通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的应用

摘要

本发明公开了通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的应用，涉及药物化学领域，本发明通过实验证明通心络可降低肺动脉高压大鼠的平均肺动脉压，改善心输出量，降低肺血管阻力，改善右心室及肺血管重构。长期使用通心络可有效治疗肺动脉高压，改善右心功能。

说明书

技术领域：

本发明涉及药物化学领域，尤其涉及通心络药物的新的用途，特别是通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的应用。

背景技术：

通心络胶囊(中国药典2005版一部-586页)是运用中医络病学说，在益气、活血化瘀、搜风解痉通络的治法指导下，研制而成的中药复方胶囊，主要成分为水蛭、全蝎、蜈蚣、蝉蜕、土鳖虫五种虫类药物，配以人参、赤芍、冰片、檀香、降香、乳香(制)、酸枣仁(炒)等药物而成，具有益气活血、通络止痛之功效，在临床广泛应用于冠心病、心绞痛、动脉粥样硬化、脑梗塞等心脑血管疾病的预防和治疗。但对于肺血管疾病和肺动脉高压的治疗作用目前尚未见报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的应用，所述的通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的这种应用要解决现有技术中未出现通心络对肺血管疾病和肺动脉高压的治疗作用的技术问题。

本发明提供了通心络在制备治疗肺动脉高压药物中的应用。

本发明和已有技术相比，其效果是积极和明显的。本发明通过大鼠肺动脉高压模型，给予通心络干预治疗，明确了通心络对于肺血管的作用。通心络可降低肺动脉高压大鼠的平均肺动脉，改善心输出量，降低肺血管阻力，改善右心室及肺血管重构。长期使用通心络可有效治疗肺动脉高压，改善右心功能。

附图说明：

图1是对照组中肺组织HE染色照片。

图2是MCT组中肺组织HE染色照片。

图3是采用0.4g/kg通心络治疗MCT所致肺动脉高压模型后的大鼠肺组织HE染色照片。

图4是采用0.8g/kg通心络治疗MCT所致肺动脉高压模型后的大鼠肺组织HE染色照片。

具体实施方式：

实施例1

一、材料与方法

1.1建立大鼠肺动脉高压模型

雄性SPF级SD大鼠，体重200-220g。一次性皮下注射野百合碱(Monocrotaline，MCT，40mg/kg)，3周后，随机采用右心导管方法测定肺动脉压力及血流动力学参数，鉴定是否造模成功。

1.2实验分组及药物干预

(1)模型组(MCT组)：10只大鼠，肺动脉高压模型建立成功后，灌胃给予生理盐水，连续3周。

(2)通心络小剂量组(Tongxinluo 0.2g·kg·d组)：10只大鼠，肺动脉高压模型建立成功后，灌胃给予通心络，连续3周。

(3)通心络中剂量组(Tongxinluo 0.4g·kg·d组)：10只大鼠，肺动脉高压模型建立成功后，灌胃给予通心络，连续3周。

(4)通心络大剂量组(Tongxinluo 0.8g·kg·d组)：10只大鼠，肺动脉高压模型建立成功后，灌胃给予通心络，连续3周。

(5)正常对照组(Control组)：10只大鼠，正常大鼠，灌胃给予生理盐水(0.5ml·kg·d)，连续3周。

1.3血流动力学测定

1.3.1右心导管法测定给药3周后各组动物的平均肺动脉压(meanpulomonary arterial pressure，mPAP)、右心室收缩末期压力(right ventriclesystolic pressure，RVSP)、心输出量以及心率等参数。具体方法如下：大鼠经6％水合氯醛(0.6ml/100g)腹腔麻醉，仰卧固定后分离右侧颈外静脉约1cm左右，结扎远心端，并作“V”形切口，将与换能器连接并充满肝素盐水的右心导管(自制末端弯曲PE 50导管，内径0.6mm，外径0.9mm)插入，动物生理多导仪记录右心室收缩末期压力RVSP、肺动脉收缩压(pulmonary arterial systolic pressure，PASP)、肺动脉舒张压(pulmonaryarterial diastolic pressure，PADP)，计算mPAP。

mPAP(mmHg)＝1/3PASP(mmHg)+2/3PADP(mmHg)

1.3.2心输出量(Cardiac Output，CO)测定：热稀释法测定心输出量。具体方法：将右心导管回抽至上腔静脉，分离左侧颈总动脉，结扎远心端，剪口，将穿有温度探测器的PE管插入胸主动脉或腹主动脉。用1ml针筒抽取0-4℃肝素化生理盐水，迅速向上腔静脉推进0.2-0.3ml，观察并记录温度曲线的变化，计算心输出量，同时计算肺血管阻力(pulmonary vesselresistance，PVR)。

PVR(Wood)＝mPAP(mmHg)/CO(ml·min)

1.4右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index，RVHI)测定

血流动力学测定完毕后，开胸取出整个心脏，用预冷生理盐水冲洗，沿着房室沟剪去心房及大血管根部，沿后室壁间沟将右心室游离壁分离，滤纸吸水后称量右心室游离壁(RV)及左心室+室间隔(LV+S)的重量，并计算右心室肥厚指数。

右心室肥厚指数(RVHI)＝RV/(LV+S)。

1.5肺组织苏木精-伊红(HE)染色

处死大鼠后，取右肺中叶以10％中性甲醛溶液固定1天，石蜡包埋，沿肺门水平横切，厚度约为5μm，进行HE染色。切片经常规二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗，苏木精染色5min，自来水冲洗。根据染色的深浅，用0.5％盐酸乙醇分化，自来水浸泡15min，置伊红液2min，常规脱水，透明，封片。

1.6肺小动脉血管形态分析

常规HE染色，随机选取直径100～200μm范围的肺小动脉，运用IPP6.0图像分析软件测定血管壁厚度(wall thickness，WT)、血管外径(externaldiameter，ED)、血管总面积(total area，TA)以及血管腔面积(lumen area，LA)，分析WT％和WA％等衡量血管重构的指标。

WT％＝(2×WT/ED)×100％

WA％＝[(TA-LA)/TA]×100％

1.6统计学处理

数据均采用均值±标准差表示，组间比较采用t检验，统计处理由SPSS1.0完成，以P＜0.05为差异有统计学意义。

二、结果

2.1大鼠一般情况与死亡情况

对照组及通心络给药组大鼠体毛光泽，反应敏捷，饮食正常。MCT组大鼠逐渐变得虚弱，反应迟钝，蜷缩少动，体毛暗淡无光泽。

实验动物死亡情况：本实验公用50只SD大鼠，死亡2只，均为MCT组，分别死于实验第18天和20天。大鼠死亡前表现为呼吸困难、口唇发绀。解剖后可见胸腔积液，腹腔积液，肝脏淤血肿胀。取出心肺后，大体可见肺部瘀点瘀斑，短轴横切心脏，可见右心室游离壁明显肥厚，提示大鼠在肺动脉高压病程中发生了右心衰竭。

2.2血流动力学变化

MCT组大鼠mPAP明显高于对照组，模型建立成功。与MCT组相比，通心络各个剂量组均可显著降低肺动脉高压大鼠的mPAP和RVSP(p＜0.01或p＜0.05)。通心络各剂量组均可明显改善肺动脉高压所致心输出量减少，降低肺血管阻力(PVR)，不影响心率。(见表1)

表1各组大鼠血流动力学参数比较

p*＜0.05，compared with control group；p*＜0.01，compared with MCT group；

p^#＜0.05，compared with control group；p^##＜0.05，compared with MCT group；

2.3右心室肥厚指数和肺血管重构

一次性皮下注射MCT21天后，可见明显的右心室肥厚，RVHI为(0.23±0.02)，通心络大剂量和小剂量组可明显改善大鼠右心肥厚指数(p＜0.05或p＜0.01)。大鼠肺中小动脉图像分析结果可见，通心络可明显改善肺动脉高压大鼠的右心和肺血管重构。MCT组大鼠肺中小动脉WT％和WA％均明显高于正常对照组。通心络组大鼠肺中小动脉WT％和WA％均明显低于MCT组(p＜0.01)，但通心络组大鼠肺中小动脉WT％和WA％均明显高于对照组(p＜0.05)。(见表2)

表2各组大鼠中RVHI，WT％and WA％比较

p*＜0.05，compared with control group；p*＜0.01，compared with MCT group；

p^#＜0.05，compared with control group；p^##＜0.05，compared with MCT group；

肺组织HE染色显示，对照组大鼠肺小动脉内皮连续性好，细胞分布均匀，薄厚一致；MCT组大鼠内皮细胞连续性破坏，呈立方形或柱状突向管腔，中层管壁厚度明显增加，管腔面积明显变小，伴有血管周围炎。通心络剂量组大鼠肺血管小动脉内皮连续性良好，管壁厚度较MCT组明显减少，管腔变宽，血管周围炎症减轻。(见图1、图2、图3和图4)

由图3和图4可知，通心络能有效抑制MCT所致大鼠肺血管微小动脉中层增厚。

三、结论

通心络可降低肺动脉高压大鼠的平均肺动脉，改善心输出量，降低肺血管阻力，改善右心室及肺血管重构。长期使用通心络可有效治疗肺动脉高压，改善右心功能。