)。在HIF脯氨酰 羟化酶(HIF-PHDs或EGLNs)分别羟化人形的脯氨酸402和563以及脯氨酸 405和531上的HIF1α或HIF2α后发生该降解。该羟化使得Von Hippell Lindau 蛋白(pVHL)与泛素连接酶结合，其导致HIF1α或HIF2α通过泛素蛋白酶体 系统降解。当细胞或组织经受高缺氧/缺血时，HIF1α或HIF2α不再被泛素- 蛋白酶体系统降解，然后可与HIF复合物的其它转录因子结合以转移至核中 并活化它们的靶基因。

尽管高缺氧是蛋白HIF1α和HIF2α活化的主要原因，其它诱导剂(如胰 岛素和生长因子)也可在它们的稳定中起作用，尤其通过在它们的丝氨酸641 和643上的磷酸化起作用。

因此，建立涉及测量蛋白HIF1α和/或HIF2α的稳定的表型筛选以鉴别 本发明的化合物。

本发明化合物对应于下式(I)：

其中

R表示基团-SO₂-NR3R4、氢原子、卤素原子、基团-卤代(C1-C5)烷基、 基团-CO₂R5或基团-SO₂-R4；R3、R4和R5如下定义；

R1表示不含氮原子的杂环烷基、基团-W-(C3-C6)环烷基、基团-W-芳基、 基团-W-杂芳基、基团-W-杂环烷基、基团-W-COOR5或基团-W-CONR5R6，

(i)所述芳基、杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至少 一个选自以下的取代基取代：卤素原子、基团(C1-C5)烷基、基 团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟基、 基团-卤代(C1-C5)烷基、氰基、基团-O(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5) 烷基、基团-O-(C1-C5)亚烷基-NR5R6、基团-SO₂-(C1-C5)烷基、 基团-NR5R6和基团-CO₂R5，和

(ii)当其为杂环烷基时，所述基团包括至少一个氮原子，该原子可任 选地具有一个选自基团(C1-C5)烷基的取代基，

R2表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷 基、基团-卤代(C1-C5)烷基、基团-W-COOR5、基团-W-C(O)NHR5或基团 -W-C(O)-NR5R6；W、R5和R6如下定义；

○n表示0、1或2；

○W为

(i)基团-(C1-C5)亚烷基-，其任选地被选自基团-(CH₂)n-CO₂R5和基 团-(CH₂)n-(CO)NR5R6的基团取代，其中n如上定义且R5和R6 如下定义；或

(ii)基团-(C3-C6)亚环烷基-，

○R3和R4

(i)其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、 基团-(C3-C6)环烷基、基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、芳基、 基团-CH₂-芳基、杂芳基、杂环烷基、基团-W-OH、基团 -W-CHOH-CH₂OH、基团-W-CO₂R5、基团-W-NR5R6或基团

-W-O-(CH₂)n-芳基；

所述基团-(C3-C6)环烷基和杂环烷基任选地

○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代：

-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟基、基团-W-NR5R6 和基团-W-CO₂R5，在基团-(C3-C6)环烷基和杂环烷基的情 况下，和/或

○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自-(C1-C5)烷 基的基团取代，在杂环烷基的情况下，

其中W和n如上定义，且R5和R6如下定义，且当R3和R4相同时， 它们不能为氢原子；

(ii)或者R3和R4与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基，其任选 地在至少一个碳原子和/或，合适时，在至少一个杂原子上被至 少一个选自基团-(C1-C5)烷基和基团-CH₂-芳基的取代基取代；

○R5和R6可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5) 烷基或基团-(C1-C5)卤代烷基，

下列化合物除外：

●4-苄基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(2，4-二氯苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(4-甲氧基苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(4-溴苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●2-(吡啶-2-基)-4-[2-(三氟甲基)苄基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(4-氯苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-基甲基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑 -3-酮

●4-(3-甲基苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(2-氯苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(4-甲基苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(3-氯苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-(4-叔丁基苄基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-苄基-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●5-甲基-4-(1-苯基乙基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-苄基-2-(6-氯吡啶-2-基)-5-甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

●4-{1-[4-(二乙基氨基)苯基]乙基}-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡 唑-3-酮。

式(I)化合物可以以碱或盐的形式存在，在该情况下的式(I)化合物已经与 酸或碱(尤其是药学上可接受的酸或碱)成盐。然后将它们提及为加成盐，其 构成本发明的一部分。

所述盐有利地用药学上可接受的酸制备，但例如用于纯化或分离式(I) 化合物的与其它酸形成的盐也构成本发明的一部分。

式(I)化合物还可以以水合物或溶剂合物的形式存在，即结合或组合一个 或多个水分子或溶剂的形式。该水合物和溶剂合物也构成本发明的一部分。

式(I)化合物的各种互变异构形式也构成本发明的一部分。

另外，本发明的一个主题还为统一测试方法(uniform test process)，其用 于在将所述细胞用一种或多种测试化合物处理后，通过β-半乳糖苷酶互补直 接测量细胞(优选HEK细胞)核中的HIF1α蛋白的量，其由以下组成：

(a)优选在384-孔板中，将所述细胞接种至合适的培养基(优选1％胎 牛血清(缩写为FCS))中；

(b)将在合适溶剂中的合适浓度的测试化合物加入至之前在所述培养 基中接种的细胞中；优选地，将测试化合物在0.1％FCS中稀释；

(c)在培养箱中在大约37℃培养由此制得的所述细胞，有利地培养 大约6小时；

(d)用含有β-半乳糖苷酶的化学发光底物的溶胞缓冲液溶解细胞；

(e)避光培养，然后读数和测量发光，其为β-半乳糖苷酶活性的函数。

本发明化合物接受了如上定义的筛选测试。

在本发明上下文中，除非在文中另外提及，否则适用以下定义：

-卤素原子：氟、氯、溴或碘原子；

-烷基：直链或支链的饱和脂肪基团，其可包含1、2、3、4或5个碳原 子(缩写为-(C1-C5)烷基)。可以提及的实例包括：作为(i)基团-C1烷基，甲基， 作为(ii)基团-C2烷基，乙基，作为(iii)基团-C3烷基，丙基或异丙基，作为(iv) 基团-C4烷基，丁基、异丁基或叔丁基，作为(v)基团-C5烷基，戊基或异戊 基；

-亚烷基：直链或支链的饱和二价的如上定义的烷基基团，其可包含1、 2、3、4或5个碳原子(缩写为-(C1-C5)亚烷基-)。可以提及的实例包括亚甲 基(或-CH₂-)、亚乙基(或-CH₂-CH₂-)或亚丙基(-CH₂-CH₂-CH₂-或-C(CH₃)₂-)；

-环烷基：环状烷基基团，其可包含3、4、5或6个碳原子，也缩写为 -(C3-C6)环烷基。可以提及的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基；

-亚环烷基：饱和二价的如上定义的环烷基，其可包含3、4、5或6个 碳原子且缩写为-(C3-C6)亚环烷基-。可以提及的实例包括基团-亚环丙基-、- 亚环丁基-、-亚环戊基-和-亚环己基-；

-烷氧基：基团-O-烷基，其中所述烷基基团如上定义。可以提及的实例 包括基团-O-(C1-C5)烷基或-(C1-C5)烷氧基，尤其是作为(i)基团-O-C1烷基， 基团-O甲基，作为(ii)基团-O-C2烷基，基团-O乙基，作为(iii)基团-O-C3烷 基，基团-O丙基或-O异丙基，作为(iv)基团-O-C4烷基，基团-O丁基、-O异 丁基或-O叔丁基，作为(v)基团-O-C5烷基，基团-O戊基或-O异戊基；

-烷氧基-烷基：式-亚烷基-O-烷基的基团，其中包括相同数目的碳原子 或不包括相同数目的碳原子的所述烷基和亚烷基如上定义。可以提及的实例 包括基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基，其中-(C1-C5)亚烷基-和-(C1-C5) 烷基如上定义；

-烷氧基-烷氧基：式-O-亚烷基-O-烷基的基团，其中包括相同数目的碳 或不包括相同数目的碳的所述亚烷基和烷基如上定义；

-卤代烷基：如上定义的烷基基团，被1、2、3、4或5个如上定义的卤 素原子取代。可以提及的实例包括基团-卤代(C1-C5)烷基，其中(C1-C5)烷基 如上定义，例如三氟甲基(缩写为-CF₃)或基团-CH₂-CF₃；

-芳基：含有5或6个碳原子的环状芳香基团。可以提及的芳基的实例 为苯基；

-杂芳基：含有2、3、4或5个碳原子且包括1至3个杂原子的环状芳 香基团，所述杂原子可相同或不同，彼此独立地选自氮原子、氧原子和硫原 子，当存在两个杂原子时，或所述杂原子可相同或不同，彼此独立，当存在 三个杂原子时。可提及吡啶基、吡咯基和呋喃基；

-杂环烷基：含有4、5、6或7个碳原子和包括1、2或3个选自氧、氮 和硫的杂原子的任选桥接的环状烷基。可尤其提及哌啶基、哌嗪基、吡咯烷 基、六亚甲基亚氨基(hexamethyleneimino)、吗啉基和1，1-二氧化四氢噻吩基 (dioxydotetrahydrothienyl)；

-围绕式(I)化合物的吡啶的字母α、β、γ和δ使得识别不同碳原子的位置 成为可能。

在本发明所述化合物中，可提及第一组对应于式(I)的化合物，其中：

R表示基团-SO₂-NR3R4、氢原子、卤素原子、基团-卤代(C1-C5)烷基、 基团-CO₂R5或基团-SO₂-R4；R3、R4和R5如下定义；

和/或

R1表示不含氮原子的杂环烷基、基团-W-(C3-C6)环烷基、基团-W-芳基、 基团-W-杂芳基、基团-W-杂环烷基、基团-W-COOR5或基团-W-CONR5R6，

(i)所述芳基、杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至 少一个选自以下的取代基取代：卤素原子、基团(C1-C5)烷基、 基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟 基、基团-卤代(C1-C5)烷基、氰基、基团-O(C1-C5)亚烷基 -O-(C1-C5)烷基、基团-O-(C1-C5)亚烷基-NR5R6、基团 -SO₂-(C1-C5)烷基、基团-NR5R6和基团-CO₂R5，和

(ii)当其为杂环烷基时，所述基团包括至少一个氮原子，该原子可 任选地具有一个选自基团(C1-C5)烷基的取代基，

和/或

R2表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷 基、基团-卤代(C1-C5)烷基、基团-W-COOR5、基团-W-C(O)NHR5或基团 -W-C(O)-NR5R6；W、R5和R6如下定义；

和/或

n表示0、1或2；

和/或

W为

(i)基团-(C1-C5)亚烷基-，其任选地被选自以下的基团取代：基团 -(CH₂)n-CO₂R5和基团-(CH₂)n-(CO)NR5R6，其中n如上定义且 R5和R6如下定义；或

(ii)基团-(C3-C6)亚环烷基-，

和/或

R3和R4

(i)其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、 基团-(C3-C6)环烷基、基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、芳 基、基团-CH₂-芳基、杂芳基、杂环烷基、基团-W-OH、基团 -W-CHOH-CH₂OH、基团-W-CO₂R5、基团-W-NR5R6或基团 -W-O-(CH₂)n-芳基；

所述基团-(C3-C6)环烷基和杂环烷基任选地

○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代： -(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟基、基团 -W-NR5R6和基团-W-CO₂R5，在基团-(C3-C6)环烷基和 杂环烷基的情况下，和/或

○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自-(C1-C5) 烷基的基团取代，在杂环烷基的情况下，

其中W和n如上定义且R5和R6如下定义，且当R3和R4相同时， 它们不可为氢原子；

(ii)或者R3和R4与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基，其任选 地在至少一个碳原子和/或，合适时，在至少一个杂原子上，被 至少一个选自基团-(C1-C5)烷基和基团-CH₂-芳基的取代基取 代；

和/或

R5和R6，其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷 基或基团-(C1-C5)卤代烷基；

除了上面已经提及的化合物本身外。

第一小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示基团 -SO₂-NR3R4、基团-卤代(C1-C5)烷基、基团-CO₂R5或基团-SO₂-R4，其中 R3、R4个R5如上定义。

第二小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示基团 -SO₂-NR3R4或-CO₂R5，其中R3、R5和R4如上定义。

第三小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示氢原子、卤 素原子、基团-卤代(C1-C5)烷基、基团-CO₂R5或基团-SO₂-R4，其中R4和 R5如上定义。

第四小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R为吡啶β位的原 子上的取代基。

第五小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R1表示不含氮原子 的杂环烷基、基团-W-(C3-C6)环烷基、基团-W-芳基、基团-W-杂芳基、基团 -W-杂环烷基、基团-W-COOR5或基团-W-CONR5R6，

所述芳基、杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至少一个选 自以下的取代基取代：卤素原子、基团(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)亚烷基 -O-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟基、基团-卤代(C1-C5)烷基、氰基、 基团-O(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、基团-O-(C1-C5)亚烷基-NR5R6、基团 -SO₂-(C1-C5)烷基、基团-NR5R6和基团-CO₂R5，和

当其为杂环烷基时，所述基团包括至少一个氮原子，该原子可任选地具 有选自基团(C1-C5)烷基的取代基，

其中W为基团(C1-C5)亚烷基或基团(C3-C6)亚环烷基且其中R5和R6， 其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基或基团-(C1-C5) 卤代烷基。

有利地，所述杂环烷基表示哌啶基，所述芳基表示苯基，且所述杂芳基 表示吡啶基。

第六小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R2表示氢原子、基 团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、基团-卤代(C1-C5)烷 基、基团-W-COOR5、基团-W-C(O)NHR5或基团-W-C(O)-NR5R6；

其中W、R5个R6如上定义。

第七小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示基 团-SO₂-NR3R4，有利地在吡啶的β位，且其中R3和R4，其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C3-C6)环烷基、基团 -(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基、芳基、基团-CH₂-芳基、杂芳基、杂环烷基、 基团-W-OH、基团-W-CHOH-CH₂OH、基团-W-CO₂R5、基团-W-NR5R6或基 团-W-O-(CH₂)n-芳基；

当R3和R4相同时，它们不为氢原子；且

当R3和/或R4选自基团-(C3-C6)环烷基和杂环烷基时，所述基团可任 选地

○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代： -(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、羟基、基团-W-NR5R6 和基团-W-CO₂R5，在基团-(C3-C6)环烷基和杂环烷基的情况 下，和/或

○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自-(C1-C5)烷基 的基团取代，在杂环烷基的情况下，

其中W、R5和R6如上定义且其中n表示0、1或2。

有利地，所述杂环烷基表示哌啶基，所述芳基表示苯基且所述杂芳基表 示吡啶基。

第八小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示基团 -SO₂-NR3R4，有利地在吡啶的β位，且其中R3和R4与携带它们的氮原子 一起形成杂环烷基，其任选地在至少一个碳原子和/或，合适时，在至少一个 杂原子上被至少一个选自基团-(C1-C5)烷基和基团-CH₂-芳基的取代基取代。

有利地，所述杂环烷基表示选自以下的基团：哌啶基、哌嗪基、吗啉基、 吡咯烷基和六亚甲基亚氨基，且所述芳基表示苯基。

第九小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中基团R、R1和/或 R2包括基团R5和/或R6，

R5或R6为氢原子、基团-(C1-C5)烷基或基团-(C1-C5)卤代烷基，或

R5和R6，其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子、基团-(C1-C5)烷 基或基团-(C1-C5)卤代烷基。

有利地，R5和/或R6选自基团(C1-C5)烷基。

第十小组的本发明化合物由式(I)化合物构成，其中R表示基团 -SO₂-NR3R4或氢原子，其中R3和R4如上定义和/或R2表示氢原子或基团 -(C1-C5)烷基，有利地为甲基和/或R1表示基团-W-芳基或基团-W-杂芳基， 有利地其中所述W表示-CH₂-，所述芳基表示苯基且所述杂芳基表示吡啶基。

如上定义的小组，分别地或组合地构成本发明的一部分。

以下化合物排除在本发明之外，即：

化合物4R1-1[2-嘧啶基]-吡唑啉-5-酮，其中R1＝

以下的化合物3-甲基-4R1-[2-嘧啶基]-吡唑啉-5-酮，其中R1表示：

基团或基团

化合物：

和

化合物：

在本发明主题的式(I)化合物中，可尤其提及以下化合物：

●4-(2-氯苄基)-5-甲基-2-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸；

●4-(2-氯苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(2-氯苄基)-5-甲基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐；

●(±)4-(2-氯苄基)-2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基) -5-甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二乙基吡啶 -3-磺酰胺；

●6-[4-(2-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(2-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二(丙烷-2- 基)吡啶-3-磺酰胺；

●4-(2-氯苄基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑 -3-酮；

●N，N-二乙基-6-[4-(2-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶 -3-磺酰胺；

●4-(2-氟苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(2-氟苄基)-5-甲基-2-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(2-氟苄基)-5-甲基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐；

●2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-4-(2-氟苄基)-5- 甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[4-(2-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺；

●4-(2-氟苄基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑 -3-酮；

●4-(2，4-氯苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(2，4-氯苄基)-5-甲基-2-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3- 酮；

●4-(2，4-氯苄基)-5-甲基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2- 二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐；

●4-(2，4-二氯苄基)-2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2- 基)-5-甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2，4-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(2，4-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二(丙烷 -2-基)吡啶-3-磺酰胺；

●4-(2，4-二氯苄基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H- 吡唑-3-酮；

●4-(2-氯-6-氟苄基)-5-甲基-2-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑 -3-酮；

●4-(2-氯-6-氟苄基)-5-甲基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2- 基}-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮三氟乙酸盐；

●4-(2-氯-6-氟苄基)-2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2- 基)-5-甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2-氯-6-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二乙基 吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(2-氯-6-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(2-氯-6-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二(丙烷 -2-基)吡啶-3-磺酰胺；

●4-(2-氯-6-氟苄基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸甲酯；

●4-(4-氯苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(4-氯苄基)-5-甲基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮；

●4-(4-氯苄基)-2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-5- 甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(4-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二乙基吡啶 -3-磺酰胺；

●6-[4-(4-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(4-氯苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二(丙烷-2- 基)吡啶-3-磺酰胺；

●4-(4-氯苄基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑 -3-酮；

●6-[4-(2-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N，N-二(丙烷-2- 基)吡啶-3-磺酰胺；

●4-(1，1-二氧化四氢噻吩-3-基)-5-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2- 基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(1，1-二氧化四氢噻吩-3-基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(1，1-二氧化四氢噻吩-3-基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N，N-二(丙烷-2-基)吡啶-3-磺酰胺；

●2-{[5-甲基-3-氧代-2-(吡啶-2-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]甲基}苯甲腈；

●4-{[5-甲基-3-氧代-2-(吡啶-2-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]甲基}苯甲腈；

●N-乙基-6-{4-[4-(甲氧基甲基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-[3-(甲氧基甲基)苄基]-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-{4-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(3-氰基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-(4-氰基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-2-(吡啶-2-基)-4-(吡啶-4-基甲基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●3-{[5-甲基-3-氧代-2-(吡啶-2-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基]甲基}苯甲腈；

●4-苄基-2-(5-溴吡啶-2-基)-5-甲基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2-氰基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{4-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-(3，5-甲氧基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●5-甲基-4-[4-(甲基磺酰基)苄基]-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-{3-甲基-4-[4-(甲基磺酰基)苄基]-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3- 酮；

●4-苄基-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-4-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-2-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-2-(吡啶-2-基)-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-(4-苄基-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3- 磺酰胺；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-(2，5-二甲氧基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(2，5-二甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基 -N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{3-甲基-4-[(1-甲基哌啶-4-基)甲基]-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{3-甲基-5-氧代-4-[4-(三氟甲基)苄基]-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{3-甲基-5-氧代-4-[3-(三氟甲基)苄基]-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-2-(吡啶-2-基)-4-[3-(三氟甲基)苄基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●5-甲基-2-(吡啶-2-基)-4-[4-(三氟甲基)苄基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-[4-(3，5-二甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基 -N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-(4-羟基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[4-(4-羟基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-{4-[4-(二甲基氨基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-乙 基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-2-(吡啶-2-基)-4-[2-(三氟甲基)苄基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-[4-(二甲基氨基)苄基]-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-{3-甲基-5-氧代-4-[2-(三氟甲基)苄基]-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(3-甲基丁基)吡啶-3- 磺酰胺；

●4-[3-(二甲基氨基)苄基]-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-{4-[3-(二甲基氨基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-乙 基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[4-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●4-(2-甲氧基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-(3-甲氧基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[4-(3-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-[4-(2-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●4-苄基-5-甲基-2-[5-(吗啉-4-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3- 酮；

●N-乙基-6-[4-(3-羟基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-3-乙基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3- 磺酰胺；

●4-(3-羟基苄基)-5-甲基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-{4-[4-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●4-苄基-5-乙基-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●4-苄基-5-甲基-2-[5-(吡咯烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢-3H-吡唑-3- 酮；

●2-[5-(氮杂环庚烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-4-苄基-5-甲基-1，2-二氢-3H-吡 唑-3-酮；

●N，N-二乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●N，N-二乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●N，N-二甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●N，N-二甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●6-(4-苄基-5-氧代-3-丙基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3- 磺酰胺盐酸盐；

●6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-(丙烷-2- 基)吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●5-甲基-4-(吡啶-3-基甲基)-2-[5-(吡咯烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮盐酸盐；

●N-叔丁基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡 啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●N-环丙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡 啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●N-环戊基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡 啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(2-苯基乙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-4-(2-苯基乙基)-2-(吡啶-2-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-(吡啶-2-基)吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●2-{5-[(4-苄基哌啶-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-5-甲基-4-(吡啶-3-基甲 基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(2-苯基丙烷-2-基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{4-[(6-甲氧基吡啶-2-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-(吡啶-2- 基)吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(1-苯基环丙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{4-[(3-甲氧基吡啶-2-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●6-[4-苄基-3-(甲氧基甲基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-苄基-5-氧代-3-(三氟甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基- 吡啶-3-磺酰胺；

●1-[5-(氮杂环庚烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-3-甲基-4-(吡啶-3-基甲基)-1H- 吡唑-5-醇盐(olate)；

●N-乙基-6-{3-甲基-5-氧代-4-[2-(吡啶-2-基)乙基]-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-(2-甲氧基乙基)-N-甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢 -1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-[4-苄基-3-(2-甲基丙基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶 -3-磺酰胺；

●6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶 -3-磺酰胺；

●N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(3-苯基丙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●N-环丙基-N-甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基]吡啶-3-磺酰胺；

●N-叔丁基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基}吡啶-3-磺酰胺；

●6-{4-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N- 乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸叔丁酯；

●6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸 叔丁酯；

●N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺 酰胺；

●N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺 酰胺盐酸盐；

●N-乙基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-叔丁基-N-甲基吡啶-3-磺酰 胺；

●N-乙基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●5-甲基-2-[5-(苯基磺酰基)吡啶-2-基]-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2-二氢-3H-吡 唑-3-酮；

●N-叔丁基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基}-N-甲基吡啶-3-磺酰胺；

●6-{4-[(6-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N- 乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基) 乙酸；

●2-(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基)-N，N-二甲基乙酰胺；

●(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基) 乙酸甲酯；

●(4-苄基-1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-3-基)乙酸乙酯；

●2-(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基)-N-甲基乙酰胺；

●N-叔丁基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-2-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基}-N-甲基吡啶-3-磺酰胺；

●2-(4-苄基-1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-3-基)-N，N-二甲基乙酰胺；

●3-(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基)丙酸；

●3-[(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H- 吡唑-4-基)甲基]苯甲酸甲酯；

●3-(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基)丙酸甲酯；

●{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}(苯 基)乙酸甲酯；

●2-[(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-甲基-3-氧代-2，3-二氢-1H- 吡唑-4-基)甲基]苯甲酸甲酯；

●N-环戊基-N-乙基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●N-环戊基-N-甲基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●2-[(1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-甲基-5-氧化-1H-吡唑-4- 基)甲基]苯甲酸盐；

●2-[5-(氮杂环庚烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2-二氢 -3H-吡唑-3-酮；

●N-环戊基-N-甲基-6-[5-氧代-4-(吡啶-4-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●N-环戊基-N-乙基-6-[5-氧代-4-(吡啶-4-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑 -4-基)-3-苯基丙酸甲酯；

●N-(2，2-二甲基丙基)-N-甲基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸2，2-二 甲基丙基酯；

●N-环戊基-N-({6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶 -3-基}磺酰基)甘氨酸甲酯；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[2-(苄基氧基)乙基]-N-环戊 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊 基吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-(3-羟基丙基)吡啶 -3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-(2-羟基乙基)吡啶 -3-磺酰胺；

●(1S，2R)-2-[甲基({6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡 啶-3-基}磺酰基)氨基]环戊烷甲酸甲酯；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基) 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[2-(二甲基氨基)- 乙基]吡啶-3-磺酰胺；

●4-苄基-2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2-二氢-3H-吡唑-3- 酮；

●6-[4-(环戊基甲基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-乙基-N-苯基吡啶 -3-磺酰胺；

●4-苄基-2-{5-[(4-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2-二 氢-3H-吡唑-3-酮；

●N-(2，2-二甲基丙基)-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●N-(2-甲基丁-2-基)-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[(1R，3S)-3-(羟基甲基)环戊 基]-N-甲基吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(1-甲基吡咯烷-3-基) 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(2-甲氧基-2-甲基丙基)吡啶 -3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[(2R)-2，3-二羟基 丙基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(2，3-二羟基丙基)-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺；

●N-环戊基-6-{4-[(4-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-甲基吡啶-3-磺酰胺；

●N-甲基-N-(2-甲基丁-2-基)-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺；

●3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑 -4-基)-3-苯基-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-羟基-2-(羟基甲 基)丙基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[(2S)-2，3-二羟基 丙基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-[5-氧代-4-(吡啶-4-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸2，2-二 甲基丙基酯；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[(1S，2S)-2-羟基环戊基]吡啶 -3-磺酰胺；

●N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-4-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺 酰胺；

●4-苄基-2-(5-{[(3R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-1，2- 二氢-3H-吡唑-3-酮；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[1-(二甲基氨基)-2-甲基丙烷 -2-基]吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；

●3-{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基}-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯；

●3-{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基}-3-苯基丙酸乙酯；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-叔丁基-N-(2，3-二羟基丙基)- 吡啶-3-磺酰胺；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(2-羟基乙基)吡啶-3-磺酰 胺；

●N-(2，3-二羟基丙基)-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑 -4-基)-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯盐酸盐；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-(二甲基氨基) 丙基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐；

●6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-(二甲基氨基) 丙基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐。

在下文中，术语“保护基”(PG)是指以下基团：其在合成中首先可保护活 性基团(例如羟基或胺)。保护基的实例以及保护和脱保护的方法可参考 “Protective Groups in Organic Synthesis”Greene等，2^nd Edition (John Wiley & Sons，Inc.，New York)。

在下文中，术语“离去基团”(LG)是指可通过断裂异化学键(breaking a  heterolytic bond)和电子对分离容易地从分子中脱除的离核基团。因此，该基 团可例如，容易地在取代反应中被另一基团替换。该离去基团为例如，卤素 或活化的羟基，例如甲磺酰基(mesyl)、甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基(triflate)、 乙酰基等。离去基团的实例及其制备的参考文献可参考“Advances in  Organic Chemistry”，J.March，3^rd Edition，Wiley Interscience，pp.310-316。

根据本发明，通式(I)化合物可按照以下方法制备。

方案1描述了式(I)化合物合成，其中R可为基团-SO₂-NR3R4、氢原子、 卤素原子、基团-卤代(C1-C5)烷基、基团-CO₂R5或基团-SO₂-R4；R1可为不 含氮原子的杂环烷基、基团-W-(C3-C6)环烷基、基团-W-芳基、基团-W-杂芳 基、基团-W-杂环烷基、基团-W-COOR5或基团-W-CONR5R6，其中R3、 R4和R5如上定义；W可为基团(C1-C5)亚烷基，且n可为0、1或2。

所述化合物在下文提及为式(Ia)化合物。

方案1

在方案1中，将式(II)化合物(其中R1和R2如式(Ia)化合物中所定义且 z表示烷基(例如甲基或乙基))与式(III)化合物反应，得到式(Ia)化合物，优选 在质子溶剂(例如乙醇/乙酸混合物)中在80℃的温度，或在非质子溶剂(例如 甲苯)中在80至110℃的温度，在催化量的有机酸(例如对甲苯磺酸)的存在 下进行。或者，它们可依次通过以下反应获得：在甲醇/乙酸混合物中反应得 到中间体腙，然后在甲醇中，在甲醇钠的存在下，优选在40℃的温度进行 环化反应。

获得的化合物(I)任选用酸或碱转化为其相应的盐。

方案2

式(II)化合物可按照方案2经式(IV)的β-酮酯R2COCH₂CO₂z与式(V)醛 R1CHO之间的Knoevenagel反应获得，其中R1如上定义，且R2为基团(C1-C5) 烷基、-(C1-C5)烷基-(C1-C5)烷氧基、-卤代(C1-C5)烷基、基团-W-COOR5， 其中W如上定义；z表示烷基(例如甲基或乙基)，其在非极性溶剂(优选正己 烷)中，在催化量的对甲苯磺酸吡啶的存在下，得到式(VI)化合物，然后在 极性质子溶剂(优选乙醇)，在催化剂(例如钯/碳)的存在下进行氢化步骤。

方案3

或者，式(II)化合物可按照方案3依次通过以下反应获得：将式(IV)的β- 酮酯R2COCH₂CO₂z用醇盐型的有机碱(优选甲醇钠)在醇性溶剂中，或用矿 碱(例如氢氧化钾或更强碱(例如氢化钠)去质子化，然后加入式(VII)的亲电试 剂R1-CH₂-Lg(其中R1如上定义且R2为基团(C1-C5)烷基、-(C1-C5)烷基 -(C1-C5)烷氧基、-卤代(C1-C5)烷基、基团-W-COOR5，其中W如上定义且 z为烷基(例如甲基或乙基)且Lg如上所述)。

其中R1为W-芳基或W-杂芳基且W表示式-CH(烷基)(烷基)的支链的亚 烷基的式(II)化合物的合成如方案4所述。所述化合物在下文提及为式(IIa) 化合物。

方案4

式(IX)化合物通过式(VIII)酮R7COR8(其中R7和R8可独立地或一起为 C1至C4烷基)与式(IV)的β-酮酯R2-CH₂-CO₂z(其中R2如上定义且z为烷 基(例如甲基或乙基))，在Lewis酸(优选氯化锌)的存在下，在溶剂(例如乙酸 酐)中，在40℃至80℃的温度缩合得到。式(IIa)化合物然后经式(X)的有机 金属化合物芳基-金属(“ArM”)(优选芳基-MgX型的有机镁化合物，其中X 表示卤素原子(例如溴或氯原子))与式(IX)化合物的1，4加成获得，在催化量 的碘化亚铜的存在下，在无水溶剂(优选乙醚)中进行。

其中R2为氢的式(II)化合物的合成如方案5所述。所述化合物在下文提 及为式(IIb)化合物。

方案5

式(IIb)化合物通过式(V)酯R1-CH₂-CO₂z(其中R1如上定义且z为烷基 (例如甲基或乙基))的甲酰化得到。甲酰化步骤由以下组成：优选地将甲酸甲 酯或甲酸乙酯与式(V)酯在钠金属的存在下在无水非质子溶剂(例如乙醚)中， 在0℃至30℃的温度，或在Lewis酸(例如四氯化钛)和有机碱(例如三丁基 胺)的存在下，在催化量的三氟甲磺酸三甲基硅酯的存在下，在非质子溶剂(例 如甲苯)中，在50℃至60℃的温度反应。

当不可市售获得时，其中R表示-卤代烷基或-CO₂R5且R5如上所述的 式(III)化合物的合成如方案6所述。所述化合物在下文提及为式(IIIa)化合物。

方案6

式(IIIa)化合物由化合物XI(其中Lg和R如上定义)获得，通过加入水合 肼，优选在质子溶剂(例如EtOH)中，在60至80℃的温度进行。

其中R表示基团-SO₂NR3R4且R3和R4如上定义的式(III)化合物的合 成如方案7所述。所述化合物在下文提及为式(IIIb)化合物。

方案7

式(IIIb)化合物由式(XII)的2-氯吡啶-5-磺酰氯，通过与式(XIII)胺 R3NHR4(其中R3和R4如上定义)，在有机碱(优选三乙胺)的存在下，在极 性溶剂(优选二氯甲烷)中反应得到。然后将获得的式(XIV)化合物与水合肼在 质子溶剂(例如乙醇)中，在70℃反应，得到所需化合物。

其中R为烷基或烷氧基的式(III)化合物的合成如方案8所述。所述化合 物在下文提及为式(IIIc)化合物。式(IIIc)化合物由式(XV)化合物(其中Lg和R 如上定义)获得。肼基经式(XVI)的二苯甲酮腙与式(XV)化合物之间的偶合反 应引入，在催化量的钯的存在下进行，得到式(XVII)中间体，所述肼基通过 酸(例如盐酸)处理得以游离，在不混溶的溶剂(例如甲苯和水)的二元混合物 中，在100℃的温度进行。

方案8

方案9描述了式(I)化合物的合成，其中R1为基团-W-芳基或-W-杂芳基， 所述基团被一个或多个基团-NR5R6取代，且其中W为基团(C1-C5)亚烷基。 所述化合物在下文提及为式(Ib)化合物。

方案9

式(XIX)化合物通过将式(IV)的β-酮酯化合物R2COCH₂CO₂z(R2为基团 (C1-C5)烷基、-(C1-C5)烷基-(C1-C5)烷氧基或-卤代(C1-C5)烷基且z表示烷基 (例如甲基或乙基))与被一个或多个硝基取代的式(XVIII)的苯甲醛化合物反 应获得。式(XX)化合物然后通过以下反应获得：在催化剂(例如钯/碳)的存在 下，在质子溶剂(例如乙醇)中完全氢化，优选接着进行还原胺化，当R5和 R6为甲基时在甲酸的条件下，在还原剂(例如三乙酰氧基硼氢化钠)的存在 下，在质子溶剂(例如乙酸)中进行。式(XX)化合物然后如方案1所述与式(III) 化合物反应，得到所需的式(Ib)化合物。

方案10描述了式(I)化合物的合成，其中R1为基团-W-芳基，且W为 基团(C1-C5)亚烷基；所述芳基被一个或多个基团-O-(C1-C5)烷基-O-(C1-C5) 烷基-(C1-C5)烷氧基或-O-(C1-C5)烷基-NR5R6取代。所述化合物在下文提及 为式(Ic)化合物。

方案10

式(XXII)化合物通过将式(IV)的β-酮酯化合物R2COCH₂CO₂z(其中R2 如上定义且z表示烷基(例如甲基或乙基))与式(XXI)的苯甲醛化合物反应， 然后在钯/碳的存在下，优选在溶剂(例如乙醇)中进行完全氢化获得。式(XXIV) 化合物然后通过用式(XXIII)化合物R₉-Lg(其中R₉表示基团(C1-C5)亚烷基、 -(C1-C5)烷基-(C1-C5)烷氧基或-(C1-C5)烷基-NR5R6且Lg如上定义)烷基化， 在碱(优选矿碱(例如碳酸钾))的存在下，并在极性溶剂(例如DMF)中进行； 然后将其如方案1所述与式(III)化合物反应，得到所需的式(Ic)化合物。

在以下的实施例中，当制备方法未描述时，起始化合物、中间体和试剂 可市售获得或如文献所述，或可按照本领域技术人员已知的方法制备。

以下的实施例例示了本发明具体化合物的制备。实施例给出的化合物的 编号参考了后面给出的表格中的编号，所述表格例示了本发明具体化合物的 化学结构和物理性质。

使用以下缩写和公式：

质子核磁共振(1H NMR)谱，如下所述，在DMSO-d6中以400MHz记 录，使用DMSO-d5的峰作为参考。化学位移δ表示为百万分率(ppm)。观察 到的信号如下表示：s＝单峰；bs＝宽单峰；d＝双重峰；dd＝两组双重峰； dt＝两组三重峰；t＝三重峰；m＝多重峰；H＝质子。

在以下LC/MS联用条件下获得质谱：

方法1：柱：Jsphere33×2mm；4μM；

洗脱剂：A＝H₂O+0.05％TFA；B＝CH₃CN+0.05％TFA

T0：98％A；T1.0至T5.0分钟：95％B；

方法2：柱：Acquity BEH C18(50×2.1mm；1.7μM)；

洗脱剂：A＝H₂O+0.05％TFA；B＝CH₃CN+0.035％TFA

T0：98％A；T1.6至T2.1分钟：100％B；T2.5至T3分钟：98％A

流速1.0mL/分钟；T℃＝40℃，进样2μL

方法3：柱：Kromasil C18(50×2.1mm；3.5μm)；

洗脱剂：A＝CH₃CO₂NH₄+3％CH₃CN；B＝CH₃CN；

T0：100％A；T5.5至T7分钟：100％B；T7.1至T10分钟：100％B； 流速0.8mL/分钟；T＝40℃，进样5μL。

实施例1：N-乙基-6-[3-甲基-4-(1-甲基-1-苯基乙基)-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物77)

1.1.2-乙酰基-3-甲基丁-2-烯酸甲酯

向9.54g(70mmol)无水ZnCl2、53.9mL(500mmol)乙酰乙酸甲酯和55 mL(750mmol)丙酮的混合物中加入64mL乙酸酐。然后将反应介质在50℃ 加热3天，然后用1L的DCM稀释并用水(3×100mL)洗涤。将有机相经 Na₂SO₄干燥、过滤然后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。在减压下浓缩后，得到51.5 g的2-乙酰基-3-甲基丁-2-烯酸甲酯，其为无色油状物的形式。

产率＝70％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：3.79(s，3H)；2.29(s，3H)；2.12(s， 3H)；1.97(s，3H)。

1.2.2-乙酰基-3-甲基-3-苯基丁酸甲酯

在0℃在氩气气流下，向146mg(0.8mmol)无水CuI(I)在5mL无水乙 醚的悬浮液中加入3.6mL(10.9mmol)的3M的苯基溴化镁的Et₂O溶液。在 0℃搅拌30分钟后，一次性加入1g(6.4mmol)的2-乙酰基-3-甲基丁-2-烯酸 甲酯。使得混合物温热至室温，并继续搅拌18小时。然后将反应混合物用 100mL饱和NH₄Cl溶液处理，通过沉降分离各相，并将有机相再次用100 mL饱和NH₄Cl溶液处理。将水相用4×100mL的DCM萃取。合并有机相、 经Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。通过硅胶色谱纯化，用95/5环己烷/EtOAc 混合物洗脱后，得到1g的2-乙酰基-3-甲基-3-苯基丁酸甲酯，其为无色油状 物的形式。

产率＝67％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4-7.2(m，5H)；3.9(s，1H)；3.8(s， 3H)；1.90(s，3H)；1.6(s，3H)，1.55(s，3H)。

1.3.N-乙基-6-[3-甲基-4-(1-甲基-1-苯基乙基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

向200mg(0.85mmol)的2-乙酰基-3-甲基-3-苯基丁酸甲酯在2mL的 EtOH/AcOH混合物(1∶1)的溶液中加入249mg(0.85mmol)的N-乙基-6-肼基 -N-苯基吡啶-3-磺酰胺，然后将反应混合物在90℃加热2小时。在减压下浓 缩后，将残余物溶于100mL的DCM、用2×30mL饱和NaHCO₃溶液洗涤、 经Na₂SO₄干燥、过滤、在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用梯度 为0至20％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。在减压下浓缩后，得到312mg 黄色油状物，在20mL戊烷中固化。将固体过滤，然后在真空下干燥。得到 178mg的N-乙基-6-[3-甲基-4-(1-甲基-1-苯基乙基)-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

产率＝44％

m.p.(℃)＝122

M＝C₂₆H₂₈N₄O₃S＝476；M+H＝477；方法2：Tr＝1.54分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.55(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.5-7.3(m，7H)；7.2(m，1H)；7.1(d，2H)；3.65(q，2H)； 1.9(s，3H)；1.7(s，6H)；1.0(t，3H)。

实施例2：N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I中的化合物43)

2.1.(2E/Z)-3-氧代-2-(吡啶-3-基亚甲基)丁酸甲酯

将10g(86mmol)的3-氧代丁酸甲酯、9.2g(86mmol)吡啶-2-甲醛和70 mg(1.1mmol)的PPTS在27mL己烷的混合物在Dean-Stark装置中回流48 小时。然后将介质在减压下浓缩，溶于50mL的EtOAc、连续用水(2×100mL) 和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤并在减压下浓缩。得到 17.6g的(2E/Z)-3-氧代-2-(吡啶-3-基亚甲基)丁酸甲酯，其为黄色油状物的形 式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝99％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.5(d，1H)；8.00(d，1H)； 7.6(s，1H)；7.35(dd，1H)；3.7(s，3H)；2.3(s，3H)。

2.2.3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯

在Parr装置中，将14g(68mmol)的(2E/Z)-3-氧代-2-(吡啶-3-基亚甲基) 丁酸甲酯在200mL的MeOH中的溶液和2.2g的10％Pd/C的混合物在7巴 氢化48小时。然后将反应混合物经Whatman GF/F纸过滤，并在减压下浓缩。 因此获得14g的3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯，其为深黄色油状物的 形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝99％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.5(m，2H)；7.28(d，1H)；7.21(dd， 1H)；3.78(t，1H)；3.71(s，3H)；3.16(dd，2H)；2.23(s，3H)。

2.3N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐

将300mg(1.45mmol)的3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯和423mg (1.45mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺在4mL的EtOH/AcOH 混合物(1/1)中的溶液在85℃加热4小时。冷却至室温后，将获得的沉淀过 滤，然后连续用Et₂O(20mL)和戊烷(20mL)洗涤。分离得到210mg残余物， 并将该残余物溶于40mL水、2mL乙腈和0.48mL的0.2N HCl溶液中，然 后冷冻干燥。因此获得220mg的N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲 基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐，其为白色冻干物 (lyophilizate)的形式。

产率＝33％

m.p.(℃)＝128

M＝C₂₃H₂₃N₅O₃S＝449；M+H＝450；方法2：Tr＝0.85分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.5(bs，1H)；8.90(s，1H)；8.8(d， 1H)；8.6(d，1H)；8.5(d，1H)；8.4(s，1H)；8.2(dd，1H)；8.05(dd，1H)；7.4(m， 3H)；7.1(d，2H)；3.8(s，2H)；3.65(q，2H)；2.3(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例3：6-(4-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢 -1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐(表I的化合物56)

3.1.(2E/Z)-2-[(3-羟基苯基)亚甲基]-3-氧代丁酸甲酯

按照实施例2.1所述的方法，由5g的3-羟基苯甲醛和4.75g的3-氧代 丁酸甲酯起始，得到2.5g的(2E/Z)-2-[(3-羟基苯基)亚甲基]-3-氧代丁酸甲酯， 其为淡黄色粉末的形式。

产率＝27％

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4(s，1H)；7.2(m，1H)；6.9-6.8(m， 2H)；5.1(s，1H)；3.8(s，3H)；2.4(s，3H)；2.4(s，3H)。

3.2.2-(3-羟基苄基)-3-氧代丁酸甲酯

按照实施例2.2所述的方法，由2.5g的(2E/Z)-2-[(3-羟基苯基)亚甲基]-3- 氧代丁酸甲酯起始，得到2.5g的2-(3-羟基苄基)-3-氧代丁酸甲酯，其为半透 明蜡的形式。

产率＝99％

¹H NMR CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.15(t，1H)；6.7-6.85(m，3H)；5.6(s， 1H)；3.7(s，3H)；3.15(d，2H)；2.25(s，3H)。

3.3.2-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-氧代丁酸甲酯

将1.5g(6.75mmol)的2-(3-羟基苄基)-3-氧代丁酸甲酯、6.6g(20.25 mmol)无水Cs₂CO₃、0.1g(0.67mmol)的NaI和1g(7.1mmol)的2-二甲基氨 基氯乙烷盐酸盐在20mL无水CH₃CN中的混合物在90℃加热4小时，然 后在室温搅拌过夜。将反应介质过滤，然后在减压下浓缩。将获得的残余物 溶于DCM(100mL)、用饱和食盐水(30mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤、 在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至10％MeOH的 DCM/MeOH洗脱。在减压下浓缩后，得到409mg的2-{3-[2-(二甲基氨基) 乙氧基]苄基}-3-氧代丁酸甲酯，其为棕色蜡的形式。

产率＝19.5％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.2(t，1H)；6.7-6.8(m，3H)；4.1(t， 2H)；3.8(t，1H)；3.7(s，3H)；3.15(d，2H)；2.8(t，2H)；2.4(s，6H)；2.3(s，3H)。

3.4.6-(4-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐

按照实施例2.3所述的方法，由195mg的2-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基] 苄基}-3-氧代丁酸甲酯和194mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起 始，得到70mg的6-(4-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苄基}-3-甲基-5-氧代-2，5- 二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐，其为白色冻干物 的形式。

产率＝20％

m.p.(℃)＝124

M＝C₂₈H₃₃N₅O₄S＝535；M+H＝536；方法2：Tr＝0.98分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；10.0(bs，1H)；8.6 (d，1H)；8.4(s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.25(t，1H)；7.15(d，2H)；6.9 (d，2H)；6.8(d，1H)；4.3(t，2H)；3.6(q，2H)；3.5(s，2H)；3.4(t，2H)；2.8(s，6H)； 2.2(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例4：6-{4-[3-(二甲基氨基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基}-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物53)

4.1.(2Z/E)-2-[(4-硝基苯基)亚甲基]-3-氧代丁酸甲酯

按照实施例2.1所述的方法，由6.18g的4-硝基苯甲醛和4.75g的3- 氧代丁酸甲酯起始，得到4.2g的(2Z/E)-2-[(4-硝基苯基)亚甲基]-3-氧代丁酸 甲酯，其为油状物的形式。

产率＝41％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.4(s，1H)；8.3(d，1H)；7.8(d，1H)； 7.6(m，2H)；3.9(s，3H)；2.5(s，3H)。

4.2.2-(4-氨基苄基)-3-氧代丁酸甲酯

按照实施例2.2所述的方法，由4.2g的(2Z/E)-2-[(4-硝基苯基)亚甲基]-3- 氧代丁酸甲酯起始，得到2g的2-(4-氨基苄基)-3-氧代丁酸甲酯，其为油状 物的形式。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.1(t，1H)；6.6-6.5(m，3H)；3.9(t， 1H)；3.8(s，3H)；3.7(bs，2H)；3.1(d，2H)；2.2(s，3H)。

产率＝54％。

4.3.2-[4-(二甲基氨基)苄基]-3-氧代丁酸甲酯

在0℃向1.5g(6.78mmol)的2-(4-氨基苄基)-3-氧代丁酸甲酯、40μl (0.04mmol)的AcOH和5.1mL(67.8mmol)的37％甲醛水溶液在13mL的 CH₃CN中的混合物中滴加4.3g(20.34mmol)三乙酰氧基硼氢化钠。然后将 反应介质缓慢温热至室温，并持续搅拌12小时。将反应混合物倒入50mL 饱和NaHCO₃溶液和30g冰中、用EtOAc(2×100mL)萃取、经Na₂SO₄干 燥、过滤，并在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至50％ EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得到344mg的2-[4-(二甲基氨基)苄基]-3-氧代 丁酸甲酯，其为黄色油状物的形式。

产率：20％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.1(t，1H)；6.65(d，1H)；6.55(m， 2H)；3.9(t，1H)；3.8(s，3H)；3.2(d，2H)；3.0(s，6H)；2.2(s，3H)。

4.4.6-{4-[3-(二甲基氨基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述方法，由172mg的2-[4-(二甲基氨基)苄基]-3-氧代 丁酸甲酯和202mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到138 mg的6-{4-[3-(二甲基氨基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N- 乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体的形式。

产率＝41％

m.p.(℃)＝122

M＝C₂₆H₂₉N₅O₃S＝491；M+H＝492；方法2：Tr＝0.96

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.7(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.2(d，2H)；7.1(t，1H)；6.7(s，1H)；6.5(d， 2H)；3.7(q，2H)；3.5(s，2H)；2.9(s，6H)；2.15(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例5：N，N-二甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物66)

5.1.6-氯-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺

在0℃向4.7mL(9.43mmol)二甲胺(2N的THF溶液)和2.6mL (18.86mmol)的TEA在20mL的THF的混合物中滴加2g(9.43mmol)的6- 氯吡啶-3-磺酰氯(按照专利WO 9840332制备)在5mL的THF中的溶液。在 0℃搅拌40分钟后，将反应介质溶于40mL的EtOAc、用水(2×40mL)和 饱和食盐水(40mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。得到1.93g 的6-氯-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺，其为棕色固体的形式，其不经进一步纯 化直接用于以下步骤。

产率＝93％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(d，1H)； 2.7(s，6H)。

5.2.6-肼基-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺

将1.9g(8.8mmol)的6-氯-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺和4.6mL(91.5 mmol)肼一水合物在10mL的EtOH中的混合物在80℃加热2小时。获得沉 淀，冷却至室温后，过滤，然后用10mL的EtOH洗涤，在真空下干燥。得 到1.62g的6-肼基-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.5(bs，1H)；8.3(s，1H)；7.7(d， 1H)；6.85(d，1H)；4.4(s，2H)；2.6(s，6H)。

5.3.N，N-二甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺

将400mg(1.85mmol)的6-肼基-N，N-二甲基吡啶-3-磺酰胺和383mg (1.85mmol)的3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯在4mL的EtOH/AcOH混 合物(1∶1)中的混合物在80℃加热4小时，然后在减压下浓缩。将获得的残 余物溶于20mL的EtOAc、连续用水(2×20mL)、饱和NaHCO₃溶液(20mL) 和饱和食盐水(20mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。残余 物然后在20mL的Et₂O/戊烷混合物(1/1)中固化、过滤，并从环己烷/EtOH 混合物中重结晶。得到188mg的N，N-二甲基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(吡啶-3- 基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺，其为白色结晶的形式。

产率＝28％

m.p.(℃)＝212

M＝C₁₇H₁₉N₅O₃S＝373；M+H＝374；方法2：Tr＝0.58分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.7(s，1H)；8.65(d， 1H)；8.5(s，1H)；8.4(d，1H)；8.35(d，1H)；7.7(d，1H)；7.3(dd，1H)；3.6(s， 2H)；2.7(s，6H)；2.2(s，3H)。

实施例6：N-乙基-6-{4-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢 -1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物34)

6.1.3-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯

在室温向15g(65.5mmol)的3-(溴甲基)苯甲酸甲酯在20mL无水MeOH 中的溶液中滴加甲醇钠的MeOH溶液(预先由2.25g(98.2mmol)钠在65mL 的MeOH中制备)。然后将反应介质在65℃加热4小时，然后在减压下浓缩， 溶于500mL的DCM、用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。得到7.8g的3-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯，其 为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝66％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.1(s，1H)；8.0(d，1H)；7.5(d，1H)； 7.4(t，1H)；4.5(s，2H)；4.0(s，3H)；3.4(s，3H)。

6.2.[3-(甲氧基甲基)苯基]甲醇

向7.8g(43.3mmol)的3-(甲氧基甲基)苯甲酸甲酯在60mL的THF/二烷混合物(1/1)中的溶液中加入0.94g(43.3mmol)硼氢化锂。然后将反应介质 在80℃加热3小时，并在室温搅拌过夜。将反应介质溶于500mL的EtOAc、 用水(2×100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。得到5.9g 的[3-(甲氧基甲基)苯基]甲醇，其为黄色液体的形式，其不经进一步纯化直接 用于以下步骤。

产率＝90％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4-7.2(m，4H)；4.7(s，2H)；4.5(s， 2H)；3.4(s，3H)；2.4(bs，1H)。

6.3.1-(溴甲基)-3-(甲氧基甲基)苯

在0℃向5.91g(38.8mmol)的[3-(甲氧基甲基)苯基]甲醇在75mL的 Et₂O中的溶液中滴加9.1mL(97.1mmol)三溴化磷。将反应混合物缓慢温热 至室温，并继续搅拌4小时。然后将粗反应混合物小心倒入100g冰和100mL 的MeOH的混合物中。在减压下蒸除MeOH后，将水相用DCM(2×200mL) 萃取。合并有机相、经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压下浓缩。将获得的 残余物通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至20％EtOAc的环己烷/EtOAc洗 脱。

因此获得3.25g的1-(溴甲基)-3-(甲氧基甲基)苯，其为油状物的形式。

产率＝39％

¹H NMR CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4-7.1(m，4H)；4.45(s，2H)；4.35(s， 2H)；3.3(s，3H)。

6.4.2-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-氧代丁酸甲酯

在室温和在氩气中，向0.34g(15.1mmol)钠在8mL无水MeOH中的溶 液中滴加1.6mL(15.1mmol)乙酰乙酸甲酯。搅拌30分钟后，迅速滴加3.25 g(15.11mmol)的1-(溴甲基)-3-(甲氧基甲基)苯，然后将反应介质在70℃加 热2小时30分钟。然后将反应介质在减压下浓缩，并将获得的残余物通过 硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至20％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得到3.2g 的2-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-氧代丁酸甲酯，其为油状物的形式。

产率＝85％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4-7.1(m，4H)；4.45(s，2H)；3.8(t， 1H)；3.7(t，3H)；3.4(t，3H)；3.2(d，2H)；2.2(s，3H)。

6.5.N-乙基-6-{4-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由300mg的2-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-氧 代丁酸甲酯和350mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到341 mg的N-乙基-6-{4-[3-(甲氧基甲基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

产率＝58％

m.p.(℃)＝144

M＝C₂₆H₂₈N₄O₄S＝492；M+H＝493；方法2：Tr＝1.29分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.7(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.3-7.1(m，6H)；4.35(s，2H)；3.6(q，2H)； 3.5(s，2H)；3.3(s，3H)；2.15(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例7：N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(2-苯基乙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物74)

7.1.3-氧代-2-(2-苯基乙基)丁酸甲酯

按照实施例6.4所述的方法，由5.16g的(2-溴乙基)苯和3.2g乙酰乙酸 甲酯起始，得到1.9g的3-氧代-2-(2-苯基乙基)丁酸甲酯，其为半透明油状物 的形式。

产率＝31％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.2-7.35(m，5H)；3.75(s，3H)；3.5(t， 1H)；2.5-2.7(m，2H)；2.2(s，3H)；2.15-2.3(m，2H)。

7.2.N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(2-苯基乙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由264mg的3-氧代-2-(2-苯基乙基)丁酸甲 酯和351mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到291mg的 N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(2-苯基乙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

产率＝53％

m.p.(℃)＝158

M＝C₂₅H₂₆N₄O₃S＝462；M+H＝463；方法2＝1.35分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.8(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.3(m，2H)；7.2(d，3H)；7.1(d，2H)；3.6(q， 2H)；2.8(t，2H)；2.5(t，2H)；1.9(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例8：6-(4-苄基-5-氧代-3-丙基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物68)

8.1.2-苄基-3-氧代己酸乙酯

按照实施例6.4所述的方法，由2.2g溴苄和4g丁酰乙酸乙酯起始，得 到2.5g的2-苄基-3-氧代己酸乙酯，其为半透明油状物的形式。

产率＝40％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.15-7.30(m，5H)；4.2(q，2H)；3.8(t， 1H)；3.2(dd，2H)；2.5-2.3(m，2H)；1.55(m，2H)；1.2(t，3H)；0.86(t，3H)。

8.2.6-(4-苄基-5-氧代-3-丙基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由300mg的2-苄基-3-氧代己酸乙酯和353 mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到400mg的6-(4-苄基-5- 氧代-3-丙基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白 色粉末的形式。

产率＝69％

m.p.(℃)＝180

M＝C₂₆H₂₈N₄O₃S＝476；M+H＝477；方法2：Tr＝1.45分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.45-7.1(m，10H)；3.65(q，2H)；3.6(s，2H)；2.5(t，2H)； 1.5(m，2H)；1.0(t，3H)；0.9(t，3H)。

实施例9：N-乙基-6-{4-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二 氢-1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物38)

9.1.[3-(2-甲氧基乙氧基)苯基]甲醇

将10g(80.6mmol)的3-(羟基甲基)酚、78.4g(241.7mmol)的Cs₂CO₃和 8.4mL(88.6mmol)溴乙基甲基醚在150mL的CH₃CN中的混合物在110℃ 加热12小时。冷却至室温后，将介质过滤、在减压下浓缩、溶于500mL的 DCM、用饱和食盐水(2×100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压 下浓缩。

得到10.9g的3-(2-甲氧基乙氧基)苯基]甲醇，其为黄色油状物的形式。

产率＝75％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.3(t，1H)；6.95(m，2H)；6.85(d， 1H)；4.6(s，2H)；4.1(t，2H)；3.8(t，2H)；3.4(s，3H)；2.1(bs，1H)。

9.2.1-(溴甲基)-3-(2-甲氧基乙氧基)苯

按照实施例6.3所述的方法，由10g的[3-(2-甲氧基乙氧基)苯基]甲醇起 始，得到11.8g的1-(溴甲基)-3-(2-甲氧基乙氧基)苯，其为油状物的形式。

产率＝87％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.3(m，1H)；7.0(m，2H)；6.9(d， 1H)；4.45(s，2H)；4.15(t，2H)；3.75(t，2H)；3.4(s，3H)。

9.3.2-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-氧代丁酸甲酯

按照实施例6.4所述的方法，由5.6g的1-(溴甲基)-3-(2-甲氧基乙氧基) 苯和2.52g乙酰乙酸甲酯起始，得到3.44g的2-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3- 氧代丁酸甲酯，其为黄色油状物的形式。

¹H NMR CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.2(t，1H)；6.75(m，3H)；4.15(d， 2H)；3.8(t，1H)；3.75(s，3H)；3.45(s，3H)；3.15(d，2H)；2.2(s，3H)。

9.4.N-乙基-6-{4-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由336mg的2-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3- 氧代丁酸甲酯和351mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到 441mg的N-乙基-6-{4-[3-(2-甲氧基乙氧基)苄基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢 -1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

产率＝70％

m.p.(℃)＝126

M＝C₂₇H₃₀N₄O₅S＝522；M+H＝523；方法2：Tr＝1.27分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.3-7.1(m，3H)；6.8(d，2H)；7.1(d，1H)； 4.1(d，2H)；3.6(m，4H)；3.5(s，2H)；3.3(s，3H)；2.1(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例10：N-乙基-6-[4-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物54)

10.1.2-(4-甲氧基苄基)-3-氧代丁酸甲酯

将1.34g(8.6mmol)的1-(氯甲基)-4-甲氧基苯、0.93mL(8.6mmol)乙酰 乙酸甲酯、0.24g(0.86mmol)四丁基氯化铵和6.9g的K₂CO₃/KOH(4/1)的混 合物(重量比)在5mL甲苯中的混合物在微波反应器中在110℃加热5分钟。 将反应介质溶于80mL的EtOAc、连续用水(2×20mL)、饱和NaHCO₃溶液 (20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓缩。将 获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至30％EtOAc的环己烷 /EtOAc洗脱。

因此获得0.93g的2-(4-甲氧基苄基)-3-氧代丁酸甲酯，其为黄色油状物 的形式。

产率＝48％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.2(d，1H)；7.1(d，1H)；6.8(m，2H)； 3.8(s，3H)；3.75(t，1H)；3.7(s，3H)；3.2(m，2H)；2.2(s，3H)。

10.2.N-乙基-6-[4-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由300mg的2-(4-甲氧基苄基)-3-氧代丁酸 甲酯和371mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到338mg的 N-乙基-6-[4-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

产率＝56％

m.p.(℃)＝188

M＝C₂₅H₂₆N₄O₄S＝478；M+H＝479；方法2：Tr＝1.29分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.8(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.45 (s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.3-7.1(m，4H)；6.8(d，2H)；3.75(s，3H)； 3.6(s，2H)；3.5(s，2H)；2.1(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例11：6-[4-(2-氯-6-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物20)

将52mg(0.2mmol)的2-(2-氯-6-氟苄基)-3-氧代丁酸甲酯、73mg(0.25 mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和5mg的pTsOH在2mL甲苯 中的混合物在110℃加热12小时，然后在减压下浓缩。将残余物溶于2mL 的DMF并过滤，将滤液在RP18反相柱上色谱纯化，用梯度为0至100％ CH₃CN的H₂O(含2％TFA)/CH₃CN洗脱。

得到86mg的6-[4-(2-氯-6-氟苄基)-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式；

产率＝99％

m.p.(℃)＝206

M＝C₂₄H₂₂ClFN₄O₃S＝501。M+H＝502；方法1

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.9(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.4(s， 1H)；8.0(d，1H)；7.5-7.3(m，5H)；7.2-7.0(m，3H)；3.7(s，2H)；3.6(q，2H)； 2.1(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例12：N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(1-苯基环丙基)-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物80)

12.1.2-乙酰基-3-苯基丁-3-烯酸甲酯

将3.2g(27.5mmol)的3-氧代丁酸甲酯、5.6g(55.0mmol)苯乙炔和700 mg(0.8mmol)的*[ReBr(CO)₃(THF)]₂在55mL无水甲苯中的悬浮液在50℃ 搅拌18小时。冷却至室温后，将介质在减压下浓缩。将获得的残余物溶于 100mL的DCM、连续用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱纯化，用99/1的DCM/MeOH 混合物洗脱。得到5g的2-乙酰基-3-苯基丁-3-烯酸甲酯，其为黄色油状物的 形式。

产率＝84％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：12.6(s，1H)；7.3-7.2(m，5H)；5.7(s， 1H)；5.1(s，1H)；3.55(s，3H)；1.9(s，3H)。

*：[ReBr(CO)₃(THF)]₂由2g(4.9mmol)的ReBr(CO)₅在60mL无水THF 中回流搅拌16小时新鲜制备。在减压下浓缩后，从5mL正己烷/THF(1/1) 中重结晶，得到700mg的[ReBr(CO)₃(THF)]₂，其为白色粉末的形式。

产率＝35％。

12.2.3-氧代-2-(1-苯基环丙基)丁酸甲酯

向1g(4.6mmol)的2-乙酰基-3-苯基丁-3-烯酸甲酯在16mL的DCM中 的溶液中连续滴加20.8mL(22.9mmol)的1.1M二乙基锌的甲苯溶液和3.7 mL(45.8mmol)二碘甲烷。将反应介质回流18小时。冷却至室温后，将反应 混合物用100mL水处理，然后用DCM(3×100mL)萃取。合并有机相、连 续用水(4×100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，然 后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化，用95/5环己烷 /EtOAc混合物洗脱。得到280mg的3-氧代-2-(1-苯基环丙基)丁酸甲酯，其 为黄色油状物的形式。

产率＝26％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.3-6.9(m，5H)；3.7(s，1H)；3.6(s， 3H)；2.0(s，3H)；1.4(s，2H)；1.25(s，2H)。

12.3.N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(1-苯基环丙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由280mg的3-氧代-2-(1-苯基环丙基)丁酸 甲酯和352mg的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到110mg的 N-乙基-6-[3-甲基-5-氧代-4-(1-苯基环丙基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]-N-苯基 吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末的形式。

m.p.(℃)＝146

M＝C₂₆H₂₆N₄O₃S＝474，M+H＝475；方法2：Tr＝1.44分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.4(s， 1H)；8.1(d，1H)；7.4-7.1(m，10H)；3.6(q，2H)；2.2(s，3H)；1.15(dd，4H)； 1.0(t，3H)。

实施例14：N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐(表I的化合物98B)

14.1.N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺

在0℃向17.3mL(165mmol)叔丁基胺和69mL(495mmol)的TEA在 330mL的DCM中的混合物中分次加入35g(165mmol)的6-氯吡啶-3-磺酰 氯。在0℃搅拌2小时后，将反应介质溶于600mL的DCM、用水(1L)、饱 和NaHCO₃溶液(1L)和饱和食盐水(1L)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减 压下浓缩。得到32.4g的N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体的形 式。

产率＝79％

¹H NMR CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(d，1H)； 4.5(bs，1H)；1.2(s，9H)。

14.2.2-甲酰基-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯

在0℃在氩气中，向2.1g(90.8mmol)钠在55mL无水Et₂O中的悬浮液 中滴加15g(90.8mmol)的3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯和7.3mL(57.41mmol)甲酸 乙酯的混合物。然后将介质在室温搅拌12小时，溶于200mL水，并用100 mL的Et₂O萃取。将水相酸化至pH 5，然后用2×300mL的EtOAc萃取。 然后将有机相经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。将获得的残余物通 过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至10％MeOH的DCM/MeOH洗脱。得到 4.8g的2-甲酰基-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯，其为白色固体的形式。

产率＝28％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.0(bs，1H)；8.45(s，1H)；8.4(d， 1H)；7.7(d，1H)；7.5(d，1H)；7.2(dd，1H)；3.6(s，2H)；3.5(s，3H)。

14.3N-叔丁基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例5.2所述的方法，由32.4g的N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺 和12.9mL肼一水合物起始，得到22.6g的N-叔丁基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺， 其为白色固体的形式。

产率：71％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.3(d，2H)；7.8(d，1H)；7.2(s， 1H)；7.0(bs，1H)；4.3(bs，2H)；1.2(s，9H)。

14.4.N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物98A)

按照实施例1.3所述的方法，由12g的N-叔丁基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺 和9.1g的2-甲酰基-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯起始，得到9.92g的N-叔丁基 -6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺，其为白 色固体的形式。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.9(bs，1H)；8.5(bs，2H)；8.4(s， 1H)；8.3(d，1H)；7.9(s，1H)；7.8(s，1H)；7.7(d，1H)；7.3(dd，1H)；3.6(s，2H)； 1.2(s，9H)。

产率＝64％

m.p.(℃)＝160

M＝C₁₈H₂₁N₅O₃S＝387；M+H＝388；方法2：Tr＝0.58分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.3(bs，3H)；8.4(s， 1H)；8.3(d，1H)；7.9(s，1H)；7.7(d，1H)；7.4(t，1H)；3.6(s，2H)；3.4(bs，1H)； 1.1(s，9H)。

14.5.N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐

向912mg的N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑 -1-基]吡啶-3-磺酰胺在20mL的DCM中加入1当量的HCl(4N的二烷溶 液)，然后将介质在真空下浓缩。得到1g的N-叔丁基-6-[5-氧代-4-(吡啶-3- 基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐，其为白色粉末的形 式。

产率＝100％

m.p.(℃)＝140℃

M＝C₁₈H₂₁N₅O₃S＝387；M+H＝388；方法2：Tr＝0.58分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12，0(bs，1H)；8.9(bs，1H)；8.8 (s，1H)；8.7(d，1H)；8.5(d，2H)；8.3(d，1H)；8.0(t，1H)；7.9(s，1H)；7.8(s， 1H)；3.8(s，2H)；1.2(s，9H)。

实施例15：(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢 -1H-吡唑-4-基)乙酸(表I的化合物104)

15.1.2-甲酰基丁二酸乙酯

在0℃在氩气中，向1.32g(57.41mmol)钠在35mL无水Et₂O中的悬浮 液中滴加10g(57.41mmol)丁二酸乙酯和4.62mL(57.41mmol)甲酸乙酯的 混合物。然后将介质在室温搅拌12小时，溶于100mL水，并用100mL的 Et₂O萃取。将水相酸化至pH 5，然后用100mL的Et₂O萃取。然后将有机 相经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱 色谱纯化，用7/3环己烷/EtOAc混合物洗脱。得到4.3g的2-甲酰基丁二酸 乙酯，其为无色油状物的形式。

产率：37％

¹H NMR，¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：10.0(s，1H)；7.1(d，1H)； 4.4-4.2(m，5H)；2.9(dd，2H)；1.3(m，6H)；

15.2 (2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸

将2.17g(7.42mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和1.5g (7.42mmol)的2-甲酰基丁二酸乙酯在15mL的EtOH中的混合物在80℃加 热5小时。然后将介质在减压下浓缩。将获得的沉淀在Et₂O中研磨，然后 过滤，并用叶轮泵干燥。在室温，将获得的4.1g米色粉末加至溶于17mL 无水MeOH的212mg(9.23mmol)钠的溶液中，并继续搅拌2小时。将介质 在减压下浓缩，然后溶于10mL水和4mL的1N氢氧化钠，并在室温搅拌 12小时。然后用1N HCl将介质酸化至pH 5，然后用DCM(2× 100mL)萃取。 将合并的有机相经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压下浓缩。将获得的残余 物在戊烷中固化、过滤、并在真空下干燥，得到2.1g的(2-{5-[乙基(苯基) 氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸，其为白色粉末 的形式。

产率＝58％

m.p.(℃)＝174℃

M＝C₁₈H₁₈N₄O₅S＝402；M+H＝403；方法Tr＝1.02分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，2H)；8.6(bs，1H)；8.5(bs， 1H)；8.2(d，1H)；7.9(bs，1H)；7.4(m，3H)；7.2(d，2H)；3.7(q，2H)；3.4(s，2H)； 1.0(t，3H)。

实施例16：(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢 -1H-吡唑-4-基)乙酸甲酯(表I的化合物107)

16.1 (2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸甲酯

将0.5g(1.24mmol)的(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代 -2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸和0.256g(1.24mmol)的DCC的混合物在室温 搅拌3小时。将形成的沉淀过滤，并将滤液在减压下浓缩。将获得的残余物 通过硅胶柱色谱纯化，用9/1的DCM/MeOH混合物洗脱。得到0.5g的 2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸 甲酯，其为棕色粉末的形式。

产率＝96％

m.p.(℃)＝140℃

M＝C₁₉H₂₀N₄O₅S＝416；M+H＝417；方法2；Tr＝1.44分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(s，1H)；8.4(s， 1H)；8.2(d，1H)；7.9(s，1H)；7.4(m，3H)；7.2(d，2H)；5.6(d，0.5H)；3.75(q， 2H)；3.7(s，3H)；3.3(d，1.5H)；1.0(t，3H)。

实施例17：2-(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢 -1H-吡唑-4-基)-N-甲基乙酰胺(表I的化合物108)

在0℃向0.28g(0.7mmol)的(2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2- 基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)乙酸、0.61mL(3.48mmol)的DIEA和0.8 mL(1.4mmol)甲胺(2N的THF溶液)在2mL的DCM中的混合物中加入0.33 g(1.04mmol)的TBTU。在室温搅拌3小时后，将介质溶于500mL的DCM、 连续用0.1N HCl(2× 40mL)、饱和NaHCO₃溶液(2× 40mL)和饱和食盐水 (30mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓缩和通过硅胶柱色谱纯化， 用95/5的DCM/MeOH混合物洗脱。得到18mg的2-(2-{5-[乙基(苯基)氨基 磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-N-甲基乙酰胺，其为棕色 粉末的形式。

产率＝6％

m.p.(℃)＝194℃

M＝C₁₉H₂₁N₅O₅S＝415；M+H＝416；方法2Tr＝0.98分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.5(s， 1H)；8.2(d，1H)；7.8(s，2H)；7.5(m，3H)；7.2(d，2H)；3.6(q，2H)；3.1(s，2H)； 2.6(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例18：(4-苄基-1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-2，5- 二氢-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(表I的化合物106)

18.1 2-苄基-3-氧代戊二酸二乙酯

在氩气中在室温，将1.7g(74.18mmol)钠溶于75mL无水EtOH中。然 后在室温滴加13.5mL(74.2mmol)的3-氧代戊二酸二乙酯，然后滴加8.8mL (74.2mmol)溴苄。然后将介质回流3小时、在减压下浓缩，并通过硅胶柱色 谱纯化，用梯度为0至20％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得到8.29g的2- 苄基-3-氧代戊二酸二乙酯，其为半透明油状物的形式。

产率＝38％

¹H NMR，¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.4-7.2(m，5H)；4.2(m， 4H)；4.1(t，1H)；3.2(d，2H)；1.2(m，6H)；

18.2.4-苄基-1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯

按照实施例1.3所述的方法，由5g(17.1mmol)的2-苄基-3-氧代戊二酸 二乙酯和5g(17.1mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺起始，得到 3g的4-苄基-1-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-3-基)乙酸乙酯，其为白色粉末的形式。

产率＝34％

m.p.(℃)＝156

M＝C₂₇H₂₈N₄O₅S＝520；M+H＝521方法2：Tr＝1.52分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.5(bs，2H)；8.15 (d，1H)；7.4-7.1(m，10H)；4.1(q，2H)；3.8-3.6(m，6H)；1.2(t，3H)；1.0(t，3H)。

实施例19：6-{4-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基}-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物97)

19.1 (5-溴吡啶-3-基)甲醇

在氩气中在-10℃，向12g(59.4mmol)的5-溴吡啶-3-甲酸在300mL无 水THF中的溶液中加入6.6mL的NMM，然后加入5.7mL(59.4mmol)氯甲 酸乙酯。在-10℃搅拌20分钟后，分次加入6.8g(179.8mmol)硼氢化钠。然 后将介质冷却至-70℃，并经1小时30分钟加入400mL的MeOH。允许温 度升至室温，并继续搅拌12小时。然后将介质在减压下浓缩，然后通过硅 胶柱色谱纯化，用98/2的DCM/MeOH混合物洗脱。得到8.4g的(5-溴吡啶 -3-基)甲醇，其为黄色油状物的形式。

产率＝75％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；8.4(s，1H)；7.9(s，1H)； 4.6(s，2H)；2.8(bs，1H)。

19.2 5-(羟基甲基)吡啶-3-甲腈

将4.2g(22.34mmol)的(5-溴吡啶-3-基)甲醇和5g(55.84mmol)氰化铜 在22mL吡啶中的混合物在密封管中在160℃加热20小时。冷却至室温后， 将介质溶于10mL浓氨水和30mL饱和NH₄Cl溶液，然后搅拌2小时。然 后将介质用200mL的DCM/iPrOH混合物(85/15)萃取、经Na₂SO₄干燥，然 后在减压下浓缩和通过硅胶柱色谱纯化，用98/2的DCM/MeOH混合物洗脱。 得到2.13g的5-(羟基甲基)吡啶-3-甲腈，其为白色固体的形式。

产率＝51％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.9(d，2H)；8.0(s，1H)；4.9(s，2H)； 2.3(bs，1H)。

19.3 5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈

向0.2g(1.49mmol)的5-(羟基甲基)吡啶-3-甲腈在2mL的DCM中的溶 液中加入1mL(4mmol)的4N HCl的二烷溶液。将混合物在减压下浓缩， 然后加入至0.65mL(8.95mmol)氯化亚砜中，接着在60℃加热3小时。冷 却至室温后，将介质溶于20mL甲苯、将形成的沉淀过滤，然后用30mL 的DCM和30mL饱和NaHCO₃溶液处理。分离出有机相，经Na₂SO₄干燥， 然后在减压下浓缩。得到161mg的5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈，其为油状物的 形式。

产率＝73％

¹H NMR，¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.9(d，2H)；8.0(s，1H)； 3.5(s，2H)。

19.4.2-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-氧代丁酸甲酯

在氩气中在0℃，向84mg(2.11mmol)氢化钠(60％，在油中)在3mL无 水DME中的悬浮液中加入0.23ml(2.11mmol)乙酰乙酸甲酯。将反应介质在 0℃搅拌30分钟，并在室温搅拌30分钟，接着加入稀释于1mL的DME的 161mg(1.06mmol)的5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈和29mg(0.11mmol)的四丁基 碘化铵。然后将介质在65℃加热4小时。冷却至室温后，将介质溶于10mL 水，通过加入0.1N HCl中和，然后用EtOAc(2× 40mL)萃取，经Na₂SO₄干 燥、在减压下浓缩，和通过硅胶柱色谱纯化，用环己烷/EtOAc混合物(8/2) 洗脱。得到140mg的2-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-氧代丁酸甲酯，其为无色 油状物的形式。

产率＝57％

¹H NMR，¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.6(s，1H)； 7.8(s，1H)；3.7(t，1H)；3.65(s，3H)；3.2(dd，2H)；2.2(s，3H)。

19.5 6-{4-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由125mg(0.43mmol)的2-[(5-氰基吡啶-3- 基)甲基]-3-氧代丁酸甲酯和99mg(0.43mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶 -3-磺酰胺起始，得到103mg的6-{4-[(5-氰基吡啶-3-基)甲基]-3-甲基-5-氧代 -2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色粉末的形 式。

产率＝51％

m.p.(℃)＝164

M＝C₂₄H₂₂N₆O₃S＝474；M+H＝475；方法2：Tr＝1.24分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.9(s，1H)；8.8(s， 1H)；8.6(bs，1H)；8.4(s，1H)；8.2(s，1H)；8.15(d，1H)；7.4(m，3H)；7.1(d， 2H)；3.7(s，4H)；2.2(s，3H)；1.0(t，3H)。

实施例20：5-甲基-2-[5-(苯基磺酰基)吡啶-2-基]-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2- 二氢-3H-吡唑-3-酮(表II的化合物197)

20.1 2-氯-5-(苯基硫基)吡啶

将3.4g(14.3mmol)的2-氯-5-碘吡啶、1.9g(17.2mmol)的硫酚、0.93g (17.2mmol)甲醇钠和0.36g(5.7mmol)铜在18mL的MeOH中的混合物在 80℃加热12小时。冷却至室温后，将介质溶于100mL的1N NaOH，并将 MeOH在减压下蒸除。将反应介质用EtOAc(2×100mL)萃取，将有机相用 0.1N NaOH(2×30mL)洗涤，然后经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，并通过 硅胶柱色谱纯化，用环己烷/EtOAc混合物(8/2)洗脱。得到1.90g的2-氯-5-(苯 基硫基)吡啶，其为白色粉末的形式。

产率＝60％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.5(d，1H)；8.3(s，1H)；7.9(s，1H)； 7.5-7.4(m，5H)。

20.2 2-氯-5-(苯基磺酰基)吡啶

在室温经15分钟向1.9g(8.57mmol)的2-氯-5-(苯基硫基)吡啶在40mL 的DCM中的溶液中加入4.8g(21.42mmol)的77％的3-氯过氧苯甲酸在20 mL的DCM中的悬浮液。搅拌1小时后，将形成的沉淀滤除，将滤液溶于 200mL的DCM，连续用100mL的0.2N氢氧化钠、100mL饱和硫代硫酸 钠溶液洗涤、经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱纯化，用 环己烷/EtOAc混合物(8/2)洗脱。得到0.67g的2-氯-5-(苯基磺酰基)吡啶，其 为白色粉末的形式。

产率＝31％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.9(s，1H)；8.1-7.9(m，3H)；7.6-7.4 (m，3H)；7.3(m，1H)。

20.3 2-肼基-5-(苯基磺酰基)吡啶

按照实施例5.2的方法，由0.67g(2.64mmol)的2-氯-5-(苯基磺酰基)吡 啶起始，得到340mg的2-肼基-5-(苯基磺酰基)吡啶，其为白色粉末的形式。

产率＝51％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：9.0(s，1H)；8.6(d，1H)；8.5(s， 1H)；8.4(m，2H)；8.0(d，1H)；7.8-7.5(m，3H)；7.3(m，1H)；3.3(bs，1H)。

20.4 5-甲基-2-[5-(苯基磺酰基)吡啶-2-基]-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮

按照实施例1.3所述的方法，由340mg(1.36mmol)的2-肼基-5-(苯基磺 酰基)吡啶和283mg(1.36mmol)的3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯起始， 得到130mg的5-甲基-2-[5-(苯基磺酰基)吡啶-2-基]-4-(吡啶-3-基甲基)-1，2- 二氢-3H-吡唑-3-酮，其为白色粉末的形式。

产率＝23％

m.p.(℃)＝176

M＝C₂₁H₁₈N₄O₃S＝406；M+H＝407；方法2：Tr＝0.78分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)12.0(bs，1H)；9.0(s，1H)；8.6(d， 1H)；8.5(s，1H)；8.4(m，2H)；8.0(d，2H)；7.8-7.6(m，4H)；7.3(m，1H)； 3.6(s，2H)；2.2(s，3H)。

实施例21：N-乙基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐(表I的化合物101)

21.1.(2E)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙-2-烯酸甲酯

在氩气中和在0℃，经45分钟向3.12g(78.1mmol)氢化钠(60％，在油 中)在30mL无水THF中的悬浮液中加入16.4g(78.1mmol)的(二乙氧基磷酰 基)乙酸甲酯在10mL的THF中的溶液。在0℃搅拌30分钟，然后在0℃ 滴加5.1g(37.2mmol)的5-甲氧基吡啶-3-甲醛在20mL无水THF中的溶液。 冷却至室温后，将反应混合物用150mL水处理，然后用EtOAc(3×100mL) 萃取。合并有机相、连续用水(2×20mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤，然 后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至40％ EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得到1g的(2E)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙-2-烯 酸甲酯，其为白色粉末的形式。

产率＝14％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.4(d，1H)；7.7(d，1H)；7.4(s，1H)； 6.5(d，1H)；3.9(s，3H)；3.8(s，3H)。

21.2.3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸甲酯

在Parr装置中，将1g(5.33mmol)的(2E)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙-2-烯 酸甲酯在20mL的MeOH中的溶液和0.1g的10％Pd/C的混合物在7巴氢 化5小时。然后将反应混合物经Whatman GF/F纸过滤，并在减压下浓缩。 因此获得1g的3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸甲酯，其为蜡的形式，其不经进 一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝100％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.3(s，1H)；8.2(s，1H)；7.1(s，1H)； 3.85(s，3H)；3.6(s，3H)；3.0(t，2H)；2.7(t，3H)。

21.3.2-甲酰基-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸甲酯

按照实施例14.2所述的方法，由1.04g(5.33mmol)的3-(5-甲氧基吡啶 -3-基)丙酸甲酯起始，得到600mg的2-甲酰基-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)丙酸甲 酯，其为蜡的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝51％。

21.4.N-乙基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐

按照实施例2.3所述的方法，由250mg(1.12mmol)的2-甲酰基-3-(5-甲 氧基吡啶-3-基)丙酸甲酯和327mg(1.12mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶 -3-磺酰胺起始，得到131mg的N-乙基-6-{4-[(5-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-5- 氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基}-N-苯基吡啶-3-磺酰胺盐酸盐，其为冻干物的形 式。

产率＝25％

m.p.(℃)＝136

M＝C₂₃H₂₃N₅O₄S＝465；M+H＝466；方法2：Tr＝0.97分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.0(bs，1H)；8.6(s，2H)；8.4(d， 2H)；8.2(d，1H)；8.1(s，1H)；7.9(s，1H)；7.4(m，3H)；7.1(d，2H)；4.0(s，3H)； 3.8(s，2H)；3.6(q，2H)；1.0(t，3H)。

实施例22：{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H- 吡唑-4-基}(苯基)乙酸甲酯(表I的化合物113)

22.1.3-氰基-3-苯基丙酸乙酯

将64g(257.8mmol)亚苄基丙二酸二乙酯(diethyl  benzylidenepropanedioate)和17g(261mmol)氰化钾在750mL的EtOH和75 mL水中的混合物在60℃加热18小时。然后将介质在减压下浓缩并溶于500 mL饱和食盐水，然后用Et₂O(2×500mL)萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥、 过滤，然后在减压下浓缩。得到43.5g的3-氰基-3-苯基丙酸乙酯，其为固体 的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝83％。

22.2.2-苯基丁二酸

将43.5g(214mmol)的3-氰基-3-苯基丙酸乙酯和52.2g(930.4mmol)氢 氧化钾在670mL的EtOH中的混合物回流4小时。冷却至室温后，将介质 在真空下浓缩，然后用1L的1N HCl处理，然后形成沉淀，其经过滤并用水 (2× 50mL)冲洗。将获得的固体溶于200mL甲苯和40mL的EtOH的混合 物中，并在减压下浓缩，然后用叶轮泵干燥。得到37g的2-苯基丁二酸， 其为固体的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝89％。

22.3.2-苯基丁二酸二乙酯

在Dean-Stark装置中，将37g(190.5mmol)的2-苯基丁二酸、6mL浓 H₂SO₄、80mL甲苯和80mL的EtOH的混合物回流72小时。冷却至室温后， 将反应混合物在减压下浓缩，然后用300mL水处理，并用Et₂O(2×400mL) 萃取。合并有机相、经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压下浓缩。将获得的 残余物通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc洗 脱。得到22g的2-苯基丁二酸二乙酯，其为油状物的形式。

产率＝46％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.5(m，5H)；4.2(m，5H)；3.0(dd， 2H)；1.0(t，6H)。

22.4.2-甲酰基-3-苯基丁二酸二乙酯

按照实施例14.2所述的方法，由7.0g(28mmol)的2-苯基丁二酸二乙酯 起始，得到7.0g的2-甲酰基-3-苯基丁二酸二乙酯，其为油状物的形式。

产率＝89％。

22.5.{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}(苯基)乙酸乙酯

按照实施例27.2所述的方法，由2g(7.19mmol)的2-甲酰基-3-苯基丁 二酸二乙酯和1.75g(7.19mmol)的N-叔丁基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺起始，得 到3.1g的{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4- 基}(苯基)乙酸甲酯，其为粉末的形式。

产率＝93％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.6(s，1H)；8.6(d，1H)；8.0(d， 1H)；7.7(s，2H)；7.3(m，5H)；4.6(s，1H)；4.1(q，2H)；1.0(m，12H)。

22.6 1-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-4-[羧基(苯基)甲基]-1H-吡唑-5-醇盐

将2.8g(5.8mmol)的2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二 氢-1H-吡唑-4-基}(苯基)乙酸乙酯和5.8mL(5.8mmol)的1N NaOH在12mL 的EtOH中的混合物在室温搅拌5小时。加入5.8mL的1N HCl，并将介质 用DCM(2×100mL)萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥、过滤，然后在减压下 浓缩。得到2g的1-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-4-[羧基(苯基)甲基]-1H- 吡唑-5-醇盐，其为米色粉末的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

22.7.{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}(苯基)乙酸甲酯

在0℃向0.3g(0.66mmol)的1-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-4-[羧 基(苯基)甲基]-1H-吡唑-5-醇盐在3mL无水MeOH中的混合物中加入0.11 mL(0.73mmol)氯化亚砜。冷却至室温后，连续搅拌12小时。将介质溶于 40mL的DCM，用20mL饱和NaHCO₃溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，然后在 减压下浓缩。将获得的残余物在DCM/戊烷混合物中固化，然后过滤，在真 空下干燥。得到0.67g的2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二 氢-1H-吡唑-4-基}(苯基)乙酸甲酯，其为米色粉末的形式。

产率＝73％

m.p.(℃)＝66

M＝C₂₁H₂₄N₄O₅S＝444；M+H＝445；方法2：Tr＝1.21分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.3(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(bs， 1H)；8.3(d，1H)；7.7(d，2H)；7.4(m，5H)；4.9(s，1H)；3.7(s，3H)；1.0(t，9H)。

实施例23：N-环戊基-N-({6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基]吡啶-3-基}磺酰基)甘氨酸甲酯盐酸盐(表I的化合物128)

23.1.6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例14.1所述的方法，由5g(23.6mmol)的6-氯吡啶-3-磺酰氯 和2g(23.6mmol)环戊胺起始，得到5.1g的6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺， 其为棕色固体的形式。

产率＝84％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(d，1H)； 4.5(d，1H)；3.6(m，1H)；1.8(m，2H)；1.6(m，4H)；1.3(m，2H)。

23.2.N-[(6-氯吡啶-3-基)磺酰基]-N-环戊基甘氨酸甲酯

将2g(7.67mmol)的6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺、0.7mL(7.67mmol) 溴乙酸甲酯和1.2g(8.4mmol)的K₂CO₃在15mL的CH₃CN中的混合物在 80℃加热12小时。冷却至室温后，将介质过滤，并将滤液浓缩。将残余物 溶于100mL的DCM，连续用50mL饱和NaHCO₃溶液和50mL水洗涤， 然后将有机相经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱纯化，用 8/2的庚烷/EtOAc混合物洗脱。得到2.4g的N-[(6-氯吡啶-3-基)磺酰基]-N- 环戊基甘氨酸甲酯，其为油状物的形式。

产率＝93％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)9.0(s，1H)；8.3(d，1H)；7.4(d，1H)； 4.1(s，2H)；4.05(m，1H)；3.8(s，3H)；1.9(m，2H)；1.6(m，4H)；1.3(m，2H)。

23.3.N-环戊基-N-[(6-肼基吡啶-3-基)磺酰基]甘氨酸甲酯

按照实施例5.2所述的方法，由2.4g(7.2mmol)的N-[(6-氯吡啶-3-基) 磺酰基]-N-环戊基甘氨酸甲酯起始，得到2g的N-环戊基-N-[(6-肼基吡啶-3- 基)磺酰基]甘氨酸甲酯，其为黄色固体的形式。

产率＝85％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)8.6(s，1H)；8.0(d，1H)；6.8(d，1H)； 6.6(bs，1H)；4.05(m，1H)；4.0(s，2H)；3.6(s，3H)；1.8(m，2H)；1.6(m，4H)； 1.2(m，2H)。

23.4.N-环戊基-N-({6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-基}磺酰基)甘氨酸甲酯盐酸盐

按照实施例2.3所述的方法，由200mg(0.61mmol)的N-环戊基-N-[(6- 肼基吡啶-3-基)磺酰基]甘氨酸甲酯和117mg(0.61mmol)的3-氧代-2-(吡啶 -3-基甲基)丁酸甲酯起始，得到130mg的N-环戊基-N-({6-[5-氧代-4-(吡啶-3- 基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-基}磺酰基)甘氨酸甲酯盐酸盐，其为 白色冻干物的形式。

产率＝34％

m.p.(℃)＝100

M＝C₂₂H₂₅N₅O₅S＝471；M+H＝472；方法2：Tr＝0.87分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)8.7(d，2H)；8.6(d，1H)；8.4(d， 2H)；8.3(d，1H)；7.8(m，1H)；7.7(s，1H)；5.0-4.0(bs，2H)；3.9(m，1H)； 3.8(s，2H)；3.6(s，2H)；3.4(s，3H)；1.4-1.0(m，8H)。

实施例24：6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3- 甲酸2，2-二甲基丙基酯(表II的化合物198)

24.1.6-氯吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯

在氩气中在室温，向10g(56.8mmol)的6-氯吡啶-3-甲酰氯在100mL 无水甲苯中的溶液中加入15g(170.4mmol)的2，2-二甲基丙醇。然后将反应 介质在80℃加热6小时。冷却至室温后，将介质浓缩，并将获得的残余物 溶于800mL的EtOAc，连续用水(2× 200mL)、饱和NaHCO₃溶液(2× 200mL) 和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、然后在减压下浓缩并通过硅 胶柱色谱纯化，用梯度为0至5％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得到11.9g 的6-氯吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，其为白色粉末的形式。

产率＝92％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.5(m，5H)；4.2(m，5H)；3.0(dd， 2H)；1.0(t，6H)。

24.2.6-肼基吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯

按照实施例5.2所述的方法，由11.9g(52.26mmol)的6-氯吡啶-3-甲酸 2，2-二甲基丙基酯起始，得到4.3g的6-肼基吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯， 其为白色粉末的形式。

产率＝37％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.15(d，1H)；6.9(d， 1H)；4.0(s，2H)；3.5(bs，1H)；1.0(s，9H)。

24.3.6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基]吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯

按照实施例1.3所述的方法，由0.3g(1.34mmol)的6-肼基吡啶-3-甲酸 2，2-二甲基丙基酯和0.26g(1.34mmol)的3-氧代-2-(吡啶-3-基甲基)丁酸甲酯 起始，得到185mg的6-[5-氧代-4-(吡啶-3-基甲基)-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基] 吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，其为白色固体的形式。

产率＝38％

m.p.(℃)＝160

M＝C₂₀H₂₂N₄O₃＝366；M+H＝367；方法2：Tr＝1.01分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.9(s，1H)；8.8(s， 1H)；8.7(d，1H)；8.5(d，1H)；8.4(d，1H)；8.3(d，1H)；8.0(t，1H)7.9(s，1H)； 3.9(s，2H)；3.8(s，2H)；1.0(s，9H)。

实施例25：3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3- 二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸甲酯(表I的化合物121)

25.1.3-苯基戊二酸二乙酯

将6g(28.8mmol)的3-苯基戊二酸和7.9mL(109.5mol)氯化亚砜的混合 物在80℃加热1小时。然后将介质浓缩，并在0℃将获得的固体分次加入 至8mL的EtOH中。然后将介质在80℃加热30分钟。冷却至室温后，将 介质浓缩，并将获得的残余物溶于400mL的DCM中，连续用饱和NaHCO₃溶液(2×100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥，然后在减压 下浓缩。得到6.97g的3-苯基戊二酸二乙酯，其为粉末的形式，其不经进一 步纯化直接用于以下步骤。

产率＝91.5％。

25.2.2-甲酰基-3-苯基戊二酸二乙酯

按照实施例14.2所述的方法，由3g(11.35mmol)的3-苯基戊二酸二乙 酯起始，得到0.23g的2-甲酰基-3-苯基戊二酸二乙酯，其为黄色油状物的形 式。

产率＝7％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)10.9(s，1H)；7.7(d，1H)；7.3-7.1 (m，5H)；4.5(t，1H)；4.0(q，4H)；3.0(m，2H)；1.0(m，6H)。

25.3.3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸盐

按照实施例22.5和22.6的方法，由0.23g(0.79mmol)的2-甲酰基-3-苯 基戊二酸二乙酯和0.21g(0.79mmol)的N-环戊基-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰 胺起始，得到0.38g的3-(1-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧化 -1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸盐，其为粉末的形式。

产率＝89％。

25.4.3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸甲酯

按照实施例22.7所述的方法，由0.38g(0.78mmol)的3-(2-{5-[环戊基(甲 基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸盐起 始，得到0.34g的3-(1-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧化-1H- 吡唑-4-基)-3-苯基丙酸甲酯。

m.p.(℃)＝80

M＝C₂₄H₂₈N₄O₅S＝484；M+H＝485；方法3：Tr＝4.4分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.9(s，1H)；8.7(bs，1H)；8.5(d， 1H)；7.9(s，1H)；7.4(d，1H)；7.3(t，3H)；7.2(t，2H)；4.4(t，1H)；4.3(t，1H)； 3.6(s，3H)；3.2(dd，1H)；3.1(dd，1H)；2.7(s，3H)；1.8-1.4(m，8H)。

实施例26：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-(二 甲基氨基)丙基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐(表I的化合物123)

26.1.N-[3-(苄基氧基)丙基]-6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺

将1g(3.84mmol)的6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺、1.32g(9.59mmol) 的K₂CO₃和0.88mL(4.99mmol)的[(3-溴丙氧基)甲基]苯在8mL无水DMF 中的混合物在40℃加热12小时。冷却至室温后，将介质溶于300mL的 EtOAc，连续用水(2×100mL)、饱和NaHCO₃溶液(100mL)和饱和食盐水(100 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓缩和通过硅胶柱色谱纯化，用梯 度为0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。因此获得1.65g的N-[3-(苄基 氧基)丙基]-6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺，其为油状物的形式。

产率＝99％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.85(s，1H)；8.1(d，1H)；7.5(d，1H)； 7.4-7.3(m，5H)；4.5(s，2H)；4.2(m，1H)；3.6(t，2H)；3.2(dd，2H)；2.1(m，2H)； 1.6-1.3(m，8H)。

26.2.N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例5.2所述的方法，由1.55g(3.79mmol)的N-[3-(苄基氧基) 丙基]-6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺起始，得到1.5g的N-[3-(苄基氧基)丙 基]-N-环戊基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色固体的形式。

产率＝90％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.6(s，1H)；8.4(bs，1H)；7.95(d，1H)； 7.85(d，1H)；7.5-7.3(m，5H)；6.9(d，1H)；6.6(bs，1H)；4.5(s，2H)；4.2(m，1H)； 3.6(t，2H)；3.2(dd，2H)；2.1(m，2H)；1.6-1.3(m，8H)。

26.3.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由0.19g的2-苄基-3-氧代丙酸甲酯和0.4g 的N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺起始，得到0.29g 的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊基 吡啶-3-磺酰胺，其为米色固体的形式。

产率＝55％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(bs， 1H)；8.4(d，1H)；7.7(s，1H)；7.4-7.1(m，10H)；4.5(s，2H)；4.2(m，1H)；3.6 (s，2H)；3.5(t，2H)；3.2(t，2H)；2.0(m，2H)；1.6-1.2(6H)。

26.4.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-(3-羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺

在-78℃在氩气中，向150mg(0.27mmol)的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢 -1H-吡唑-1-基)-N-[3-(苄基氧基)丙基]-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺在2mL的 DCM中的溶液中滴加0.82mL(0.82mmol)的三溴化硼(1M的DCM溶液)。 在-78℃继续搅拌1小时，然后在0℃加入2mL的MeOH。将介质溶于40mL 的DCM，连续用饱和NaHCO₃溶液(30mL)和饱和食盐水(30mL)洗涤，经 Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓缩并通过硅胶柱色谱纯化，用9/1的 DCM/MeOH混合物洗脱。得到106mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡 唑-1-基)-N-环戊基-N-(3-羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺，其为粉末的形式。

产率＝85％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.6(bs，1H)；8.4(d， 1H)；7.7(s，1H)；7.4(m，5H)；7.3(m，1H)；4.5(t，1H)；4.2(m，1H)；3.6(s，2H)； 3.5(q，2H)；3.2(t，2H)；1.8(m，2H)；1.5-1.2(6H)。

26.5.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-(二甲基氨基)丙基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐

在氩气中在0℃，向82mg(0.18mmol)的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基)-N-环戊基-N-(3-羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺和50μL(0.36mmol)的 Et₃N在0.5mL无水DCM中的溶液中加入27μL(0.36mmol)甲磺酰氯；允许 温度逐渐回升至室温，继续搅拌1小时。将介质溶于20mL的DCM，连续 用水(2×10mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，然后在减压下浓 缩。在密封管中，将获得的残余物(110mg黄色油状物)溶于2mL的DCM中， 然后用向溶液中鼓泡的二甲胺气流处理1分钟。然后将介质在60℃加热11 小时。冷却至室温后，将介质浓缩，并将获得的残余物在Et₂O/CH₃CN混合 物中研磨。将形成的沉淀过滤，用戊烷冲洗，在减压下干燥，然后在加入1 当量的1N HCl后冷冻干燥。因此获得57mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H- 吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-(二甲基氨基)丙基]吡啶-3-磺酰胺盐酸盐，其为冻 干物的形式。

产率＝88％

m.p.(℃)＝230

M＝C₂₅H₃₃N₅O₃S＝483；M+H＝484；方法2：Tr＝1.1分钟

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；10.8(bs，1H)；8.9 (s，1H)；8.8(s，1H)；8.5(d，1H)；7.8(s，1H)；7.4(m，5H)；7.3(m，1H)；4.5(m， 1H)；4.2(m，1H)；3.6(s，2H)；3.3(t，2H)；3.2(q，2H)；2.7t(s，6H)；2.0(m，2H)； 1.6-1.3(6H)。

实施例27：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡 啶-3-磺酰胺(表I的化合物93)

27.1.2-苄基-3-氧代丙酸甲酯

在氩气中向3g(18.3mmol)的3-苯基丙酸甲酯和3.57mL(54.8mmol)的 甲酸甲酯在36mL甲苯中的混合物中连续滴加54.8mL(54.8mmol)的1M的 TiCl₄的甲苯溶液、0.17mL(0.91mmol)三氟甲磺酸三甲基硅酯和19.6mL (82.2mmol)的三丁基胺。然后将介质在60℃加热2小时30分钟，并在室温 搅拌12小时。

将反应介质用200mL水进行水解，并用200mL的Et₂O萃取。将有机 相经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。得到3.12g的2-苄基-3-氧代丙 酸甲酯，其为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝87％。

27.2.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

将0.38g(1.3mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和0.25g (1.3mmol)的2-苄基-3-氧代丙酸甲酯在2mL的AcOH/MeOH混合物(1/1)中 的混合物在80℃加热4小时。然后将介质在减压下浓缩，将获得的残余物 在Et₂O/戊烷混合物(1/1)中固化，然后过滤，并在减压下干燥。在室温，将 获得的440mg固体分次加入至22mg(0.96mmol)钠在1mL的MeOH中的 溶液中，然后在室温连续搅拌3小时。然后将反应混合物在减压下浓缩，溶 于10mL水，然后通过加入AcOH酸化至pH 3-4。然后将获得的沉淀过滤， 用戊烷洗涤，然后从EtOH中重结晶，并干燥。因此获得245mg的6-(4-苄 基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色 粉末的形式。

产率＝59％

m.p.(℃)＝180

M＝C₂₃H₂₂N₄O₃S＝434；M+H＝435；方法2：Tr＝1.35分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.5(s， 1H)；8.1(d，1H)7.7(s，1H)；7.5-7.1(m，10H)；3.7(q，2H)；3.6(s，2H)；1.0(t， 3H)。

实施例28：6-(4-苄基-5-氧代-3-三氟甲基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙 基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物83)

28.1.2-苄基-4，4，4-三氟-3，3-二羟基丁酸甲酯

在氩气中，向675mg(29.4mmol)钠在15mL无水MeOH中的溶液滴加 3.73mL(29.4mmol)的3，3，3-三氟丙酸甲酯。在室温搅拌30分钟后，加入3.5 mL溴苄，然后将介质在70℃加热12小时。然后将反应混合物在减压下浓 缩。将获得的残余物溶于100mL的EtOAc，用50mL饱和食盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱纯化，用环己烷/EtOAc 混合物(85/15)洗脱后，得到3.4g的2-苄基-4，4，4-三氟-3，3-二羟基丁酸甲酯， 其为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝37％。

28.2.6-(4-苄基-5-氧代-3-三氟甲基-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

将1g(3.59mmol)的2-苄基-4，4，4-三氟-3，3-二羟基丁酸甲酯、1.05g(3.59 mmol)的N-乙基-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和1g的分子筛在8mL的 MeOH中的混合物在90℃加热12小时。在室温，将反应介质溶于30mL 甲苯，在Dean-Stark装置中回流12小时。然后将反应介质过滤和在减压下 浓缩，然后将获得的残余物溶于50mL的DCM中，用1N HCl溶液(2×50mL) 洗涤，经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。将因此获得的固体从EtOH 重结晶。得到224mg的6-(4-苄基-5-氧代-3-三氟甲基-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色结晶的形式。

产率＝12％

m.p.(℃)＝186

M＝C₂₄H₂₁F₃N₄O₃S＝502；M+H＝503；方法3：Tr＝4.4分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.7(s，1H)；8.25(d， 1H)；8.0(d，1H)；7.5-7.1(m，10H)；3.9(s，2H)；3.7(q，2H)；1.0(t，3H)。

实施例29：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[(1R，3S)-3-(羟 基甲基)环戊基]-N-甲基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物138)

29.1.[(1R，3S)-3-(羟基甲基)环戊基]氨基甲酸叔丁酯

在-20℃向2g(8.7mmol)的(1S，3R)-3-[(叔-丁氧基羰基)氨基]环戊烷甲酸 和1.33mL(9.6mmol)的Et₃N在20mL无水THF中的溶液中滴加1.2mL(9.2 mmol)氯甲酸异丁酯。将介质在-20℃搅拌45分钟，然后滤除形成的不溶物 质。在-10℃将1g(26.2mmol)硼氢化钠在THF/H₂O混合物(16mL/4mL)中 的溶液滴加至该滤液中，然后继续搅拌，同时允许温度回升至室温。然后缓 慢加入100mL的0.1N HCl，并将反应介质用2×200mL的EtOAc萃取，经 Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH 混合物(95/5)洗脱后，得到1.4g的[(1R，3S)-3-(羟基甲基)环戊基]氨基甲酸叔 丁酯，其为油状物的形式。

产率＝77％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：4.5(bs，1H)；3.9(m，1H)；3.5(d，2H)； 2.1(m，2H)；1.8-1.7(m，3H)；1.5(s，2H)；1.4(s，9H)；1.0(m，1H)。

29.2.{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}氨基甲酸叔丁酯

在氩气中在室温，向1.4g(6.7mmol)的[(1R，3S)-3-(羟基甲基)环戊基]氨 基甲酸叔丁酯在20mL无水THF中的溶液中分次加入0.27g(6.7mmol)氢化 钠(60％，在油中)。搅拌45分钟后，将介质冷却至0℃，并加入0.8mL(6.7 mmol)溴苄。在室温搅拌1小时后，将介质用30mL水进行水解，并用2×100 mL的EtOAc萃取，经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱 纯化，用99/1的DCM/MeOH混合物洗脱。得到1.53g的{(1R，3S)-3-[(苄基 氧基)甲基]环戊基}氨基甲酸叔丁酯，其为油状物的形式。

产率＝75％。

29.3.(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊胺盐酸盐

在0℃向1.52g(5mmol)的{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}氨基甲 酸叔丁酯在20mL的DCM中的溶液中加入5mL(20mmol)的4N的HCl的 二烷溶液。然后将介质在室温搅拌12小时，然后在减压下浓缩。将获得 的残余物在20mL的Et₂O中固化，过滤和在真空下干燥。得到1g的 (1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊胺盐酸盐，其为粉末的形式。

产率＝83％。

29.4.N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6-氯吡啶-3-磺酰胺

按照实施例14.1的方法，由1g的(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊胺盐 酸盐和1g的6-氯吡啶-3-磺酰氯起始，得到1.2g的N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基) 甲基]环戊基}-6-氯吡啶-3-磺酰胺，其为粉色粉末的形式。

产率＝83％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.6(s，1H)；7.8(dd，1H)；7.4-7.3(m， 5H)；7.2(s，1H)；5.8(d，1H)；4.5(dd，2H)；3.7(m，1H)；3.3(m，2H)；2.2(m， 1H)；1.9(m，1H)；1.6-1.5(m，4H)；1.2(dd，1H)。

29.5.N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6-氯-N-甲基吡啶-3-磺酰胺

按照方法23.2，由0.66g的4N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6- 氯吡啶-3-磺酰胺和0.22mL碘甲烷起始，得到0.58g的N-{(1R，3S)-3-[(苄基 氧基)甲基]环戊基}-6-氯-N-甲基吡啶-3-磺酰胺，其为油状物的形式。

产率＝86％。

29.6.N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺

按照方法5.2，由0.58g的N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6-氯 -N-甲基吡啶-3-磺酰胺和0.15mL水合肼起始，得到0.49g的 N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺。

产率＝86％。

29.7.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}吡啶-3-磺酰胺

按照实施例1.3所述的方法，由0.495g的N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲 基]环戊基}-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺和0.244g的2-苄基-3-氧代丙酸甲 酯起始，得到301mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基)-N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}吡啶-3-磺酰胺，其为粉末的形式。

产率＝44％。

29.8.6-(4-苄基-5-氧代-25-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[(1R 3S)-3-(羟基甲基)环戊基]-N-甲基吡啶-3-磺酰胺

向0.3g(0.57mmol)的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1- 基)-N-{(1R，3S)-3-[(苄基氧基)甲基]环戊基}吡啶-3-磺酰胺在2mL冷却至 -78℃的DCM中的溶液中加入1.7mL三溴化硼。然后将温度升至0℃并在 0℃继续搅拌1小时。然后在-10℃加入10mL的MeOH，并将介质在减压 下浓缩。将介质溶于100mL的DCM，连续用饱和NaHCO₃溶液(2×20mL) 和饱和食盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，然后通过硅胶 柱色谱纯化，用90/10的DCM/MeOH混合物洗脱。得到126mg的6-(4-苄 基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-[(1R，3S)-3-(羟基甲基)环戊基]-N-甲基 吡啶-3-磺酰胺，其为粉末的形式。

产率＝50％

α²⁰_D＝-12(c＝0.1；MeOH)

m.p.(℃)＝108

M＝C₂₂H₂₆N₄O₄S＝442；M+H＝443；方法2：Tr＝1.09分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.7(bs，1H)；8.4(d， 1H)；7.8(bs，1H)；7.4-7.3(m，5H)；7.1(m，1H)；4.5(bs，1H)；4.4(m，1H)； 3.6(bs，2H)；3.4(m，2H)；2.8(s，3H)；1.9(m，1H)；1.6-1.1(m，6H)。

实施例30：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-羟 基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物147)

30.1.4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基酯

向冷却至0℃的1.5g(10.26mmol)的(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5- 基)甲醇和1.71mL的Et₃N在15mL的DCM中的溶液中加入2.15g(11.3 mmol)甲苯磺酰氯。将介质温热至室温，并继续搅拌1小时。将介质溶于100 mL的DCM，连续用0.1N HCl(2×20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，经 Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用99/1的 DCM/MeOH混合物洗脱。得到3g的4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环 己烷-5-基)甲基酯，其为无色油状物的形式。

产率＝97％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.8(d，2H)；7.3(d，2H)；4.1(d，2H)； 3.9(dd，2H)；3.6(dd，2H)；2.4(s，3H)；1.9(m，1H)；1.4(s，3H)；1.2(s，3H)。

30.2.N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基]环戊胺

将1.5g(5mmol)的4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲 基酯和10mL(101mmol)环戊胺的混合物在80℃加热12小时。将介质在减 压下浓缩，然后溶于200mL的Et₂O，用水(2×50mL)洗涤，然后经Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。得到1g的N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基) 甲基]环戊胺，其为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝100％。

30.3 N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺

该化合物按照方法14.1和14.3制备，由N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己 烷-5-基)甲基]环戊胺、6-氯吡啶-3-磺酰氯和水合肼起始。

产率：70％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；8.25(s，1H)；8.0(s， 1H)；7.8(d，1H)；7.7(s，1H)；7.2(d，1H)；6.8(d，1H)；4.4(s，1H)；4.2(m，1H)； 3.9(dd，2H)；3.6(dd，2H)；3.0(dd，2H)；2.0(m，1H)；1.9(d，2H)；1.6-1.4(m， 4H)；1.3(s，3H)；1.2(s，3H)。

30.4.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-羟基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺

按照实施例11所述的方法，由0.485g的N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3- 二氧杂环己烷-5-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺和0.242g的2-苄基-3-氧代丙 酸甲酯起始，得到79mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊 基-N-[3-羟基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺，其为粉末的形式。

产率＝14％

m.p.(℃)＞260

M＝C₂₄H₃₀N₄O₅S＝486；M+H＝487；方法2：Tr＝2.09分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(t， 2H)；8.25(d，1H)；7.7(s，1H)；7.4-7.2(m，5H)；4.3(q，2H)；3.9(m，2H)；3.0 (m，1H)；2.8(m，1H)；2.7(s，3H)；1.6-1.3(m，8H)。

实施例31：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基 -N-[(2R)-2，3-二羟基丙基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物142)

按照实施例30所述的方法，该化合物由[(4R)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环 戊烷-4-基]甲醇、环戊胺、6-氯吡啶-3-磺酰氯和2-苄基-3-氧代丙酸甲酯获得。

m.p.(℃)＝184

(c＝0.1；DMSO)

M＝C₂₃H₂₈N₄O₅S＝472；M+H＝473；方法2：Tr＝1.39分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(bs， 1H)；8.4(d，1H)；7.8(s，1H)；7.3-7.1(m，5H)；4.8(s，1H)；4.6(s，1H)；4.2(m， 1H)；3.8(s，1H)；3.6(s，2H)；3.3(m，2H)；2.9(m，1H)；1.6-1.3(m，9H)。

实施例32：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基 -N-[(2S)-2，3-二羟基丙基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物148)

按照实施例30所述的方法，该化合物由[(4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环 戊烷-4-基]甲醇、环戊胺、6-氯吡啶-3-磺酰氯和2-苄基-3-氧代丙酸甲酯获得。

m.p.(℃)＝184

(c＝0.15；DMSO)

M＝C₂₃H₂₈N₄O₅S＝472；M+H＝473；方法2：Tr＝1.39分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(bs， 1H)；8.4(d，1H)；7.8(s，1H)；7.3-7.1(m，5H)；4.8(s，1H)；4.6(s，1H)；4.2(m， 1H)；3.8(s，1H)；3.6(s，2H)；3.3(m，2H)；2.9(m，1H)；1.6-1.3(m，9H)。

实施例33：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(2，3-二羟基丙 基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的合物143)

32.1.6-氯-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照方法14.1，由1g的6-氯吡啶-3-磺酰氯和0.86mL苯胺起始，得到 1.15g的6-氯-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色固体的形式。

产率＝91％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：10.5(bs，1H)；8.7(s，1H)；8.1(dd， 1H)；7.75(dd，1H)；7.3(m，2H)；7.2(m，3H)。

32.2.6-氯-N-苯基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰胺

按照方法23.2，由1.15g的6-氯-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和0.37mL的烯 丙基溴起始，得到1.29g的6-氯-N-苯基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰胺，其 为黄色固体的形式。

产率＝97％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.6(s，1H)；8.0(dd，1H)；7.9(dd， 1H)；7.4(m，3H)；7.2(m，2H)；5.7(m，1H)；5.2(dd，1H)；5.1(dd，1H)；4.3(d， 2H)。

32.3.6-氯-N-(2，3-二羟基丙基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

在室温向1.3g(4.2mmol)的6-氯-N-苯基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰 胺在17mL的tBuOH和水的混合物(1/1)中的溶液中加入1.37g(11.7mmol) 的NMO和0.52mL(0.04mmol)的2.5％OsO₄的tBuOH溶液。继续搅拌12 小时。然后将介质用200mL水稀释，并用Et₂O(2×100mL)萃取，经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下浓缩。得到1.14g的6-氯-N-(2，3-二羟基丙基)-N- 苯基吡啶-3-磺酰胺，其为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步 骤。

产率＝80％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；7.8(d，1H)；7.4-7.3(m， 4H)；7.1(d，2H)；3.7-3.5(m，3H)；2.5(bs，1H)；2.0(bs，1H)；(m，2H)。

32.4.6-氯-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

将0.67g(1.96mmol)的6-氯-N-(2，3-二羟基丙基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺、 0.53mL(4.3mmol)的2，2-二甲氧基丙烷和37mg的pTsOH在4mL的DMF 中的混合物在室温搅拌3小时。将介质溶于100mL的EtOAc，用50mL饱 和NaHCO₃溶液和50mL水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥、过滤，并在减压下 浓缩。得到0.54g的6-氯-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-N-苯 基吡啶-3-磺酰胺，其为棕色固体的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步 骤。

产率＝73％。

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；7.7(d，1H)；7.4(d，1H)； 7.3(m，3H)；7.0(d，2H)；4.1(m，1H)；3.9(m，1H)，3.8(dd，2H)；3.5(m，1H)； 1.3(s，3H)；1.2(s，3H)。

32.5.N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照方法5.2，由0.54g的6-氯-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基) 甲基]-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和30μL水合肼起始，得到0.53g的N-[(2，2-二 甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色 固体的形式。

产率＝99％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.6(s，1H)；8.1(s，1H)；7.5(d， 1H)；7.4(m，3H)；7.2(d，2H)；6.8(bs，1H)；1.3(s，3H)；1.2(s，3H)。

32.6 6-(4-苄基-5-氧代-25-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(23-二羟基丙基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺

按照方法1.3，由0.2g(0.53mmol)的N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷 -4-基)甲基]-6-肼基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺和0.1g的2-苄基-3-氧代丙酸甲酯 起始，得到127mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-(2，3-二羟 基丙基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体的形式。

产率＝50％

m.p.(℃)＝174

M＝C₂₄H₂₄N₄O₅S＝480；M+H＝481；方法2：Tr＝1.39分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.5(bs，1H)；8.4(s， 1H)；8.1(d，2H)；7.8(s，1H)；7.4-7.2(m，7H)；7.2-7.1(m，3H)；4.7(d，1H)； 4.5(t，1H)；3.6(dd，2H)；3.4(m，4H)。

实施例33：3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二 氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺(表I的化合物146)

33.1 3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺

在0℃向200mg(0.43mmol)的3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基]吡啶 -2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基丙酸盐、0.3mL(1.7mmol)的 DIEA和30μL(0.43mmol)的2，2，2-三氟乙基胺在1mL的DCM中的溶液中 加入207mg(0.64mmol)的TBTU。将介质在室温搅拌12小时。然后加入另 外0.3mL的2，2，2-三氟乙基胺，并将介质在40℃加热6小时。将介质溶于 20mL的DCM，连续用水(2×10mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥和在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至10％EtOAc 的环己烷/EtOAc洗脱。因此获得32mg的3-(2-{5-[环戊基(甲基)氨基磺酰基] 吡啶-2-基}-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰 胺，其为粉末的形式。

产率＝14％

m.p.(℃)＝80

M＝C₂₅H₂₈F₃N₅O₄S＝551；M+H＝552；方法2：Tr＝1.21分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(t， 2H)；8.25(d，1H)；7.7(s，1H)；7.4-7.2(m，5H)；4.3(q，2H)；3.9(m，2H)；3.0 (m，1H)；2.8(m，1H)；2.7(s，3H)；1.6-1.3(m，8H)。

实施例34：6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-羟 基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物147)

34.1.4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基酯

向冷却至0℃的1.5g(10.26mmol)的(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5- 基)甲醇和1.71mL的Et₃N在15mL的DCM中的溶液中加入2.15g(11.3 mmol)甲苯磺酰氯。允许介质温热至室温，并继续搅拌1小时。将介质溶于 100mL的DCM，连续用0.11N HCl(2×20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤， 经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，然后通过硅胶柱色谱纯化，用99/1的 DCM/MeOH混合物洗脱。得到3g的4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环 己烷-5-基)甲基酯，其为无色油状物的形式。

产率＝97％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)：7.8(d，2H)；7.3(d，2H)；4.1(d，2H)； 3.9(dd，2H)；3.6(dd，2H)；2.4(s，3H)；1.9(m，1H)；1.4(s，3H)；1.2(s，3H)。

34.2.N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基]环戊胺

将1.5g(5mmol)的4-甲基苯磺酸(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲 基酯和10mL(101mmol)环戊胺的混合物在80℃加热12小时。将介质在减 压下浓缩，然后溶于200mL的Et₂O，用水(2×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥， 并在减压下浓缩。得到1g的N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基] 环戊胺，其为油状物的形式，其不经进一步纯化直接用于以下步骤。

产率＝100％。

34.3.N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷-5-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺

该化合物按照方法14.1和5.2制备，由N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己 烷-5-基)甲基]环戊胺、6-氯吡啶-3-磺酰氯和水合肼起始。

产率：70％

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；8.25(s，1H)；8.0(s， 1H)；7.8(d，1H)；7.7(s，1H)；7.2(d，1H)；6.8(d，1H)；4.4(s，1H)；4.2(m，1H)； 3.9(dd，2H)；3.6(dd，2H)；3.0(dd，2H)；2.0(m，1H)；1.9(d，2H)；1.6-1.4(m， 4H)；1.3(s，3H)；1.2(s，3H)。

34.4.6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊基-N-[3-羟基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺

按照实施例11所述的方法，由0.485g的N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3- 二氧杂环己烷-5-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺和0.242g的2-苄基-3-氧代丙 酸甲酯起始，得到79mg的6-(4-苄基-5-氧代-2，5-二氢-1H-吡唑-1-基)-N-环戊 基-N-[3-羟基-2-(羟基甲基)丙基]吡啶-3-磺酰胺，其为粉末的形式。

产率＝14％

m.p.(℃)＞260

M＝C₂₄H₃₀N₄O₅S＝486；M+H＝487；方法2：Tr＝2.09分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.6(t， 2H)；8.25(d，1H)；7.7(s，1H)；7.4-7.2(m，5H)；4.3(q，2H)；3.9(m，2H)；3.0 (m，1H)；2.8(m，1H)；2.7(s，3H)；1.6-1.3(m，8H)。

实施例35：3-{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H- 吡唑-4-基}-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯(表I的化合物154)

35.1.(2Z)-3-(吡啶-3-基)戊-2-烯二酸二乙基酯

在氩气气流下，向15mL(85.6mmol)的(2E)-戊-2-烯二酸二乙基酯在5 mL无水DMF中的溶液中加入0.62g(2.8mmol)的Pd(OAc)₂、1.7g(5.56mmol) 的P(OTol)₃和5.5mL(39.7mmol)的Et₃N，然后将介质加热至40℃，并加入 4mL(39.75mmol)的3-溴吡啶。然后将介质在90℃加热24小时，然后溶于 100mL的EtOAc，用100mL水洗涤，经Na₂SO₄干燥、在减压下浓缩，并 通过硅胶柱色谱纯化，用梯度为0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc洗脱。得 到9.12g的(2Z)-3-(吡啶-3-基)戊-2-烯二酸二乙酯，其为黄色蜡的形式。

产率＝87％

¹H NMR，CDCl₃，400MHz，δ(ppm)8.8(s，1H)；8.6(d，1H)；7.8(dd，1H)； 7.4(dd，1H)；6.3(s，1H)；4.2(q，2H)；4.15(s，2H)；4.1(q，2H)；1.3(t，3H)； 1.2(t，3H)。

35.2.2-甲酰基-3-(吡啶-3-基)戊二酸二乙酯

该化合物按照方法21.2和14.2制备，由(2Z)-3-(吡啶-3-基)戊-2-烯二酸 二乙酯起始。

产率：18％。

35.3.3-{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基)吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯

按照方法22.5至22.7，由88mg的2-甲酰基-3-(吡啶-3-基)戊二酸二乙 酯和74mg的N-叔丁基-6-肼基吡啶-3-磺酰胺起始，然后在1当量的0.1N HCl 的存在下冷冻干燥获得的化合物，得到17mg的3-{2-[5-(叔丁基氨基磺酰基) 吡啶-2-基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-吡唑-4-基}-3-(吡啶-3-基)丙酸甲酯盐酸盐，其 为绿色冻干物的形式。

产率＝17％

m.p.(℃)＝146

M＝C₂₁H₂₅N₅O₅S＝459；M+H＝460；方法2：Tr＝1.19分钟。

¹H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.5(bs，1H)；8.8(s，1H)；8.7(bs， 1H)；8.6(d，1H)；8.4(bs，1H)；8.3(d，1H)；8.2(d，1H)；7.9(s，1H)；7.8(t，1H)； 7.6(s，1H)；4.3(t，1H)；3.5(s，3H)；3.2(m，2H)；1.0(s，9H)。

下面的表I和表II例示了本发明化合物的一些实施例的化学结构和物 理性质。

表I例示了本发明的式(I)化合物，其中R表示-SO₂-NR3R4。所述化合 物在下文提及为式(I’)化合物。

表II例示了本发明的式(I)化合物，其中R如所述表格所定义。所述化 合物在下文提及为式(I”)化合物。

下面的表I和II例示了本发明化合物的一些实施例的化学结构和物理 性质。

在这些表中：

-在“盐”栏，“-”表示化合物为游离碱形式，而“CF₃COOH”、“HCl”和“Na” 分别表示化合物为三氟乙酸盐、盐酸盐和钠盐的形式；

-在其他栏中，“-”是指所考虑的取代基不出现在分子上；

-Me、Et、n-Pr、i-Pr、n-Bu和i-Bu分别表示甲基、乙基、正丙基、异丙基、 正丁基和异丁基；

-Ph和Bn分别表示苯基和苄基；

-“m.p.”栏指示所考虑的化合物的熔点，以℃计；

-质谱鉴定的峰MH⁺，以及使用的和先前详细说明的高效液相色谱分析方 法分别在“LC/MS”栏和“方法”栏中指出。

表I

表II

根据本发明的化合物接受药理试验以测定它们的性质，且特别是：

-直接测量蛋白HIF1-α的稳定的体外测试，该蛋白HIF1-α为在细胞中 组成性表达但在正常氧条件下被泛素/蛋白酶体系统降解的转录因子；

-用于在He3pB细胞中测量VEGF和EPO的分泌的功能试验，VEGF和 EPO为肝细胞中HIF1-α活化的两个标记。

所述两种测试如下所述。

1.在HEKEA细胞中测量HIF1-α的稳定

1.1目的

HIF为参与细胞适应缺氧的转录因子。该转录因子最小为由两种蛋白， ARNT和HIF1-α形成的杂二聚体。ARNT在细胞中组成性且稳定地表达， 且转录复合物调节的大多数通过蛋白HIF1-α的稳定进行。实际上，该蛋白， 在常氧条件下(20％，约等于环境的氧值)尤其在两种脯氨酸(人蛋白的脯氨 酸402和564)上经HIF脯氨酰-羟化酶羟基化，导致von Hippell Lindau(VHL) 蛋白的结合。VHL与HIF1-α的结合然后通过泛素/蛋白酶体系统导致HIF1-α 的降解。在缺氧下(在细胞测试中O₂＜5％)，HIF脯氨酰-羟化酶被抑制，其 反映为细胞中HIF1-α蛋白的量的增加。该蛋白然后可与ARNT结合以转移 至核中并活化其靶基因。

由于HIF活化的基因参与细胞对缺氧和组织对缺血的适应性反应，因此 该目的在于鉴别和表征在细胞中稳定HIF1-α的化合物，以放大或模拟其有 益作用。

存在许多测试，其描述了通过报道基因系统(HRE-荧光素酶)或通过测量 HIF-诱导的蛋白(例如VEGF或EPO)间接测量HIF的活性。而且，允许直接 测量细胞中HIF1-α蛋白的量的唯一测试为使用抗体的测试，例如包括消耗 细胞和时间的细胞提取相(总溶解产物或核萃取物)的蛋白印迹，因此限制化 合物筛选能力。因此该目的在于开发一种灵敏的筛选测试，适合于384-孔板， 用于直接测量细胞核中HIF1-α蛋白的量。该测试在HEK细胞(来自肾腺癌 的人上皮细胞)中建立。

1.2测试原理

该测试为基于酶互补原理的细胞测试，本文使用的酶为β-半乳糖苷酶。 HEKEA细胞为稳定表达(且在核中受限制)突变体β-半乳糖苷酶(Ω片段，也 已知为EA)的HEK细胞(DiscoverX销售的系列)。该构造使得仅当包含 Prolabel互补片段的蛋白迁移至核中时可获得β-半乳糖苷酶活性。

在该情况下，包含Prolabel片段的感兴趣蛋白为在两个脯氨酸402和564 被丙氨酸替代的突变的HIF1-α或HIF1-α，其C-端通过分子生物学(Clontech 销售的DiscoverX载体)与小互补肽片段(Prolabel或ED，约4kDa)融合。然 后将编码嵌合蛋白HIF1-α_Prolabel的载体转染至HEKEA细胞以得到稳定的 克隆(HEKEA_HIF1-αPLBL)。

将细胞进行缺氧处理或用潜在HIF活化剂的化合物处理后获得的C-端 Prolabel-“标记的”HIF1-α蛋白的量通过向细胞中添加含β-半乳糖苷酶的化 学发光底物的溶胞缓冲液测量。

β-半乳糖苷酶活性的测量与Prolabel的量成比例，从而与迁移至细胞核 中的HIF1-α的量成比例。

在内部平行地进行实验以证实单独的Prolabel片段在细胞中不稳定，从 而不允许测量任何活性。

1.3实验方案

1.3.1实验计划

1)在D0接种细胞

2)在常氧下粘附24小时

3)在D+1制备和添加产物(Biomek 2000和FX)

4)在常氧培养6小时

5)对板读数(通过发光)

1.3.2接种细胞

用Multidrop在白色不透明底的384-孔板(Greiner ref 3704)中于30μl培 养基(1％FCS)中以10000细胞/孔(细胞板)接种细胞。

1.3.3处理

●稀释板(DL板)的制备

测试产物以3×10^-2M在100％DMSO中制备，然后在含有0.1％FCS(10 μl在990μl的MEM中)的培养基中稀释至3×10^-4M。然后手动将其放置在 称为稀释板(dl)的圆底96-孔板的第12列(各个化合物各200μl)。然后用 Biomek 2000制备3×10^-4M至10^-9M的完整DL板(程序：连续10点的范围)。 对于参照和对照，将含有0.1％FCS的100μl的DMEM加入至第1列，将 100μl的去铁胺10^-3M加入至第2列的孔ABCD，以及将100μl的去铁胺 5×10^-3M加入至第2列的孔EFGH。

●细胞板中的DL板分布

用Biomek FX 96从DL板移取3.3μL，一式两份放入水平的(第1至24 列)各384-孔细胞板(HEKEA_HIF1αPLBL细胞板)中。

然后在培养箱中在37℃(环境O₂，6％CO₂)将细胞放置6小时。

1.3.4β-半乳糖苷酶活性的测量

所用的试剂盒为Prolabel的化学发光试剂盒(Ref 93-0001 DiscoverX)。

在37℃培养6小时后，加入15μl含有β-半乳糖苷酶底物(19体积的Path  hunter细胞(Path hunter cell)测定缓冲液+5体积的Emarald II溶液+1体积 的Galacton star)的溶胞缓冲液溶解细胞，通过直接将其加入至板中的30μl 培养基中。将板在避光环境培养60分钟，然后用Top Count仪读取发光。然 后用合适的拟合软件计算化合物的EC50值，其在下表III中给出。

化合物对HIF的激活活性通过产生50％最大响应的该化合物的摩尔浓 度给出。

表III

  化合物号   EC50(M)   14   3.8E-06   31   3.0E-06   37   3.2E-06   38   4.7E-06   39   1.8E-06   42   4.8E-06   43   3.1E-06   44   3.1E-06   46   9.6E-06   47   1.1E-06   48   4.3E-06   51   4.4E-06   53   2.6E-06   54   6.4E-06   56   2.1E-06   58   5.7E-06   59   1.7E-06   62   1.6E-05   63   9.2E-06   64   4.3E-06   68   1.5E-06   70   3.5E-06   71   5.0E-06   72   7.5E-06   74   3.7E-06   76   2.0E-06   77   4.8E-06   80   3.3E-06   81   7.5E-06   82   1.5E-06   83   3.3E-06   84   9.9E-06   85   1.8E-06   87   9.8E-06   88   8.8E-07   92   8.6E-07   93   3.5E-07   98B   2.5E-06

1.4附件

1.4.1.HEKEA_HIF1αPLBL细胞的保持

所述细胞在完全培养基(whole medium)(如下)中，在烧瓶T225中在37℃ 在CO₂培养箱中培养。

1.4.2.HEKEA_HIF1αPLBL细胞的培养基

2.Hep3B肝细胞分泌VEGF和EPO的测量

2.1.目的

HIF是一种参与细胞适应缺氧的转录因子。由于被HIF激活的基因参与 了细胞对缺氧和组织对缺血的适应性反应，本目的在于鉴定和表征在细胞中 稳定HIF1α的化合物，以放大或模拟其有益效果。HIF1α在分析EPO基因 启动子后鉴定，其使得该蛋白(HIF1α的第一标记之一)激活。此外，VEGF 还在文献中识别为HIF激活的主要标记之一。因此选择测量这两种蛋白用于 表征Hep3B细胞中的HIF激活剂的化合物。

因此，本目的在于开发一种适用于96-孔板的灵敏的筛选测试，用于直 接测量Hep3B细胞(来源于人肝癌的细胞)上清液中对可能的HIF激活剂响应 的VEGF和EPO的量。

2.2.测试原理

所述测试为用于测量Hep3B细胞上清液中VEGF和EPO的ELISA测 试，所述细胞经缺氧处理或经去铁胺处理作为对照或经可能的HIF激活剂处 理。所述测试适用于96-孔板，使之具有更大的化合物筛选能力。

2.3.实验方案

2.3.1实验计划

1)在D0接种细胞

2)在常氧下粘附6小时

3)制备和加入产物(Biomek 2000和FX)

4)在常氧下培养18小时

5)在D+1在上清液中测定EPO和VEGF

2.3.2接种细胞

在黑色、不透明底的96-孔板(参考Costar 3916)中以30000细胞/孔，在 100μl培养基(10％FCS)中以Multidrop次代培养细胞。

2.3.3处理细胞

●稀释板（DL板)的制备

测试产物以10^-2M在100％DMSO中制备，然后在含有0.1％FCS(6μl 在194μl的MEM中)的培养基中稀释至3×10⁴M。将200μl各个化合物放 置在96-孔板的第12列。用Biomek 2000制备3×10^-4M至3×10^-8M的稀释范 围(程序：连续9点的范围)。分别加入100μl的MEM 0.1％FCS和去铁胺 5×10^-3M至第3列的孔A，B，C，D和孔E，F，G，H作为对照。

●细胞板中的DL板分布

将在前一天接种在96-孔板的细胞培养基更换为90μl含有0.1％FCS的 培养基，并用FX 96从96-孔DL板中分配10μl至细胞板中。

将如此处理的细胞板在培养箱中在37℃(环境O₂，6％CO₂)放置18小时。

2.3.3EPO和VEGF的测定

在96-孔板中用可能的HIF激活剂处理的Hep3B细胞的上清液(80μl)用 多通道移液管回收，用于通过ELISA根据制造商的使用说明书(Kit EPO Mesoscale(refK15122B-2))同时测定VEGF和EPO。然后用合适的拟合软件 计算化合物对EPO和VEGF的EC50值，其在下表IV中给出。

2.4.附件

Hep3B细胞的培养基：

3.结果

化合物对HIF的激活活性通过产生50％最大响应的该化合物的浓度给 出于下表IV中。

表IV

  化合物号   EC50 EPO(M)   EC50 VEGF(M)   14   3.0E-07   -   20   1E-06   1.1E-06   31   2.1E-06   -   34   9E-07   -   37   1.0E-06   -   38   1.0E-06   -   39   2.0E-06   -   42   1.1E-06   1.3E-06   43   1.5E-06   1.7E-06   44   1.9E-06   2.1E-06   46   7.0E-07   1.2E-06   47   2.0E-06   2.8E-06   48   1.1E-06   1.9E-06   51   3.0E-07   4.0E-07   53   9.0E-07   3.2E-06   54   4.5E-07   3.0E-07   56   2E-06   2.5E-06   58   3.2E-06   3.6E-06   59   8.1E-07   6.8E-07   62   9.0E-07   1.0E-06   64   1.4E-06   2.4E-06   68   4.0E-07   5.0E-07   70   2.7E-06   2.9E-06   71   1.6E-06   1.6E-06   72   1.0E-06   1.7E-06   74   3E-07   76   2.0E-07   2.0E-07   77   1.4E-06   1.3E-06   80   4.0E-07   9.0E-07   81   1.2E-06   1.9E-06   82   1E-06   1.2E-06   83   1.4E-06   1.3E-06   84   2.9E-06   3.3E-06   85   2.5E-06   2.5E-06   88   3.0E-07   4.0E-07   92   5.0E-07   5.0E-07   93   4.0E-07   4.0E-07

因此，本发明化合物可用于制备药物，特别是制备为HIF转录因子的激 活剂的药物。

因此，根据另一方面，本发明的一个主题为药物，其包括式(I)化合物， 或式(I)化合物与药学上可接受的酸形成的加成盐。

本发明还涉及药物组合物，其包括本发明的式(I)化合物，或该化合物的 药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。

所述药物在尤其在治疗/预防特别是人中和动物中的心血管疾病、下肢 缺血、心功能不全、源于缺血的冠心病、例如心绞痛或心肌梗塞、动脉硬化、 源于缺血的中风、肺高血压和任何部分或全部血管闭塞导致的病理中具有治 疗用途。

所述药物还可用于治疗/预防青光眼、源于神经变性或其他的肾病或脑 病、以及贫血，或用于促进愈合的药物或缩短术后恢复期的药物，或治疗四 肢无力病症的药物，或在大型外科手术(例如颅或胸部手术，或心脏、颈动 脉或主动脉手术)后用于在自身输血必要时获得血液的药物。

所述化合物尤其在治疗/预防贫血中具有治疗用途。

所述化合物还可在人和动物中，在大型外科手术(例如颅或胸部手术， 或心脏、颈动脉或主动脉手术)后用于在自身输血必要时获得血液的目的。

所述化合物可用于人和动物，作为用于促进愈合的药物或缩短术后恢复 期的药物。

所述化合物可用于人和动物，用于治疗四肢无力病症，尤其包括在老年 人中出现的恶病质。

所述化合物可用于人和动物，用于治疗青光眼、源于神经变性或其他的 肾病或脑病。

最后，本发明所述化合物可用于人和动物，用于治疗源于缺血的心脏或 外周疾病，其经再生性药物以自体和异源方式使用非-胚胎干细胞或成肌细 胞用于治疗目的，不论是作为给药前细胞的治疗还是作为局部给药这些细胞 的同时治疗。

此外，本发明所述化合物可单独使用，或必要时组合一种或多种用于治 疗高血压、心功能不全、糖尿病和贫血的其它活性化合物使用。

例如，提及本发明化合物与一种或多种选自以下的化合物的组合：转化 酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、β阻断剂、盐皮质激素受体拮抗剂、 利尿剂、钙拮抗剂、他汀类和洋地黄苷衍生物。

根据另一方面，本发明涉及药物组合物，其包括作为有效成分的本发明 化合物。所述药物组合物包含有效量的至少一种本发明化合物，或所述化合 物的药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。

所述赋形剂根据药学形式和所需的给药模式，从本领域技术人员已知的 常规赋形剂中选自。

在用于口服、舌下、皮下、肌内、静脉注射、局部(topical)、局部(local)、 气管内、鼻内、经皮或直肠给药的本发明的药物组合物中，上述式(I)的有效 成分或其盐可以以单位给药形式，作为与标准药学赋形剂的混合物向人和动 物给药，用于预防或治疗上述病症或疾病。

合适的单位给药形式包括口服剂型，例如片剂、软和硬明胶胶囊、粉剂、 颗粒剂和口服溶液或悬浮液，舌下、含服、气管内、眼内、鼻内和吸入给药 形式，局部、经皮、皮下、肌内和静脉注射给药形式，直肠给药形式和埋植 剂。对于局部应用，本发明化合物可以霜剂、凝胶剂、软膏剂或洗剂使用。

通过实例的方式，以片剂形式的本发明化合物的单位给药形式可包括 以下成分：

存在特殊情况，其中更高或更低的剂量是合适的；该剂量不背离本发明 的范围。根据常规实践，适合各患者的剂量由医师根据给药模式和所述患者 的体重和响应来确定。

根据另一方面，本发明还涉及用于治疗上述病理的方法，其包括向患者 给药有效量的本发明化合物，或其药学上可接受的盐。