一种改良斑鳜生长性状的杂交育种方法

摘要

本发明属于人类生活必需的农业技术领域，涉及一种改良斑鳜生长性状的杂交育种方法，包括下列主要步骤：选择斑鳜作为父本，翘嘴鳜作为母本，采用搭建塑料大棚越冬及强化培育等方法；采取父母本同步一次注射外源激素法进行催产，人工授精时采用干毛巾包裹亲鱼；用人工半干法授精、环道流水孵化等繁殖技术措施，使父本利用率1.5-2倍；采取分段培育模式，配套适口饵料鱼，强化苗期及养成期的养殖管理。本发明成功开发了一种提高斑鳜生长性状的方法，培育出抗逆、抗病及生长速度明显优于斑鳜的改良新品种。同时改变现有斑鳜杂交育种的方法，保证了亲本的同步性成熟，延长可繁殖时间，操作更为简便，提高了人工繁殖、孵化杂交苗的生产效率及成活率。

说明书

技术领域

本发明属于人类生活必需的农业技术领域，涉及鱼类养殖技术，更详细地是涉及利用鱼类种间杂交育种技术产生具有明显形态特点和生长优势的新品种斑鳜的方法。

背景技术

为提高斑鳜的生长速度，培育新的具有明显生长优势、抗逆、抗病性强的新鳜鱼品种，现主要技术是杂交育种。其制种方法如下：

1、选择斑鳜作为父本，翘嘴鳜作为母本；

2、流水刺激法促进其性成熟；

3、采用注射外源激素催产，并且先注射父本斑鳜，2个小时后再注射母本翘嘴鳜；

4、干法人工授精；

5、杂交苗种分阶段培养并进行食性转化。

现斑鳜与翘嘴鳜杂交繁殖方法存在如下缺点：

1、流水刺激法不能很好地促进这两种不同鳜性腺的同步成熟，使得亲本的繁殖期不能更有效的重叠，同时，满足不了生产上早繁的需求；

2、催产方法复杂，父母本间隔2小时注射且分两次注射，增加了人为操作对亲鱼造成的应激反应，不利于催产及亲本的产后恢复；

3、干法人工授精，对于主要来源于野生资源，很少有人工养殖的父本斑鳜来说，精子的利用率低，造成资源的严重浪费；

4、对杂交苗的进行食性转化降低了苗种的成活率。

对养殖鱼类而言，提高鱼类生长速度、增强抗病、抗逆性是育种工作中的首要任务，因此在杂交培育新品种的基础上，加以科学的选择育种，有利于育种工作成效的提高。同时为适应大规模的苗种生产应充分利用亲本的生产力，简化操作步骤，提高生产效率。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的缺陷，提供一种充分利用资源，更有效改良斑鳜生长性状的新的杂交育种方法。

本发明的改良斑鳜生长性状的杂交育种方法主要包括如下步骤：以翘嘴鳜作母本亲鱼，野生斑鳜作为父本亲鱼，进行人工催产、授精及苗期培育。具体来说各步骤如下：

（1）亲鱼选择及促进性腺同步成熟：

选择体质健壮、生长速度快、2龄以上原种翘嘴鳜作母本亲鱼，1龄以上的野生斑鳜作为父本亲鱼。繁殖前一年冬搭建塑料大棚，提高养殖水温，强化培养，使母本翘嘴鳜和父本斑鳜的性腺发育周期能同步进行，从而保证两种鳜鱼繁殖期的有效重叠，有利于种间的杂交。同时该方法使亲鱼的性腺比当地正常气候提前1个月左右成熟，可进行早繁。

（2）人工催产及采精采卵：

     水温为20℃-30℃，且周水温温差在2℃左右进行人工催产。采取一次性父母本同步注射外源激素法进行催产，母本亲鱼按照以下用量注射外源激素：每千克鱼体重量注射15-20ug促黄体素释放激素类似物（LRH-A）、1200-1500IU绒毛膜促性腺激素（HCG）和5-8mg马来酸地欧酮（DOM）；父本亲鱼按照以下用量注射外源激素：每千克鱼体重量注射10ug促黄体素释放激素类似物、750IU绒毛膜促性腺激素和4mg马来酸地欧酮。人工催产前后亲鱼的生活环境温度为20℃-30℃，昼夜温差3-5℃。人工催产后的24-28小时将母本亲鱼和父本亲鱼捞起进行人工采卵和采精。采精或采卵时采用干毛巾包裹亲鱼，减少人为操作对亲鱼造成的应激反应。

（3）采用半干法人工授精：

人工授精是将父本斑鳜精子挤出，父本斑鳜精子密度（2.75×10¹⁰个/ml)约是翘嘴鳜雄鱼精子密度（0.59×10¹⁰个/ml）的4.7倍。人工授精时，先将父本斑鳜精子挤出，加入适量0.8-0.9%（w/v）氯化钠溶液进行稀释，再倒入鱼卵中搅拌均匀，加入少量清水稍加搅拌，静置1-2分钟，用清水清洗数次，放入环道内孵化，每立方水体入受精卵2-3万粒；母本的数量与父本的数量优选3-4：1。采用这个方法进行人工授精，可以使得父本利用率提高1.5-2倍。

（4）苗期培育：

采取分段培育模式，破膜2天后投喂适口饵料鱼苗，如团头鲂、鲮鱼苗等，投喂量为4-8尾饵料鱼/每尾杂交鳜苗，投喂量随日龄渐增。开口4天后从环道转入水泥中进行培育，水泥池面积18平方米，水深0.8—1米，每平方米放2000—3000尾。达1cm时放入池塘进行专池培育，池塘面积1—2亩，水深1.2米—1.5米，每亩放养4000尾，投喂鳜鱼总重量5%—10%的饵料鱼。

本发明方法对父母本进行搭棚强化培育，保证两种不同鳜繁殖期的有效重叠，促进性腺的同步成熟，这是种间杂交产生子一代的必要条件。同时，由于斑鳜资源的稀缺，进行二次注射的人工催产及干法人工授精，不利于斑鳜的产后恢复及资源的高效合理使用。因此，本发明与现有技术相比，具有如下优点：

1、以搭建塑料大棚的方式提高养殖水温，强化培养，使母本翘嘴鳜和父本斑鳜的性腺发育周期能同步进行，从而保证两种鳜鱼繁殖期的有效重叠，有利于种间的杂交。同时该方法使亲鱼的性腺比当地正常气候提前1个月左右成熟，可进行早繁，从而充分利用生长期，培育出大规格鱼种，提高鱼的产量，取得良好的生产效果；

2、采取父母本同步一次注射外源激素法进行催产，激素的用量对提高对亲鱼的催产率有重要的作用，采用本发明的激素用量，可以达到93-96%的催产率；

3. 人工授精时采用干毛巾包裹亲鱼，减少人为操作对亲鱼造成的应激反应，省时，省力，同时有助于亲本的催产及产后恢复；

3、采用半干法人工授精，使主要来源于野生资源的父本斑鳜利用率提高1.5-2倍；

4、苗期分段培育并投喂适口饵料鱼苗，明显提高了杂交苗的成活率。

具体实施方式

以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。

实施例1

下面通过实施例对本发明作进一步说明。

1.亲鱼引进及强化培育。

12月引进2龄以上原种翘嘴鳜亲鱼作为母本，1年龄以上野生斑鳜作为父本；驯养及养殖于搭建的塑料大棚池塘内，加强饲养管理，投喂充足的饵料鱼。

2.人工繁殖。

①  亲本选择：3月中旬开始检查亲鱼成熟度，4月初，亲本的同步成熟率达到80%以上。水温20℃以上时即可进行人工繁殖。选择腹部膨大、柔软、卵巢轮廓明显、手压腹部松软而富有弹性的性腺成熟的翘嘴鳜雌鱼作为母本。选择肛门中间内凹呈微红色、轻压腹部有乳白色精液流出且入水即散的斑鳜雄鱼作为父本。

②   人工催产：对性腺成熟的亲本采取同步一次注射外源激素法进行催产，催产激素种类有促黄体素释放激素类似物（LRH-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG）和马来酸地欧酮（DOM），母本亲鱼注射剂量分别如表1所示，父本亲鱼剂量减半。且雌雄鱼同时注射。注射后的亲鱼放在环道中暂养，流水刺激促进其发情。24小时后检查催产情况，当亲鱼发情达到高潮即将产卵时（从人工催产至达到发情高潮所需的时间为效应时间），立即将亲鱼捕起，进行人工采卵、采精。人工催产时不同注射激素及注射剂量对亲鱼催产率的影响见表2，由表2可知由促黄体素释放激素类似物（LRH-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG）和马来酸地欧酮（DOM）三种激素组合注射的催产率最高。而在不同水温条件下，这三种激素在本发明剂量配比范围内注射，对亲鱼催产效果均良好（见表2），水温低于20℃时，催产率相对较低，因此，催产前后的水温最好保持在20℃以上。

                 表1  不同激素及剂量人工催产效果的对比

时间水温催产剂量催产尾数产卵尾数催产率2008年25—27℃LHR-A15ug/kg+HCG1500IU/kg+DOM6mg/kg  282796%2008年25—27℃LHR-A10ug/kg+HCG1500IU/kg8788％2008年25—27℃LHR-A15ug/kg+HCG1800IU/kg9778%2008年25—27℃PG2mg/kg+LHR-A6ug /kg+HCG1000IU/kg8675％

*促黄体素释放激素类似物（LHR-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG）和马来酸地欧酮（DOM）、PG（鲤鱼脑垂体）。

表2不同注射剂量、不同水温亲鱼的人工催产效果

时间水温催产剂量催产尾数产卵尾数催产率2008年25—27℃LHR-A15ug/kg+HCG1500IU/kg+DOM6mg/kg  282796%2009年22—24℃LHR-A18ug/kg+HCG1200IU/kg+DOM8mg/kg151493%2010年25—27℃LHR-A20ug/kg+HCG1200IU/kg+DOM5mg/kg212095%2010年19—20℃LHR-A20ug/kg+HCG1500IU/kg+DOM5mg/kg141286％

③  半干法人工授精：采用干毛巾包裹亲鱼，先将父本斑鳜精子挤出，加入相当于5倍精子体积的0.85%氯化钠溶液进行稀释（由表3可知父本斑鳜精子密度约是翘嘴鳜雄鱼精子密度的4.7倍，故稀释体积为5倍精子的体积。同时，表4显示0.8％-0.9％浓度的氯化钠溶液不能激活精子，因此可以用于精子的前期稀释），再倒入鱼卵中搅拌均匀，加入少量清水稍加搅拌，静置2分钟，用清水清洗数次，放入环道内孵化。用以采卵和采精的母本数量和父本数量比例为4：1。          

表3 不同鳜鱼精子的生物学特性

种类精液pH值精子长度（um）精夜密度（个/ml）

翘嘴鳜6.7931.850.59×10¹⁰斑鳜7.1828.752.75×10¹⁰

表4 不同浓度的氯化钠溶液对精子激活率的影响

氯化钠溶液浓度％激活率（%）0700.1700.3650.552.50.6400.750.800.8500.90

④  孵化：采用环道流水孵化，每立方水体入受精卵3万粒，保持水质清新，严防敌害进入，调节水流，加强管理。

3．苗期培育。

采取分段培育模式，破膜2天后投喂适口饵料鱼苗，如团头鲂、鲮鱼苗等，投喂量为4-8尾饵料鱼/每尾杂交鳜苗，投喂量随日龄渐增。开口4天后从环道转入水泥中进行培育，水泥池面积18平方米，水深0.8米，每平方米放3000尾。达1cm时放入池塘进行专池培育，池塘面积为2亩，水深1.2米，每亩放养4000尾，投喂鳜鱼总重量5%—10%的饵料鱼，并随时根据鱼池中饵料鱼剩余数量及时调整及补充。做好水质管理及病害防治等工作。杂交苗种成活率达87%以上（见表5）。养殖6个月后杂交鳜的体重达500g左右，体现出明显的杂种生长优势，达到上市规格。

表5   采用上述方法进行杂交育苗的技术参数

时间水温催产剂量催产率授精率孵化率苗种成活率2008年25—27℃LHR-A15ug/kg+HCG1500IU/kg+DOM6mg/kg96%89.8％80.1%93％2009年22—24℃LHR-A18ug/kg+HCG1200IU/kg+DOM8mg/kg93%86.5%78.6%87％2010年25—27℃LHR-A20ug/kg+HCG1200IU/kg+DOM5mg/kg95%90.1％83.3%94％