一种能防治葡萄白腐病的微生态制剂

摘要

一种能防治葡萄白腐病的微生态制剂是涉及有益微生物混合，制成微生态制剂。本发明就是提供一种用于预防和治疗葡萄白腐病的微生态制剂。本发明采用如下技术方案：将葡萄糖0.5～8％，淀粉0.05～1％，豆饼粉0.1～8％，磷酸氢二钾0.1～1.2％，磷酸二氢钾0.01～1.2％，硫酸镁0.01～1.3％，酵母膏0.01～1.2％，氯化铁0.01～0.8％，碳酸钙0.01～0.2％，30.8mg/L浓度的硫酸锰溶液0.015～0.18％，其余为水，配成母液；将母液按装液量为5～50％，发酵温度15～34℃，接种量0.5～1.5％，pH值3～7；瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株混合比例为0.3～5∶0.7～8；100～300r/min振荡发酵培养56小时即可。

说明书

技术领域：

本发明涉及有益微生物混合，制成微生态制剂。

背景技术：

葡萄白腐病(Coniella diplodiella(Speg.)Petrak & Sydow)是葡萄生产中危害最为严重的病害之一，广泛发生于世界各地。每年葡萄白腐病造成的产量损失20％-50％，严重年份高达80％以上，甚至绝收。目前防治该病的主要措施是化学防治，由于有些生产者长期使用化学农药，盲目打药，任意加大农药使用量，随意增加农药使用次数，更有甚者使用高毒、高残留农药，导致该病抗药性增强，葡萄品质下降，果品污染，影响葡萄产品在国内、国际市场竞争力，危害消费者健康。这已成为葡萄可持续生产的严重障碍。

微生态制剂是根据微生态学原理，为了调控微生物生态平衡，利用有益的微生物群成员或其促进物质制成的。从本世纪初梅切尼科夫(Elie metchnikoff)在欧洲提倡饮用酸牛奶可健康长寿以来，微生态制剂亦从此而风行于世界各地。70年代德国Volkor rusch在赫尔本建立了微生态学研究所，并从事对双歧杆菌、乳杆菌、大肠杆菌等活菌作生态疗法的研究与应用。我国最早使用微生态制剂乳酶生来治疗肠道疾患。80年代初大连医科大学康白教授首先研制成功促菌生(蜡杆芽胞杆菌)以来，此后各种活菌微生态制剂相继研制成功。并陆续投放市场，这些微生态制剂一问世，便受到了人们的普遍关注和欢迎，并以惊人的速度、良好的效果被更多人群所接受。我国生产微生态制剂的厂家(包括：医药、保健、饮料、化妆品等)已达到30～40家。随着微生态学的发展，越来越多的微生态制剂种类和品种已经应用或将要应用到人、动物和植物上。目前的微生态制剂大致分6个种类，近100个品种。微生态制剂应用范围包括医用微生态制剂，兽用微生态制剂和农用微生态制剂等。其中应用最广泛为医用微生态制剂，其次是兽用微生态制剂，农用微生态制剂目前应用较少(梅汝鸿，1991.植物微生态制剂-增产菌)。用于防治葡萄白腐病的微生态制剂尚未见到。葡萄生产中缺少对环境无污染，防治葡萄白腐病有良好效果的微生态制剂。因此利用微生态制剂防治葡萄白腐病具有广阔的开发前景。

发明内容：

本发明就是针对上述问题，提供一种用于预防和治疗葡萄白腐病的微生态制剂。

本发明采用如下技术方案：将葡萄糖0.5～8％，淀粉0.05～1％，豆饼粉0.1～8％，磷酸氢二钾0.1～1.2％，磷酸二氢钾0.01～1.2％，硫酸镁0.01～1.3％，酵母膏0.01～1.2％，氯化铁0.01～0.8％，碳酸钙0.01～0.2％，30.8mg/L浓度的硫酸锰溶液0.015～0.18％，其余为水，配成母液；将母液按装液量为5～50％，发酵温度15～34℃，接种量0.5～1.5％，pH值3～7；瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株混合比例为0.3～5∶0.7～8；100～300r/min振荡发酵培养56小时即可。

本发明的微生态制剂的有益效果：

本发明的微生态制剂中的微生物来源于葡萄植株的表面，所以对植物本身及人都是安全的，其多种生态效应可调节生态平衡，不会使人和植物产生抗药性，也不会像一部分农药那样有剧毒性，且其生产、加工过程中无毒副作用。

本发明的微生态制剂中是兼有竞争和拮抗两种功能的两个不同菌株的混合物，对预防和治疗葡萄白腐病有良好的防治效果。在刺伤离体果葡萄白腐病菌防治试验中，本发明的微生态制剂防治效果达到了75.1％。在田间试验中，本发明的微生态制剂防治效果也达到了76.5％，高于或相当于50％福美双WP700倍和50％退菌特WP900倍两种化学药剂的防治效果。应用前景广阔。

微生物(株)：LN12

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

保藏时间：2005年11月1日

保藏编号：CGMCC No：1524

微生物(株)：LN24

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

保藏时间：2005年11月1日

保藏编号：CGMCC No：1525

具体实施方式：

1、菌种制备

瘦果红酵母菌LN24菌株，由PDA培养基活化培养，PDA培养基成分：马铃薯200.0g，葡萄糖20.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1000ml，pH5-6，温度25-30℃。

枯草芽孢杆菌LN12菌株，由NA培养基活化培养，NA培养基成分：牛肉膏3g、蛋白胨10g、琼脂18g、蒸馏水1000ml，pH7，温度28-32℃。

2、瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株互作关系

瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株应用不同方法进行互作关系试验见表1，各种处理中两种菌株均未出现生物拮抗现象，这两种菌株可以混合使用。

表1瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株互作关系

  培养基  试验方法  互作关系  备注  NA  PDA  画线对峙  瘦果红酵母菌LN24菌株上和枯草  芽孢杆菌LN12菌株下  瘦果红酵母菌LN24菌株下和枯草  芽孢杆菌LN12菌株上  画线对峙  瘦果红酵母菌LN24菌株上和枯草  芽孢杆菌LN12菌株下  瘦果红酵母菌LN24菌株下和枯草  芽孢杆菌LN12菌株上  -  -  -  -  -  -  “-”表示无  拮抗作用  “+”表示有  拮抗作用

实施例1：

本发明的微生态制剂为葡萄糖0.1％，淀粉0.06％，豆饼粉0.2％，磷酸氢二钾0.1％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.01％，酵母膏0.04％，氯化铁0.02％，碳酸钙0.03％，30.8mg/L浓度的硫酸锰溶液0.018％，其余为水，配成母液，将母液按装液量为10％，发酵温度30℃，接种量0.4％，pH值5～6。瘦果红酵母菌LN24菌株和枯草芽孢杆菌LN12菌株混合比例为0.5∶3。200r/min振荡发酵培养56小时即成。

将制备的微生态制剂在葡萄离体果上进行防治葡萄白腐病试验。从表2的试验结果看出，本发明的微生态制剂对葡萄白腐病菌有较好的防治效果。其中本发明的微生态制剂发酵液300倍防治效果最好，达到75.1％，其次分别为枯草芽孢杆菌LN12菌株发酵液300倍和瘦果红酵母菌LN24菌株发酵300倍，防治效果分别为66.5％和61.5％。比较差异显著性，这4种处理它们之间有显著差异。

表2离体果不同处理防治葡萄白腐病的效果分析

处理浓度调查总数发病率(％)防效(％)差异显著性α＝0.05微生态制剂瘦果红酵母菌LN24枯草芽孢杆菌LN12Ck300倍300倍300倍清水    360    360    360    360    22.5    30.3    34.7    90.3    75.1    66.5    61.5    a    b    c

本发明的微生态制剂田间防治葡萄白腐病的效果评价

将制备的微生态制剂在田间进行防治葡萄白腐病防治试验。从表3中可以看出，本发明的微生态制剂对葡萄白腐病有较好的防治效果，中期防治效果平均达60.0％～81.1％，末期防治效果平均达65.8％～85.5％。在末期防治效果中，50％多菌灵WP600倍防效最高，达88.0％，该药剂属于高效低毒农药。本发明的微生态制剂100倍、300倍防效仅次于多菌灵，高于50％福美双WP700倍和50％退菌特WP900倍两种化学药剂。因此看出，本发明的微生态制剂是防治葡萄白腐病的较好药剂。

表3不同处理防治葡萄白腐病的效果分析

  处理  浓度         中期防效          末期防效差异显著性^*α＝0.05病穗率(％)  防效(％)病穗率(％)  防效(％)  50％多菌灵WP  微生态制剂  微生态制剂  微生态制剂  50％福美双WP  50％退菌特WP  对照(CK)  600倍  100倍  300倍  600倍  700倍  900倍  0    3.1    3.5    4.5    7.4    4.8    5.7    18.4    83.3    81.1    75.6    60.0    73.9    68.9    -    4.5    5.4    8.8    12.8    10.2    10.1    37.4    88.0    85.5    76.5    65.8    72.7    72.9    -    a    a    b    c    bc    bc

注：不同字母表示差异显著，相同字母表示差异不显著。