用于治疗骨关节炎的选择性雌激素受体调节剂

摘要

本发明涉及式（A）化合物或其可药用的盐，还涉及式（I）化合物或其可药用的盐。

说明书

大多数用于治疗骨关节炎（“OA”）的市售的治疗药物是以减轻和缓解与OA有关的炎症和疼痛为目标。已批准的OA治疗剂可能是侵害性的，长期使用失效，并且可能不适合治疗所有患者。对于OA患者，希望有新的治疗选择。

业已报道，雌激素和各种选择性雌激素受体调节剂（SERM）的临床前试验在OA关节病模型中显示出抑制疾病的活性。很多SERM分子是业内人士已知的。已经发现很多已知的SERM在骨内具有雌激素激动剂活性，然而，目前尚无SERM被批准用于治疗OA。SERM分子对各种组织的选择性激动剂或拮抗活性会改变SERM的安全和效能特性。例如，在子宫具有激动剂活性的SERM分子可能与不良的阴道出血有关。SERM分子可以在例如骨、乳房和/或子宫中具有选择性激动剂和/或拮抗剂活性。申请人相信，在子宫内提供有效的拮抗剂活性、而在骨中具有SERM激动剂活性的SERM化合物，对治疗OA会特别理想。对于OA征兆或症状具有有益作用，同时又具有合格的安全特性的SERM化合物，会是特别有用的可选择的治疗药物。

美国专利5,728,724（“724专利”）公开了具有[2-(2-噻吩基)-6-羟基苯并噻吩-3-基][4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]甲酮结构的SERM化合物。据称这些化合物可用于治疗骨质疏松、绝经后综合症、子宫内膜异位症和与SERM活性有关的其它病症。但是，该专利未提到这些SERM化合物可用于治疗OA。另外，该724专利的SERM分子在结构上与本发明化合物截然不同。与724专利不同，本发明要求化合物具有一个与萘基骨架连接的氧连接基团。

本发明提供一种强效的新的SERM化合物。该SERM分子则在子宫具有选择性雌激素拮抗作用，为用于治疗OA提供了特别理想的药理特性。另外，这种选择性SERM可为在治疗OA中的应用提供理想的安全特性。

本发明涉及下式化合物

或其可药用的盐。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物：

或其可药用的盐；其中

R¹选自H，-C₁-C₄烷基，F, Cl, -CN, -C(O)R³, -(C₁-C₃ 烷基)OH, -OCH₃, -S(O)₂R⁴, -S(O)CH₃, -CF₃和 -S(C₁-C₃ 烷基);

R²选自H，F和CH₃；

R³选自OH, -OCH₃, -NH(C₀-C₂ 烷基), CH₃, -N(CH₃)₂;

R⁴选自-C₁-C₄烷基, -N(CH₃)₂和-CF₃；和

R⁵选自H和CH₃。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物：

或其可药用的盐；其中

R¹选自H, -C₁-C₄烷基, F, Cl, -CN, -C(O)R³, -(C₁-C₃烷基)OH, -OCH₃, -S(O)₂R⁴, -S(O)CH₃和-S(C₁-C₃烷基)；

R²选自H，F和CH₃；

R³选自OH, -OCH₃, -NH(C₀-C₂烷基), CH₃, -N(CH₃)₂;

R⁴选自C₁-C₄烷基, -N(CH₃)₂和CF₃; 和

R⁵选自H和CH₃。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物或其可药用的盐，其中：

R¹选自H, -C₁-C₄ 烷基, F, Cl, -CN, -C(O)R³, -S(O)₂R⁴, -S(O)CH₃, -SCH₃, 和-CF₃;

R²选自H和CH₃;

R³选自CH₃, -N(CH₃)₂和-OCH₃;

R⁴选自C₁-C₃烷基; 和

R⁵选自H和CH₃。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物或其可药用的盐，其中：

R¹选自以下基团：H, -CH₃, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH₂CH(CH₃)₂, F, Cl, -CN, -C(O)CH₃, -C(O)N(CH₃)₂, -C(O)OCH₃, -S(O)₂CH(CH₃)₂, -S(O)₂CH₂CH₃, -S(O)₂CH₃, -S(O)CH₃, -CF₃, 和-SCH₃；

R²选自H和CH₃；和

R⁵是H。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物或其可药用的盐，其中：

R¹选自以下基团：H, -CH₃, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH₂CH(CH₃)₂, F, Cl, -CN, -C(O)CH₃, -C(O)N(CH₃)₂, -C(O)OCH₃, -S(O)₂CH(CH₃)₂, -S(O)₂CH₂CH₃, -S(O)₂CH₃, -S(O)CH₃, -CF₃, 和-SCH₃;

R²是H；和

R⁵是H。

在另一实施方案中，本发明提供式I化合物或其可药用的盐，其中：

R¹是-CH₃；

R²是-CH₃；和

R⁵是H。

在另一实施方案中，本发明涉及作为2-噻吩的式I化合物：

或其可药用的盐；其中

R¹选自 H, -C₁-C₄烷基, F, Cl, -CN, -C(O)R³, -(C₁-C₃烷基)OH, -OCH₃, -S(O)₂R⁴, -S(O)CH₃, -CF₃和-S(C₁-C₃烷基);

R²选自H, F和CH₃;

R³选自OH, -OCH₃, -NH(C₀-C₂烷基), CH₃, -N(CH₃)₂;

R⁴选自-C₁-C₄烷基, -N(CH₃)₂和-CF₃; 和

R⁵选自H和CH₃。

在另一实施方案中，本发明提供作为3-噻吩的式I化合物：

或其可药用的盐；其中

R¹选自H, -C₁-C₄烷基, F, Cl, -CN, -C(O)R³, -(C₁-C₃烷基)OH, -OCH₃, -S(O)₂R⁴, -S(O)CH₃, -CF₃和-S(C₁-C₃烷基);

R²选自H, F和CH₃;

R³选自OH, -OCH₃, -NH(C₀-C₂烷基), CH₃, -N(CH₃)₂;

R⁴选自-C₁-C₄烷基, -N(CH₃)₂和-CF₃; 和

R⁵选自H和CH₃。

本发明的又一实施方案提供了一种治疗哺乳动物中骨关节炎的方法，包括向哺乳动物施用本发明化合物的步骤。

在另一实施方案中，本发明还涉及药物组合物，其中含有本发明化合物或其可药用的盐，以及可药用的载体。

另外，本发明涉及可作为药物使用的本发明化合物。再者，本发明涉及用于治疗骨关节炎的本发明化合物，以及本发明化合物在制造用于治疗骨关节炎的药物中的应用。

“可药用的盐”是指被认为可用于临床和/或兽医用途的本发明化合物的盐。这些盐可以用本领域专业人员已知的方法制备。可药用的盐及制备它们的常用方法在本领域是众所周知的。例如见，P. Stahl, 等, HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S.M. Berge, 等, “Pharmaceutical Salts,” Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, 1977年1月。本发明化合物优选被制备成以各种途径给药的药物组合物。术语“可药用的载体”是指药学上与组合物中其它成分相容的载体、稀释剂、赋形剂和盐。最优选这些组合物是用于口服给药。可药用的组合物及其制备方法在本领域是众所周知的。例如见Remington: The Science and Practice of Pharmacy (A. Gennaro等编著，第19版，Mack Publishing Co., 1995)。优选的可药用盐包括盐酸盐、甲磺酸盐和甲基苯磺酸盐。盐酸盐和甲基苯磺酸盐是特别优选的可药用盐。

骨关节炎（以后称“OA”）是一种影响关节的慢性变性疾病。OA的症状是例如，显著疼痛、机能受限和与受影响的关节有关的失能。

迄今为止，进行了两项关于一种已知的SERM雷洛昔芬用于OA的研究。第一项研究是一项前瞻性非安慰剂对照观察研究，该研究证实，使用雷洛昔芬大大降低了在多个骨骼部位报告疼痛的频率，减少了镇痛药的使用，并改善了睡眠质量。在第二项研究中，雷洛昔芬治疗在进行一年之后在临床疗效方面产生小的但是明显的改进（WOMAC评分减小15%）。雷洛昔芬和另一种SERM左美洛昔芬还都显示出大大减小尿中的CTX-II含量，它是软骨中II型胶原转换的标志物。具有能用于治疗OA的特殊选择性特点的新的SERM化合物是人们所期望的。

本发明化合物能够用方案A中示例说明的和如实施例中所述的方法制备。制备例和实施例用ChemDraw Ultra版本10.0和Symyx? Draw版本3.1命名。

在本文中的方案、制备例、实施例和步骤中使用的术语和缩写，除非另外指定，均具有其通常含义。例如，在本文中使用时，以下术语具有所指出的含义：“NBS”是N-溴代丁二酰亚胺，“BnBr”是苄基溴，“Cs₂CO₃”是碳酸铯，“CuOTf”是三氟甲磺酸铜，“Tf₂O”是三氟甲磺酸酐，“Pd(OH)₂/C”是碳载Pd(OH)₂，“Pd(OAc)₂”是乙酸钯，“PCy₃”是三环己基膦，“ACN”是乙腈，“CsF”是氟化铯，“BBr₃”是三溴化硼，“DMF”是二甲基甲酰胺，“nBuLi”是正丁基锂，“THF”是四氢呋喃，“Et₃SiH”是三乙基硅烷，“TFA”是三氟乙酸，“POCl₃”是磷酰氯，“MgSO₄”是硫酸镁，“NH₄OH”是氢氧化铵，“Na₂SO₄”是硫酸钠，“Pd(dppf)Cl₂”是(1,1’-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)，“dppf”是1,1’-双(二苯基膦)二茂铁，“KOAc”是乙酸钾，“DCM”是二氯甲烷，“DIPEA”是二异丙基乙胺，“TFAA”是2,2,2-三氟乙酸酐，“n-BuLi”是正丁基锂，“mCPBA”是间氯过苯甲酸，“Pd(PPH₃)₄”是四(三苯基膦)钯，“TEA”是三乙胺，“DMAC”是N,N-二甲基乙酰胺，“TBAI”是碘化四-N-丁基铵，“DMAP”是4-二甲基氨基吡啶，“NaClO₂”是次氯酸钠，“DDQ”是2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌，“DMSO”是二甲基亚砜，“SCX”是强阳离子交换，“LRMS”是低分辨质谱法，“DSC”是差示扫描量热法，“MP”是熔点。

方案A

制备例1

6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯的合成

在环境温度下向二甲基甲酰胺（DMF，250 mL）中加入6-甲氧基萘-2-酚（20 g, 114.8 mmol），接着在30分钟内加入N-溴代丁二酰亚胺（NBS，21.5 g，120 mmol）。45分钟后，用水（800 mL）稀释，收集沉淀并干燥之，得到25.5 g(87%)1-溴-6-甲氧基萘-2-酚。

向DMF（800 ml）中加入1-溴-6-甲氧基萘-2-酚(66.7 g, 264 mmol)、碳酸钾(K₂CO₃, 40.0 g, 290 mmol)和苄基溴(49.6 g, 290 mmol)。在环境温度下搅拌该混合物1小时。加水(400 ml)使产物沉淀。收集沉淀，用庚烷(3 × 125 ml)洗滤饼，然后干燥，得到2-苄氧基-1-溴-6-甲氧基萘（83.7 g, 98.9 mmol）。

将甲苯（200 ml）、2-苄氧基-1-溴-6-甲氧基萘（30 g，87.4 mmol）、4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯酚（23.2 g，105 mmol）和碳酸铯（34.4 g, 105 mmol）混合。将此混合物加热回流，蒸馏除去一部分甲苯（100 ml）。向反应混合物中加入乙酸乙酯（390 mg, 4.37 mmol）和三氟甲磺酸铜-苯络合物（2.20 g, 4.37 mmol），搅拌5分钟。蒸馏除去溶剂，将形成的残留物加热至174℃1.5小时。将残留物溶在乙酸乙酯（200 ml）和盐酸（1N，90 ml）的混合物中。分离和浓缩该有机溶液至得到残留物。用硅胶色谱法将该残留物纯化，得到1-{2-[4-(2-苄氧基-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基]乙基}哌啶（12.4 g, 26.2 mmol）。

向甲醇/乙酸乙酯混合物（1:1，490 ml）中加入1-{2-[4-(2-苄氧基-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基]乙基}哌啶（12.4 g, 25.5 mmol），加热至形成溶液。撤除热源，加入甲酸铵（4.83 g, 76.6 mmol）和碳载Pd(OH)₂ (20% w/w, 1.58 g, 1.12 mmol)。将该溶液回流50分钟后过滤。将滤液浓缩，得到6-甲氧基-1-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯氧基]萘-2-酚(9,9 g, 25.1 mmol)。

将二氯甲烷（290 ml）、三乙胺（3.08 g, 30.4 mmol）和6-甲氧基-1-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯氧基]萘-2-酚（9.2 g, 23.4 g）冷却至-50℃，加入三氟甲磺酸酐（7.26 g, 25.7 mmol）。将形成的混合物在-50℃搅拌2小时，然后温热至环境温度，再搅拌1小时。加热水（150 ml）分离有机溶液。用NaHCO₃饱和水溶液洗该有机溶液，然后干燥，浓缩或残留物。将残留物用乙醚-己烷结晶，得到标题化合物（11.2 g, 21.27 mmol）。LRMS(m/z):526(M+1)。

制备例2

1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-甲基噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐的合成

将6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯（398.8 g, 758.8 mmol）、5-甲基-2-噻吩硼酸（224 g, 1.58 mol）和氟化铯（300 g, 1.97 mmol）悬浮在乙腈（12 L）中。经由气体进入管将形成的悬浮液于50℃加热下脱气30分钟。用三环己基膦（8 g, 28.5 mmol）处理该混合物并脱气10分钟，然后用乙酸钯（II）（4 g, 17.8 mmol）处理，再脱气5分钟，在80℃搅拌过夜。加入三环己基膦（8 g, 28.5 mmol）和乙酸钯(II) (4 g, 17.8 mmol)，将混合物再加热8小时，然后使溶液慢慢冷却过夜。将冷却的溶液经由大的玻璃砂漏斗过滤，浓缩滤液。将残留物和滤饼在水（4 L）和乙酸乙酯（8 L）中浆化，然后转移至分液漏斗中，用碳酸氢钠饱和水溶液（300 g, 3.57 mol）处理。激烈搅拌10分钟后分层。有机层用碳酸氢钠饱和水溶液、盐水洗，用MgSO₄干燥过夜。将混合物过滤，用HCl（4N二烷溶液，200 mL，800 mmol）处理滤液。搅拌所形成的浆体60分钟后过滤，得到标题化合物（352 g, 690.06 mmol）。LRMS(m/z):474(M+1-HCl)。

实施例1

6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚盐酸盐的合成

配制1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-甲基噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐(346.9 g, 680.07 mmol)在二氯甲烷（12 L）中的溶液并冷却至约3℃。将三溴化硼（1 M二氯甲烷溶液，301.4 mL，3.19 mol）经由导管在20分钟内加入所形成的溶液中。在0℃搅拌该混合物90分钟。将该混合物倒在碎冰上，于30分钟内用碳酸氢钠（1 kg, 11.90 mol）分批处理。将形成的浆体过滤，得到深色的滤饼。将滤液转移到分液漏斗中，分离该溶液并将有机溶液浓缩。将残留物与滤饼合并，在20%异丙醇/氯仿（约6升）中浆化，与含200 g碳酸氢钠的水（4 L）一起搅拌3小时。分层，有机层用盐水洗，干燥(MgSO₄)，过滤后蒸发，得到324 g灰白色固体。将形成的固体用硅胶色谱法纯化，得到281 g浅黄色粉末。将该固体在四氢呋喃（11 L，135.18 mol）中搅拌并用S-三胺(S-Triamine) (446 g, 2.05 mol)。搅拌过夜后，经硅藻土过滤，将滤液浓缩成白色粉末。将粉末在四氢呋喃（11 L，135.18 mol）中搅拌，再次用S-三胺（357 g, 1.64 mol）处理。搅拌整个周末之后，经硅藻土过滤，将滤液浓缩成白色粉末。室温下将得到的白色固体悬浮在甲醇（5 L）中。在另一只容器中将HCl（12 N水溶液，85 ml，1.04 mol）一次全加到甲醇（2 L）中。将此溶液加到上述浆体中并搅拌1小时。将此混合物冷却至约2℃，搅拌1小时。将得到的混合物过滤，得到奶油色的粉末。将该粉末在真空下于85℃干燥过夜，得到标题化合物（258 g, 520.0 mmol）。LRMS(m/z): 460(M+1-HCl)。MP（DSC）=248.82℃。

制备例66

6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚的合成

将1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-甲基噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐（5.15 g, 10.1 mmol）溶于二氯甲烷（340 mL）中。将得到的溶液冷却至0℃。在另一容器中将净的三溴化硼（3.9 mL，40.4 mmol）与二氯甲烷（36.5 mL）混合，形成的三溴化硼溶液加到上述的冷却溶液中。将形成的混合物在0℃下搅拌2.5小时。用碳酸氢钠饱和水溶液猝灭该混合物的反应，使其温热至室温。分层，用20%的甲醇/二氯甲烷（10 mL × 3）萃取水层。将合并的有机溶液浓缩，得到固体。将该固体在甲醇（234 mL）中浆化，加入HCl（1 N水溶液，10.8 mL）。将得到的溶液加到一只SCX酸性离子交换柱上。用40%的甲醇/二氯甲烷冲洗柱子，然后用40%的7 M氨-甲醇溶液/二氯甲烷洗脱。将含氨的洗脱液浓缩，得到标题化合物（4.54 g, 9.88 mmol）。LRMS(m/z)：460(M+1)。

制备例67

6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚甲磺酸盐的合成

在小瓶内放入6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基）萘-2-酚（105.7 mg，0.23 mmol）。加入乙酸乙酯（2 mL）和甲磺酸（18 μL）。在搅拌下将形成的混合物温热至约60℃，向形成的焦橙色溶液中加入四氢呋喃（1 mL），小瓶底部形成一些深褐色胶状物。将形成的溶液超声15分钟。小心地将烧瓶上形成的胶状物上的悬浮液倒出。利用抽气过滤，仔细地收集形成的固体，用戊烷（2 × 2 mL）洗形成的滤饼。将得到的固体在40℃的真空箱中干燥过夜，得到标题化合物。MP（DSC）=161.90℃。

制备例68

6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚4-甲基苯磺酸盐的合成

在小瓶内放入6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚(103.4 mg, 0.22 mmol)。加入乙酸乙酯（4 mL）和对甲苯磺酸（52 mg, 0.30 mmol）并在约60℃下搅拌。加入四氢呋喃使溶液澄清，超声15分钟。小心地倒出在烧瓶上形成的胶状物之上的悬浮液。将该悬浮液过滤，得到很浅的粉红色固体滤饼。用戊烷（2 × 2 mL）洗滤饼，在40℃真空烧箱中干燥过夜，得到标题化合物。MP(DSC)=136.24℃。

方案B

在方案B中，任选取代的噻吩硼酸与式1化合物偶合，形成式2化合物，其中R^1a选自H、-C₁-C₄烷基、F、Cl、-CN和-C(O)R³，R^2a选自H、F和CH₃。最好是，R^1a是H、Cl、-C(O)CH₃、CH₃、CN，R^2a是H或CH₃。

制备例3

1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

将6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯（6.0 g, 11.4 mmol）、噻吩-2-硼酸（4.4 g, 34.3 mmol）、三环己基膦（1.1 g, 4.0 mmol）、乙酸钯（II）（0.51 g, 2.3 mmol）、氟化铯（15.6 g, 102.8 mmol）和乙腈（150 mL，用氮脱气30分钟）在圆底烧瓶中于氮气下混合。将形成的混合物温热至80℃并搅拌40分钟。滤出固体，用乙腈洗。将滤液和洗液合并，减压浓缩。将残留物溶于甲醇，加到一只SCX酸性离子交换柱上。用甲醇冲洗柱子，然后用2M的氨/甲醇洗脱。将含氨的洗脱液减压浓缩，得到浅褐色固体。用硅胶快速色谱法将该固体纯化，得到标题化合物（3.88 g, 8.4 mmol）。

表1中的制备例可以基本上按照制备例3中所述，用列出的试剂（第3列）代替噻吩-2-硼酸来制备。

表I

方案C

在方式C中，式3化合物先被转化成有机锂化物，然后加入到亲电子试剂([E⁺])中，形成式4化合物，其中E是-F, -C(O)OH, -S-CH₃, -S-CH(CH₃)₂, -S-CH₂CH₃, -C(O)N(CH₃)₂, -CH₂CH₃, -C(CH₃)₂-OH或-CH₂CH(CH₃)₂。

制备例13

1-(2-(4-(2-(5-氟噻吩-2-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

在氩气下向一只螺纹盖的小瓶中加入1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(153 mg, 0.4 mmol)和四氢呋喃(3.3 mL)。将形成的溶液冷却至-78℃，逐滴加入正丁基锂（1.6 M己烷溶液，230 μL，0.4 mmol）。将形成的溶液温热至0℃，搅拌30分钟。加入N-氟代苯磺酰亚胺（210.0 mg, 0.6 mmol）在四氢呋喃（500 μL）中的溶液。使形成的混合物温热至室温并搅拌2小时。加入1M HCl，用乙醚稀释，流过一只SCX酸性离子交换柱。用甲醇冲洗柱子，然后用2M的氨/甲醇洗脱所要的物质。将含氨的洗脱液浓缩，得到黄色固体。将该黄色固体在硅胶快速色谱柱上纯化，得到标题化合物（59.0 mg, 0.1 mmol）；质谱(m/z): 478(M+1)。

表II中的制备例可以基本上按照制备例13中所述，使用列出的试剂（第三列）代替N-氟代苯磺酰亚胺制备。

表II

方案D

在方案D中，式5化合物用2当量的过一硫酸氢钾复合盐氧化，形成式6化合物，其中R^4a是-CH₃, -CH₂CH₃或-CH(CH₃)₂。

制备例22

1-(2-(4-(2-(5-(乙磺酰基)噻吩-2-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐

在氮气下向圆底烧瓶中加入1-(2-(4-(2-(5-(乙硫基)噻吩-2-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(226 mg, 0.43 mmol)、四氢呋喃(8.7 mL)和甲醇(8.7 mL)。将形成的溶液冷却至0℃，加入过一硫酸氢钾复合盐(535 mg, 0.87 mmol)的水(4.5 mL)溶液。将得到的混合物在0℃搅拌30分钟，温热至室温并搅拌1小时。将该混合物加在一只SCX酸性离子交换柱上。用甲醇和二氯甲烷的1:1混合物冲洗柱子，然后用2M的氨/甲醇与二氯甲烷的1:1混合物洗脱。将含氨的洗脱液减压浓缩，得到灰白色泡沫体。将该泡沫体溶于二氯甲烷，用HCl（1M乙醚溶液，900 μL）处理。将形成的混合物减压浓缩，得到标题化合物（142 mg, 0.24 mmol）；质谱(m/z): 552 (M+1-HCl)。

表III中的制备例可以基本上如制备例22中所述，用列出的试剂（第三列）代替1-(2-(4-(2-(5-乙硫基)噻吩-2-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基）哌啶制备。

表III

方案E

在方案E中，式7化合物用一当量的过一硫酸氢钾复合盐氧化，形成式8化合物。

制备例25

1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-(甲基亚磺酰)噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

在氮气下向圆底烧瓶中加入1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-(甲硫基)噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(84 mg, 0.17 mmol)、四氢呋喃(3.3 mL)和甲醇(3.3 mL)。将形成的溶液冷却至0℃，加入过一硫酸氢钾复合盐(102 mg, 0.17 mmol)在水(1.7 mL)中的溶液。在0℃搅拌所形成的混合物30分钟。将该混合物加在SCX酸性离子交换柱上。用1:1的甲醇：二氯甲烷冲洗柱子，用2M的氨/甲醇与二氯甲烷的1:1混合物洗脱。将含氨的洗脱液减压浓缩，得到标题化合物(87 mg, 0.17 mmol)；质谱(m/z): 522 (M+1)。

方案F

在方案F中，式9化合物被还原成式10化合物。

制备例26

1-(2-(4-(2-(5-异丙基噻吩-2-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

在氩气下向一只圆底烧瓶中加入2-(5-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-基)丙-2-醇（84 mg, 0.16 mmol）、三乙基硅烷(1.7 mL)和二氯甲烷(0.85 mL)。加入三氟乙酸(0.81 mL)，将形成的混合物搅拌45分钟。将该混合物加在一只SCX酸性离子交换柱上。用1:2的甲醇：二氯甲烷冲洗柱子，用2M的氨/甲醇与二氯甲烷的1:2混合物洗脱。将含氨的洗脱液减压浓缩，得到标题化合物(73.1 mg, 0.15 mmol)；质谱(m/z): 502 (M+1)。

方案G

在方案G中，式II化合物先被转化成酰氯，然后用氢氧化铵处理形成式12化合物的酰胺。接着将该式12化合物脱水，然后形成盐酸盐，得到式13化合物。

制备例27

5-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲酰胺

在氮气下向一只圆底烧瓶中加入5-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-羧酸(86 mg, 0.2 mmol)和二氯甲烷(2.4 mL)。将该悬浮液冷却至0℃，依次加入草酰氯(22.2 μL，0.3 mmol)和二甲基甲酰胺(30.0 μL)。将形成的混合物温热至室温并搅拌30分钟。减压浓缩，得到黄色固体。向该固体加四氢呋喃(2.5 mL)，向形成的悬浮液中加入氨（12.1M水溶液，3 mL，36.4 mmol）在四氢呋喃（5.7 mL）中的溶液。搅拌所形成的溶液30分钟，然后用乙醚稀释。分层，将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤和减压浓缩，得到棕色固体。将得到的固体溶于甲醇，加在一只SCX酸性离子交换柱上。用甲醇冲洗柱子，然后用2M的氨/甲醇洗脱所要的物质。将含氨的洗脱液浓缩，得到标题化合物(79 mg, 0.16 mmol)。

制备例28

5-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈盐酸盐

在氮气下向圆底烧瓶中加入5-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲酰胺(79 mg, 0.16 mmol)和磷酰氯(13 mL, 139.9 mmol)。将形成的混合物温热至100℃，搅拌15分钟。将该混合物冷却至室温，减压浓缩，得到黄色残留物。小心地用甲醇使形成的残留物中的反应猝灭，加到一只SCX酸性离子交换柱上。用甲醇冲洗柱子，然后用2M氨/甲醇洗脱所要的物质。将含氨的洗脱液减压浓缩，得到浅黄色固体。将得到的固体溶于二氯甲烷，用HCl（1M乙醚溶液，5 mL）处理。减压浓缩，得到标题化合物（81.5 mg, 0.16 mmol）。

方案H

式14化合物去保护，形成式I化合物的盐酸盐。

实施例5

5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-6-(噻吩-2-基)萘-2-酚盐酸盐

将1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(100 mg, 0.22 mmol)溶于二氯甲烷并用HCl（1M乙醚溶液，220 μL，0.22 mmol）处理。减压浓缩得到黄色固体，加入二氯甲烷（7.3 mL）。将形成的溶液冷却至0℃，加入三溴化硼（1M二氯甲烷溶液，870 μL，0.87 mmol）。将形成的混合物在0℃搅拌2.5小时。用碳酸氢钠饱和水溶液猝灭该混合物中的反应，使其温热至室温。分层，水层用20%的甲醇/二氯甲烷(10 mL × 3)萃取。将合并的有机层干燥（Na₂SO₄），过滤后减压浓缩，得到黄色残留物。用硅胶快速色谱法将残留物纯化，得到灰白色泡沫体。将该泡沫体悬浮在ACN中，加入HCl（5M水溶液，1 mL）。将形成的溶液冷冻干燥，得到标题化合物（50.5 mg, 0.12 mmol）；质谱(m/z): 446(M+1-HCl)。

表IV中的实施例可以基本上利用实施例5中所述的去保护步骤制备。

表IV

方案I

制备例29

4,4,5,5-四甲基-2-(4-甲基噻吩-3-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷

向一只圆底烧瓶中加入3-溴-4-甲基噻吩(0.885 g, 5.00 mmol)、(1,1’-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II) (408 mg, 499.82 μmol)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁(277.09 mg, 499.82 μmol)、联硼酸频哪醇酯(2.54 g, 10 mmol)、乙酸钾(1.47 g, 14.99 mmol)和1,4-二烷（50 ml）。用氩气吹洗反应容器。将混合物在85℃搅拌16小时后冷却至室温。将混合物过滤，用1,4-二烷洗固体。将滤液浓缩，用快速色谱法在硅胶上纯化所形成的残留物，得到标题化合物（0.62 g, 2.5 mmol）。

表V中的制备例可以基本上如制备例29中所述，用列出的试剂（第3列）代替3-溴-4-甲基噻吩制备。

表V

方案J

制备例31

4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈

向圆底烧瓶中加入乙腈(10 mL)、6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯(150 mg, 285.4 μmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)噻吩-3-甲腈(134.2 mg, 570.8 μmol)、三环己基膦（24.0 mg, 85.6 μmol）、乙酸钯(II) (12.8 mg, 57.1 μmol)和氟化铯(390.2 mg, 2.6 mmol)。用氩气吹洗反应器3次，在80℃搅拌该混合物1.5小时。将混合物过滤，固体用乙腈洗。将滤液浓缩，残留物用DOWEX离子交换树脂纯化，得到标题化合物（87 mg, 179.8 μmol）。

表VI中的制备例可以基本上如制备例31中所述，用列出的试剂（第3列）代替4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)噻吩-3-甲腈制备。

表VI

制备例35

4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基）噻吩-3-甲腈盐酸盐

向4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基）噻吩-3-甲腈(87 mg, 179.5 μmol)在二氯甲烷（2 mL）中的溶液加入HCl的乙醚溶液（1M，180 μL，180.0 μmol）。搅拌该混合物10分钟，浓缩后得到标题化合物（95 mg, 179 μmol）。

表VII中的制备例可以基本上如制备例35中所述，用列出的试剂（第3列）代替4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基）噻吩-3-甲腈制备。

表VII

制备例化学名称试剂361-(2-(4-(2-(2,5-二甲基噻吩-3-基)-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐制备例32371-(2-(4-(6-甲氧基-2-(4-甲基噻吩-3-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶盐酸盐制备例33381-(4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-基)乙酮盐酸盐制备例34

制备例39

4-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈

在0℃和搅拌下，向4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈盐酸盐(95 mg, 182.3 μmol)和二氯甲烷(4 mL)的溶液中慢慢加入三溴化硼在二氯甲烷中的溶液（4M，182 μL, 728.0 μmol）。在0℃搅拌该混合物1.5小时，用碳酸氢钠水溶液猝灭该混合物的反应，用20%的甲醇/二氯甲烷萃取该混合物3次。合并的有机层用水洗。将形成的溶液用硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干。残留物用快速色谱法在硅胶上纯化，得到标题化合物(52 mg, 111.2 μmol)。

表VIII中的制备例可以基本上如制备例39中所述，用列出的试剂（第3列）代替4-(6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基）噻吩-3-甲腈盐酸盐制备。

表VIII

制备例化学名称试剂406-(2,5-二甲基噻吩-3-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚制备例36416-(4-甲基噻吩-3-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚制备例37421-(4-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-基)乙酮制备例38

实施例14的另一合成方法

4-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈盐酸盐

向4-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈(52 mg, 110.5 μmol)在二氯甲烷(4 mL)中的溶液加入HCl乙醚溶液（1M，122 μL，122.0 μmol）。将此混合物超声5分钟后浓缩，得到标题化合物(57 mg, 110.5 μmol)。MS(m/z): 471(M+1-HCl)。

表IX中的实施例可以基本上如在实施例14的另一合成方法中所述，用列出的试剂（第2列）代替4-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈制备。

表IX

制备例43

2-溴-4,5-二甲基噻吩

向2,3-二甲基噻吩(0.55 g, 4.90 mmol)在二氯甲烷（20 mL）中的溶液加入N-溴代丁二酰亚胺(0.96 mg, 5.39 mmol)，将反应混合物搅拌过夜后浓缩，残留物在硅胶上用快速色谱法纯化，得到标题化合物（704 mg, 3.68 mmol）。

制备例44

2-溴-3,5-二甲基噻吩

制备例44可以基本上如制备例43中所述，用试剂2,4-二甲基噻吩制备。

方案K

制备例45

2-溴噻吩-3-羰基氯

在搅拌下向2-溴噻吩-3-羧酸(500 mg, 2.41 mmol)和甲苯(20 mL)的溶液中加入亚硫酰二氯(0.35 mL, 4.80 mmol)。用氮气吹洗反应容器。将该混合物加热回流并搅拌3小时。混合物浓缩后得到标题化合物(540 mg, 2.41 mmol)。该化合物用于下一步骤，不作进一步的纯化。

制备例46

5-溴噻吩-3-羰基氯

制备例46可以基本上如制备例45中所述，用试剂5-溴噻吩-3-羧酸制备。

制备例47

2-溴噻吩-3-甲酰胺

在搅拌下向氨水(25%, 3 mL, 17.44 mmol)溶液中加2-溴噻吩-3-羰基氯。搅拌该混合物30分钟。将混合物浓缩，过滤收集形成的沉淀，用水洗该固体。将此白色沉淀真空干燥，得到标题化合物（450 mg, 2.17 mmol）。

制备例48

5-溴噻吩-3-甲酰胺

制备例48可以基本上如制备例47中所述，用试剂5-溴噻吩-3-羰基氯制备。

制备例49

2-溴噻吩-3-甲腈

在5℃和搅拌下，用注射器向2-溴噻吩-3-甲酰胺(200 mg, 970.58 μmol)和三乙胺(0.34 mL, 2.44 mmol)在THF(10 mL)中的溶液加入2,2,2-三氟乙酸酐(0.17 mL, 1.21 mmol)。撤除冷浴，将混合物温热至室温并搅拌16小时。将混合物浓缩，加水和二氯甲烷，用二氯甲烷萃取该混合物3次。将合并的萃取液用硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干。残留物用硅胶快速色谱法纯化，得到标题化合物(113 mg, 601.76 μmol)。

制备例50

5-溴噻吩-3-甲腈

制备例50可以基本上如制备例49中所述，用试剂5-溴噻吩-3-甲酰胺制备。

方案L

制备例51

6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯盐酸盐

向6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯(2.62 g, 4.99 mmol)在二氯甲烷(20 mL)中的溶液加入HCl的乙醚溶液（1.0 M, 5.5 mL, 5.50 mmol）。搅拌该混合物10分钟，然后浓缩，得到标题化合物（2.8 g, 4.99 mmol）。

制备例52

6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基）萘-2-基三氟甲磺酸酯

向6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯盐酸盐（2.8 g, 4.98 mmol）在二氯甲烷（100 mL）中的溶液加入三溴化硼在二氯甲烷中的溶液（4M，5 mL，20.00 mmol）。将反应混合物搅拌2小时，然后用碳酸氢钠水溶液猝灭反应。用二氯甲烷萃取3次。将萃取液合并，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩，得到标题化合物（2.4 g, 4.68 mmol）。

制备例53

5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-6-(三氟甲磺酰氧基)萘-2-基乙酸酯

向6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基三氟甲磺酸酯(2.4 g, 4.69 mmol)和二异丙基乙胺(2.45 mL, 14.05 mmol)的溶液加入乙酰氯(0.67 mL, 9.41 mmol)。搅拌该混合物1小时，然后用碳酸氢钠水溶液猝灭反应。用二氯甲烷萃取混合物3次，将萃取液合并，用硫酸钠干燥，过滤后浓缩，得到标题化合物（2.33 g, 4.22 mmol）。

制备例54

6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基硼酸盐酸盐

向圆底烧瓶中加入联硼酸新戊二醇酯(4.2 g, 18.59 mmol)、5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-6-(三氟甲磺酰氧)萘-2-基乙酸酯(2.33 g, 4.21 mmol)、乙酸钯(II)(0.199 g, 886.38 μmol)、氟化铯(5.21 g, 34.30 mmol)、三环己基膦(0.41 g, 1.40 mmol)和乙腈(50 mL)。将混合物在氮气氛下搅拌回流1小时。冷却后过滤，固体用乙腈洗。将合并的滤液和洗液浓缩，形成的残留物悬浮在乙醚(40 mL)中，超声30分钟。过滤除去沉淀，将滤液浓缩，得到粗制的中间体。向该粗制的中间体在乙醚(50 mL)中的溶液加入二乙醇胺(405.25 μL, 4.21 mmol)，搅拌该混合物1小时。倒出有机层，将余下的残留物溶在甲醇(20 mL)和水(10 mL)中。加入浓盐酸(2 mL, 24 mmol)，将形成的混合物搅拌16小时。浓缩该混合物以除去甲醇。用二氯甲烷萃取该含水残留物3次。将萃取液合并，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干。残留物在硅胶上用快速色谱法纯化，得到标题化合物(0.6 g, 1.47 mmol)。

制备例55

3-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈

向6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基硼酸盐酸盐(100 mg, 245.5 μmol)在乙醇(2 mL)和乙腈(8 mL)中的溶液加入3-溴噻吩-2-甲腈(93 mg, 494.6 μmol)、乙酸钯（12 mg, 53.4 mmol）、三环乙基膦(21 mg, 74.9 μmol)、氟化铯(336 mg, 2.2 mmol)。用氮吹洗反应容器3次，将混合物在85℃搅拌2小时，冷却后过滤。形成的固体用乙腈洗。将合并的滤液和洗液浓缩。残留物用DOWEX离子交换树脂纯化以得到粗产物。将粗产物用Prep-HPLC纯化，得到标题化合物（12 mg, 24.55 μmol）。

表X中的制备例可以基本上如制备例55中所述，用列出的试剂（第3列）代替3-溴噻吩-2-甲腈制备。

表X

制备例化学名称试剂564-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈4-溴噻吩-2-甲腈571-(3-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-基)乙酮1-(3-溴-2-噻吩基)乙酮585-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-6-(5-(三氟甲苯)噻吩-2-基)萘-2-酚2-溴-5-(三氟甲基)噻吩592-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-3-甲腈2-溴噻吩-3-甲腈603-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-羧酸甲酯3-溴噻吩-2-羧酸甲酯616-(5-甲基噻吩-3-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚4-溴-2-甲基噻吩626-(3,5-二甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚2-溴-3,5-二甲基噻吩636-(4,5-二甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚5-溴-2,3-二甲基噻吩

实施例26

3-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈盐酸盐

向3-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈(12 mg, 24.5 μmol)和二氯甲烷(4 mL)的溶液中加入HCl乙醚溶液（1M，28 μL，28.0 μmol）。将此混合物超声5分钟后浓缩，得到标题化合物（13 mg, 24.5 μmol）。质谱(m/z): 471(M+1-HCl)。

表XI中的实施例可以基本上如实施例26中所述，用列出的试剂（第2列）代替3-(6-羟基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-基)噻吩-2-甲腈制备。

表XI

方案M

制备例64

三甲基-5-(5-甲磺酰-3-噻吩基)锡烷

在-78℃下向2,4-二溴噻吩(7 mL, 62 mmol)在乙醚(240 mL)中的溶液加入正丁基锂（1.6M己烷溶液，39 mL，62 mmol）。半小时后，加入正丁基锂（1.6M己烷溶液，15.6 mL，25 mmol），在-78℃再搅拌15分钟。加入甲基二硫烷基甲烷（6 mL, 68 mmol），搅拌反应混合物，同时令其温热至室温。将反应混合物倒入冰与饱和氯化铵水溶液的混合物中。分层，水层用乙醚萃取。将有机层合并，用饱和氯化铵水溶液、水及盐水洗，然后用硫酸钠干燥。将得到的溶液浓缩，得到4-溴-2-甲硫烷基噻吩(9.3 g, 44.4 mmol)。

将4-溴-2-甲硫烷基噻吩(9.3 g, 44.4 mmol)溶在二氯甲烷(230 mL)中，冷却至0℃。以5分钟的间隔分三批加入间氯过苯甲酸(28 g, 162 mmol)。搅拌形成的混合物并令其温热至室温。用乙醚稀释反应混合物，用5%亚硫酸钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗，然后用硫酸钠干燥。将形成的溶液浓缩，残留物用快速色谱法纯化(10-20%乙酸乙酯/己烷)，得到4-溴-2-甲磺酰基噻吩（5 g, 20.73 mmol）。

将4-溴-2-甲磺酰基噻吩(0.6 g, 2.5 mmol) 溶于甲苯(18 mL)，加入六甲基二锡（1.8 mL, 3.8 mmol）和四(三苯基膦)钯（0）(0.05 g, 0.04 mmol)。将得到的混合物温热至85℃并搅拌4小时，然后冷却至室温，加入盐水进行分配。将有机层浓缩，用快速色谱法（0-10%乙酸乙酯/己烷）纯化，得到三甲基-(5-甲磺酰-3-噻吩基)锡烷(0.5 g, 1.53 mmol)。

实施例65

1-[2-[4-[[6-甲氧基-2-(5-甲磺酰-3-噻吩基)-1-萘基]氧]苯氧基]乙基]哌啶

将乙酸钯(II)(0.043 g, 0.19 mmol)和三环己基膦(0.081 g, 0.29 mmol)在乙腈(15 mL)中混合并超声10分钟。将[6-甲氧基-1-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯氧基]-2-萘基]三氟甲磺酸酯(0.5 g, 0.95 mmol)、三甲基-(5-甲磺酰-3-噻吩基)锡烷(0.94 g, 2.9 mmol)和上述钯混合物加到氟化铯（0.5 g, 3.3 mmol）在乙腈（40 mL）中的悬浮液内。将形成的混合物温热至90℃，搅拌18小时。冷却至室温后浓缩。将形成的残留物分配在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液中。分层，有机层用氯化铵饱和水溶液和盐水洗，然后用硫酸钠干燥。将得到的溶液浓缩，用快速色谱法（0-5%甲醇/二氯甲烷）纯化，得到标题化合物（0.3 g, 0.55 mmol）。

实施例35

6-(5-甲磺酰-3-噻吩基)-5-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯氧基]萘-2-酚三氟乙酸盐

将1-[2-[4-[[6-甲氧基-2-(5-甲磺酰-3-噻吩基)-1-萘基]氧]苯氧基]乙基]哌啶(0.3 g, 0.55 mmol)溶于乙酸乙酯。加入乙醚（10 mL）并冷却至0℃。加HCl（2M乙醚溶液，0.4 mL，0.84 mmol），过滤收集形成的沉淀。将该固体溶于乙酸乙酯并浓缩，得到1-[2-[4-[[6-甲氧基-2-(5-甲磺酰-3-噻吩基)-1-萘基]氧]苯氧基]乙基]哌啶盐酸盐(0.35 g, 0.55 mmol)。

将1-[2-[4-[[6-甲氧基-2-(5-甲磺酰-3-噻吩基)-1-萘基]氧]苯氧基]乙基]哌啶盐酸盐(0.35 g, 0.55 mmol)溶于二氯甲烷(15 mL)，冷却至0℃。向此冷却溶液中加入三溴化硼(0.3 mL, 3.1 mmol)，在0℃下搅拌1小时。将反应混合物分配在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液中。分层，水层用乙酸乙酯萃取2次。合并的有机层用盐水洗，用硫酸钠干燥。将形成的溶液浓缩，用高压液相色谱法纯化，得到标题化合物(24 mg, 0.04 mmol)。质谱(m/z): 524(m+1-TFA)。

方案N

在方案N中，三氟甲磺酸酯化合物被转化成硼酸化合物。6-硼酸-5-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯氧基]萘-2-酚盐酸盐可以按照PCT出版物WO 2005073204中的步骤制备。利用基本上如WO 2005073204中所述的方法，用试剂3-溴-2-氯噻吩或2-溴-5-甲基噻吩将该硼酸化合物转化成取代的噻吩化合物。

实施例36

6-(2-氯-3-噻吩基)-5-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯氧基]萘-2-酚三氟乙酸盐

基本上按照WO 2005073204中用于制备5-[4-(2-哌啶-1-基乙氧基)苯氧基]-6-(2,3,4-三氟苯基)萘-2-酚三氟乙酸盐的相同步骤，用3-溴-2-氯噻吩制备6-(2-氯-3-噻吩基)-5-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯氧基]萘-2-酚三氟乙酸盐。质谱(m/z): 480(M+1-TFA)。

方案O

实施例1的游离碱形式的另一合成方法

制备例69

1-氯-6-甲氧基-3,4-二氢萘-2-甲醛

向圆底烧瓶中加入化合物1（方案O，6-甲氧基四氢萘-1-酮）（6.11 g, 34.7 mmol）和N,N-二甲基乙酰胺（20 mL, 259.5 mmol）。用氩吹洗反应器5次。向反应混合物中逐滴加POCl₃（8 mL, 148.9 mmol）。在搅拌下将反应混合物加热至105℃，保持在该温度4小时。用冰-水混合物猝灭反应。用乙酸乙酯萃取该混合物3次，倒出水相。将有机相合并，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩至干，得到1-氯-6-甲氧基-3,4-二氢萘-2-甲醛，为褐色固体(5.94 g, 收率70%)。

制备例70

6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-甲醛

向一只三口圆底烧瓶中加入1-氯-6-甲氧基-3,4-二氢萘-2-甲醛(2.25 g, 10.1 mmol)、4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯酚(1.8 g, 8.24 mmol)、碘化四-N-丁基铵(50 mg, 0.14 mmol)、碳酸钾(4.1 g, 29.8 mmol)和4-二甲基氨基吡啶(120 mg, 0.99 mmol)。用氮吹洗反应容器，向反应混合物中慢慢加二甲基甲酰胺(30 mL)，在搅拌下将反应混合物加热至100℃并保持4小时。将反应混合物冷却至室温，用冰-水猝灭反应。用乙酸乙酯萃取该混合物3次，将合并的有机层用MgSO₄干燥，过滤后浓缩，得到6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-甲醛(4.11 g)。

制备例71

6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-羧酸

向圆底烧瓶中加入6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-甲醛(3.0 g, 4.34 mmol)、间苯二酚(531 mg, 4.8 mmol)、THF(8 mL)、乙醇(8 mL)和乙酸(0.9 mL)。将该混合物在25℃搅拌5分钟。慢慢加入亚氯酸钠(1.3 g, 11.2 mmol)的水(8 mL)溶液，在80℃搅拌2小时。用冰水猝灭反应，用稀NaOH洗该混合物3次，倒出有机层。向水层中加水使pH调节至5-6。用乙酸乙酯萃取水层5次，丢弃水相。将有机层用MgSO₄干燥，过滤并浓缩至干，将其进一步纯化，得到400 mg 6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-羧酸。

制备例72

1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

向烧瓶中加入6-甲氧基-1-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)-3,4-二氢萘-2-羧酸(0.4 g, 0.68 mmol)、二氯甲烷(10 mL)和三乙胺(0.2 mL, 1.43 mmol)。在25℃搅拌该混合物10分钟。分批加入N-溴代丁二酰亚胺(0.5 g, 4.13当量，2.81 mmol)。将反应混合物冷却至室温，用冰水猝灭反应。用乙酸乙酯萃取混合物3次，丢弃水相。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤后浓缩至干，得到1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶，为黄色油状物(300 mg)。

制备例73

1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

向圆底烧瓶中加入1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(6.7 g, 6.6 mmol)和乙腈(50 mL)。在25℃搅拌该混合物5分钟，然后慢慢加入2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(DDQ)(3.2 g, 14.1 mmol)。将混合物加热至80℃。在此温度下搅拌14小时。将反应混合物冷却至室温，用冰水猝灭反应。用乙酸乙酯萃取混合物3次，丢弃水相。将合并的有机层干燥（MgSO₄），过滤并浓缩至干。用快速色谱法纯化，得到1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶，为褐色固体(817 mg)。

制备例74

1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-甲基噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶

向一只三口圆底烧瓶中加入1-(2-(4-(2-溴-6-甲氧基萘-1-基氧)苯氧基)乙基)哌啶(25 mg, 75.9 μmol)、5-甲基噻吩-2-硼酸(20 mg, 140.86 μmol)、四(三苯基膦)钯(20 mg, 17.3 μmol)和二甲基亚砜（DMSO）(2 mL)。用氮气吹洗反应器5次，将混合物在100℃加热6小时，然后在80℃加热40小时。

制备例75

6-(5-甲基噻吩-2-基)-5-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯氧基)萘-2-酚

利用实施例1中所述步骤，将1-(2-(4-(6-甲氧基-2-(5-甲基噻吩-2-基)萘-1-基氧)苯氧基)乙基哌啶去保护。

生物试验

雌激素受体结合试验：利用竞争性结合试验，测定化合物从受体上顶替³H-雌二醇的能力，试验化合物与两类雌激素受体(ERα和ERβ)和结合亲和性。对两类受体的IC₅₀和K_i都可以计算。

一种竞争性结合试验可以在含有50 mM HEPES缓冲剂，pH 7.5, 1.5 mM乙二胺四乙酸（“EDTA”），150 mM NaCl，10%甘油，1 mg/mL卵清蛋白和5 mM二硫苏糖醇（“DDT”）的缓冲液中进行，使用每孔0.025 μCi的³H-雌二醇（NEN#NET517，118 Ci/mmol，1 mCi/mL）、10 ng/孔的ERα或ERβ受体。以10种不同的浓度加入试验化合物。在1 μM雌二醇（17β-雌二醇）存在下测定非特异性结合。结合反应（140 μL）在室温下温育4小时，然后向每份反应混合物中加入70 μL的冷DCC缓冲液（DCC缓冲液中每50 mL试验缓冲液含750 mg活性炭和250 mg葡聚糖）。将板在4℃于定轨摇床上混合8分钟，然后在4℃于3000 rpm离心10分钟。取每份120 μL的混合物转移到另一只96孔白色平底板中，向各孔中加175 μL闪烁液。将板密封，在定轨摇床上激烈摇荡。在温育2.5小时后，在计数器上读板。此数据用来计算IC₅₀和在10 μM下的抑制%。³H-雌二醇的K_d通过对ERα和ERβ受体的饱和结合来测定。利用Cheng-Prusoff公式将试验化合物的IC₅₀值转换成K_i，K_d用饱和结合试验测定。本文中公开的所有实施例均在结合试验中显示活性，对于ERα受体测得的K_i-α小于20 nM，对于ERβ受体测得的K_i-β小于200 nM。对于实施例1化合物，测得的K_i-α值为0.15 ± 0.22 nM（几何平均值 ± 标准偏差），而对ERβ受体的亲和性经测定为K_i-β=0.20 ± 0.20 nM（几何平均值±标准偏差）。于是证实了本发明化合物对两种ER受体的高亲和性结合。

Ishikawa细胞（子宫内膜癌细胞）增殖试验：此试验测定以下两种条件下的细胞增殖（使用碱性磷酸酶读数）：激动剂模式，只有试验化合物存在；和拮抗剂模式，其中测定试验化合物阻断雌二醇刺激生长的能力。

在温育过夜后，Ishikawa细胞用不含Ca⁺²和Mg⁺²的Dulbecco磷酸盐缓冲液（“D-PBS”）冲洗，用0.25%胰蛋白酶/EDTA（不含酚红）温育3分钟进行胰酶消化。将细胞再悬浮于试验介质中并调节至250000细胞/mL。将在100 μL培养基中的约25000个细胞加到平底96孔微量培养板中，在37℃和5% CO₂加湿培养箱中温育24小时。次日，配制化合物在试验介质中的系列稀释液（为试验中最终浓度的6倍）。试验以双重模式：激动剂模式和拮抗剂模式进行。

对于激动剂模式，板中依次加入25 μL/孔的试验介质和25 μL/孔的稀释的试验化合物（6倍最终浓度）。对于拮抗剂模式，板中依次加入25 μL/孔的6 nM 17β-雌二醇（“E2”）和25 μL/孔的稀释的试验化合物（6倍最终浓度）。在37%于5% CO₂增湿的培养箱中再温育48小时后，从孔中抽出培养基，向每份微量培养物中加入100 μL新鲜的试验介质。如上所述地配制并向细胞中加入化合物的系列稀释物。在37℃于5% CO₂增湿的培养箱中再温育72小时后，除去培养基并用D-PBS淋洗板子两次以猝停试验。将板干燥5分钟，在-70℃冷冻至少1小时，然后从冷冻室中取出板使其在室温下解冻。温育20分钟后，在分光光度计上于405 nm读板。

将数据用4参数拟合模型拟合以得到EC₅₀（对于激动剂模式）或IC₅₀（对于拮抗剂模式）值。对于拮抗剂模式，只计算每种化合物相对于E2（1 nM）的效力%。对于激动剂模式，计算每种化合物相对于他莫昔芬响应的效力%。基本上按上述测定的实施例1化合物的拮抗剂效力为102% ± 8.4%(n=4)(算术平均值±标准偏差)；相对IC₅₀为3.75 ± 1.71 nM（n=4） (算术平均值 ± 标准偏差)。实施例1化合物独自的平均激动剂活性为17.7% ± 11.3% (n=4)（算术平均值 ± 标准偏差）。实施例1的化合物的数值可以与4-羟基他莫昔芬相比，后者通常产生>100%的激动剂活性。这些数据表明，本发明化合物可以作为子宫内雌激素受体的有效拮抗剂起作用。

3天幼鼠子宫拮抗剂试验：关于子宫拮抗作用的这一模型使用未成年（3周龄）雌性大鼠，在其循环雌激素水平是青春期前水平的条件下，它们对于子宫的雌激素刺激高度敏感。幼鼠的子宫对外源性雌激素充分敏感，但在外源性雌激素不存在时是休眠的。向幼鼠施用外源性雌激素造成子宫重量的可信增加，这可以用来研究子宫拮抗剂作用。将鼠用雌二醇和4种不同浓度的试验化合物处理3天，然后测定子宫的湿重。

19-21天龄（或45-50 g）的雌性大鼠用17α-乙炔基雌二醇（EE2）（0.1 mg/kg, 对于可信的子宫增重的最大刺激性雌激素刺激物）和10、1.0、0.1和0.01 mg/kg试验化合物处理3天，每组6只大鼠。试验化合物溶在20% β-羟基环糊精中，用管饲法每天口服0.2 mL（管饲EE2之前15分钟）。还服用载体、EE2本身和EE2+雷洛昔芬作为对照。在末次用药后将动物禁食过夜。次晨将动物称重，然后安乐死（用CO₂窒息），迅速采集子宫（利用中线腹部切开）并称重。

对每只动物计算子宫重量/体重比（UWR）。然后用以下公式计算雌激素诱发的响应的抑制百分数：

抑制百分数=100 × (UWR_雌激素-UWR_{试验化合物})/(UWR_雌激素-UWR_对照)

ED₅₀值从剂量响应曲线的线性部分的半对数回归分析得到。UWR数据和抑制%数据，当p≤ 0.05时，均用单因素方差分析（ANOVA）和Fisher’s PLSD的事后比较检验法进行统计分析。用基本上如上所述的试验观察到实施例1化合物是强效的子宫拮抗剂，ED₅₀值为0.053 mg/kg。

4天OVX大鼠子宫激动剂试验：为了保证试验化合物没有显著的部分子宫激动剂活性，将化合物施用给成熟的卵巢切除的大鼠。

将75天龄的大鼠切除卵巢，14天后当循环的雌二醇水平已达到最低值时开始治疗。用3个剂量的试验化合物治疗4天后（每组6只），测定体重、子宫湿重和子宫嗜伊红过氧化物酶（EPO）活性。还测定胆固醇含量以便与其它SERM比较降低胆固醇的相对能力。如果有任何子宫刺激的问题，组织学检验将确定上皮细胞高度。

子宫EPO活性的显著的（大于由0.1 mg/kg的雌二醇引起的增加的10%）和剂量响应性增加被用来作为可能的子宫激动剂活性的早期指示。与OVX组相比，实施例1化合物利用基本上如上所述的试验在最高达10 mg/kg的剂量未造成EPO活性的与剂量有关的显著性增加（Tukey Kramer方法；p<0.05）。没有一个以实施例1化合物用药的组显示出EPO活性的增加超过0.1 mg/kg雌二醇引起的10%。子宫内膜厚度的与剂量有关的显著增加也被用来作为可能的SERM子宫激动剂活性的早期征兆。与OVX组相比，剂量最高达10 mg/kg的实施例1化合物不造成子宫内膜厚度与剂量有关的显著增加。这些结果表明，实施例1化合物会提供所期望的子宫安全性。

OVX/半月板撕裂模型

大鼠半月板撕裂（MCT）模型是被充分描述的OA模型，其中在一个膝关节用外科介入方式（横切内侧半月板）造成关节损伤和疼痛。在使用雄性大鼠的标准MCT模型中，关节病理特征逐渐发展，在术后3周为借助于关节组织学进行测量。一项内部初步试验确定，MCT手术5周后，与进行了MCT手术的卵巢完整的动物相比，在OVX/MCT动物中疼痛和关节组织病理特征都显著增强。

在用基本上如上所述的撕裂模型处理的OVX动物中，实施例1化合物以与剂量有关的方式减小疼痛，在所有≥1.0 mg/kg的剂量下，与OVX/MCT组相比，所述的减小都是统计显著性的。另外，剂量3和10 mg/kg的实施例1化合物造成的关节疼痛减小与17α-乙炔基雌二醇造成的没有统计学上的差别。

P-CTXII

pCTX-II被认为是反映治疗OA的效力的一种有用的生物标志。例如见，Garnero P等，Ann Rheum Dis 2003, 62: 939-943; Mazieres B等，Arthritis Rheum 2003, 48: S683。

实施例1化合物显著地和与剂量有关地降低pCTX-II。另外，所有剂量的实施例1化合物都将pCTX-II降低到与用17α-乙炔基雌二醇治疗造成的降低没有统计学上差别的水平。