用于调节微囊化的活性成分的释放速率的方法

摘要

本发明公开了调节微囊化的活性成分的释放速率的方法，包括：1a)对制剂A)添加或削减胡椒基丁醚(PBO)即组分B)，2a)制剂A)，其包含至少一种微囊化的具有农用化学活性的活性成分和任选的在所述微囊外的PBO，3a)用水稀释组分A)和/或组分B)直到获得活性成分施用剂量，PBO/活性成分的重量比为0.1到80，只有当PBO存在于制剂A)的微囊外时削减PBO才是可行的。

说明书

本发明涉及在农艺学领域中的用于调节微囊化的活性成分的释放速率的方法。

更具体地，本发明涉及胡椒基丁醚(PBO)作为活性成分释放速率的调节剂，在包含农艺学领域中的活性成分、特别是杀虫剂、杀螨剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂、驱蠕虫剂和除草剂的制剂中的应用。

对农艺学领域中的活性成分诸如杀虫剂、杀螨剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂、驱蠕虫剂和除草剂的耐药性需要引起越来越多的注意，并且使得越来越难以控制和消除有害物种(昆虫、蜱螨、真菌、蜗牛、蟲虫(warms)、杂草)。对活性成分的耐药性应归于由有害物种发展形成的多种防御机制。一种可能的机制是能够将所述活性成分代谢(使其效力降低)的酶诸如例如氧化酶、酯酶的超量产生。因此，为了消除所述的有害物种，有必要增加剂量但随后为环境带来高风险，或者有必要开发新的活性成分。

众所周知，协同增效物质例如胡椒基丁醚(PBO)的使用可以在体外和/或体内影响杀虫剂、杀螨剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂、驱驱虫剂和除草剂的活性。这通过例如抑制一些代谢酶的活性来实现。例如，参见Gunning R.V.等人的″PiperonylButoxide″，215-225页，Academic Press(1998)；Benchaoui H.A.等人，J.Pharmacol.1996，48，753-759；Wen Z.等人，Pest.Science 1997，49，367-371；Zhao J.Z.，J.Econ.Entomol.2000，93，1508-1514；Nishiwaki H.等人，J.Pest.Science 2004，29，110-116，和专利申请EP 617,890，WO 2003/092,378。

已经建议在用活性成分处理有害物种之前的不同时间点，使用协同增效产品进行先前处理，以便获得更好的协同增效活性，特别是在存在有害物种对活性成分的高耐药性的条件下。用这种方法，所述活性成分可以发挥它们全部的活性，因为有害物种已被致敏并具有被削弱的自我防御性质。因此所述活性成分的效力得以被保持。然而，上述预处理具有缺点，因为分开施用不是很实用，另外，它们在经济上也是不利的。

杀虫剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂、杀螨剂、驱蠕虫剂、除草剂的微囊化的制剂以及它们的制备方法是现有技术中已知的。例如，参见Gimeno M.，J.Environ.Sci.Health，1996，B31(3)，407-420；Finch CA.″Encapsulation and controlled release″，专刊，Royal Society of Chemistry1993，138，1-12；专利申请，例如EP 183,999，WO 03/051,116，US2003/0119,675，EP 322,820。微囊化的活性成分制剂对于操作者安全而言是有用的，但是在微囊制好后，就不再可能随后调节活性成分的释放了。为了改变所述活性成分从所述微囊的释放，有必要调节微囊的厚度、多孔性和大小的特征。这需要改变微囊的制备方法。这意味着有必要获得可获得的多种微囊化的制剂，用于获得不同的活性成分释放时间。缺点是它们更昂贵。

一些与协同增效剂结合使用的微囊化的活性成分描述于例如专利申请WO 2006/111,553中。所述制剂包含(A)具有杀虫剂、杀螨剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂或驱蠕虫剂活性的微囊化的组分，和(B)针对(A)具有协同增效活性的组分。在这些制剂中，相对于组分(B)的平均释放时间[t_B]，组分(A)的平均释放时间[t_A]被推迟约1到12个小时的时间t＝[t_A]-[t_B]。这些制剂相对于两种组分的同生施用具有改善的活性成分效力。该文献没有描述当制剂制好后如何改变活性成分从微囊释放的速率。

认为需要具有可获得的微囊，其具有作为酶的抑制剂的活性成分的不同的释放时间，被协同增效剂所增效，用于不同的专门应用和/或待治疗物质。例如，对于杀虫剂应用，B型烟粉虱(Bemisia tabaci)酯酶的最大抑制时间为约10小时，而对于棉铃虫(Helicoverpa armigera)而言，为约4小时。因此，需要两种具有不同释放时间的制剂，用于对不同的昆虫获得最高的效力。这些制剂在工业实践中是不利的。需要其中活性成分的释放速度根据应用和/或待处理物种的不同是可调节的制剂。

本申请人意想不到地和令人惊讶地发现了解决上述技术问题的制剂。

本发明的一个目的是调节微囊化的活性成分的释放速率的方法，包括：

1a)对制剂A)添加或削减胡椒基丁醚(PBO)即组分B)，

2a)制剂A)，其包含至少一种微囊化的具有农用化学活性的活性成分和任选的在所述微囊外的PBO，

3a)用水稀释组分A)和/或组分B)直到获得活性成分施用剂量，

PBO/活性成分的重量比为0.1到80，只有当PBO存在于制剂A)的微囊外时削减PBO才是可行的。

在步骤1a)中，组分B)在制剂A)的微囊外被添加或削减。

令人惊讶地和意想不到地发现，对具有PBO/活性成分的重量比处于上述范围内的制剂添加或削减PBO，允许调节活性成分从所述微囊释放的速率。

所述具有农用化学活性的活性成分优选是杀虫剂、杀螨剂、杀真菌剂、杀蜗牛剂、驱蠕虫剂或除草剂。

在制剂A)中，PBO/活性成分的重量比优选为1到50、更优选5到30、更优选10到20。

始终对制剂A)添加(或削减)组分B)，以便根据实施例中所述的测定，改变活性成分从微囊释放的速率。

通常，PBO添加的范围优选优选从20重量％到600重量％的在制剂A)的微囊外的PBO。

对于在微囊外不含PBO的制剂A)而言，组分B)的添加使得获得PBO/活性成分的重量比为0.1到80、优选1到40、更优选3到20。

从工业观点考虑，根据本发明使用作为组分B)的PBO是特别有利的，因为制造商可以制备商用制剂A)，然后，终端用户根据具体的农用化学应用而异，通过对所述商用制剂添加或削减PBO，可以改变活性成分的释放速度。这避免了制备多种为满足用户需求所必需的制剂。

削减(减少)PBO可以通过例如微过滤技术实现。

在本发明的实施方案中，在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比优选与以下值不同：当活性成分是联苯菊酯时的5±0.5；当活性成分是α-氯氰菊酯时的2.2±0.2；活性成分是大利松时的1±0.1；当活性成分是吡虫清时的3±0.3；当活性成分是溴氰菊酯时的2±0.2；当活性成分是醚菊酯时的1±0.1；当活性成分是z-氯氰菊酯时的1.5±0.2；当活性成分是芬杀螨时的3±0.3；当活性成分是哒螨灵时的4±0.4；当活性成分是λ-三氟氯氰菊酯时的3.2±0.3。

所述制剂A)包含优选在水混悬液中的微囊化的活性成分；当PBO位于所述微囊外时，其作为水乳液存在。在制剂A)中的活性成分的浓度通常为1重量％到60重量％，优选2.5重量％到55重量％，更优选5重量％到45重量％。

所述活性成分属于以下类别的化学产品之一：拟除虫菊酯类，氨基甲酸酯类，有机磷酸酯类，硫脲类，其中存在1、2或3个氮原子的五元或六元杂环类，例如吡啶、吡咯、咪唑、苯并咪唑、噻唑、吡唑、哒嗪、喹唑啉、恶二嗪、三嗪；二硝基苯胺类，氯乙酰胺衍生物和二苯醚类。

以下是特别优选的：

(1)拟除虫菊酯类，例如丙烯菊酯，反丙烯除虫菊，四甲司林，炔酮菊酯，氯氰菊酯，β-氯氰菊酯，ζ-氯氰菊酯，Es-生物烯丙菊酯，氯菊酯，甲氰菊酯，四氟苯菊酯，联苯菊酯，苄呋菊酯，苄呋菊酯，氰戊菊酯，高氰戊菊酯，四甲司林，咪唑酮菊酯，苯醚菊酯，β-氟氯氰菊酯，δ-溴氰菊酯，三氟氯氰菊酯，醚菊酯，硅醚菊酯，除虫菊提取物，及其混合物，等等。

(2)新烟碱类，例如吡虫啉，吡虫清，噻虫啉，噻虫嗪和AKD1022。

(3)氨基甲酸酯类，如比加普，涕灭威，硫敌克，加保扶，丁基加保扶和残杀威。

(4)有机磷酸酯类，例如丙溴磷，乐果，氧化乐果，特丁磷，甲基谷硫磷，甲基内吸磷，甲基嘧啶磷，杀螟硫磷，敌百虫和马拉硫磷。

(5)线粒体电子载体抑制剂(″METI″)，例如芬杀螨，吡螨胺，唑螨酯，哒螨灵和唑虫酰胺。

(6)杀真菌剂，例如咯菌睛和嘧霉胺。

(7)驱蠕虫剂，例如甲苯咪唑，甲硝唑，芬苯达唑，噻菌灵，克霉唑和吡喹酮。

(8)神经传递抑制剂，例如恶二唑虫和氟虫清。

(9)其中对抗有害物种的作用机制尚不明确或者具有其它类型的机制的其它的活性成分，例如吡蚜酮，溴虫腈和啶虫丙醚。

(10)除草剂，例如：二硝基苯胺类，例如硝草胺和氟乐灵；氯乙酰胺衍生物，例如甲草胺，乙草胺，dimetenamide，异丙甲草胺，烯草胺，丙草胺；氨基甲酸酯类，例如禾大壮，野麦畏，EPTC；二苯醚类，例如乙氧氟草醚。其它有用的除草剂是：氟咯草酮，异恶草酮，敌草腈。

作为活性成分，更优选以下物质：丙烯菊酯，反丙烯除虫菊，四甲司林，炔酮菊酯，氯氰菊酯，Es-生物烯丙菊酯，氯菊酯，甲氰菊酯，四氟苯菊酯，联苯菊酯，苄呋菊酯，苄呋菊酯，氰戊菊酯，高氰戊菊酯，醚菊酯，咪唑酮菊酯，苯醚菊酯，β-氟氯氰菊酯，溴氰菊酯，三氟氯氰菊酯，吡虫啉，吡虫清，噻虫啉，硫敌克，丁基加保扶，加保扶，芬杀螨，哒螨灵，咯菌睛，嘧霉胺，芬苯达唑，克霉唑，吡喹酮，氟虫清，吡蚜酮和啶虫丙醚。

除所述活性成分之外，所述微囊还可以包含其它组分，例如所述活性成分的协同增效剂。所述协同增效剂优选包含至少一个碳环芳环或含磷衍生物。可以作为实例提及的有胡椒基丁醚(PBO)及其类似物，芝麻酚，熊果素，MGK 264，DEF。PBO及其类似物、熊果素是优选的。PBO是特别优选的。

在所述微囊内的其它组分是溶剂，例如：-可以提及的有C₉-C₂₀烷基苯，优选C₁₀-C₁₆烷基苯，以及它们的混合物，其中烷基可以是直链或支链的，当可能时，150，200，150ND，200ND，优选不含萘残留物，诸如150ND和200ND；

-C₃-C₁₄二羧酸的C₁-C₄烷基酯，例如戊二酸二甲酯，琥珀酸二甲酯，己二酸二甲酯，癸二酸二甲酯或它们的混合物，优选DBE(包含55-65重量％的戊二酸二甲酯、15-25重量％的琥珀酸二甲酯和10-25重量％的己二酸二甲酯的混合物)；

-C₃-C₁₄羧酸或醇酸的C₃-C₁₄烷基酯，例如EHL(乳酸乙基己基酯)和肉豆蔻酸异丙酯；

-C₁₂-C₂₂饱和或不饱和脂肪酸或其混合物的甲酯，优选油酸和亚油酸或它们的混合物的甲酯，例如生物柴油；

-乙酸的C₇-C₉烷基酯，例如乙酸庚酯(700，900)。

所述制剂A)除所述微囊之外还可以包含其它组分，例如分散剂，增稠剂，消泡剂，防冻剂，制霉菌剂和活性改性剂等等。

在分散剂中，可以提及以下物质：木质素磺酸盐类，例如木质素磺酸钠，如100M，88B和NA，和木质素磺酸钙，如CA，包含氧化乙烯和/或氧化丙烯嵌段的嵌段共聚物，如10400，聚羧酸盐类，例如聚羧酸钠，如TA72。

在增稠剂中，可以提及的有黄原胶在消泡剂中，可以提及有机硅化合物，例如1510。

在防冻剂中，可以提及的有无机盐，如硝酸钙，碳酸钠；作为制霉菌剂，可以提及的有被取代的三嗪类，例如C，和苯并异噻唑啉酮类，例如GXL。

在活性改性剂中，可以提及的有以下物质：

-在除草剂的情况下，“安全剂”(解毒剂)，例如呋喃解草唑，解毒喹；

-协同增效剂，例如PBO(胡椒基丁醚)，特别是在杀虫剂、杀真菌剂和除草剂的情况下；

-在杀虫剂的情况下，性外激素和利它素(cairomones)。

特别优选的是在所述微囊内包含协同增效剂(优选PBO)的制剂A)。该制剂优选即使在所述微囊外包含PBO，但是当所述制剂A)被制好后，释放时间是固定的。

将在乳液或可乳化液的形式下的组分B)添加到制剂A)。乳液或可乳化液是指根据CIPAC MT 36方法，在水中形成稳定的乳液的组分B)和表面活性剂的混合物。在可乳化液中或在乳液中的组分B)优选以20重量％到85重量％存在。

非离子表面活性剂，优选与离子表面活性剂混合的非离子表面活性剂，存在于所述可乳化液或所述乳液中。非离子表面活性剂的实例是烷基芳基酚类，优选被乙氧基化，例如乙氧基化的三苯乙烯基酚类，乙氧基化的脂肪醇类，乙氧基化的蓖麻油，乙氧基化的山梨糖醇酐油酸酯，其中所述乙氧基化单元可为1到60个，优选5-40个。作为阴离子表面活性剂的实例，可以提及的有磺酸盐，磺基丁二酸盐，等等，特别是十二烷基苯磺酸盐，如60BE，或磺基琥珀酸二辛酯，优选为盐的形式，如Ca盐、Na盐或胺盐。

本发明的组合物在空气中被施用于、优选被喷射到地面、植物上。之后，所述活性成分开始释放。所述活性成分以其典型的施用剂量进行施用，所述典型的施用剂量通常被定义为是在水中被稀释的农业经济学有效量的活性成分。通常，根据用于施用的设备而异，在杀虫剂的情况下，水的量为50到2,000升/公顷，优选600到1,200升/公顷。

可将PBO(组分B))添加到制剂A)，或者反之亦然，然后加入水，直到获得活性成分的施用剂量。或者，可将水加入到制剂A)和/或组分B)中，并且然后混合。

施用剂量是本领域技术人员公知的，根据活性成分和/或使用率而异。

本发明的组合物可以为水性混悬乳液()的形式。该形式通常具有良好的稳定性。或者，所述组合物为水混悬分散体(suspo-dispersions)或水混悬微乳液(suspo-microemulsions)的形式。本领域技术人员通过使用本领域的公知常识，能够容易地制备本发明的组合物的乳液、分散体、微乳液等形式。

制剂A)可以根据已知技术制备，例如根据专利申请WO2006/111,553和WO 2007/039,055制备，其作为参考被并入本文。它们通常包含具有平均直径为1到30微米、优选2到20微米的聚合物微囊。所述微囊包含至少一种活性成分的芯和聚合材料的壳。所述壳由不溶于水的高分子膜形成，所述不溶于水的高分子膜通常通过界面聚合可被原地获得。所述聚合物优选是通过缩聚可获得的那些。可以提及的有聚酰胺，聚酯，聚氨酯-脲，更优选聚脲。

如上所述，对制剂A)添加或削减组分B)允许根据最终应用来调节活性成分的释放速率。这是有利的，因为这样就使得有可能改变制剂的生物效力以及拓宽作用谱。

以下是一些说明性的实施例，其不对本发明构成限制。

实施例

表征

用于活性成分从微囊释放的动力学的分析测定方法

该方法在于将已知量的本发明的组合物A)+B)(在水中被稀释达到施用剂量)沉积到Teflon片上，并且在预定的时间间隔(例如1、2、4、6、18、24小时)，通过在每个时间间隔用能够使活性成分增溶且不影响微囊的聚合物稳定性的溶剂例如正己烷提取释放出的活性成分。轻微搅拌以避免微囊被破坏。

更具体地，用于聚脲微囊的方法的程序如下。

1b)用水稀释本发明的组合物A)+B)直到获得包含5到100g活性成分/1,000升水(优选10-20g活性成分/1,000升水)的混悬液。

2b)将1ml的在1b)中制备的组合物放在尺寸为6.5×5×0.02cm的Teflon片上；

3b)在预定的时间，将该Teflon片与50ml的己烷一起转移到300ml烧瓶中；

4b)轻微搅拌约5分钟；

5b)在0.45μm过滤器上过滤；

6b)通过适合的分析技术测定在提取溶剂中的活性成分的量。

每次使用不同的Teflon片，在不同的预定的时间间隔之后重复所述的程序。在所述结果的基础上，通过对随着时间变化从所述胶囊释放出的活性成分的相对量(用相对于在微囊中的同样活性成分的起始浓度的％表示)进行绘图，来测定所述活性成分的释放动力学。

相对量可根据下式来计算：相对量％＝C/C_F×100

其中：

C＝在步骤6b)中测定的从微囊释放的活性成分的浓度；

C_F＝在制剂A)的微囊中的活性成分的起始浓度。

稀释时制剂的稳定性

稀释时制剂的稳定性是根据CIPAC MT 161方法，通过可混悬性(suspendability)(沉降)测量来测定的。

可混悬性越大(＜沉降)，则组合物的稳定性越大。

混悬液的加速稳定性测试

这个测试用于评价在超过1年的时间，混悬液在室温下的行为，假定在54℃历时一天相当于在室温下历时约1个月。

根据CIPAC MT 46测试，将组合物置于54℃历时14天(老化测试)，然后评价滴度和囊封效率。

生物测定方法

叶子浸渍生物测定方法(Leaf dip bioassay method)

生物活性是在实验室中，在合适的昆虫物种上，通过使用现有技术已知的方法(称作“叶子浸渍生物测定方法”)来进行评价的，该方法例如由Cahill，M.等人的Bull.Entomol.Res.85，181-187，1995进行描述。将没有暴露于杀虫剂而生长的棉花植物切成4cm直径的圆盘形。将这些圆盘浸入到含有0.01％(重量％)的(非离子表面活性剂)的杀虫剂溶液中，并在室温下干燥。选择所述杀虫剂溶液使得获得介于0到100％之间的死亡率。将对照的叶子浸入到Agral 0.01％在水中形成的溶液中。一旦干燥，将所述的圆盘放在陪氏培养皿(直径3cm，高度1.5cm)中的琼脂上。将大约20个成年昆虫放在该处理过的棉花圆盘上，并且在25℃放置24小时。在开始时即零时间、24和48小时之后，对活的昆虫进行计数，目的是减压死亡率。

Potter精度实验室喷雾塔

使用Potter精度实验室喷雾塔(″Laboratory apparatus for applyingdirect sprays and residual films″，The Annual of Applied Biology，vol.39，No.1，March 1，1952)测试了制剂的效力。

将测试生物体放在陪氏培养皿(10-15个成年体/复制品(replicate))。在施用之前，通过调节喷雾压力、施用速度和喷嘴的类型来用去离子水校正喷雾塔，来提供2mg/cm²±10％(200升/公顷)的输出。施用量是通过在处理之前和刚刚处理之后，称量玻璃板(作为参考)的重量来确定的。在校正步骤后，将该陪氏培养皿用去离子水喷涂(用于未经处理的对照)，然后用测试项溶液(从最低浓度开始)喷涂。在不同的产品施用过程中，将喷雾器设备用去离子水冲洗几次。在处理后(AT)的不同的时间：30分钟，1小时，3小时，24小时，观察测试生物体的情况。

实施例1

包含PBO和联苯菊酯的微囊的组合物

步骤a)：制备包含10重量％的在微囊外的PBO的制剂A)

将20.8g的活性成分联苯菊酯(96％纯度)和0.2g的PBO(纯度94％)加入到被包含在装备有搅拌器的容器中的20g的Solvesso 200(C₉-C₁₆烷基苯的混合物，具有226-284℃的馏程)。将该混合物加热到50℃并在搅拌下被保持直到实现均化。然后，在搅拌下，加入2.87g的M 220(异氰酸酯MDI)。

将如此制备的混合物加入到1.0g的分散剂CA和39.0g的水的分散体中。然后在Turrax中，在最大速度(约10,000rpm)下搅拌混合物历时2分钟。获得了水包油乳液。

然后通过使用在800rpm下的搅拌器，在搅拌下，加入2.75g的包含40重量％己二胺(HMDA)的水性溶液。

将如此获得的混合物转移到在50℃下保持的反应器中。在几分钟后，加入4.0g的增稠剂(23，预胶化的，2.7重量％的水，并包含1g的GXL作为制霉菌剂)，0.2g的消泡剂1510，并在50℃下保持4小时。

然后将混合物在室温下冷却并加入9.0g的硝酸钙。获得具有200g/l(20重量％)的活性成分浓度的微囊的混悬液。

将10.6重量份的PBO(滴度94％)，0.2重量份的1510，3.0重量份的预凝胶，2.4重量份的TE777和73.8重量份的水加入到10重量份的所获得的混悬液中，获得在混悬液中为约20g/l(2重量％的活性成分)的活性成分含量。在微囊内的PBO为约0.2g/l(0.02重量％)，在微囊外的PBO为约100g/l(10重量％)。

获得的混悬乳液的加速稳定性测试如上述表征中所述来进行。所述混悬乳液的化学-物理稳定性不改变。

步骤b)：加入可乳化液形式的PBO组分B)

在轻微搅拌下，将由80重量％的PBO和20重量％的FF6和FF475的4∶1重量比的混合物形成的11重量份的混合物B)加入到89重量份的混悬乳液A)中。PBO的加入量为活性成分重量的约5倍。在组合物(表示为(A+B))中的活性成分的含量是1.8重量％，并且在微囊外的PBO与活性成分的重量比为10∶1。

然后通过向72.7重量份的制剂A)中加入27.3重量份的B)(等于活性成分重量的15倍)进行相同的程序。在组合物(表示为(A+B)′)中的活性成分是1.45重量％并且在微囊外的PBO和活性成分之间的重量比为20∶1。

然后将制剂(A)以及组合物(A+B)和(A+B)′的制剂A)用水稀释，直到获得等于20mg/l的联苯菊酯浓度。通过使用如上述表征中所述的程序和正己烷作为提取溶剂，从微囊释放出的联苯菊酯的含量是通过GC-ECD技术进行测定的。在预定的时间间隔之后测定联苯菊酯的浓度。数据报道在表1中。

表1

A)      (A+B)       (A+B)′

时间(h)    (％)    (％)        (％)

1          5       7           8

2          5       7           23

4          7       30          45

6          15      45          67

18         17      55          80

24         17      71          93

实施例2

包含PBO和联苯菊酯的微囊的组合物

重复进行实施例1，但是在步骤a)中，通过使用以下的反应物来制备微囊的混悬液：

联苯菊酯(96％)        15.6g

PBO(94％)             0.15g

EHL                       15.0g

M220                      2.14g

HMDA，40重量％        2.06g

88B                       1.1g

硝酸钙                9.0g

水                    53.0g

获得微囊的混悬液，微囊具有15重量％的活性成分量并且在微囊内的PBO为0.14重量％。

然后，向66.7重量份的如此获得的混悬液中加入0.2重量份的1510、5重量份的23(2.7重量％的预凝胶)、0.1重量份的GXL、28重量份的水。获得包含10重量％的活性成分和0.1重量％的在微囊内的PBO的微囊的混悬液。使该获得的混悬液A)经历稳定性测试(参见表征)。混悬液在化学上和物理上是稳定的。

步骤b)

如实施例1的步骤b)中所报道的，将72.2重量份的混悬液A)加入到27.8重量份的混合物B)中，从而获得组合物(表示为(A+B))。活性成分的含量是7.2重量％，PBO的量是活性成分重量的约3倍。

通过将42.9重量份的B)加入到57.1重量份的制剂A)中来重复相同的程序，获得了组合物(A+B)′。活性成分的量是5.7重量％，以及在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是6。

类似地，向47重量份的A)中加入53重量份的B)。在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是9。在如此获得的组合物(A+B)″中，活性成分的浓度是4.7重量％。

然后制剂A)、(A+B)、(A+B)′和(A+B)″根据实施例1所述用水进行稀释，直到获得等于20mg/l的联苯菊酯浓度。在不同的预定时间的活性成分联苯菊酯的数据报道于表2中。

表2

A)    (A+B) (A+B)′(A+B)″

时间(h)   (％)  (％)  (％)   (％)

1         5     32    38     38

2         12    38    54     53

4         18    47    79     76

6         23    67    91     100

18        30    68    100    100

24        37    70    100    100

实施例3

包含PBO和α-氯氰菊酯的微囊的组合物

步骤a)：制备包含20重量％的在微囊外的PBO的制剂A)

重复进行实施例1，但是在步骤a)中，通过使用以下的反应物来制备微囊的混悬液：

α-氯氰菊酯(98％)    15.3g

PBO(94％)            15.8g

M220                     2.18g

Na                       1.1g

HMDA，40重量％       2.1g

硝酸钙               10g

水                   50g

从而获得微囊的混悬液，微囊具有的活性成分量为15重量％以及在微囊内的PBO为15重量％。

然后将23.7重量份的PBO、0.2重量份的1510、3.0重量份的预凝胶、2.4重量份的TE777和37.3重量份的水加入到33.4重量份的该获得的混悬液中，从而获得活性成分的量为50g/l(5重量％)，在微囊内的PBO的量为50g/l(5重量％)，在微囊外的PBO的量为约200g/l(20重量％)。

使该获得的混悬液经历稳定性测试(参见表征)。所述混悬液在化学上和物理上是稳定的。

步骤b)

如实施例1的步骤b)中所报道的，但是使用45.7重量份的制剂A)和54.3重量份的混合物B)。加入的PBO是活性成分重量的约16倍。在如此获得的组合物(A+B)中的活性成分的含量是2.3重量％，在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是20∶1。

然后根据实施例1所述将制剂A)和组合物(A+B)用水稀释，直到获得等于20mg/l的α-氯氰菊酯的浓度并且根据实施例1进行表征。数据报道于表3中。

表3

A)        (A+B)

时间(h)   (％)      (％)

1         28        49

2         36        62

4         42        72

6         54        83

18        78        100

24        90        100

实施例4

包含PBO和α-氯氰菊酯的微囊的组合物

重复进行实施例1，但是在步骤a)中，通过使用以下的反应物来制备微囊的混悬液：

α-氯氰菊酯(滴度96％)     15.3g

PBO(94％)                 0.2g

EHL                           15g

M 220                         2.1g

CA                            1.0g

HMDA，40重量％            2.06g

1510                          1.1g

硝酸钙                    10.0g

水                        53.1g

获得微囊的混悬液，微囊具有的性成分含量为15重量％以及PBO为0.19重量％。

然后向33.3重量份的如此获得的混悬液中加入0.2重量份的5重量份的2.4重量份的GXL、25.7重量份的水，从而获得包含5重量％的活性成分的微囊的混悬液，在微囊内的PBO的量是0.06重量％。使该获得的混悬液经历如上述表征中所述的稳定性测试。所述混悬液在化学上和物理上是稳定的。

步骤b)

重复实施例1，但是在步骤b)中，将84.2重量份的制剂A)加入到15.8重量份的混合物B)中。PBO的量为活性成分重量的约3倍。该获得的组合物(A+B)具有的活性成分的含量为4.2重量％。

通过向76.2重量份的制剂A)中加入23.8重量份的B)来重复相同的程序，获得在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比等于5/1。该获得的组合物(A+B)′具有的活性成分的含量为约3.8重量％。

通过向4.4重量份的A)中加入5.6重量份的B)来以类似的程序制备了组合物(A+B)″，使得在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是20∶1。(A+B)″中的活性成分的含量为2.2重量％。

然后，将制剂A)和组合物A)+(A+B)、(A+B)′、(A+B)″用水稀释，直到获得等于20mg/l的α-氯氰菊酯的浓度并且根据实施例1进行表征。数据报道于表4中。

表4

A)   (A+B) (A+B)′   (A+B)″

时间(h)   (％)  (％)  (％)      (％)

6         42    43    54        55

18        44    58    65        79

24        44    69    71        88

实施例5

包含PBO和λ-三氟氯氰菊酯的微囊的组合物

重复进行实施例1，但是在步骤a)中，通过使用以下的反应物来制备微囊的混悬液：

λ-三氟氯氰菊酯(96％)15.6g

PBO(94％)            16.0g

M 220                    2.21g

HMDA，40重量％       2.15g

88B                      1.1g

硝酸钙               10.0g

水                   52.94g

从而获得微囊的混悬液，微囊具有的活性成分含量为15重量％以及在微囊内的PBO为15重量％。

然后，向33.3重量份的该获得的混悬液中加入0.2重量份的1510、5重量份的预凝胶、5重量份的TE777和56.5重量份的水，从而获得50g/l(5重量％)的活性成分的含量，50g/l(5重量％)的在微囊内的PBO。使该获得的混悬液经历稳定性测试(参见表征)。混悬液在化学上和物理上是稳定的。

步骤b)

如实施例1的步骤b)中所报道的，但是使用76.2重量份的制剂A)和23.8重量份的混合物B)。PBO的量是活性成分重量的约5倍，该获得的组合物(A+B)具有的活性成分的含量为3.81重量％。

通过将38.5重量份的在乳液中的PBO加入到61.5重量份的制剂A)中来重复相同的程序。在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是10/1，从而获得组合物(A+B)′，其中活性成分的含量等于3.07％w/w。

以类似的过程继续制备组合物(A+B)″，为了获得在微囊外的PBO与活性成分之间的重量比是20∶1，从而将55.6重量份的B)加入到44.4重量份的制剂A)中。活性成分的含量为2.2重量％。

然后将制剂A)和组合物(A+B)、(A+B)′、(A+B)″用水稀释，直到获得等于20mg/l的λ-三氟氯氰菊酯的浓度并且根据实施例1进行表征。数据报道于表5中。

表5

A)    (A+B) (A+B)′(A+B)″

时间(h)   (％)  (％)  (％)   (％)

1         10    29    37     35

2         11    31    49     57

4         21    31    75     71

6         21    52    92     100

18        29    65    100    100

24        35    72    100    100

实施例6

包含PBO和芬杀螨的微囊的组合物

重复进行实施例1，但是在步骤a)中，通过使用以下的反应物来制备微囊的混悬液：

芬杀螨(97％)     15.4g

PBO(94％)        0.15g

EHL                  15.0g

M 220                2.14g

CA                   1.0g

HMDA，40重量％   2.06g

88B                  1.1g

硝酸钙           9.0g

水               54.1g

从而获得微囊的混悬液，微囊具有的活性成分含量为15重量％。

然后，向66.7重量份的该获得的混悬液中加入0.2重量份的Defomex 1510、5.0重量份的0.1重量份的GXL和28重量份的水，从而获得在混悬液中的活性成分的含量为约100g/l(10重量％的活性成分)，在微囊内的PBO为约1g/l(0.1重量％)。

使该获得的混悬液经历稳定性测试(参见表征)。所述混悬液在化学上和物理上是稳定的。

步骤b)

重复实施例1的步骤b)，但是使用28.6重量份的制剂A)和71.4重量份的混合物B)。加入的PBO的量是活性成分重量的约20倍，该获得的组合物(A+B)具有的活性成分的含量为2.86重量％。

然后将制剂A)和组合物(A+B)用水稀释，直到获得等于10mg/l的芬杀螨的浓度并根据实施例1进行表征。数据报道于表6中。

表6

A)    (A+B)

时间(h)   (％)  (％)

1         14    8

2         26    42

4         30    59

6         35    64

18        55    88

24        56    96

实施例7

效力试验

在黑豆蚜的敏感株上，使用如表征中所述的Potter塔，在放在6厘米直径的陪氏培养皿中的大约15个成年雌性黑豆蚜上(Aphis fabae)上，根据表征中所报道的生物测定方法-Potter精度实验室喷雾塔来测试实施例2所述的组合物。微囊的混悬液A)以及组合物(A+B)、(A+B)′和(A+B)″如实施例1所述用水进行稀释，直到获得3g活性成分/公顷的可施用剂量。

作为比较，将实施例1的混合物B)在水中稀释，直到活动27g的胡椒基丁醚/公顷的可施用剂量。

在相当于2.7毫巴的压力下，使用体积为1.25ml的杀虫剂溶液进行处理。在每次处理之后，用去矿化水洗涤Potter塔若干次。在1小时、2小时、4小时和6小时之后，评价了用黑豆蚜的死亡率表示的效力。

表7

在黑豆蚜上测试的基于微囊化的联苯菊酯、混悬液A)和组合物(A+B)、(A+B)′和(A+B)″的制剂的效力

死亡率(％)        死亡率(％)    死亡率(％)     死亡率(％)

在1小时后         在2小时后     在4小时后      在6小时后

对照(混合物B)  0                 0             0              0

A)             14                22            26             32

(A+B)          65                80            91             100

(A+B)′        82                93            100            100

(A+B)″        83                98            100            100