用于缓解哺乳动物炎症及氧化应激的组合物和方法

摘要

本发明公开一种增加对象的抗氧化防卫能力的促进抗氧化的组合物，该组合物包括假马齿苋提取物、水飞蓟提取物、南非醉茄粉末、绿茶提取物、积雪草粉末、银杏叶提取物、芦荟粉末、姜黄提取物以及N－乙酰基半胱氨酸。本发明的促进抗氧化的组合物安全地诱导细胞抗氧化能力以达到整体净降低氧化应激而没有与所述促进抗氧化的组合物的各种成分有关的不良副作用。本发明还公开了一种通过向有此需要的对象给药有效量的本发明的促进抗氧化的组合物以减少对象中自由基的不良副作用。

说明书

技术领域

本发明涉及用于缓解对象的炎症及氧化应激的组合物。具体而言，本发明涉及天然治疗领域以及开发组合物以通过诱导对象的天然细胞防卫来增加所述对象的抗氧化潜力。

背景技术

由于对人类健康及疾病具有重要作用，因此自由基受到关注。许多普通以及威胁生命的疾病，包括动脉粥样硬化症、癌症及衰老，都具有自由基反应作为潜在的损伤机制。最常见的自由基之一是活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)。这些是正常细胞呼吸及代谢的产物并且通常通过存在于体内的细胞防卫系统进行调控。这样的细胞防卫系统通过清除自由基或将自由基酶促地转化为毒性较低的化学簇(chemicalspecies)而减少可能由自由及活性簇基团(reactive species radicals)引起的损伤的量，从而承担抗氧化剂的生理学作用。

超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是对于细胞对抗ROS-介导的细胞损伤的防卫而言很重要的三种哺乳动物酶。由于环境因素如污染和生活方式因素如吸烟或锻炼，使细胞更多地暴露于自由基。尤其当身体衰老以及产生抗氧化剂或除去ROS的机制不足以对抗氧化应激时，这样的更多的暴露可能导致身体失调。身体的抗氧化防卫系统，包括SOD、CAT及GPX可因衰老而受损和或受到诸如炎症、微生物感染、病毒感染、癌症进程或神经学失调、以及特征为或部分因氧化应激引起的许多其他病症的危害。造成的损伤可由生物学过程的破坏、细胞死亡、及遗传物质突变，这可能导致癌症的发生。因此，在过去的四十年中，对包含饮食补充剂的抗氧化剂在对抗氧化应激效应及退行性疾病和衰老的进展的保护中的潜在应用已成为越来越多的研究的课题，例如参见：Pauling L.，N Engl J Med.，Vitamin Ctherapy of advanced cancer，Mar 20，1980；302(12)：694-5。

非酶性抗氧化剂可以直接与自由基进行反应并且被自身氧化(因此不可再用以清除自由基)；或一种抗氧化剂作为还原剂而另一种抗氧化剂以循环的方式被氧化(如抗坏血酸与α-生育酚之间的相互作用)。其他非酶性自由基清除剂已被用于试验，且其结果多种多样(如甘露醇、PBS等)；由于毒性，其临床应用受到严重限制。其他合成的抗氧化剂，如BHA(丁羟茴醚)、BHT(丁羟甲苯)以及NDGA(去甲二氢愈创木酸)由于在体内毒性很强，因此可能导致过敏反应和肿瘤形成，并且由于对温度敏感而很容易受到加热的破坏。

另一方面，尽管在病理情况下酶性抗氧化剂(如SOD、CAT及GPX)可能被破坏从而失去功能，但它们并未在与自由基的反应中被消耗。在局部细胞环境中，受损的酶性抗氧化剂将会使细胞内环境受到危害并受到自由基的进攻。向人类给药酶性抗氧化剂的缺点是：(1)(就源自细菌或真菌的酶而言)可能发生严重性程度不同的过敏反应；(2)获得这些酶的成本大；(3)能够在给定时间给药的酶性抗氧化剂的数量有限(理论上是为了避免副作用如血清病(serum sickness)或其他对重组蛋白的免疫反应)；(4)它们用于单一的用途(即它们只与一种氧化剂进行反应)；以及(5)它们不能清除所有的自由基(radical)，这对有益的代谢途径很重要，如一氧化氮诱导的血管扩张和免疫系统支持(例如参见：Griscavage JM，Wilk S，Ignarro LJ.，Proc Natl Acad Sci USA.，Inhibitors ofthe proteasome pathway interfere with induction of nitric oxide synthase inmacrophages by blocking activation of transcription factor NF-kappa B.，Apr16，1996；93(8)：3308-12)。

由于这些酶对消化系统环境的敏感和/或缺乏生物利用度，直接口服给药SOD、CAT或GPX的效果受到局限。例如研究表明消化系统破坏SOD，并且CAT和GPX均不能通过消化道吸收。

由于通过直接摄取抗氧化剂给药显示令人失望的结果，人们已经通过努力以向身体提供三种抗氧化剂中的每种的所谓“构建单元”。一种有希望的途径是发展旨在增加体内SOD、CAT和GPX活性的组合物。因此，配制了补充剂用来增加体内锌、铜及锰的水平以协助体内SOD的产生。类似地，开发了与铁、硒及谷胱甘肽有关的补充剂用于增加CAT和GPX。这些化合物在量大时具有毒性。

发明内容

本发明提供一种组合物，其可以向哺乳动物对象给药，并且在所述对象体内将通过增加至少一种包括如SOD、CAT和GPX的抗氧化酶的活性来安全地促使所述对象的抗氧化能力增加，从而减少病理性自由基(pathologic free radical species)的组织水平。当向哺乳动物对象以不良副作用最小的有效量给药时，本发明的组合物致使氧化应激及炎症全面净减少。同与组合物中每种单独的活性物质相关的副作用相比，本发明的组合物有利地提供较小的副作用。

一方面，本发明提供一种促进抗氧化的组合物，该组合物包含包括至少两种如下物质的活性成分，所述物质包括如假马齿苋(Bacopamonnieri)提取物、水飞蓟(milk thistle)提取物、南非醉茄(ashwagandha)粉末、绿茶提取物、积雪草粉末、银杏(Ginko biloba)叶提取物、芦荟(Aloe vera)粉末、姜黄(turmeric)提取物以及N-乙酰基半胱氨酸，其中当向有此需要的哺乳动物对象以有效量给药时，该组合物增加至少一种抗氧化酶如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性水平，并且降低硫代巴比妥酸活性化学簇的血浆浓度水平。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物是从假马齿苋植物的叶制备的标准化提取物。在一个具体实施方案中，假马齿苋标准化提取物含有至少20％假马齿苋皂素(bacoside)。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少22重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物标准化为含有至少约70重量％的水飞蓟素(silymarin)。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约60重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约33重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约22重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约22重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物标准化为含有至少约95重量％的姜黄素(curcumin)。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约2.5重量％至约25重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约15重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约11重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约6重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物标准化为含有至少约40重量％的多酚。在一个具体实施方案中，所述至少一种多酚为多酚(-)-表没食子儿茶精没食子酸酯(epigallocatechin gallate)。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约2.5重量％至约25重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约15重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约11重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约6重量％。在一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，积雪草提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述N-乙酰基半胱氨酸存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约2重量％至约20重量％。在一个具体实施方案中，所述N-乙酰基半胱氨酸存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约15重量％。在一个具体实施方案中，所述N-乙酰基半胱氨酸存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约6重量％。

在另外的具体实施方案中，本发明的组合物是包含如下活性成分的促进抗氧化的组合物，所述活性成分包括假马齿苋提取物、水飞蓟提取物、南非醉茄粉末、绿茶提取物及姜黄提取物，其中当向有此需要的哺乳动物对象以有效量给药时，该组合物增加至少一种抗氧化酶如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性水平并且降低硫代巴比妥酸活性化学簇的血浆浓度水平。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物是由假马齿苋植物的叶制备的标准化提取物。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋标准化提取物含有至少20％假马齿苋皂素。在一个具体实施方案中，假马齿苋标准化提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少22重量％。在一个具体实施方案中，所述假马齿苋提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物标准化为含有至少约70重量％的水飞蓟素。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约60重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约33重量％。在一个具体实施方案中，所述水飞蓟提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约22重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约22重量％。在一个具体实施方案中，所述南非醉茄粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物标准化为含有至少约95重量％的姜黄素。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约2.5至约25重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约15重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约11重量％。在一个具体实施方案中，所述姜黄提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约6重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物标准化为含有至少约40重量％的多酚。在一个具体实施方案中，所述至少一种多酚是多酚(-)-表没食子儿茶精没食子酸酯。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约2.5重量％至约25重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的约5重量％至约15重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约11重量％。在一个具体实施方案中，所述绿茶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约6重量％。在一个具体实施方案中，该组合物还包含活性成分积雪草粉末、银杏叶提取物及芦荟粉末。在一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述积雪草粉末提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约5重量％至约50重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约10重量％至约30重量％。在一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物活性成分的总干重的至少约12重量％。

在一些具体实施方案中，本发明的组合物还包含至少一种赋形剂，如碳酸钙、交联羧甲基纤维素钠、磷酸二钙、硬脂酸镁、微晶纤维素、改性纤维素、二氧化硅及硬脂酸。

在另一个具体实施方案中，本发明提供一种促进抗氧化的组合物，其包括：(a)包含至少约150毫克假马齿苋提取物，45％假马齿苋皂素；至少约225毫克水飞蓟提取物，约70％至约80％的水飞蓟素；至少约150mg南非醉茄粉末；至少约75毫克绿茶提取物，98％多酚，45％(-)-表没食子儿茶精没食子酸酯；至少约75毫克姜黄提取物，95％姜黄素的活性成分；以及(b)包含碳酸钙、交联羧甲基纤维素钠、磷酸二钙、硬脂酸镁、微晶纤维素、改性纤维素、二氧化硅及硬脂酸的其他成分；其中当向有此需要的哺乳动物对象以有效量给药时，该组合物增加至少一种选自以下组中的抗氧化酶的酶活性水平：超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶，并且降低硫代巴比妥酸活性化学簇的血浆浓度水平。在一个具体实施方案中，该组合物配制为口服剂量形式。在一个具体实施方案中，该口服剂量形式选自以下组中：片剂、胶囊及囊片。

在另一方面，本发明提供一种方法，其通过向有此需要的哺乳动物对象以有效量给药本发明的促进抗氧化的组合物来增加至少一种酶如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性水平从而增加所述对象的抗氧化活性水平，其中增加的酶活性会减少因病理性自由基引起的组织损伤。在一个具体实施方案中，因病理性自由基引起的组织损伤发生在患有选自以下组中的疾病或病症的哺乳动物对象，这些疾病包括如，炎症、感染、动脉粥样硬化症、高血压、癌症、放射性损伤、神经系统疾病、神经退行性疾病、缺血/再灌注损伤、衰老、伤口愈合、谷胱甘肽缺乏、获得性免疫缺陷综合症、镰状细胞性贫血及糖尿病。在该方法的一个具体实施方案中，所述促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。

在一个具体实施方案中，本发明提供一种通过向哺乳动物对象给药有效量的本发明的促进抗氧化的组合物从而降低所述对象的c-反应蛋白的血浆水平的方法。在该方法的一个具体实施方案中，该促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。在该方法的一个具体实施方案中，c-反应蛋白的血浆水平在30天内至少降低10％或更多。在该方法的一个具体实施方案中，c-反应蛋白的血浆水平在30天内至少降低20％或更多。

在一个具体实施方案中，本发明提供一种通过向哺乳动物对象给药有效量的本发明的促进抗氧化的组合物从而降低所述对象血压的方法。在该方法的一个具体实施方案中，该促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。

附图说明

图1所示为Protandim I饮食补充剂在23天后对小鼠体重增加百分比的作用图。

图2所示为Protandim I饮食补充剂对鼠红细胞SOD浓度(RBCSOD)的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的RBC SOD浓度(U/ml)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后RBCSOD增长百分比图。星号表示p＜0.02水平的统计学显著性。

图3所示为Protandim I饮食补充剂对鼠肝脏SOD浓度的作用图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的肝脏SOD浓度(U/mg蛋白质)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后肝脏SOD增长百分比图。星号表示p＜0.02水平的统计学显著性。双星号表示p＜0.0001水平的统计学显著性。

图4所示为Protandim I饮食补充剂对鼠脑SOD浓度的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的脑SOD浓度(U/mg蛋白质)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后脑SOD变化百分比图。星号表示p＜0.02水平的统计学显著性。

图5所示为Protandim I饮食补充剂对鼠红细胞过氧化氢酶浓度(RBC CAT)的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的RBC CAT浓度(U/ml)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后RBC CAT增长百分比图。

图6所示为在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的Protandim I饮食补充剂对鼠肝脏CAT浓度(U/mg蛋白质)的作用的图。

图7所示为Protandim I饮食补充剂对鼠红细胞谷胱甘肽过氧化物酶浓度(RBC GPX)的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的RBC GPX浓度(U/ml)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后RBC GPX(U/g Hb)的变化百分比图。

图8所示为Protandim I饮食补充剂对鼠肝脏GPX浓度的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的肝脏GPX浓度(U/mg蛋白质)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后肝脏GPX变化百分比图。星号表示p＜0.004水平的统计学显著性。

图9所示为Protandim I饮食补充剂对鼠脑GPX浓度的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的脑GPX浓度(U/mg蛋白质)图。B组表示在喂食本发明组合物的各种饮食23天后脑GPX变化百分比图。星号表示p＜0.03水平的统计学显著性。

图10所示为作为TBARS测定的Protandim I饮食补充剂对鼠血浆脂质过氧化反应产物的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的血浆TBARS浓度(μM)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后血浆TBARS变化百分比图。单一星号表示p＜0.004水平的统计学显著性。双星号表示p＜0.0004水平的统计学显著性。

图11所示为作为TBARS测定的本发明组合物的饮食对鼠肝脏脂质过氧化反应产物的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的肝脏TBARS浓度(nmol/mg蛋白质)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的ProtandimI饮食补充剂23天后肝脏TBARS变化百分比图。单一星号表示p＝0.001水平的统计学显著性。双星号表示p＜0.00001水平的统计学显著性。

图12所示为作为TBARS测定的Protandim I饮食补充剂对鼠脑脂质过氧化反应产物的作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠中所观察到的脑TBARS浓度(nmol/mg蛋白质)图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的ProtandimI饮食补充剂23天后脑TBARS的变化百分比图。单一星号表示p＜0.004水平的统计学显著性。双星号表示p＜0.0001水平的统计学显著性。

图13所示为Protandim I饮食补充剂对不同组织的鼠SOD、CAT和GPX作用的图。A组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠的RBC、肝脏和脑中所观察到的SOD变化百分比图。B组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠的RBC和肝脏中所观察到的CAT变化百分比图。C组表示在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠的RBC、肝脏和脑中所观察到的GPX变化百分比图。单一星号表示相对于对照饮食组具有统计学显著性。

图14所示为Protandim I饮食补充剂对不同组织的鼠脂质过氧化反应作用的图。该图表示作为RBC、肝脏和脑中的TBARS测定的脂质过氧化反应在喂食1×、3×、和10×剂量的Protandim I饮食补充剂23天后的小鼠的变化百分比图。单一星号表示相对于对照饮食组具有统计学显著性。

图15所示为人类对象对包含草药组合物Protandim II的饮食补充剂的反应的图。A组表示在以675毫克/天补充Protandim II之前(闭环)、补充30天之后(灰色正方形)、以及120天之后(开环)人类对象的血浆TBARS水平。在Protandim处理30天之后(灰色正方形)血浆TBARS的水平下降至约51％的平均水平(p＜0.002)，与年龄有关的TBARS的增加实际上消失了。B组表示在补充Protandim II之前正常对象的血浆TBARS水平，显示TBARS随着年龄增加显著增大(环)。在补充ProtandimII 30天之后(正方形)血浆TBARS的水平下降至约51％的平均水平(p＜0.002)，并且与年龄有关的TBARS的增加实际上消失了。

图16所示为Protandim II饮食补充剂对RBC中的人类SOD的作用的图。

图17所示为Protandim II饮食补充剂对RBC中的人类CAT的作用的图。

图18所示为Protandim II饮食补充剂对人类CRP蛋白水平的作用的图。

图19所示为半剂量的Protandim II对人类对象的血浆TBARS的作用的图。所述半剂量的Protandim II是338毫克/天的饮食补充剂。

图20所示为比较Protandim II剂量对人类对象的血浆TBARS的作用的图。图中显示了以全剂量(675毫克/天，n＝11)和半剂量(338毫克/天，n＝4)补充Protandim II 30天之后的平均血浆TBARS浓度。经单尾配对t检验确定这种差异在p＜0.03具有统计学显著性。

图21所示为接受本发明的草药组合物给药的人类对象的血压测量值的图。A组表示实施例2的对象#2的血压测量值。B组表示实施例2的对象#4的血压测量值。箭头表示个体开始以本发明的草药组合物治疗的时间点。在两个体中，其心脏舒张压在约21天内显著下降，之后维持平衡。

具体实施方式

仍然需要配制能够增加哺乳动物的SOD、CAT或GPX水平的、更为有效且副作用较少、毒性更低的改良的组合物和补充剂。本发明提供一种可以向哺乳动物对象给药，并且在所述对象体内将通过增加至少一种包括如SOD、CAT和GPX的抗氧化酶的活性来安全地促使所述对象的抗氧化能力增加，从而减少病理性自由基的组织水平。该组合物能全面净降低哺乳动物经历的氧化应激且不良副作用很小。有利地，同与组合物中各种单独的活性物质相关的副作用相比，该组合物的副作用更小。

因此，本发明各方面涉及若干特殊的组合物(如饮食补充组合物)在预防或治疗由病理性自由基及活性基团反应所诱导的疾病或损伤中的治疗性或预防性应用。本发明的各方面还涉及若干特殊的组合物在预防或治疗与SOD、CAT和/或GPX酶活性降低有关的疾病或损伤例如炎症和氧化应激中的治疗性或预防性应用。

阐述这些方面的各种特殊的具体实施方案如下所述。

应意识到所述的医疗状况的各种治疗或预防的模式意指“实质性的”，包括全部以及少于全部的治疗或预防，并且其中达到了一些生物学或医学上相关的结果。本文所使用的“对象”优选为哺乳动物，如人类，但也可以是动物，如家畜(如狗、猫等)、农场动物(如牛、羊、猪、马等)及试验室动物(如大鼠、小鼠、豚鼠等)。本文所使用的诱导抗氧化剂的组合物的“有效量”是通过特定给药途径和特定的剂量方案提供的，足以获得预期的治疗和/或预防效果的组合物的量。例如，能预防或减少所治疗疾病的相关症状的量。向所述对象给药的本发明组合物的量将取决于疾病的种类和严重性、疾病对氧化剂反应的易感性(amenability)以及个体特征和他们响应组合物在体内产生抗氧化剂的代谢能力，这些因素包括全身健康、年龄、性别、体重及对组合物中的活性物质的耐受性。技术人员可以根据这些及其他因素来确定适当的剂量。通常，足以获得治疗性或预防性效果的本发明组合物的有效量范围是从每天每公斤体重约0.000001mg至每天每公斤体重约10,000mg。优选地，该剂量范围是从每天每公斤体重约0.0001mg至每天每公斤体重约100mg。本发明的组合物还可以相互联合给药，或者与其他一种或多种治疗性或预防性化合物联合给药。

就服用简便以及剂量均一而言，配制为剂量单位形式的口服组合物为有利的。本文所使用的剂量单位形式是指适合作为整体剂量用于待治疗的对象的物理地离散的单位；各单位包含经计算能产生所需治疗效果的预定量的活性化合物以及所需的药物载体。本发明剂量单位形式的说明书支配于并直接取决于所述饮食补充剂的独特性质和所要达到的特定治疗效果以及配制这种用于个体治疗的活性化合物的领域的内在限制。该药物组合物可以与使用说明书一起包含在容器、包装或给药器中。通常，口服剂量是每天摄取两次至四次，直到症状缓解。本发明的组合物还可以相互联合给药，或者与一种或多种另外的治疗性化合物联合给药。

应意识到，下文以不同的详细程度对本发明的某些方面、模式、具体实施方案、变更以及特征进行了描述，以使得充分理解本发明。通常，这些公开内容提供对对象健康有益处的组合物。在一个具体实施方案中，本发明的组合物是饮食补充组合物。在另一个具体实施方案中，本发明的组合物是与其他饮食补充组合物相结合。在另一个具体实施方案中，本发明的组合物是药物组合物。

自由基、氧化应激及细胞防卫

在过去的几十年中，由于对人类健康及疾病的重要作用，游离及结合的活性基团、高度活化的并因此有破坏性的分子日益受到关注。许多普通的以及威胁生命的疾病包括动脉粥样硬化症、癌症及衰老都是以基于自由基的病理反应作为潜在的损伤机制。

自由基(radical或free radical)通常被理解为一种在外层轨道带有一个或多个未配对电子的分子。许多具有非游离基团的分子是一氧化物或通常指活性氧簇(ROS)的其他含氧化合物。这些高度不稳定的分子易于与邻近分子迅速反应，给予、接收或甚至是共享它们的外层轨道电子。这种反应不仅有时以意义重大且有益的方式改变邻近的靶标分子，而且还可以破坏它，或者所述未配对电子可以传递给靶标，即如在自由基中，产生第二个有害的ROS，之后它可以继续与新的靶标积极地或有害地反应。实际上，大量高活性的ROS由于他们产生这种分子链反应从而使它们的作用有效地扩大了许多倍。由于抗氧化剂可以在ROS及自由基对各种生物分子引起损伤之前将其清除或预防氧化损伤扩散，如通过中断脂质过氧化反应的自由基链反应，因此抗氧化剂能够提供保护。已知氧化应激是体内基团的反应性和导致最终的病理状况的身体负担。

例如，在循环系统中的氧化应激被看作是动脉粥样硬化以及血管壁的斑块沉积。斑块引起炎症反应，炎症反应通过补充免疫细胞增加自由基的生成，从而恶化循环。已发现，自由基和ROS两者的主要靶标都是细胞膜脂质中的多不饱和脂肪。多不饱和脂肪的氧化变质称为脂质过氧化反应。脂质过氧化反应严重地损害膜的功能，这被认为会导致细胞结构和功能受到破坏。脂质过氧化反应的产物如已知的与蛋白质及氨基酸起反应的诱变剂丙二醛是对身体氧化应激量的良好的度量。脂质过氧化反应的另一种副产物——脂褐质随着年龄在体内累积，并且据认为这种副产物的胞质集结(cytosolic buildup)会危害脑功能。因此由局部病理性自由基反应开始引起了能够并且将最终影响到远端器官系统的氧化应激。

维生素，如维生素C及维生素E两者都存在于食物中并且可以用作补充剂，它们帮助身体降低氧化应激的影响。然而，对抗自由基和ROS更有效的斗士是称作抗氧化剂的天然产生的化学物质的人体自身防御系统。这些抗氧化剂可以通过给予自由基或ROS电子或通过阻碍其生成来终止自由基及ROS上的结合基团的传播。

身体的抗氧化防御系统包括三种重要的天然抗氧化剂——超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)。实施的研究表明由于它们催化的反应在代谢上是序贯时，因此这些抗氧化剂可以协同作用，首先从SOD开始，接着是CAT和GPX作用。

SOD是一类可以催化类似于下列反应的酶：

SOD在防御系统中的作用是除去ROS之一超氧化物自由基。SOD主要以三种形式存在于体内：(1)在细胞质中作为Cu-Zn SOD；(2)在线粒体中作为Mn-SOD；(3)在细胞外环境中作为CuSOD。因此，身体依赖于锌、铜及镁的存在以制备SOD。在SOD清除超氧化物自由基期间会产生羟基和氧基，它们分别由CAT及GPX催化。

过氧化氢酶(CAT)存在于几乎所有需氧细胞的过氧化物酶体中，并且通过催化其分解为分子氧及水而不产生自由基来保护细胞不受过氧化氢的毒性影响。

总反应如下所示：

蛋白质是以四个相同亚基(220,000至350,000kDa)组成的哑铃型四聚物形式存在。每个单体在催化中心含有一个血红素辅基。源自某些物种(如牛)的CAT单体在每个亚基还含有一个牢固结合的NADP。该NADP可以保护酶不被其H₂O₂底物氧化。身体CAT的产生取决于是否有铁可用。

谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是利用谷胱甘肽(GSH，glutamylcysteinylglycine)作为电子供体催化过氧化氢(H₂O₂)、有机过氧化物及脂质过氧化物还原为相应的醇的一大类不同的酶(Ursini等，1995)。GPX酶利用谷胱甘肽(GSH)作为还原等价物(reducingequivalents)催化H₂O₂还原为水以及催化有机过氧化物(R-O-O-H)还原为相应的稳定的醇(R-O-H)：

GPX在帮助保护细胞对抗氧化损伤，尤其是脂质过氧化反应方面很重要(Flohé等，1976)。在哺乳动物中，胞浆GPX族及磷脂过氧化氢(PH)GPX族在其活性位点具有硒代半胱氨酸(Selenocysteine)残基。除单体磷脂过氧化氢GPX外，所有GPX酶都是由4个相同亚基(单体Mr 22-23kDa)组成。各个亚基在酶活性位点都含有硒代半胱氨酸分子。硒代半胱氨酸被认为直接参与了向过氧化物底物供应电子并在该过程中被氧化。之后该酶利用谷胱甘肽作为电子供体来恢复硒代半胱氨酸的还原形式(Ursini，1995)。GPX酶接受各种各样的有机过氧化物作为底物。身体产生GPX的能力部分取决于硒的充足供应和谷胱甘肽的供应，谷胱甘肽为身体由半胱氨酸、谷氨酸及甘氨酸产生的三肽。哺乳动物含有血浆(p)GPX，它是在其活性位点由半胱氨酸代替硒代半胱氨酸的不包含硒的酶(Ursini等，1995)。然而，除了磷脂过氧化氢GPX和可能的pl·GPX外，这些酶非常优选以谷胱甘肽作为还原等价物的来源。

尽管存在SOD、CAT及GPX，身体的抗氧化防御系统仍经常受到氧化应激，并且其产生SOD、CAT及GPX的能力因衰老过程而受到损害，并且还会受到炎症、微生物或病毒感染、癌症进程或神经学疾病、以及产生氧化应激、有氧化应激导致或加剧的其他病理状况的损害。

本发明的含草药的组合物

本发明的目的之一是提供新的且有效的组合物以缓解对象的氧化应激。本发明的另一个目的是提供辅助身体天然抗氧化防御系统以缓解与氧化应激相关的弊端的组合物。本发明的又一个目的是提供上调SOD、CAT及GPX水平，降低自由基和ROS浓度，并降低脂质过氧化反应速率的新的组合物。同样，本发明的一个目的是提供饮食补充组合物以缓解氧化应激，以及向身体提供其他有利于健康的益处。本发明另一个目的是配制滋补品或胶囊形式的具有缓解氧化应激的有利作用的组合物，其浓度足以易于实现部分每日补充方案。

本发明的这些和其他目的将会因下文对本发明的详细描述而更容易意识到并理解。

本发明提供诱导身体产生抗氧化剂SOD、CAT和GPX的源自植物的组合物，并提供通过使用这些组合物来缓解氧化应激的方法。该组合物有效地上调这些抗氧化酶，但是有利的是这些组合物的副作用降低，即相对于每一种活性成分单独给药时的毒性来说，组合时毒性降低。

有关脂质过氧化反应的观测是对对象氧化应激量好的度量。理想地，诱导SOD、CAT及GPX产生的天然饮食补充剂也应该具有降低体内自由基及ROS浓度并且减少脂质过氧化反应速率的作用。然而，观察表明一些诱导抗氧化剂产生的饮食补充制剂同时引起ROS浓度的增加，导致脂质过氧化反应速率增加。换句话说，虽然一些补充剂可以使体内SOD、CAT及GPX的产生增加，但是它使体内氧化应激得到整体净增加。本发明的组合物不增加身体的氧化应激。

因此，仅仅基于其引起诱导产生抗氧化剂的能力自身来选择活性物质可能不是达到缓解氧化应激的整个预期目的充分的选择标准。此外，植物提取物通常是天然饮食补充剂的成分，它们通常具有各自的不良副作用，这也需要在整个制剂中适当地平衡以消弱各自的不良副作用。例如，研究显示假马齿苋的乙醇提取物在海虾致死试验中在约300mg/L时产生毒性(D′Souza等，Phytotherapy Res.2002，vol 16，197-8)并且增加甲状腺功能，这可能是不良副作用(Kar等.J.Ethnopharmacol.2002，vol81，281-5)。

前述以及其他问题已由本发明解决。具体而言，本发明提供含有植物提取物的适当混合物的组合物或其任何药物学可接受的制剂，以安全地诱导抗氧化剂的产生以达到整体净降低氧化应激，同时消弱或减小与组成该组合物的各种提取物相关的不良副反应及毒性。

本发明涵盖的混合物包含以下九种植物来源的活性成分，它们与每种物质的需要量一起在下表中列出。一方面，抗氧化剂诱导剂还包括以下九种植物来源的活性物质之一，它们以目前优选存在的浓度(重量比)并入抗氧化剂诱导制剂，所述浓度的范围是约0.001mg至约1000g，优选为约0.1mg至约10g，更优选为约1mg至约2g，最优选为从约50mg至约500mg。

                                表1

  活性物质   量   可能的副反应      假马齿苋提取物       0.001mg至   1000g    被认为非常安全，但是在培养的细胞中  显示细胞毒性(100mg/kg)及抗癌活性  (D′Souza等，Phytotherapy Res.2002，   vol 16，197-8)；增加甲状腺功能  (200mg/kg)(Kar等，J.  Ethnopharmacol.2002，vol 81，281-5)   积雪草粉末    0.001mg至   1000g   镇静及抗抑郁效果；可能有降血压效果  (PDR for Herbal Medicines(第一版).   Medical Economics Co.，1998，729-30)    南非醉茄粉末      0.001mg至   1000g    认为相当安全，但是在25mg/kg显示镇  静及低血压效果(Mishra等，Altern.  Med.Rev.2000，vol 5，334-346)；   (Malhotra等，Indian J.Physiol  Pharmacol.1965，vol 9，127-136)  绿茶98％  多酚45％   EGCG   0.001mg至  1000g   兴奋剂(咖啡因)；可能有胃刺激性  (PDR for Herbal Medicines(第一版).   Medical Economics Co.，1998，710-1)   姜黄提取物95  ％    0.001mg至  1000g   可能有胃刺激性；在125mg/kg时可能  有避孕(antifertility)效果(PDR for  Herbal Medicines(第一版).Medical  Economics Co.，1998，786-7)    水飞蓟提取物  70-80％      0.001mg至  1000g    认为相当安全，但是在体外引起细胞分  裂增加(PDR for Herbal Medicines(第  一版)。Medical Economics Co.，1998，  1138-9)；在高剂量250mg/kg具有促  炎作用(Johnson等，Planta Med.2003，  vol.69，pp.44-49)    芦荟粉末      0.001mg至   1000g    轻泻作用；胃肠道绞痛(PDR for Herbal  Medicines(第一版).Medical Economics  Co.，1998，630-3)；在125mg/kg抑制   甲状腺功能(Kar等，J.Ethnopharmacol.  2002，vol 81，281-5)    银杏叶提取物     0.001mg至   1000g   轻度胃肠道刺激；超敏性反应；在  240mg/天可能干扰抗血栓治疗(PDR   for Herbal Medicines(第一版).Medical  Economics Co.，1998，871-3)  N-乙酰基半胱  氨酸  0.001mg至  1000g  被认为是安全的 

                  表2

  活性物质  剂量/天  假马齿苋提取物  10-4,000mg  水飞蓟提取物70-80％  15-6,000mg  南非醉茄粉末  10-4,000mg  姜黄提取物95％  5-2,000mg  积雪草粉末  10-4,000mg  芦荟粉末  10-4,000mg  绿茶，98％多酚 45％EGCG  5-2,000mg  银杏叶提取物  5-2,000mg  N-乙酰基半胱氨酸  50-5,000mg

如表1中所示，列出的许多从植物中提取的活性物质在高剂量时可能具有不良副作用。然而，通过按照表2中所列出的各自的量联合使用一些或所有九种活性物质来配制植物基组合物(如口服饮食补充剂)，有益的效果是加和性的并且在某些具体实施方案中，甚至是协同性的。那么其总效果是上调至少一种抗氧化酶如SOD、CAT及GPX，而降低自由基和ROS的浓度，以及脂质过氧化反应和其他在体内可以产生氧化应激的不良化学反应的速率。例如，在向对象给药本发明的组合物后可以降低硫代巴比妥酸活性化学簇(如血浆TBARS)的组织水平。而且，由于每种提取物被稀释最高9倍，因此观察到各种活性物质的不良副反应的可能性要更小。

此外，期望列出的量的上述活性物质可以联合治疗氧化应激，在一个具体实施方案中，它可以加工成用于口服给药的剂量单位。之后这种剂量单位是以片剂、胶囊、明胶胶囊(gel cap)、微球(小球)或者以其他适于口服的载体给药。或者，该组合物可以制备成粉末以与适当的液体如水相混合来做成滋补品。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物制剂是口服饮食补充剂。同样，可以将高效、适当及有效平衡的活性物质为用于提供可以作为适宜的每日口服饮食补充剂给药的组合物。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物含有至少两种(2)表2中所示的组分(如，成分)。在一些具体实施方案中，本发明含草药的组合物含有两种(2)、三种(3)、四种(4)、五种(5)、六种(6)、七种(7)、八种(8)或九种(9)表2中所示的组分。本发明含草药的组合物可以包含适于获得所预期的预防、治疗或缓解氧化的效果的任何剂量或组合的表2中所示的组分。

本发明组合物的抗氧化性质及应用

本发明提供一种用于预防、缓解或治疗对象氧化应激的方法。本发明的活性物质被配制成组合物，该组合物保留了各种活性物质的预防性及治疗性诱导抗氧化剂的性质，相对于各种单独的活性成分来说可获得加和性的或者甚至是协同性的抗氧化剂诱导作用，同时减少组合物中各种活性物质对对象的毒副作用。本发明的组合物可用于根除目前发生的自由基及结合基反应或者可以用于预防可造成可能的氧化促进事件(如缺血性损伤)的病理性自由基或结合基反应。

本发明的组合物通过调节体内SOD、CAT及GPX酶的活性水平用于增加抗氧化剂水平。在一个具体实施方案中，该组合物提供假马齿苋(B.monniera或Bacopa)的草药提取物的混合物，其中包含高百分比的活性化学物质假马齿苋皂素A和B。摄取假马齿苋会诱导SOD、CAT及GPX并提供其有益活性，在脑中具有显著结果。研究表明假马齿苋皂素还增加蛋白质及5-羟色胺水平，而减少海马、下丘脑及大脑皮层中去甲肾上腺素的浓度。因此假马齿苋降低脑中与神经毒性的自由基的累积相关的氧化应激所引起的神经退行性病变。因此它可以用于缓解神经退行性病变的症状，如记忆丧失、阿尔茨海默症及帕金森氏症甚至衰老。

假马齿苋

假马齿苋(通用名：water hyssop和Brahmi)是生长在温暖气候下的多年生爬行植物。假马齿苋属包括分布于世界温暖地区的100多种水生草本植物。该植物是一种分枝多的草药，在节点处生根并形成密集的缠结。假马齿苋提取物(Bacopin)是由假马齿苋植物的叶子制备的标准化提取物(Sabinsa Corporation，Piscataway，NJ，USA)。其标准化为含有最低20％的有益于支持认知功能的活性成分假马齿苋皂素A和B(bacosides A和B)。其他标准化为具有更高的最低水平的假马齿苋皂素A和B(如30％，40％，50％等)的假马齿苋植物提取物可用于本发明的组合物中，并且可以通过本领域已知的提取技术来制备。假马齿苋制品/提取物的药理作用还包括抗氧化、抗炎、强心以及抗癌作用。因此本发明的组合物可用于预防或治疗因自由基引起的疾病或病症，如炎症、心脏功能失常或细胞增生。假马齿苋提取物可商购获得，如Viable HerbalSolutions(Morrisville，PA，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约4,000mg的假马齿苋提取物(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约3,000mg的假马齿苋提取物。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约100mg至约2,000mg的假马齿苋提取物。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约200mg的假马齿苋提取物。在一个具体实施方案中，该含草药的组合物的假马齿苋提取物是Bacopin。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包括标准化为含有至少约20％的假马齿苋皂素A和B的假马齿苋提取物。在另一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包括标准化为含有至少约30％的假马齿苋皂素A和B的假马齿苋提取物。在另一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包括标准化为含有至少约40％的假马齿苋皂素A和B的假马齿苋提取物。在另一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物含有标准化为至少约50％的假马齿苋皂素A和B的假马齿苋提取物。

水飞蓟

水飞蓟(植物名：Silybum marianum；其它通用名：Marian，Silybum，Silymarin)是一种纤细、高的植物，其大小接近于Cotton Thistle，根出叶中有切口、叶边起伏带刺、深绿色具光泽、具有乳白色叶脉、且常见于树篱堤和荒地。该植物的有效部位包括，如全草、根部、叶、种子以及外壳(hull)。水飞蓟种子包含称作水飞蓟素的生物类黄酮复合物。水飞蓟素是水飞蓟植物的种子的提取物。标准化提取物应该为80％水飞蓟素(活性成分)。该成分是该植物具药用价值的原因。水飞蓟素是由三部分组成：水飞蓟宾、水飞蓟宁、和水飞蓟丁。水飞蓟宾活性最强并且是造成水飞蓟素的有益作用的主要原因。与其他生物类黄酮相同，水飞蓟素是一种强效的抗氧化剂。水飞蓟提取物可用于保护或反转因毒素(如酒精、药物、杀虫剂、毒药)引起的肝脏细胞损伤，从而促进肝脏细胞的再生、预防或治疗肝脏疾病(如肝硬化、慢性肝炎以及因硬化引起的糖尿病)、消化不良、以及癌症。水飞蓟素在预防肝损伤和提高肝功能方面的作用主要与其抑制造成肝损伤的因素即自由基和白三烯的能力，加上其刺激肝脏蛋白质合成的能力有关。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。水飞蓟(80％水飞蓟素)提取物可商购获得，例如Stayleaner.com(Las Vegas，NV，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约15mg至约6,000mg的水飞蓟提取物(70％-80％)(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约5,000mg的水飞蓟提取物(70％-80％)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约100mg至约3,000mg的水飞蓟提取物(70％-80％)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约300mg的水飞蓟提取物(70％-80％)。

南非醉茄

南非醉茄(植物名：Withania somnifera和Physalis flexuosa；其他通用名：自然灯笼草(Winter Cherry)、Ashgandh、Achuvagandi、Amikkira-gadday、Amkulang-kalang、Amukkira-kilzhangu、Amukran-kizhangu、Asagandha、Asana、Asgandh、Asundha、Asvagandhi、Fatarfoda、Hirimaddina-gadday、Hirre-gadday、Penneroo-gadda、Pevette、Sogade-beru、Indian ginseng)是印度、巴基斯坦和斯里兰卡当地生长的一种直立的带分枝的灌木。南非醉茄制剂可用于促进放松、骨髓和女性健康(例如安胎和激素再生)、提高智力功能(例如记忆力和集中力)、作为催情剂以及治疗疲劳、应激、咳嗽、不育症、组织炎症、癌症、传染病、焦虑症、恐慌发作(panic attacks)、风湿病、关节炎、疼痛、躁狂抑郁症(manicdepression)、酒精致偏执狂(alcoholic paranoia)以及精神分裂症、发烧、失眠、不育症、衰老、皮肤炎症及皮肤病、酒精中毒、阿尔茨海默症、贫血症、痈(carbuncles)、康复、消瘦、HIV支持(HIV sopport)、AIDS、免疫系统问题、腰痛、多发性硬化症、肌肉能量损失(muscle energy loss)、麻痹症、皮肤不适(skin afflictions)、淋巴腺肿胀(swollen gland)、溃疡、和呼吸困难以及用作利尿剂。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。南非醉茄粉末可商购获得，例如iHerb Inc.(Monrovia，CA，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每目向对象给药约10mg至约4,000mg的南非醉茄粉末(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约3,000mg的南非醉茄粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约100mg至约2,000mg的南非醉茄粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约200mg的南非醉茄粉末。

姜黄

95％的姜黄提取物是由姜黄(Curcuma longa)植物(通用名：Curcuma、Turmeric、Ukon、Goeratji、Kakoenji、Koenjet、Kondin、Kunir、Kunyit、Oendre、Rame、Renet、Temu kuning、Temu kunyit、Tius.Curcumin)的根或根茎制备。姜黄(C.longa)是印度当地出产的多年生植物。称为姜黄素的化合物是其根的强效提取物并被认为具有广泛的治疗作用。姜黄提取物可用作抗氧化剂、抗炎剂、抗诱变剂、抗癌剂、利胆剂(cholagogueue)、净化剂、利尿剂、延胡索(fumitory)、止血剂、肝保护剂(hepatoprotective agent)、催乳剂、健胃剂、滋补剂以及创伤药。姜黄制剂可用于保护肝脏避免中毒、减少血小板聚集、预防或治疗炎性疾病、炎症、关节炎、银屑病、癌症(如前列腺癌和乳癌)、疼痛、阿尔茨海默症、心血管病(如动脉硬化和动脉粥样硬化症)。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。标准化为含95％姜黄素的姜黄提取物包含姜黄(含95％姜黄素)。95％姜黄提取物可商购获得，例如EZ-FITNESS(Northborough，MA，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约5mg至约2,000mg的姜黄提取物(95％)(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约1,000mg的姜黄提取物(95％)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约500mg的姜黄提取物(95％)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约100mg的姜黄提取物(95％)。

积雪草

积雪草(植物名：Hydrocotyle asiatica、Centella asiatica；其他通用名：Centella、March Pennywort、Indian Pennywort、Hydrocotyle、Brahmi(梵语)、雷公根(中文))是一种通常生长在印度、斯里兰卡、马达加斯加、南非以及热带地区的沼泽地的细长的、多年生爬行植物。积雪草与可乐果(kola nut)不同。积雪草粉末是由该植物的叶及气生(aerial)部分制备并用于医药用途。积雪草粉末可用于促进放松、提高智力功能(例如记忆力和集中力)、促进组织愈合(例如伤口、皮肤、其他结缔组织、淋巴组织、血管、以及黏膜)、以及用于治疗疲劳、焦虑症、注意力不集中症、失眠、皮肤炎症、麻风病、癌症、关节炎(如，银屑病关节炎、僵直性脊椎炎(anklylosing spondylitis )、以及风湿性关节炎)、痔疮、肺结核、高血压、充血性心力衰竭、静脉功能不全(静脉郁血，通常是腿部)、喉咙痛、肝炎、梅毒、胃溃疡、癫痫症、痢疾、发烧、以及哮喘并用作温和的利尿剂。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。积雪草可商购获得，例如@Internatural(TwinLakes，WI，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约4,000mg的积雪草粉末(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约25mg至约2,000mg的积雪草粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约1,000mg的积雪草粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约200mg的积雪草粉末。

芦荟

芦荟(通用名：药用芦荟、burn plant、Barbados aloe、unguentine cactus)是一种多年生植物；其强大的须根形成像龙舌兰一般但小得多的肉质基生莲座叶丛，它广泛生长在东非和南非并且还在西印度群岛和其他热带地区种植。芦荟含有蒽醌苷、树脂、多糖、甾醇、白树素(Gelonin)、以及色酮，这些是该草药具有药用性质的原因。芦荟制品，例如汁液或粉末可用作润肤剂、泻剂、创伤药、滋补剂、缓和剂、驱虫剂、抗真菌剂、调经剂。芦荟制品可用于治疗烧伤、痔疮、晒斑、皱纹、头痛、虫叮、皮肤过敏、切伤、溃疡、疮、疱疹、黄疸、粘囊炎、口腔溃疡、齿龈肿痛(sore gums)、毒葛(poison ivy)、炎症、胃炎、以及癌症。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。芦荟粉末可商购获得，例如Red Lion International Trading & Brokerage Co.(Fullerton，CA，USA)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约4,000mg的芦荟粉末(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约25mg至约2,000mg的芦荟粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约1,000mg的芦荟粉末。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约200mg的芦荟粉末。

绿茶

绿茶提取物可用于本发明的组合物中。在本发明组合物的某些具体实施方案中，该绿茶提取物以多酚类标准化。例如，包含45％多酚如多酚-表没食子儿茶精没食子酸酯(EGCG)的绿茶98％多酚是由茶草药Camellia sinensis的叶制备。绿茶中的多酚类，如EGCG可用于保护性地对抗若干癌症，并且它们还是强效的抗氧化剂。绿茶制品可用于促进免疫功能并用于预防和治疗高胆固醇、心脏病、传染病(如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染、皮肤感染、细菌感染、病毒感染)、痤疮、衰老、免疫失调、龋齿、牙周炎、口臭、头皮屑、癌症、心血管病(如，高血压、血栓症、动脉硬化)、糖尿病、高血糖、消化道和呼吸系统疾病、流行性肝炎(influenza hepatitis)、肝病。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。绿茶提取物可商购获得，例如Hunan Kinglong Bio-Resource Co.，Ltd.(中华人民共和国，湖南，长沙，Xingsha)。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约5mg至约2,000mg的绿茶(98％多酚类，45％EGCG)(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约1,000mg的绿茶(98％多酚类，45％EGCG)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约500mg的绿茶(98％多酚类，45％EGCG)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约100mg的绿茶(98％多酚类，45％EGCG)。

银杏

银杏(通用名：白果树)是一种雌雄异株树。已发现银杏叶提取物具有广泛的生物活性。在药物中应用的叶提取物采用多步工艺标准化，以从该植物中浓缩所需的活性成分。这些提取物大致包含黄酮苷(主要包括槲皮素、山奈酚、以及异鼠李素)和萜内酯(银杏内酯A、B、和C，以及白果内酯)。其它成分通常包括花色素(proanthocyanadins)、葡萄糖、鼠李糖、有机酸、D-葡萄糖二酸以及银杏酸(ginkgolic acid)(至多5ppm银杏酸)。该复合提取物本身而不是分离的单一成分被认为是银杏具有生物活性的原因。黄酮类复合物可以除去外周和/或大脑血管系统的自由基，并抑制脂质过氧化反应。银杏提取物可商购获得，例如iHerb Inc.(Monrovia，CA，USA)。

银杏具有的众多颇有价值的作用中的一些是稳定细胞膜、减少自由基损伤、改善血液循环以及提高氧和葡萄糖的利用。银杏对大脑、神经和血管非常有益。它可用于改善短期记忆。银杏已被用于改善大脑血液循环以及用于保护神经对抗损害性自由基。银杏叶通过抑制膜的脂质过氧化反应帮助维持细胞壁的完整性和渗透性。银杏提取物可用于预防或治疗与年龄有关的身体和心理退化(例如阿尔茨海默症以及与年龄有关的痴呆)、心血管病、大脑血管功能不全(cerebral vascular insufficiency)以及大脑机能受损(impaired cerebral performance)、经期前综合症的充血性症状、过敏症、与年龄有关的失明、抑郁症、雷诺氏病(Raynaud′sdisease)、外周血管病、间歇性跛行、眩晕、平衡失调、预防高空病、耳鸣(耳内鸣响)、肝纤维化、黄斑病变、哮喘、移植排斥、以及诱导中毒性休克的免疫疾病。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约5mg至约2,000mg的银杏叶提取物(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约10mg至约1,000mg的银杏叶提取物。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约500mg的银杏叶提取物。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约200mg的银杏叶提取物。

N-乙酰基半胱氨酸

N-乙酰基半胱氨酸(NAC)是氨基酸半胱氨酸的乙酰化形式。NAC是抗氧化剂、抗毒素以及免疫支持物(immune support substance)，并存在于天然食物中。在若干种情况中NAC被证明是抗氧化剂。NAC可商购获得，例如Doctor′s Trust Vitamins(Orlando，FL，USA)。

NAC非常缓慢地与超氧化物(superoxide)或过氧化氢自由基反应。从速率常数可以看出与NAC相比GSH是更有效的对抗羟基自由基的抗氧化剂(在pH 1.0时，GSH K2＝8.8×10⁹，NAC K2＝1.36×10¹⁰)。NAC以3∶1(分别地)的比例在生理浓度下抑制HOCl。

NAC是谷胱甘肽的前体，谷胱甘肽是一种重要的保护细胞避免氧化应激的抗氧化剂。除了维持细胞内谷胱苷肽水平以外，已发现补充NAC能抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制、对因化疗和放疗引起的细胞损伤起保护作用、提高免疫、起保护作用以对抗毒素如羟苯基乙酰胺(acetametaphen)和其它药物、汞、铅等，并且是粘液溶解剂，也就是说它能驱散在支气管肺病(bronchoulmonary)如囊性纤维化病、慢性支气管炎、哮喘、胃炎、心脏病发作、心绞痛、慢性阻塞性肺病、预防在冠脉血管造影术期间的肾脏损伤、Unverricht-Lundborg病、假口症(pseudoporphyria)、以及肺炎中存在的粘液。还发现它为猪的主动脉内皮细胞提供保护作用以对抗超氧化物自由基并保护动物以对抗扑热息痛肝中毒。因此本发明的组合物可用于预防或治疗上述提到的病症和疾病。

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约50mg至约5,000mg的N-乙酰基半胱氨酸(通常见表2)。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约100mg至约4,000mg的N-乙酰基半胱氨酸。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药约250mg至约2,000mg的N-乙酰基半胱氨酸。在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，利用本发明的含草药的组合物每日向对象给药至少约500mg的N-乙酰基半胱氨酸。

临床水平的自由基损伤将通过定位产生的主要氧化剂、氧化剂类型、以及病理性前列腺素的生成来确定。本发明组合物的给药是取决于病理性自由基反应的发生。在一个具体实施方案中，本发明的组合物是向有此需要的对象口服给药。测定生成氧化产物的速率可以评估本发明组合物的功效。还可以在对象身上根据其临床进展来监控其功效。

在一方面，本发明提供一种通过向有需要的哺乳动物对象给药有效量的促进抗氧化的本发明组合物，通过增加至少一种酶如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、以及谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性水平方法来增加所述对象的抗氧化活性水平，其中增加的酶活性降低了因病理性自由基引起的组织损伤。在一个具体实施方案中，因病理性自由基引起的组织损伤存在于患有以下组中的疾病或病症的哺乳动物对象中，它们选自包括如炎症、传染病、动脉粥样硬化症、高血压、癌症、放射性损伤、神经系统疾病、神经退行性疾病、缺血/再灌注损伤、衰老、伤口愈合、谷胱甘肽缺乏、获得性免疫缺陷综合症、镰状细胞性贫血、以及糖尿病。在该方法的一个具体实施方案中，该促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。

在另一个具体实施方案中，本发明提供一种通过向哺乳动物对象给药有效量的促进抗氧化的本发明组合物来降低所述对象中c-反应蛋白的血浆水平的方法。在该方法的一个具体实施方案中，该促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。在该方法的一个具体实施方案中，c-反应蛋白的血浆水平在30天期间降低至少10％或更多。在该方法的一个具体实施方案中，c-反应蛋白的血浆水平在30天期间降低至少20％或更多。

在另一个具体实施方案中，本发明提供一种通过向哺乳动物对象给药有效量的本发明促进抗氧化组合物来降低所述对象的血压的方法。在该方法的一个具体实施方案中，该促进抗氧化的组合物是以口服饮食补充剂给药。

ROS与人类健康

我们的身体经常性暴露在外部来源(日照、其它形式的射线、污染)和内源性生成的自由基或其它ROS中；氧化应激和ROS-介导的组织损伤是多种病理过程中最终的共同途径。氧化应激导致免疫系统活性增强，引起炎症、补充更多免疫细胞、并释放进一步加剧身体应激的细胞因子和急性期蛋白。

细胞因子

假定在自由基产生过多或存在感染(如AIDS)的状况下，会发生严重的白细胞介素-2(IL-2)生成变化，这是因谷胱甘肽(GSH)耗竭而继发的。IL-2是对有丝分裂和抗原刺激反应而产生的一种糖蛋白；它和其他细胞因子表现多种功能。谷胱苷肽水平调节两种IL-2受体中较大的α链。降低GSH水平会降低IL-2对相应受体的亲合力；从而有损于IL-2的功能。假设通过利用本发明的组合物来维持GSH水平将允许IL-2及其受体引发对该特殊的白细胞介素的正常的免疫学反应。

过量的氧化应激导致TNF-α和IL-6的生成增多。IL-6发动并促进急性期蛋白如c反应蛋白、血清淀粉样A蛋白、纤维蛋白原、以及甘露糖结合凝集素的生成。IL-1、IL-6和TNF-α通过诱导触发多种炎症反应和相关病理学的肝基因表达来刺激如CRP合成(参见，Albert MA.The roleof C-reactive protein in cardiovascular disease risk.Curr Cardiol Rep2000；2(4)：274-9)。CRP还是部分先天性免疫反应的补体系统的介质(参见，Yuan G，Expression of C5aR(CD88)of synoviocytes isolated frompatients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis.Chin Med J(Engl).2003Sep；116(9)：1408-12)。该补体系统提供TH1和TH2适应性免疫反应的进一步刺激，这增加了炎症反应。

由巨噬细胞产生的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)受自由基或氧化剂刺激(Chaudhri，G. and Clark，I.A.：J Immunol，vol.143，1990-1294，No.4，1989)。TNF-α通过刺激白细胞、从白细胞中释放花生四烯酸以及释放溶酶体来诱导氧化产物生成。因此，通过给药本发明的组合物来提高抗氧化剂的血浆水平会减少TNF-α的生成。通过向所述对象给药本发明的组合物维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗细胞因子介导的组织损伤。

炎症

炎症可以起源于感染因素(infective agent)(如病毒体)、外伤、化学物质、免疫反应、金属物质、以及离子化和热因子。炎症的要素是热、红、肿、痛以及功能障碍(如周围组织的)。在任何一种炎症中，可以发现典型的炎症细胞，例如白细胞、嗜酸性细胞、以及巨噬细胞/大红细胞。作为程序性(programmed)反应的一部分，这些细胞类型分别都产生自由基。作为该“程序性”反应的一部分的是炎性细胞因子，如TNF-α、CM-CSF以及IL-2和IL-6的生成。这些特殊的细胞因子促进氧化剂如一氧化氮和其他反应性化合物的生成。氧化剂还作为前列腺素(PG)生成的副产物产生，这是炎症过程的传播和扩大的一部分。血小板依靠其充当栓塞(如在凝块中)并由于其释放血小板活化因子(PAF)从而也参与炎症过程。PAF从白细胞中释放花生四烯酸。

前列腺素的产生取决于微环境和代谢合成的自由基氛围(tone)(或浓度)。通过降低自由基氛围和PG自由基中间代谢物，可假定前列腺素的病理生成将减少，PG具有的在炎症过程中起作用的放大效应可被限制。理论上，前列腺素途径的脂氧化酶分支或者环氧化酶分支会受增加的细胞抗氧化剂的影响。

自由基或氧化剂还对其所在的组织具有过多的不同作用，如膜损坏、血小板附着、血管内膜损伤(intimal damage)等。通过增加炎症部位的抗氧化剂水平，可假定传播作用、组织损伤以及病理生理反应将大大缩减。NF-KB转录蛋白调节与炎症过程有关的大量蛋白和细胞因子的基因表达(Baeuerle，P.A.and Baltimore，D.：Science，vol.242，Oct，1988)。NF-KB蛋白对DNA的活性和亲合力也受GSH水平的调节(Staal，F.J.T，等：Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，vol.87，pp 9943-9947，Dec.1990；Duh，E.J.，等：Proc.Natl.Sci.Acad.，USA，vol.86，p 5974-5978，1989)。提高GSH水平可降低NF-KB对DNA的活性和结合力。通过提高GSH水平，那些参与炎症过程的细胞因子和蛋白质将减少。因此通过向所述对象给药本发明的组合物以维持/增加抗氧化剂潜力可以预防或治疗炎症介导的损伤。

炎症的一种重要标记物是c反应蛋白(CRP)，一种对急性期反应细胞因子如白细胞介素-1(IL-I)、白细胞介素-6(IL-6)、以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生反应而在肝脏中合成的主要的急性期反应蛋白。其他相关的急性期蛋白包括血清淀粉样A蛋白、纤维蛋白原、以及甘露聚糖结合凝集素。

在几乎所有的炎症、传染病和肿瘤疾病中CRP浓度都提高。具体疾病包括风湿性疾病(如系统性红斑狼疮、干燥综合症、风湿性关节炎、脉管炎(vasculitides)(如Wegener氏肉芽肿症)、以及慢性传染病(如肺结核、心内膜炎)。若干恶性肿瘤，例如实体瘤也可能与CRP水平升高有关。由于CRP半衰期长，CRP水平与持久性炎症诱导的其合成相关性良好。CRP水平提高还与心血管疾病如心内膜炎、心绞痛、以及心肌梗塞有关(参见：http://www.americanheart.org/presenter.jhtml？identifier＝4648和http://www.americanheart.org/presenter.jhtml？identifier＝3006541)。若干病原体已经与动脉粥样硬化病以及临床相关的冠状动脉粥样硬化症的发展关联起来。例如，通过诱导脉管炎及其他机制已将巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)、以及幽门螺杆菌与冠心病(CAD)关联起来。这一发现表明CMV通过引起炎症反应而引起动脉粥样硬化病。CRP水平与CAD的临床严重性以及心肌缺血的急性期和亚急性期的冠状事件相关。住院治疗不稳定性绞痛且CRP浓度高于0.3mg/dL的患者比CRP水平低的患者在医院具有显著更多的缺血发作(参见，Morrow D，Rifai N，Antman EM等C-reactiveprotein is a potent predictor of mortality independently of and in combinationwith troponin T in acute coronary syndromes：a TIMI 11A substudy.Thrombolysis in Myocardial Infarction.J Am Coll Cardiol 1998；31(7)：1460-5)。在患有稳定性心绞痛的患者中的CRP浓度显著低于患有不稳定性心绞痛或急性冠状综合症的患者中的浓度。CRP水平随时间稳定、低的慢性稳定性心绞痛患者在追踪调查(follow-up)中具有较少的继发性心血管事件(参见，Bogaty P，Poirier P，Simard S等，Biological profilesin subjects with recurrent acute coronary events compared with subjects withlong-standing stable angina.Circulation 2001；103(25)：3062-8)。另一方面，在患有不稳定性心绞痛的患者中，CRP水平提高是斑块不稳定的有力的预报器。

许多试验证明高水平的CRP与将来的冠状事件如MI和心源性猝死的危险性相关。在欧洲血栓症和伤残联合行动组织(European ConcertedAction on Thrombosis and Disabilities study)的研究中(Bolibar I，vonEckardstein A，Assmann G等，Short-term prognostic value of lipidmeasurements in patients with angina.The ECAT Angina Study Group：European Concerted Action on Thrombosis and Disabilities.ThrombHaemost 2000；84(6)：955-60)，发现在MI后的对象中CRP平均水平提高20％或更多。在患有或未患有明显冠状损伤的MI生还者中CRP水平更高，并且如果还涉及其他部位如外周脉管系统则进一步提高。因此，CRP水平可用于代表炎症负荷(inflammatory burden)。

在对心血管危险的长期前瞻性调查心血管疾病趋势和决定因素的监测试验中(Koenig W，Sund M，Frhlich M等，C-reactive protein，a sensitivemarker of inflammation，predicts future risk of coronary heart disease ininitially healthy middle-aged men：results from the MONICA(MonitoringTrends and Determinants in Cardiovascular Disease)Augsburg Cohort Study，1984 to 1992.Circulation 1999；99(2)：237-42)，CRP水平最高的患者患MI的危险性为2.6倍。在另一项研究中(Haverkate F，Thompson SG，DuckertF.Haemostasis factors in angina pectoris；relation to gender，age andacute-phase reaction.Results of the ECAT Angina Pectoris Study Group.Thromb Haemost 1995；73(4)：561-7)，CRP水平正常的患者中梗死后心绞痛(postinfarction angina)仅为14％。相比之下，64％被确认CRP水平高的患者患有明显的梗死后心绞痛；大约42％的患者需要血管再生(revascularization)，而21％患有复发性MI。

在患有MI的对象中，CRP浓度增加与存在复合血管造影损伤(complex angiographic lesions)以及需要血管再生术有关(Moukarbel GV，Arnaout MS，Alam SE.C-reactive protein is a marker for a complex culpritlesion anatomy in unstable angina.Clin Cardiol 2001；24(7)：506-10)。CRP水平提高还可能代表最易于患再阻塞的对象的生物标志。在在血管造形术后经支架植入的患有稳定性CAD的患者中，在患有再狭窄的那些患者中其CRP水平在96小时内增加；在那些未患有再狭窄的患者中，CRP水平在48小时达到峰值，之后下降。

CRP的正常血清浓度范围是3mg/dL(全部美国人口的第90个百分点)到200mg/dL以上。通常，美国心脏协会已经建议如果hs-CRP水平低于1.0mg/L，那么其患心脏病的危险性低；如果hs-CRP水平介于1.0和3.0mg/L之间，那么其会有平均水平的风险，如果hs-CRP水平高于3.0mg/L，那么其患心脏病的危险性高。

由于这些范围对确定或许为(otherwise)健康人的心血管危险所要求的值不敏感，调查者开发出新的改进的方法来测定高灵敏的CRP。这种高灵敏的CRP测定已表明能检测0.2mg/mL以下的浓度，并在酶联免疫吸附测定(ELISA)或荧光免疫测定中利用标记的单克隆或多克隆抗-CRP抗体(参见，Rifai N，Ridker PM.High-sensitivity C-reactive protein：anovel and promising marker of coronary heart disease.Clin Chem 2001；47(3)：403-11)。

许多条件、活性以及药物影响C-反应蛋白水平。在同种异体移植物和移植物闭塞后、在结缔组织疾病(如红斑狼疮、Wegener氏肉芽肿症)、关节炎、冠心病、肥胖症、败血症(sepsis)、在吸烟者等之中发现水平升高。在对抑制性细胞因子、锻炼、以及治疗剂量的阿司匹林或3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂(“他汀类”)中发现CRP水平下降。

因此，本发明的组合物当向患有炎症或所列出的相关/由其引起的疾病的对象给药时，可降低CRP水平从而缓解炎症和相关的/由其引起的疾病的严重性。视特定的组合而定，将这些组合物与阿司匹林、萘普生、萘丁美酮(nambutome)、其他NSAID一起给药或者与他汀类一起给药似乎对控制炎症和疾病具有协同或加和性作用。

动脉粥样硬化症

在发达社会中动脉粥样硬化症仍然是导致死亡及过早伤残的主要原因。而且，据目前预测，到2020年心血管疾病，特别是动脉粥样硬化症将会成为最主要的全球性的疾病负担，定义为自健康的年数中减去的伤残或过早死亡的年数。动脉粥样硬化症是特征为内皮活化、细胞外物质内流(cellular influx)以及产生介质和细胞因子的炎性血管病变。这一过程导致泡沫状巨噬细胞和动脉粥样硬化斑的生成，并最终导致动脉栓塞性疾病。动脉粥样硬化症与高致病率和高死亡率联系在一起。

动脉粥样硬化症是一个复杂的过程，它通过以动脉粥样斑块堵塞动脉导致心脏病发作、中风和肢体丧失(limb loss)。这种斑块是一种氧化的脂肪的形式。目前通常认为动脉粥样硬化症是一种以炎症部位白细胞(单核细胞和T-细胞)的过度募集为特征的慢性炎性疾病。心血管危险因素导致的血管损伤促使内皮功能不良，导致致炎性细胞因子和趋化因子的黏附分子的表达和分泌增加。而这一点反过来又导致了白细胞在动脉粥样硬化损伤中黏附、迁移和聚集。最近有关在动脉粥样硬化症发展中的炎性过程的发现表明，在危险因素和动脉粥样硬化发病机制之间存在着重要联系。因此人们的研究兴趣逐渐集中在将炎症的生物标志作为预测未来发生临床事件的风险的方法。事实上，已证实分子如可溶性胞内黏附分子-1，白介素-6，或C-反应蛋白(CRP)的血浆水平的提高代表以后发生心血管风险的炎性标志。其中，CRP已成为作用最强的可应用于临床的标志(参见Steffens S.，inflammation and Atherosclerosis，Herz.2004 Dec；29(8)：741-748)。

CRP是穿透因子(pentraxin)蛋白家族中的一员，之所以这样命名它们，是因为这些蛋白含有五个相同的亚基。在急性炎症过程中大量生成的(elaborated dramatically)CRP增加对若干抗原的免疫应答，活化补体，并增加组织因子的单核细胞生成。CRP结合细菌表面的磷酸胆碱，作为调理素并在宿主防御中起着关键性的作用。有趣的是，CRP似乎还在体外结合低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，这表明它与导致动脉粥样硬化的脂质具有直接的相互作用。

血管的炎症导致免疫细胞释放活性氧化物和自由基。当自由基和脂质发生反应时，结果导致脂质的过氧化。尽管有许多因素影响动脉粥样硬化症的发展和严重性，但主要因素是ROS介导的血清低密度脂蛋白(LDL)的过氧化。预防心脏病和中风的饮食途径是部分基于在饮食中加入抗氧化剂以限制LDL氧化，并减少脂肪本身的摄入。这些途径已经显著降低了心脏病引起的死亡率，但本发明的组合物可能会在将来提供一种安全的药理学预防方法，这种方法不像饮食和锻炼那样需要依赖意志力。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗心血管疾病，如动脉粥样硬化症。

高血压

动脉血压增高和产生血管损伤之间的联系仍是一个尚待研究的领域。最近在自然的高血压大鼠和盐依赖型Dah1高血压品系中发现的证据表明，在微血管内皮和循环白细胞中有过量的超氧阴离子产生(Swei等，Mechanisms of Oxygen Radicals Formation in Experimental Forms ofHypertension，On-line Proceedings of the 5th Internet World Congress onBiomedical Sciences ’98 at McMaster University，Canada，Presentation#SAswei0837，1998)。这些研究检测了在SHR和Dah1型高血压及其正常血压对照组中内皮黄嘌呤氧化酶作为氧化应激反应源的作用，结果表明与各自的正常血压对照组相比，这两种模型中XD和XO水平显著提高，且微循环的动脉段和静脉段的氧化应激水平都提高。通过阻断XD和XO可以显著降低氧化应激和血压。因此，类似地，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗心血管疾病，如高血压。

已知原发性高血压(EH)中的膜功能异常。呼吸爆发酶(respiratoryburst enzyme)——NADPH氧化酶存在于嗜中性白细胞(PMNL)的细胞膜上，其活性在氧源自由基(ROS)的产生过程中起着重要作用。如上所述，ROS参与了各种情况下的血管变化。Sagar及其合作者研究了在EH中ROS和抗氧化剂的状态(Sagar等，Mol Cell Biochem.1992 Apr；111(1-2)：103-8)。

Sagar及其合作者研究了十个年龄和性别匹配的健康对照(GpI)和26个未治疗的EH对象(Gp IIA轻度8例，Gp IIB中度8例，Gp IIC重度10例)。在对对象进行临床检查和试验室评价后，对从他们的血液中分离的嗜中性白细胞进行研究。在发光计中测量(计数/分钟)PMNL受激发后发出的化学发光(CL)，并以此作为衡量OFR生成及NADPH氧化酶活性的方法。同时还评价抗氧化剂、超氧化物歧化酶(SOD)以及还原的谷胱甘肽(GSH)的水平。与Gp IIA(2.80±1.87)、Gp IIB(34.54±30.24)和Gp I(0.52±0.15)相比，Gp IIC(243.04±24.9×10³次/分钟)的化学发光显著增多(P＜0.01)。与对照组(4.1±0.2)相比，在所有EH中SOD均显著降低(P＜0.05)(Gp IIA每毫克蛋白3.9±0.3单位，Gp IIB 3.5±0.3，以及Gp IIC 3.12±0.3)。类似地，与Gp I(13.5±2.5)相比，EH中GSH水平降低(P＜0.05)(Gp IIA每克蛋白11.2±1.7毫克，Gp IIB 8.5±1.1，Gp IIC 6.6±0.3)。

此外，有明显的证据表明氧化应激反应可导致血管增厚。钙拮抗剂，特别是高脂溶性的氨氯地平、拉西地平和尼索地平被发现具有抗氧化性质。这些药物可减少LDL的氧化及其向动脉壁的内流，并降低动物的动脉粥样硬化样损伤。在高血压患者中，氧自由基形成的标志丙二醛的血小板生成受氨氯地平、拉西地平和尼索地平的抑制。在他汀延缓生长评估研究(Regression Growth Evaluation Statin Study，REGRESS)中联合给药钙拮抗剂氨氯地平或硝苯地平以及普伐他汀导致出现新的血管损伤的几率明显降低。在维拉帕米治疗高血压与动脉粥样硬化研究(VHAS)中发现，在促进颈动脉增厚性损伤减少以及降低心血管事件发生几率方面维拉帕米比chlothalidone作用更强。在评估Norvasc的血管性作用的前瞻性随机试验中(Prospective Randomized Evaluation of the VascularEffects of Norvasc Trial，PREVENT)发现，氨氯地平延缓了患有冠状动脉疾病的对象的早期冠状动脉粥样硬化的进程。在将干预作为高血压治疗的目标的亚研究方案(In a subprotocol of the Intervention as a Goal in theHypertension Treatment，INSIGHT)的研究中发现与复方阿米洛噻(氢氯噻嗪+阿米洛利)相比硝苯地平GITS显著降低内膜的厚度。欧洲拉西地平对动脉粥样硬化的作用的研究(ELSA)的初步结果表明：与阿替洛尔相比拉西地平可降低内膜增厚过程的速度。因此，选择性钙拮抗剂可治疗高血压，并且是潜在的抗动脉粥样硬化剂(参见Hernandez，R.H.Calcium antagonists and Atherosclerosis protection in hypertension，Am JTher.2003 Nov-Dec；10(6)：409-14)。同样，通过向对象单独给药本发明的组合物或与钙通道拮抗剂联合给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗心血管疾病，例如动脉粥样硬化症、动脉损伤、内膜—中层增厚(intima-media thickening)和高血压。这一点将在以下实施例中进一步加以阐述。

关节炎

类风湿性关节炎(RA)是一种病因不明的慢性多系统疾病。尽管有各种各样的系统症状，RA特有的特征是渐行性炎性滑膜炎，通常涉及对称分布的外周关节。滑膜炎可导致软骨破坏和骨质侵蚀并最终改变关节的完整性，这一过程是该疾病的特点。

在RA患者中发现TNF-α和MMP-I生成的增加与胶原降解之间存在直接联系，这表明软骨胶原中胶原酶的断裂与TNF-α及MMP-I的活性有关。由于缺少这种分子的合成将会抑制软骨基质的维持，因此在早期RA中软骨II型胶原的合成减少可能和病理的发展有关(参见Fraser A.，Turnover of type II collagen and aggrecan in cartilage matrix at the onset ofinflammatory arthritis in humans：relationship to mediators of systemic andlocal inflammation.Arthritis Rheum.2003 Nov；48(11)：3085-95)。

当患者的CRP水平得到持续控制时，关节破坏的现象就不太可能出现(参见Dawes，P. T.，Rheumatoid arthritis：treatment which controls theC-reactive protein and erythrocyte sedimentation rate reduces radiologicalprogression.The British Journal of Rheumatology，Vol 25，44-49)。CRP水平还有助于对风湿性疾病的治疗的反应，并可以帮助区别风湿性关节炎(C反应蛋白水平高)和无并发症的狼疮(C反应蛋白水平低)。当用于评估关节炎患者时，血清是优选的样品；不应该检查滑液中的C反应蛋白。在通常经历过心血管疾病发生频率显著提高的RA患者中，CRP水平、胰岛素敏感性、HDL胆固醇、甘油三脂和高血压是相互联系的(参见Dessein PH，Cardiovascular risk in rheumatoid arthritis versus osteoarthritis：acute phase response related decreased insulin sensitivity and high-densitylipoprotein cholesterol as well as clustering of metabolic syndrome featuresin rheumatoid arthritis.Arthritis Res.2002；4(5)：R5)。

通常，治疗RA的一线医学处理法是使用非甾体抗炎药(NSAID)和简单的止痛药来控制局部炎症过程的症状和体征。这类药物在缓解体征和症状方面迅速起效，但它们似乎对疾病的进程发挥很小作用。NSAID阻断Cox酶的活性并因此阻断前列腺素、前列环素及血栓烷的生成。因此，它们具有止痛、抗炎、解热作用。此外，这类药物还可能发挥其它抗炎作用。由于这些药物都有广泛的不良甚至毒性副作用，因此本发明的天然饮食补充剂组合物提供了不同于NSAID的无毒性的选择。

虽然骨关节炎(OA)被认为是源于软骨细胞代谢缺陷，并因此自然缺乏类风湿性关节炎那样大规模的系统应答，但人们对OA急性期蛋白的兴趣仍逐渐增加(参见Sowers M.，C-reactive protein as a biomarker ofemergent osteoarthritis.Osteoarthritis Cartilage.2002 Aug；10(8)：595-601)。在患有晚期OA的患者中，疼痛的严重性与其hsCRP水平有关(参见Sturmer T.，Severity and extent of osteoarthritis and low grade systemicinflammation as assessed by high sensitivity C reactive protein，Ann RheumDis.2004 Feb；63(2)：200-5)。

因此，维持/增加哺乳动物的抗氧化能力提供了一种可改善或减少关节炎(RA和OA)中的组织退行性病变和炎症的方法。通过向上述对象给药本发明的组合物可以预防或治疗OA和RA。该组合物可以与其他药物，如罗氏芬(Relafen)和其它非甾体类抗炎药或糖皮质激素(可的松、地塞米松等)联合给药以达到更大的抗炎作用。

癌症及其它恶性疾病

癌症和其它恶性疾病都伴有基于细胞遗传信息改变的无控制的细胞生长和增殖。例如，通常限制细胞生长和复制的一个或多个基因发生突变或失活。这些基因缺陷直接对应于存在于细胞中DNA的遗传密码的删除和序列改变。导致这种DNA破坏的常见的、关键的共同原因是自由基损伤。DNA每天都会经受各种各样的损伤，大多数都被细胞内的正常DNA修复机制修复，但其中一些导致细胞调亡。由于这些损伤是偶尔发生的而且是分散的几乎是随机地发生在基因组中，因此大多数致死性DNA损伤在临床上是不重要的，仅导致数百万细胞中损失一小部分。然而，当单个细胞遭受损伤使其生长调节机制被破坏时，它可以不均衡地增殖并且迅速生长以通过阳性自然选择(positive natural selection)在细胞群中占据主导地位。当抑制细胞生长和增殖的因素缺乏时，肿瘤就会产生，通常是恶性的。因此，遗传物质的自由基损伤是致癌作用的一个主要的关键的共同途径。

似乎获得早期成功的建立抗肿瘤治疗的方法的目的是预防肿瘤诱导的血管生成，从而减少肿瘤的供血以通过切断其营养和氧来阻止增殖细胞生长并将其杀死。大多数侯选的治疗法是血管生成的直接抑制剂，其它治疗法目的是为了阻断血管生成反应的起始步骤。肿瘤形成与局部炎症反应和C-反应蛋白(CRP)的增多有关，这些是决定对象能否幸存的众所周知的预后指标(参见McKeown，DJ.，The relationship betweencirculating concentrations of C-reactive protein，inflammatory cytokines andcytokine receptors in patients with non-small-cell lung cancer.Br J Cancer.2004 Dec 13；91(12)：1993-5)。在多种类型的癌症中均可见CRP水平升高，例如参见：McArdle PA The relationship between interleukin-6 andC-reactive protein in patients with benign and malignant prostate disease，BrJ Cancer.2004 Nov 15；91(10)：1755-7；Saddler，D.，C-reactive proteinelevation and the risk of colorectal cancer，Gastroenterol Nurs.2004 Sep-Oct；27(5)：246-7；and Alexandrakis，MG The relation between bone marrowangiogenesis and the proliferation index Ki-67 in multiple myeloma，J ClinPathol.2004 Aug；57(8)：856-60。

CRP可显著影响血管内皮的基因表达。CRP受IL-6上调，并增加IL-8、ZF9、Activin A、MCP-1、EXT1、Cited2、PAI-1、Fibronectin-1、Gravin、Connexin-43和SORL-1的表达，并减少MAT2A、WRB、RCN1、TEB4、DNCL1和AnnexinA1的表达(参见Wang，Q.，Effect of C-ReactiveProtein on Gene Expression in Vascular Endothelial Cells，Am J PhysiolHeart Circ Physiol.2004 Dec 9)。因此，CRP反应基因可能在细胞的生长和分化、血管重塑和实体瘤发展过程中起着广泛的作用。抑制CRP将为目前的癌症治疗提供另一途径，并且可能通过抑制炎症和血管生成而提供预防性的抗癌效果。

因此，通过向上述对象给药本发明的组合物可以预防或治疗可对抗氧化剂治疗产生反应的癌症。这些癌症包括例如但不限于乳腺癌(参见Kline K，Vitamin E and breast cancer，J Nutr.2004 Dec；134(12 Suppl)：3458S-3462S)、肺癌(参见Wright ME，Development of a comprehensivedietary antioxidant index and application to lung cancer risk in a cohort ofmale smokers.Am J Epidemiol.2004 Jul 1；160(1)：68-76)、卵巢癌(参见Anderson K，Differential response of human ovarian cancer cells to inductionof apoptosis by vitamin E Succinate and vitamin E analogue，alpha-TEA.Cancer Res.2004 Jun 15；64(12)：4263-9)、以及结肠癌(参见A1-Shaer MH.，C-reactive protein and risk of colon cancer.JAMA.2004 Jun 16；291(23)：2819)。实际上，结肠直肠癌症发生与严重的氧化应激有关，氧化-抗氧化疾病的逐渐发展造成了结肠直肠癌的发生(参见Skrzydlewska E，Lipidperoxidation and antioxidant status in colorectal cancer.World JGastroenterol.2005 Jan 21；11(3)：403-6)。

该组合物可以和其它药物如糖皮质激素、喜树碱、氮芥类(mustard)药物和其它的化疗药物一起使用以达到更大的抗肿瘤反应并控制炎症。

放射性损伤

放射性损伤代表ROS介导的疾病的一个重要起因。根据情况不同，对于常见的辐射水平而言，大约三分之二的持续损伤不是由辐射本身介导而是继发地生成的ROS所介导。这不仅适用于急性中毒性放射性损伤，也适用于长期的致突变作用(并且因此适用于致癌作用)。

这一原则的重要临床应用就是常见的通过放射疗法治疗癌症。大的肿瘤往往过度生长而供血不足，并且尽管外周供氧充足肿瘤细胞死于中心部位。在这两个区域之间有一个肿瘤细胞仍可生长的缺氧区。这类肿瘤的放疗在外周部分特别有效，这个部位氧浓度充裕可形成可杀灭肿瘤的ROS。供氧不足的中心部位受损伤的程度很小。虽然中心部位的死亡细胞已不能幸存，但存在于两个区域之间的供氧不足、仍可存活的细胞在安全放疗剂量下可以存活，并因此导致后来的局部肿瘤复发。这就是为什么许多大的肿瘤是通过联合运用放疗(杀死边缘部位进展性肿瘤)和外科切除肿瘤团包括这些特别危险的残存细胞来治疗的原因。

ROS不仅可以在细胞内由外源性放射源生成，而且可以在体内作为正常代谢过程的副产物生成。内源性自由基的重要来源是统称为生物异源物质(xenobiotics)的药物、污染物、以及其它化学物质和毒素的代谢。它们中的一部分直接具有毒性，而其它许多物质是通过机体用于使其解毒的代谢过程中产生大量的自由基。除草剂百草枯(Paraquat)的代谢就是一个例子。药物执行管理部门曾使用这种除草剂去杀大麻。种植者发现把他们可以在庄稼枯萎之前收获喷洒该除草剂的庄稼，并且仍销售加有百草枯的产品。许多曾吸食这种产品的人后来都死于爆发性肺损伤(fulminate lung injury)。幸运的是，作为解决毒品问题的特别不人道的途径，该方法已经得以废除。

尽管百草枯(Paraquat)的报告(story)是自由基毒性的代谢机制的鲜明例子，许多常见的生物异源物质包括香烟烟雾、空气污染物甚至酒精都是有毒的，而且通常很大程度上借助于由它们在我们体内的分解代谢产生的自由基而产生致癌作用。此外，越来越多的证据表明富含水果和蔬菜的饮食——天然抗氧化剂含量高且饱和脂肪酸(特别易受ROS损害的靶标)含量低——能降低动脉粥样硬化症和癌症的危险。因此，通过给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可预防或治疗动脉粥样硬化症和癌症。

因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗辐射介导的损伤。

神经疾病和神经退行性疾病

神经疾病和神经退行性疾病影响着数百万美国人。这些疾病包括抑郁症、强迫症、阿尔茨海默症、过敏症、神经性厌食症、精神分裂症以及神经递质水平或免疫系统调节功能失调导致的其它神经疾病，以及行为障碍如ADD(注意力不足障碍(Attention Deficit Disorder))和ADHD(注意力不足与过度活动障碍(Attention Deficit HyperactivityDisorder))。氧化应激与多种神经疾病相联系，包括中风、帕金森氏病和阿尔茨海默症，并且已在体外模型中以各种形式模拟导致活性氧簇累积增多后引起的神经细胞死亡。例如，抗氧化剂谷胱甘肽耗竭导致永存性神经元和未成熟的初等皮质神经元细胞经历细胞死亡，这可以通过给药高浓度的谷氨酸盐引发。

许多这些疾病似乎把ROS毒性作为其神经细胞破坏的根本机制的主要部分，包括但不限于肌萎缩侧索硬化(ALS或称Lou Gehrig′s病)、帕金森氏病、阿尔茨海默症。例如，阿尔茨海默症是一种与衰老和认知退化相关的神经退行性疾病。淀粉样β肽(1-42)是老年斑块——阿尔茨海默症的标志——的主要成分，并且与这种疾病的发病机理有关。研究表明β(1-42)的蛋氨酸残基35可能在Aβ(1-42)介导的氧化应激和神经毒性中起着关键作用(参见Boyd-Kimball D，Rodent Abeta(1-42)exhibits oxidative stress properties similar to those of human Abeta(1-42)：Implications for proposed mechanisms of toxicity.J Alzheimer’s Dis.2004Oct；6(5)：515-25)。

此外，氧化应激还与帕金森氏病中黑质的多巴胺能神经元的选择性损失有关。通过鉴定于PD患者脑中累积的胞内聚集物中的突触核蛋白(synuclein)的翻译后修饰以及许多氧化性损伤引起突触核蛋白低聚化的能力证明了α突触核蛋白作为细胞内氧化物的潜在靶标的作用(参见Cole NB.，Metal-catalyzed oxidation of alpha synuclein：helping to define therelationship between oligomers，protofilaments and filaments.J Biol Chem.2004 Dec 21)。

因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗由炎症和氧化应激诱导或并发有炎症和氧化应激的神经疾病和神经退行性疾病。

缺血/再灌注损伤

当器官被剥夺其血液供应时(中风)就会受到损伤，这不仅是因为暂时性缺氧，还因为恢复供血时，与再灌注时重新引入的氧发生反应所产生的ROS。在某些临床情况中，这种损伤可通过给予抗氧化剂来预防，有时甚至是在缺血期之后但在再灌注之前。例如，现在通常在肾、肝和其它器官移植之前把它们保存在含抗氧化剂和其它物质的溶液中。另一个实例是在心脏外科手术时，在心脏停跳前使用药物阻断能产生自由基的酶的功能。这些药物在心脏恢复跳动、血流重新注入时有助于预防再灌注损伤。还发现这种再灌注损伤机制在外伤、大型外科手术或中风后发生的多器官衰竭的病人身上起着重要作用。多器官衰竭是目前重症监护病房中的主要死亡原因，并且人们正在作大量的努力以更好地理解ROS在这种综合症中如何起作用。

缺血是给定组织的组织氧饱和度低，它可以出现在任何器官系统中。所有器官都需要血液供应以满足生存的需要。那些动脉供血受到损伤(部分或完全堵塞)的未受损器官导致缺血(如冠状动脉栓塞、等候移植的器官、脑血管意外、隔室综合症等)。组织的缺血性损伤导致可逆转和不可逆转的组织学、生理和生化变化。晚期缺血是普遍性并表现出坏死。Demopoulos等(Fed.Proc.32：1859-1861，1973b)论证了在缺血组织中所观察到的坏死是线粒体中非结合的氧化磷酸化链中产生的氧化剂造成的理论。Zweir等采用顺磁共振光谱学为缺血导致自由基的产生提供了直接的证据(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，vol.84，pp：1404-1407)。在再灌注研究中，Zweir表明使用(可清除超氧化物的)超氧化物歧化酶可以改变其中的自由基之一。在缺血性心肌细胞中，ATP的耗竭可诱导释放花生四烯酸和棕榈酸。维生素E(Massey，K.D.和Burton，K.P.：Am.J.Physiol.256(Heart Circ.Physiol.25)：H1192-H1199，1989)、维生素E乙酸盐和亚硒酸硒已被用于保护组织使其免受缺血时出现的自由基的损害。可以认为增加组织抗氧化剂会清除缺血和前列腺素代谢产物中不可能同时产生的超氧化自由基和其它氧化剂。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗缺血/再灌注损伤，如脑缺血和心缺血(如心肌梗死)。

衰老

衰老是一种非常复杂的过程，其科学理解仍然比较模糊。现在已有证据表明衰老是一系列的过程，即一系列受控制的机制，而不仅仅是由于年龄增长引起的磨损的被动累积。如果衰老是一系列过程，那么其中一些步骤可能是可控制的，或至少是可改变的。由自由基和其它ROS所介导的分子损伤的累积构成了这些过程中最重要的步骤之一。最近的研究表明对ROS代谢的治疗性处理实际上可大幅延长小鼠的总寿命。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗年龄介导的损伤。

烧伤/伤口愈合

皮肤和其它器官的烧伤可见于紫外线辐射(UV)、化学物质、传导性或对流性热、触电等。因吸入烟或腐蚀性气体会在肺的薄壁组织中出现烧伤(参见组织损伤部分)。皮肤烧伤可分为一级、二级和三级烧伤(最严重)。可以认为所有烧伤在很大程度上因产生氧化物而均造成组织损害(Till，G.O.：Am J.Pathol.Jul；1325(1)：195-202，1989)。当暴露于紫外线时，脂质体(人工膜)会发生过氧化(Bose，B：Biotechnol Appl.Biochem，Oct.，12(5)：557-61，1990)。可以认为当皮肤暴露于紫外线辐射时会有相似的过氧化过程发生(Somer，E.：Shape Magazine，p 33-35，Nov.1992；Hamanka，H.：J.Dermatol，Oct.17(10)：595-8，1990)。皮肤暴露于UV的暴露强度和时间不同。可以认为每日暴露于UV下(如阳光)会导致皮肤皱纹。根据皮肤暴露在UV光下的强度和/或时间不同可导致一级、二级或三级烧伤。

将裸鼠暴露在单纯UV中可导致抗氧化剂谷胱甘肽、β-胡萝卜素、α-生育酚大幅度降低。过氧化氢酶和谷胱甘肽还原酶的酶活性也会下降(Fuchs，J.：J.Invest Dermatol，Dec，93(6)：769-73，1989)。由于暴露于UV下而造成皮肤中抗氧化剂浓度和酶活性的下降，这些事实支持了皮肤中含有自由基这一概念。可以认为增加皮肤中的抗氧化剂会抑制脂质过氧化。通过在脂质体中置入β-胡萝卜素、α-生育酚可以抑制暴露在UV下的脂质体的脂质过氧化(Pelle，E.：Arch.Biochem.Biophys.Dec.283(2)：234-40，1990)。

已经提出产生过多的自由基是延缓伤口愈合的因素(Yukie，N.：Dermatolgica，179(suppl 1)：101-106，1989)。因此通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化剂的抗氧化能力可改善病理性氧化剂和前列腺素生成的作用，同时还可促进各种皮肤损伤中的伤口愈合。

组织损伤和退化

组织损伤是细胞或器官区域中炎症聚集而导致的。例如，溃疡性结肠炎患者中出现血浆氧化应激，而作为可用于保护患者免遭全身性的氧化应激反应的ω-3脂肪酸正在研究之中(参见Barbosa DS，Decreasedoxidative in patients with ulcerative colitis supplemented with fish oilomega-3 fatty acids.，Nutrition.2003 Oct；19(10)：837-42)。在克罗恩氏病(Crohn′s disease)患者中，C-反应蛋白水平与疾病的复发、缓解以及对治疗的反应的临床和病理性指标密切相关。对血清C-反应蛋白的分析为炎症活性提供了客观的标准，这可用于评估、治疗和研究克罗恩氏病(参见Fagan，E.A.，Serum levels of C-reactive protein in Crohn’s disease andulcerative colitis.Eur J Clin Invest.1982 Aug；12(4)：351-9)。因此，CRP水平也可能对治疗组织损伤的后续反应中，并可能有助于区分克罗恩氏病(C-反应蛋白水平高)和溃疡性结肠炎(C-反应蛋白水平低)。

由于局部诱导会发生炎症(如肝炎)或由于远端器官或与之不相连的其它器官出现损伤会发生炎症，其同样经受损伤(如皮肤出现的严重烧伤(第一器官)并接着引发了肺的损伤(第二器官))。在任一种情况中，局部的或远端的损伤都被认为是由释放氧化剂的活化的白细胞所介导。由白细胞释放的氧化剂可以与细胞(器官)膜发生反应(Fantone，J.C.和Ward，P.A.：Am.J.of Path.，vol.107(3)，P. 397-418，1982)。细胞膜反复暴露于氧化剂下会降低抗氧化剂水平，从而增加易于受损的可能性。可以认为通过提高细胞内和/或细胞外和/或脂-水界面的抗氧化剂水平会阻止氧化剂损伤重要的细胞结构。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗ROS介导的组织损伤或其它类型的炎性组织退化。

败血症

败血症是以全身性微生物感染为特征。通常它是致命的并且即使不致命也会增加对象的发病率。在败血症中，红细胞变的粘稠且变形(Baker，C.H.，等：Circ.Shock 20：127-139，1986；Powell，J.，等：Critical Care Med.，vol 19(5)，1991)，这会导致微血管堵塞。心输出量增加而肾、肝和肌肉组织中的血流却减少(Hurd，T.C，等：Archives of Surg.，vol.123，1988)。在体外和体内对由内毒素引发的中风的研究中发现证明自由基可造成损伤(McKechnie，K.，等：Circ.Shock 19：429-439，1986)。研究结果包括血管通透性增加、线粒体破坏、肌质网破环钙转运以及补体系统的活化(特别是C5a)。在败血症感染中，急性期蛋白特别是CRP的血清水平提高，这增加了补体应答和其它细胞介导的应答的活化。

因此通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗败血症介导的炎性细胞损伤。

GSH缺乏症(GSH Deficiency)

人为地消耗谷胱甘肽会干扰正常T细胞的功能，特别是在活化的最初30-60分钟内(Fischman，C.M.，等：The Journal of Immunology，vol.127(6)，p2257-2262，1981；Hamilos，D.L.和Wedner，H.H.：Journal ofImmunology，vol.135(4)，1985)。谷胱甘肽缺乏的T细胞表现出胸苷结合(thymidine incorporation)以及母细胞变异减少。谷胱甘肽消耗得越多，细胞恢复到正常水平所花的时间就越长。如果细胞的GSH消耗得足够多，那么该细胞就再也不能恢复到正常的GSH水平。在艾滋病(AIDS)患者中发现的谷氨酸盐水平增高(Eck，H.-P.和Droge，W.：Bio.Chem.Hoppe-Seyler，vol.370，pp 109-113)似乎抑制胱氨酸向巨噬细胞转运。在正常情况下，胱氨酸被巨噬细胞还原成半胱氨酸。半胱氨酸被输出到微环境中以供T细胞应用，从而最终将其转化为细胞内的谷胱甘肽。T细胞不能利用胱氨酸。AIDS患者体内谷胱甘肽被耗竭(Eck，H.-P，等；Biol.Chem.Hoppe-Seyler，vol.370，pp101-108)，这被认为会不利地影响T细胞功能。这种情况被认为与试验研究所证实的人为的GSH耗竭会导致T细胞功能异常这一结果相似。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗GSH缺乏症。

艾滋病(AIDS)

大量证据表明HIV感染及其后续的ARC/AIDS在很大程度上是自由基介导的疾病。通过判断人类中的抗氧化水平及其对免疫系统的后果可间接得出这一分析。那些抗氧化剂之一的谷胱甘肽(GSH)因HIV感染宿主而减少。在经ARC并最终发展为AIDS的疾病进程中GSH水平持续下降。GSH水平的微摩尔级(micromolar)变化对T淋巴细胞(它可视为免疫系统的关键指标)的功能会产生不利的影响。GSH在免疫系统中表现出多重作用。硫醇含量(如GSH)调节HIV基因组表达的复制(Kalebic，T.，等.Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，；88：986-90，1991；Roeder，M.，等.，Pore.Natl.Acad.Sci.，USA，vol.87，p 4884-4888)。增加U1细胞系(幼单核细胞)培养基中的硫醇浓度(GSH、NAC、GSE(谷胱甘肽酯))可导致病毒组装、HIV逆转录酶生成和及病毒复制的抑制。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持抗氧化能力可以预防或治疗HIV介导的损伤。

免疫调节作用

白细胞具有多种活化剂(如暴露于可摄取的微粒、一些可溶性因子如补体、凝集素、佛波酯等之中)。白细胞活化的后果之一是释放MPO系统(H2O2+卤化物+髓过氧化物酶)和其它氧化剂。对白细胞活化的刺激越强，释放的氧化剂就越多，对T细胞功能的抑制就更严重。当活化的白细胞与T淋巴细胞及过氧化氢酶结合时，淋巴细胞的功能不会受到抑制；单核细胞(其含有酶性抗氧化剂：谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、髓过氧化物酶)被用于代替过氧化氢酶时也不会受到抑制(Lipsky，P.E.：J.Clin，Invest.73：53，1984)。B淋巴细胞产生的抗体显示了和淋巴细胞类似的易受自由基破坏的性质(El-Hag，A.，等.：J.of Immunol.，vol.136(9)，1986)。以下是关于各种淋巴细胞功能对自由基攻击的敏感度的等级次序：免疫球蛋白分泌细胞是最敏感的(特别是对MPO系统)；天然杀伤细胞活性；对PHA和ConA反应的DNA合成为中等敏感；对PWM反应的DNA最不易受影响。单核细胞/巨噬细胞中过氧化氢酶的含量大约是淋巴细胞中的15-20倍(Meerhof，L.J.和Roos，D.：J.Reticulendothel.Soc.28：419)，并因此其对氧化损伤的敏感度要低得多。将淋巴细胞暴露于自由基生成系统证实了膜特征的变化：E花结(E rosette)形成减少63％；表面免疫球蛋白减少44％；帽形成(cap formation)减少90％(Kraut，E.H.和Sagone，A.L.：J.ofLab.Clin.Med.，Nov.1981，p 697-703)。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可以预防或治疗ROS引起的免疫损伤。

镰状细胞性贫血

镰状细胞性贫血是一种遗传决定性疾病。对患者的镰状红细胞(HbS)的分析显示了大量膜特征：冻结的不可逆的镰状红细胞的血影蛋白外壳，脂质双层磷脂的定向异常；钙-ATP酶缺乏；HbS红细胞向血管内皮黏附的倾向性，HbS分子上的硫醇被氧化。具有向血管内皮黏附的倾向这一特征可能是这种疾病即导致微脉管系统堵塞的主要发病机制。因而器官出现缺血性损伤(参看缺血部分)。自由基损害HbS的其他证据是α-生育酚的缺乏、丙二醛的量增加以及和丙二醛交联的基团异常。超氧阴离子可经过阴离子通道进入红细胞中，导致形成高铁血红蛋白并最终溶解红细胞(Weiss，S.J.：J.Biol.Chem.225：9912-9917，1980)。与对照组相比，镰状红细胞自发生成的超氧化物数量要多60％，而多生成的过氧化氢的量约为75％(Hebbel，R.P.，等：J.Clin.Invest.，vol.70，p.1253-1259，1982)。超氧化物歧化酶增加约50％，谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶分别减少约50％和29％。谷胱甘肽和维生素E的水平显著下降。可以认为通过增加骨髓和血清中抗氧化剂水平会显著降低由镰状红细胞生成的自由基。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可有效预防或治疗贫血介导的损伤。

糖尿病

糖尿病(DM)是一种常见病，全球约有1亿2千4百万人罹患此病。糖尿病与高风险的动脉粥样硬化症以及肾脏、神经及视觉损伤有关。当细胞或器官不能使代谢活动中生成的自由基解毒，便产生氧化应激反应。糖尿病是以导致细胞代谢失调的慢性高血糖为特征。Vincent及其合作者曾提出糖尿病使糖代谢途径超载导致产生过多自由基和氧化应激(Vincent等，Endocr Rev.Aug；25(4)：612-28(2004))。Vincent及其合作者已经提供支持这一理念的证据，即慢性和急性高血糖都会导致外周神经系统的氧化应激反应，这促进了糖尿病神经病变的发展。因氧化应激损伤的蛋白质的生物活性降低，导致能量代谢、细胞信号传导和转运损失，并最终导致细胞死亡。分析由糖尿病的动物及细胞培养模型以及抗氧化剂的临床试验数据明显提示，在糖尿病神经病变过程中存在着高血糖诱导的氧化应激反应。Vincent等得出结论：优越的抗氧化治疗对预防糖尿病患者的神经病变仍然是必要的(Vincent等，Endocr Rev.，Aug；25(4)：612-28(2004))。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可预防或治疗与糖尿病相关的、ROS-介导的组织损伤。

Pasaoglu及其合作者研究了2-型糖尿病患者中脂质过氧化、血浆和红血球对氧化的抵抗以及红细胞和血清中的抗氧化防御系统(Pasaoglu等，Tohoku J Exp Med.，Jul；203(3)：211-8(2004))。第一组包括新诊断出患有糖尿病的20名患者，而另一组包括20名使用口服抗糖尿病药物(OAD)治疗的患者。20名健康对象作为对照组。测量血清和红血球丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、对氧化的抵抗和血浆硫醇(总SH)水平。此外，还测定糖化血红蛋白(glycated hemoglobin)、血清果糖胺、尿酸、总蛋白、总胆固醇、甘油三脂和血糖水平。尽管新诊断的患者中血清和红细胞MDA水平高于对照组，但在使用OAD治疗的组中测定出MDA的最高水平。在暴露于氧化剂后MDA水平在OAD组中的增高要高于新诊断组。两组糖尿病组的总-SH和红细胞谷胱甘肽水平均低于对照组。这些结果均表明糖尿病患者的血清和红细胞脂质过氧化增加。患者血清表明对抗氧化的抵抗力降低。Pasaoglu及其合作者提出在2型糖尿病的早期阶段，抗氧化剂系统可阻止自由基增加所产生的效应，但在晚期由于抗氧化剂活性下降这种关系被破坏。红血球中GSH及血清总-SH水平降低可能是由于抗氧化剂的补偿机制造成的。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可预防或治疗糖尿病(如2型糖尿病)有关的、ROS介导的组织损伤。

给药抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶可防止NOD鼠中胰岛同种异体移植物的破坏(Nomikos等，Immunol Cell Biol67：85-87(1989))。此外，抗氧化剂普罗布考被证明在BB大鼠中可降低糖尿病的发生率还可延迟糖尿病的发病(Drash AL等，Am J Cardiol，62：27B-30B(1988))。Tabatabaie及其合作者证明长期给药自由基清除剂苯基N-叔丁基硝酮(PBN)可抑制小鼠中STZ诱导的糖尿病(Tabatabaie等，FEBS Lett，407：148-152(1997))。胰岛中抗氧化物酶如SOD、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平低从另一方面提示了β细胞对氧化损伤特别敏感(Lenzen等，Free radicals Biol.Med.，20：463-466(1996))。

ROS的产生表现为通过脂质过氧化产物的形成，其被认为是孤立胰岛中β细胞的细胞因子介导的死亡的最终原因(Rabinovitch等，J.Clin.Endocrinol.Metab.，81：3197-3202(1996))。Tabatabaie及其合作者最近通过使用EUR光谱证明：胰岛中自由基的形成是细胞因子作用的结果(Tabatabaie等，Diabetes，Aug.(2003))。基于他们的研究，Tabatabaie及其合作者得出这样的结论：自由基通过胰岛中β细胞细胞因子介导的自由基生成，在1型糖尿病的发病过程中起作用(Tabatabaie等，Diabetes，Aug.(2003))。因此，通过向所述对象给药本发明的组合物来维持/增加抗氧化能力可预防或治疗与糖尿病相关的(如1型糖尿病)、ROS介导的组织损伤。

药物组合物与制剂

本发明的组合物可单独用于饮料、滋补品、冲剂(infusion)、或食品中，或者与其他饮食补充剂或治疗剂一起使用。本发明的组合物可以单独使用或者与药物学可接受的具有有利的传递性质，即适于向对象传递的化合物、载体、赋形剂或佐剂一起进一步配制。这种组合物通常包含本发明的组合物与药物学可接受的载体。本文所使用的“药物学可接受的载体”是指包括与药物给药相容的任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗菌和抗真菌化合物、等渗和延缓吸收的化合物等。适当的载体记载于最新版的本领域的标准参考书Remington′s PharmaceuticalSciences中，其并入此处作为参考。这种载体或稀释剂的优选的实例包括但不限于水、盐水、Ringer氏溶液、葡萄糖溶液、以及5％人类血清白蛋白。脂质体和非水性载体如不挥发油也可以使用。这种用于药物学活性物质的介质和化合物的应用为本领域所熟知。除了与活性化合物不相容的以外，本发明涵盖所有常规介质在本组合物中的应用。辅助的活性化合物也可以并入该组合物中。

本发明的药物组合物配制成与既定的给药途径相容。给药途径的实例包括口服、静脉内、腹膜内、皮下、肌肉内、关节内、动脉内、大脑内、小脑内、支气管内、鞘内、局部、以及气雾剂途径。可以用酸或碱如盐酸或氢氧化钠来调pH。口服组合物通常包括惰性稀释剂或可食用的载体。他们可以装在明胶胶囊、囊片中或压成片剂。为达到口服治疗给药的目的，本发明的组合物可以与一种或多种赋形剂相结合并采用片剂、药片(troche)或胶囊的形式。口服组合物也可以利用液体载体来制备而用作漱口液，其中液体载体中的化合物是通过口服、鼓动、吐出或吞咽施用。药物相容的粘合化合物和/或佐剂可以作为该组合物的一部分而包括在内。片剂、药丸、胶囊、药片等可以包含任何下列成分或类似性质的化合物：粘合剂如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂如淀粉或乳糖；崩解剂如褐藻酸、Primogel、或玉米淀粉；润滑剂如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂如胶态二氧化硅；甜味剂如蔗糖或糖精；或矫味剂如薄荷、水杨酸甲酯、或橙味剂。赋形剂还可以包括但不局限于如碳酸钙、交联羧甲纤维素钠、磷酸二钙、硬脂酸镁、微晶纤维素、改性纤维素、二氧化硅和硬脂酸。

本发明的组合物还可以制备成栓剂(如，与常规的栓剂基质如可可脂和其他甘油酯一起)或保留灌肠剂(retension enema)形式用于直肠给药的药物组合物。

在一个具体实施方案中，本发明的组合物是与载体一起配制，该载体将保护化合物避免从身体迅速消除，例如控释制剂，包括植入剂和微胶囊传递系统。可以使用可生物降解的、生物相容的聚合物，如乙烯-醋酸乙烯酯共聚物(ethylene vinyl acetate)、聚酐、聚乙醇酸、胶原质、聚原酸酯(polyorthoesters)以及聚乳酸。制备这种制剂的方法对本领域技术人员来说将是显而易见的。其原料也可以从Alza Corporation和NovaPharmaceuticals，Inc.购买得到。脂质体混悬剂也可以用作药物学可接受的载体。这些可以根据本领域技术人员已知的方法如美国专利No.4,522,811所记载的方法来制备。

就便于给药且剂量均匀而言，以剂量单位的形式配制口服或非胃肠道组合物特别有利。本文所使用的剂量单位形式是指适于用作待治疗的对象的单位剂量的物理地离散的单位，各个单位包含预定量的经计算用于产生预期治疗效果的活性化合物以及所需的药物载体。本发明的剂量单位形式的规格是遵从并直接取决于本发明组合物的独特性质和要达到的特殊治疗效果，以及在混合这种用于治疗个体的活性化合物的领域中所固有的局限性。该药物组合物可以与给药说明书一起装在容器、包装或给药器里。

该组合物可以作为单一剂量提供，然而，该化合物优选为以多剂量给药。特别优选为间断性剂量，如每天两次或每天一次剂量。然而对于更分散的间断性剂量，如每36、48、60或72小时一次，或每周一次仍可以获得有利的效果。治疗持续时间将取决于被治疗的疾病。例如，如本文所讨论的，在以本发明组合物间断性治疗30天的人类对象中可以观测到血清CRP水平平均下降24％。在90天的研究期内可观测到血清CRP水平进一步下降。根据该信息外推建议性的剂量方案，一周时间足以治疗手术后患者的炎症，其血清CRP水平通常在手术后三天达到峰值并在之后即刻自然地下降。或者，慢性病如关节炎或动脉粥样硬化症可能要求在多年内长期治疗。医学专业人员根据本文提供的教导将能够确定剂量水平和间隔。

本发明通过以下的实施例得到进一步详细说明，而不是为了限制本发明的范围。对本领域技术人员来说很显然在不偏离本发明的目的和利益的情况下，可以对本文的物质和方法进行许多改良。

实施例

实施例1本发明的草药组合物调节野生C57BL/6J小鼠抗氧化酶并减少脂质过氧化反应

I总体目的及试验设计

该试验的目的为观察本发明的草药组合物对4周龄的野生正常C57BL/6J小鼠的作用。示例性的草药组合物Protandim I是含有八种草药提取物的饮食补充剂，包括假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％姜黄素、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚，45％EGCG)及银杏叶提取物，具体如下表3中所详述。

                  表3Protandim I组合物

  活性成分  量  占总活性成分的百分比  假马齿苋提取物，45％假马齿苋皂素  150mg  12.77  水飞蓟提取物，70-80％水飞蓟素  275mg  23.4  南非醉茄粉末  150mg  12.77  积雪草粉末  150mg  12.77  姜黄提取物，95％姜黄素  75mg  6.38  绿茶98％多酚，45％EGCG  75mg  6.38  银杏叶提取物  150mg  12.77  芦荟粉末  150mg  12.77  总计  1175mg  100

将组合物与粉末饮食混合然后制成小球。按下表4中所述将小鼠分为四组，服用预期人类剂量的0至1、3或10倍的剂量。用于本试验的估计的人类剂量是1175毫克/天或16毫克/千克体重/天。然而，在本发明的其他具体实施方案中，对象接受的剂量为达到预期抗氧化效果所需要的量。

            表4接受指示量的Protandim I的小鼠

  小鼠数量  饮食  剂量  微克/克体重/天  Protandim I  毫克/千克饮食  第1组  7  对照  0  0  第2组  8  1×  16  100  第3组  7  3×  48  300  第4组  8  10×  160  1000  总计  30

加入的量是基于每只小鼠平均消耗5g/d的假设。在第2组中每只小鼠接受的Protandim I组合物的量相当于按mg/gbw表示的70kg的人的预期剂量。第3组中每只小鼠接受的Protandim I组合物的量为3倍并且第4组中每只小鼠接受的Protandim I组合物的量为10倍。小鼠在第1天及第23天称重。23天后，牺牲动物并收获组织用于分析。所测量的终点包括在RBC、肝脏及脑中的主要抗氧化酶SOD、CAT及GPX的活性。另外，通过测定血浆、肝脏及脑中的硫代巴比妥酸反应活性物质(TBARS)来评价脂质过氧化反应的程度。

硫代巴比妥酸活性物质或TBARS是通过Ohkawa等(Ohkawa等，Anal.Biochem.，95：351-358(1979))的方法来测定。该反应混合物(总体积1ml)包含50μl 8.1％的十二烷基硫酸钠、0.375ml 20％的醋酸和0.375ml 0.8％的硫代巴比妥酸以及200μl血浆或组织匀浆上清液。将该混合物在沸水中加热1小时，用自来水冷却并用正丁醇/吡啶(15∶1体积比)通过旋涡1-2分钟来萃取。之后将混合物在500-1000g离心10分钟，或者直至水层和有机层出现好的分离。除去有机相并在532nm测定其相对空白反应混合物的吸光度。用1，1，3，3-四甲氧基丙烷来制备标准曲线，并以摩尔当量来报导TBARS。

超氧化物歧化酶活性是通过McCord和Fridovich(McCord等，J.Biol.Chem.，244：6049-6055(1969))的方法来测定。

过氧化氢酶是通过Beers和Sizer(Beers等，J.Biol.Chem.，195，pp.133-140(1952))的方法进行分析。通过分光光度法在240nm跟踪过氧化物的消失。该温育混合物(3ml)包含在0.05M磷酸钾(pH 7.0)和0.02M过氧化氢中的50μl样品上清液。在240nm记录吸光度的降低2分钟。吸光度在每分钟降低的速率是由曲线中的最初线性部分(45秒)计算得到。

将0.0394cm²/μmol的值作为H₂O₂的消光系数。

一单位的过氧化氢酶定义为在所定条件下于250℃，pH7.0时每分钟分解1μmol H₂O₂的酶的量。

谷胱甘肽过氧化物酶按照Carrillo等(Carrillo等.，Life Sci.，48：517-521(1991))所述进行分析。

II结果

                    A.Protandim I的毒性评价

为评价Protandim I补充剂的任何可能的毒性，在试验开始及结束时对动物进行称重，并计算各自的体重增加或减少的百分比。最常见的毒性症状是“生长迟缓”，它可以表现为生长速度减慢，或实际体重下降。图1表示补充剂实际上可适度而不显著性地增加生长速度。从预期的人类剂量(1×)至十倍的该剂量，Protandim I补充剂在任何水平均未表现出存在生长迟缓的毒性。

                    B.Protandim I对SOD活性的影响

SOD活性是在小鼠RSC(图2)、肝脏(图3)和脑(图4)中测定，以评价Protandim I对这种酶的影响。如图2中所示，补充Protandim I的动物显示出其RBC SOD活性呈剂量依赖性增加。在最高水平的补充剂中发现显著增加了25％。应注意，成熟的循环RBC不含细胞核，并因此一旦它们进入循环即无法诱导新的酶合成。RBC的循环寿命为120天。因此，在23天的试验过程中，大约20％的RBC将被来自骨髓的成熟(maturing)网织红细胞所代替。由于衰老的RBC被新生细胞稀释，人们可以预期RBC SOD将随时间呈线性前进直至所有的细胞在120天被代替。因此，所期望的预计的最终RBC SOD活性(120天之后)在1×饮食时约为16％，3×时为44％，10×时为125％。

如图3中所详示，观察到肝脏SOD活性呈剂量依赖性增加。如图中所示，在所有补充剂水平可观察到显著增加，1×饮食时为13％，3×时为23％，10×时为45％。同样，观察到脑SOD活性除了在3×水平的ProtandimI外都显著增加(图4)。增加的百分比大约为20％。

                    C.Protandim I对CAT活性的影响

补充Protandim I的动物的CAT变化不大。在RBC中似乎有少许剂量依赖性增加，10×组的增加接近统计学显著性(p＝0.057)(图5)。基于上述讨论的RBC的周转，人们可以预知RBC CAT将随时间呈线性前进直至所有的细胞在120天被代替。因此，120天之后，所期望的预计最终RBC CAT活性在1×饮食时接大约为10％，3×时为20％，10×时为40％。

肝脏CAT在1×和3×饮食时不变，但在10×饮食时显示活性有少量非显著性增加(图6)。脑在正常情况下含有非常少的过氧化氢酶，并且这种检测到的该少剂量在任何饮食水平都未改变。

                D.Protandim I对GPX活性的影响

补充Protandim I的动物显示出GPX出乎意料的降低。在RBC中，似乎有少许剂量依赖性降低，10×组降低13％，无统计学显著性(图7)。基于上述讨论的RBC的周转，人们可以预知RBC GPX将随时间呈线性前进直至所有的细胞在120天被代替。因此，120天之后所期望的RBCGPX活性在10×饮食时预计降低大约65％。类似地，肝脏GPX似乎是剂量依赖性地降低，其在10×组降低40％，这在p＜0.004时具统计学显著意义(图8)。脑GPX遵循类似的方式，在3×(p＜0.03)显著性地降低19％而在10×(p＝0.01)降低23％(图9)。

            E.Protandim I对脂质过氧化的影响(TBARS)

Protandim治疗的一个目的是减少氧化应激。在本项试验中评价氧化应激的终点是TBARS。补充Protandim I的动物表明TBARS在所有受试组织中都急剧并高度显著性地下降。在血浆中存在剂量依赖性下降：在1×饮食的动物中下降135％，3×饮食时下降62％，10×时下降75％。在3×和10×组的变化具有高度的统计学显著性：分别为p＝0.004和p＝0.0004(图10)。

如图11所示，在肝脏匀浆中存在类似的剂量依赖性下降：在1×饮食的动物中下降34％，3×时下降56％，10×时下降66％。这种组织中的变化在所有三个饮食浓度下都具有高度的统计学显著性(图11)。在脑匀浆中，Protandim I的作用甚至更显著：观察到在1×饮食时下降83％(p＜0.004)，3×饮食时下降94％(p＜0.0001)，而在10×饮食时下降97％(p＜＝0.0001)(图12)。

III.Protandim I作用总结

本项试验确定了本发明的草药组合物，如Protandim I(如表3中所定义)是减少氧化应激的一种安全有效的途径。定义为“1×”(16mg/kg体重)的剂量似乎被确定为非常安全和有效。该试验主要的意想不到的结果是所测试的三种抗氧化酶中，只有SOD被明显诱导。CAT未受影响，而GPX水平实际上是显著下降。这项试验是基于文献中声称的八种草药成分中的七种上调SOD(Bhattacharya等，Phytother，Res.，14：174-179(2000)；Soto等，Comp Biochem.Physiol C.Toxicol.Pharmacol.，136：205-212(2003)；Bhattacharya等，Indian J.Exp.Biol.，35：236-239(1997)；Bridi等，Phytother.Res.，15：449-451(2001)；Luczaj等，J.Toxicol.Environ.Health A，67：595-606(2004)；Reddy等，Food Chem.，Toxicol.，32：279-283(1994)；Singh等，Phytomedicine，7：209-219(2000)；Naidu等，Indian J.Exp.Biol.，40：894-900(2002))，并且所有八种成分都上调CAT和GPX(Bhattacharya等，Phytother，Res.，14：174-179(2000)；Soto等，CompBiochem.Physiol C.Toxicol.Pharmacol.，136：205-212(2003)；Bhattacharya等，Indian J.Exp.Biol.，35：236-239(1997)；Bridi等，Phytother.Res.，15：449-451(2001)；Luczai等，J.Toxicol.Environ.Health A，67：595-606(2004)；Reddy等，Food Chem.，Toxicol.，32：279-283(1994)；Singh等，Phytomedicine，7：209-219(2000)；Naidu等，Indian J.Exp.Biol.，40：894-900(2002)；Skukla等，Phytother.Res.，13：50-54(1999))。

图13总结了Protandim诱导在血液、肝脏和大脑中的抗氧化酶的变化，他们表现出明显不同的模式。SOD是以剂量依赖性的方式被诱导，仅仅在10×饮食时在脑中观察到不同的方式。正如图14中可以看到的，实际上脑TBARS在10×饮食时几乎全部被消除，这表明对避免氧化应激的保护达到最大化。

图14总结了各种水平的Protandim I饮食分别对三种受试组织之一中的脂质过氧化的影响。存在强烈的剂量依赖性，根据适当建立的可以看出SOD浓度增加对脂质过氧化的速率的影响的钟形曲线，没有任何脂质过氧化反常增加的迹象。这是一个重要的安全因素。虽然很明显SOD增加将对经历高度氧化应激的个体有好处，但是有可能SOD增加会对具有少量氧化应激的健康个体产生问题。因此这项试验的目的是为了检测Protandim I对降低年幼的正常小鼠的氧化应激，而在10倍剂量的上限范围内不引起氧化应激反常增加的能力。当向所述对象给药时，本发明的其他组合物很可能对身体健康具有同样的积极作用。

实施例2本发明的草药组合物改变人类对象的抗氧化酶并减少脂质过氧化

I总体试验目的及设计

本项试验的目的为了观察本发明的草药组合物对人类对象的作用。向16位年龄为20-78岁的健康人类对象给药称作Protandim II的包含五种草药提取物的示例性饮食补充剂。Protandim II的组分如下表5所示。

                         表5.Protandim II的组分

 活性成分  量  占总活性成分的重量百分比 假马齿苋提取物， 45％假马齿苋皂素  150mg  22.2 水飞蓟提取物，70-80％水飞蓟素  225mg  33.3 南非醉茄粉末  150mg  22.2 姜黄提取物，95％姜黄素  75mg  11.1 绿茶，98％多酚，45％EGCG  75mg  11.1 总计  675mg  99.9

按照表6中所示将对象分为两组。

        表6.人类对象的Protandim II给药

  对象数量  年龄范围  每日补充Protandim II  1组  12  20-78  675mg  2组  4  29-66  338mg  总计  16

1组含12位对象，他们在一次性服用的胶囊中接受675mg的全日Protandim II补充剂120天。在第0、30和120天，通过静脉穿刺采血分析。2组含另外4个参与者，他们接受一半量的Protandim(即，半剂量)，或338mg单日胶囊30天。

II.方法

在人类对象的组织中测定的终点包括在RBC中的主要抗氧化酶SOD和CAT的活性。脂质过氧化的程度是通过测定血浆中的硫代巴比妥酸活性物质(TBARS)来评定。此外，还测定了血浆中的尿酸，这是因为它被认为是具有一定重要性的，尤其是关于清除和中和氧化剂过氧化亚硝酸盐的内源性抗氧化剂。如果氧化应激减少，人们可以预期其对血浆尿酸水平具有抑制(sparing)作用。高灵敏度的CRP被当作炎症活性的指示剂来监控，并评定了脂质特征(总胆固醇、LDL、HDL和甘油三酯)。

硫代巴比妥酸活性物质或TBARS是通过Ohkawa等(Ohkawa等，Anal.Biochem.，95：351-358(1979))的方法来测定。该反应混合物(总体积1ml)包含50μl 8.1％的十二烷基硫酸钠、0.375ml 20％的醋酸和0.375ml 0.8％的硫代巴比妥酸以及200μl血浆或组织匀浆上清液。将该混合物在沸水中加热1小时，用自来水冷却并用正丁醇/吡啶(15∶1体积比)通过旋涡1-2分钟来萃取。之后将混合物在500-1000g离心10分钟，或者直至水层和有机层出现好的分离。除去有机相并在532nm测定其相对空白反应混合物的吸光度。用1，1，3，3-四甲氧基丙烷来制备标准曲线，并以摩尔当量来报导TBARS。

超氧化物歧化酶活性是通过McCord和Fridovich(McCord等，J.Biol.Chem.，244：6049-6055(1969))的方法来测定。

过氧化氢酶是通过Beers和Sizer(Beers等，J.Biol.Chem.，195，pp.133-140(1952))的方法进行分析。通过分光光度法在240nm跟踪过氧化物的消失。该温育混合物(3ml)包含在0.05M磷酸钾(pH 7.0)和0.02M过氧化氢中的50μl样品上清液。在240nm记录吸光度降低2分钟。吸光度在每分钟降低的速率是由曲线中的最初线性部分(45秒)计算得到。

将0.0394cm²/μmol的值作为H₂O₂的消光系数。

一单位的过氧化氢酶定义为在所定条件下于250℃，pH7.0时每分钟分解1μmol H₂O₂的酶的数量。

高灵敏度的C-反应蛋白、尿酸、以及脂质特征分析(总胆固醇、LDL、HDL、甘油三酯)是由University Hospital/University of Colorado HealthSciences Center，Denver，CO临床化学试验室完成。

谷胱甘肽过氧化物酶按照Carrillo等(Carrillo等.，Life Sci.，48：517-521(1991))所述进行分析。

III.结果

            A.Protandim II的毒性或副作用评价

所有对象都被告知及时向调查者报告任何可疑的不良反应或副作用(例如恶心、呕吐、头痛、胃肠不适、痢疾、便秘、痒等)并停止使用该补充剂。未发现这种反应或副作用。在各个补充剂水平均未发现到Protandim II的毒性或其他不良的药理作用的证据。

        B.Protandim II对脂质过氧化和TBARS的影响

Protandim II治疗的一个目的是减少氧化应激。在这项试验中我们评价氧化应激的终点是TBARS，试验中测定了一族脂质过氧化产物(大多数是脂质过氧化氢)，他们在分析过程中分解产生丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸反应生成能在532nm检测的发色团。TBA分析存在一些争论，有些人批评它缺乏特异性，因为它比对丙二醛专属的气相色谱法得到更高的值。TBA检验能集体测定包括将继续分解生成丙二醛的前体在内的脂质过氧化产物是TBA分析的基础。Gutteridge等，J.Appl.Biochem，5：293-299(1983)，Liu等.，Anal.Biochem.245：161-166(1997)。很明显不含脂质过氧化物的天然脂肪酸在TBA检验的酸加热期间并不经历明显的过氧化反应。Gutteridge等，J.Appl Biochem.，5：293-299(1983)。此外，该TBA检验在文献中被广泛用于评定脂质过氧化，这使得能够容易地与大量其他试验室的试验进行对比。特别地，最近试验发现血浆TBARS是患有确定的心脏病的患者中独立于传统的危险因子以及炎症标记的心血管事件的预报器。Walter等，J.Am.Coll.Cardiol.，44：1996-2002(2004)。

图15(A组和B组)阐述了16名年龄在20-78岁之间的健康人类对象在补充Protandim II之前血浆TBARS的年龄相关性增加(实心环)。正如图15中所示，A组中尽管在线性回归线周围相当分散，但与年龄存在强烈的相关性(R²＝0.602)，其中最老的个体比最小的个体的值高约3倍。正如灰色正方形所示，在补充Protandim II 30天之后(675毫克/天，n＝11)血浆TBARS下降。其分散少得多，并且与年龄的相关性几乎消失(R²＝0.082)。30天之后，平均TBARS浓度为0.95±0.04μM。在120天的补充之后检测这些个体中的9个(空心环)，结果显示没有进一步的变化(0.99±0.05μM，R²＝0.012)。在30天Protandim II之后所有对象的TBARS都减少。补充Protandim II后脂质过氧化产物的年龄相关性增加消失。在第120天时维持了这种变化，结果可与在第30天的结果相区别。

            C.Protandim II对SOD活性的影响

如图16中所示，补充Protandim II的对象在补充120天后其红血球SOD活性统计学显著性地增加22％(n＝9，p＝0.04)。红血球SOD在第0天为378±17U/ml而在120天为460±18U/ml。应注意，成熟的循环中的RBC不含细胞核，因此一旦他们进入循环则无法诱导新的酶合成。红血球的循环寿命为120天。因此，在120天的试验过程中，100％的红细胞将被来自骨髓的成熟网织红细胞所代替。

        D.Protandim II对CAT活性的影响

如图17中所示，补充Protandim II的对象在补充120天后其红血球CAT活性统计学显著性地增加57％(n＝9，p＝0.001)。红血球CAT在第0天为104,000±8,000U/ml，而在120天为163,000±8,000U/ml。如上述对SOD的讨论，对于红血球的周转和替换的考虑同样适用于过氧化氧酶。

         E.Protandim II对所选血液参数的影响

补充Protandim II的对象补充30天之后其血浆尿酸浓度增加4.6％，但是这种增加并未达到统计学显著性。由于尿酸充当内源性抗氧化剂，预计随着SOD活性的增加，尿酸水平会升高，这将会导致更低水平的过氧化亚硝酸盐生成。尿酸被认为可清除氧化剂过氧化亚硝酸盐。

三位CRP水平升高的对象参与了这项试验，存在利用Protandim II补充降低这些水平的趋势。如图18所示，在30天Protandim II补充之后，CRP平均降低24％。在60-70天，CRP水平持续下降，这说明在检验时间内CRP水平下降量要大于平均30％-33％。试验中未发现总胆固醇、LDL、HDL、或甘油三酯有明显变化。

        F.低剂量的Protandim II(338mg/day)的作用

为了评价所建议的每天人类补充675毫克是否会高于达到所期望的减少氧化应激的所需的量，四位对象接受了338毫克/天的较低剂量30天。在第0、5、12和30天，从个体中抽血用于提供关于表现出氧化应激减少所需的时间的附加信息。图19显示血浆TBARS的反应相当快，大多数变化出现在第5-12天。图20显示低剂量的Protandim II并不完全如全剂量的那么有效，相对于全剂量的0.95±0.04μM(n＝11)它使TBARS降低至1.29±0.14μM(n＝4)的平均值。利用单尾t-检验，这种差异在p＜0.03时具显著性。这就再次保证了使用推荐的全剂量675毫克/天的Protandim并不是过量的剂量的正确性。

IV.讨论

本项试验确立了本发明的草药组合物，如Protandim II(如表5中所定义)是减少年龄为20-78岁之间的人类对象的氧化应激的安全有效的途径。所定义的剂量(675mg/kg体重)似乎被充分确定为安全和有效。根据通过脂质过氧化所测定的结果，氧化应激不再年龄依赖性地增长。没有证据表明所达到的适当提高SOD和过氧化氢酶会以任何方式损害具有最低初始水平的氧化应激的对象，其被认为是可能性极小的结果，但由于我们承认对于SOD存在钟形剂量反应曲线，因而在理论上是可能的。更确切地说，SOD太多和太少都会产生问题。本项试验的结果表明所有的对象获得了因Protandim II诱导的SOD和过氧化氢酶活性提高所带来的好处。

Protandim II的作用可能超出了SOD和/或过氧化氢酶基因的直接诱导。这种抗氧化酶形成一种相互保护系统：过氧化物能使CAT和GPX两者失活，而过氧化氢能使细胞溶胶(cytosolic)SOD失活。McCord，FreeRadical Biol.Med.，4：9-14(1988)；Kono等.，J. Biol.Chem.，257：5751-5754(1982)；Blum等，Arch.Biochem.Biophys.，240：500-508(1985)；Bray等，Biochem.J，139：43-48(1974)。因此，在经历大量氧化应激的系统中，全组的抗氧化酶可能被未清除的浓度的过氧化物和过氧化氢导致部分失活。在这些条件下，如果SOD单独被诱导，则过氧化物的浓度将降低，从而当它们摆脱过氧化物介导的失活作用时可部分恢复CAT和GPX的活性。因此，似乎所有三种酶都被诱导。只有当在大量氧化应激的条件下开始时才有此预期。在正常条件下，CAT和GPX只发生少量失活，因此SOD诱导可能对其它两种酶的活性影响小。另一个需要考虑的因素是4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal)，其为脂质过氧化的产物，用于诱导GPX的合成。Larini等，Free Radic.Res.，38：509-516(2004)。如果SOD诱导引起脂质过氧化速率降低，那么4-羟基壬烯醛的浓度会下降，而人们可以认为GPX合成较少。事实上，这就是我们所观测到的：SOD被诱导，脂质过氧化被抑制，且GPX活性降低。当向对象给药时，本发明的其他组合物很可能也对身体健康起同样的积极作用。

实施例3本发明的草药组合物使人类对象的血压正常化

高血压被公认为具有因环境和遗传因素，包括食盐或酒精摄取过量、压力、年龄、遗传学和家族史、肥胖症、身体不活动、以及高饱和脂肪饮食引起的多因素特点。然而，在过去的几年里收集了大量关于脉管炎(vascular inflammation)的信息，结果表明在高血压的开始及发展过程中都可能涉及炎症。来自动物模型和患者的证据显示已确定为冠心病的主要危险因素的高血压被认为是通过增加若干介质包括白细胞黏着分子(leukocyte adhesion molecules)、趋化因子、特异性生长因子、热休克蛋白、内皮肽-1(endothelin-1)、以及血管紧张素的表达而发挥促炎症作用(pro-inflammatory actions)。在患有高血压的患者中观察到内皮功能紊乱(Endothelial dysfunction)以及C-反应蛋白血清水平提高(参见，Li.，J.，Med Hypotheses.Is hypertension an inflammatory disease？2005；64(2)：236-240)。对与动脉硬度增加有关的基因表达和增加患血管硬化危险性的基因多形性的变化进行评价，结果表明肾素-血管紧张素系统的成分、基质金属蛋白酶、细胞内信号传导以及细胞外基质成分都可能与这一过程有关。对这些靶标的干涉可能降低血管硬度、降低心脏收缩压、减少ISH的患病率、并改善患有高血压或其他CV病症的患者(尤其是老年对象)的后果(参见，Schiffrin EL.，Vascular stiffening and arterialcompliance：implications for systolic blood pressure.Am J Hypertens.2004Dec；17(12 Pt 2)：39S-48S)。因此本发明的组合物提供了新的治疗策略来减少高血压的发病率和死亡率，并缓解高血压的靶器官损伤。

#1对象是一位50岁的男子，在给药本发明的组合物之前测量其血压为收缩压140-150，舒张压90-100。每日摄取1500mg含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚45％EGCG)以及银杏叶提取物的组合物14天之后，测量对象血压为收缩压126，舒张压74。含草药的组合物中的各种成分的每日近似剂量为：假马齿苋提取物(200mg)、水飞蓟提取物70-80％(300mg)、南非醉茄粉末(200mg)、姜黄提取物(95％)(100mg)、积雪草粉末(200mg)、芦荟粉末(200mg)、绿茶(98％多酚45％EGCG)(100mg)以及银杏叶提取物(200mg)。

#2对象是一位44岁的妇女，在任何处理之前测量其血压大约为收缩压165舒张压113到收缩压160舒张压103。该对象开始摄取25毫克/天的阿替洛尔(ATENOLOL)(9个月)。阿替洛尔药物治疗使对象的血压降低至收缩压142舒张压98到收缩压135舒张压96，然而测量的对象的舒张压从未低于91(阿替洛尔的最低值)。每日摄取1500mg含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚45％EGCG)以及银杏叶提取物的组合物21天之后(同时继续ATENOLOL治疗)，测量对象血压为收缩压136舒张压70。因此，观测到舒张压在此期间降低20mm以上(参见图21，A组)。之后在继续两者治疗的情况下血压保持恒定。含草药的组合物中的各种成分的每日近似剂量为：假马齿苋提取物(200mg)、水飞蓟提取物70-80％(300mg)、南非醉茄粉末(200mg)、姜黄提取物(95％)(100mg)、积雪草粉末(200mg)、芦荟粉末(200mg)、绿茶(98％多酚45％EGCG)(100mg)以及银杏叶提取物(200mg)。

#3对象是一位49岁的老年男子，在给药本发明的组合物之前测量其血压为收缩压135，舒张压78。每日摄取1500mg含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚45％EGCG)以及银杏叶提取物的组合物7天之后，测量对象血压为收缩压117，舒张压75。含草药的组合物中的各种成分的每日近似剂量为：假马齿苋提取物(200mg)、水飞蓟提取物70-80％(300mg)、南非醉茄粉末(200mg)、姜黄提取物(95％)(100mg)、积雪草粉末(200mg)、芦荟粉末(200mg)、绿茶(98％多酚45％EGCG)(100mg)以及银杏叶提取物(200mg)。

#4对象是一位59岁的老年男子，在任何处理之前测量其血压大约为收缩压128，舒张压75。每日摄取1000mg含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚45％EGCG)以及银杏叶提取物的组合物21天之后，测量对象血压为收缩压125，舒张压61。因此，观测到舒张压在此期间降低14mm以上(参见图21，B组)。21天后，在继续治疗的情况下血压保持恒定。含草药的组合物中的各种成分的每日近似剂量为：假马齿苋提取物(134mg)、水飞蓟提取物70-80％(200mg)、南非醉茄粉末(134mg)、姜黄提取物(95％)(67mg)、积雪草粉末(134mg)、芦荟粉末(134mg)、绿茶(98％多酚，45％EGCG)(67mg)以及银杏叶提取物(134mg)。

实施例4本发明的组合物预防或缓解人类对象的偏头痛

在美国偏头痛使二千四百万人饱受折磨。它们可能出现在任何年龄，但通常在10-40岁开始50岁之后减少。有些人一个月经历若干次偏头痛，而其他人一生中只经历少数几次偏头痛。大约75％的偏头痛患者是女性。

偏头痛是一种颤动性或跳动性头痛，它通常是在一侧(单侧)并伴随有恶心、呕吐、对光、声音和气味敏感、睡眠中断、以及抑郁。它经常反复发作并倾向于随着偏头痛对象年龄增长而趋于缓和。偏头痛是根据它们产生的症状来分类。最常见的两种类型是先兆性偏头痛和无先兆性偏头痛。不常见的偏头痛类型包括以下：基底动脉偏头痛、颈动脉痛(Carotidynia)、无头痛性偏头痛、眼肌麻痹性偏头痛、偏头痛持续状态(Status migraine)。

引起偏头痛原因未知。这种病症可能是因体内或环境改变引起的中枢神经系统的一系列反应所导致。这种疾病通常具有家族史，表明偏头痛患者可能遗传了对在脑周围的血管和神经产生炎症的触发因素的敏感性从而引起疼痛。

触发因素是引发某一过程或反应的任何刺激。确诊的偏头痛的触发因素通常包括以下：酒精(如红葡萄酒)、环境因素(如天气、海拔高度、时区变化)、含咖啡因的食物(如咖啡、巧克力)、谷氨酸单钠(MSG，见于中餐中)、以及硝酸盐(如加工食品、热狗)、炫目、女性荷尔蒙变化、饥饿、睡眠不足、药物(非处方药或处方药)、香水、压力。

在本项试验中，对经常患偏头痛的女性对象(妇女)给药本发明的组合物以评价该组合物对她的偏头痛发病率的影响。该对象摄取含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物70-80％、南非醉茄粉末、姜黄提取物95％、积雪草粉末、芦荟粉末、绿茶(98％多酚45％EGCG)以及银杏叶提取物的组合物30天。含草药的组合物中的各种成分的每日剂量近似为：假马齿苋提取物(134mg-200mg)、水飞蓟提取物70-80％(200mg-300mg)、南非醉茄粉末(134mg-200mg)、姜黄提取物(95％)(67mg-100mg)、积雪草粉末(134mg-200mg)、芦荟粉末(134mg-200mg)、绿茶(98％多酚45％EGCG)(67mg-100mg)以及银杏叶提取物(134mg-200mg)。在开始给药本发明的组合物之后，对象未患偏头痛。因此本发明的组合物可用于预防或缓解对象的偏头痛。

类似地，本发明的组合物可用于预防或治疗与高海拔相关的对象的头痛(如，急性高山病(acute mountain sickness，AMS))。在最近的一次攀登中，在2500米(8000英尺)以上具有以下一种或更多症状的头痛可以诊断该对象患有AMS：胃口减退、恶心、或呕吐、疲劳或虚弱、眩晕或轻微头痛、睡眠困难、精神错乱、蹒跚步态。本发明组合物还可用于预防或治疗急性和慢性头痛。

实施例5本发明含草药的组合物的具体实施方案

在一个预防、缓解或治疗对象的氧化应激的方法的具体实施方案中，至少每日向对象给药含有假马齿苋提取物、水飞蓟提取物、70-80％水飞蓟素，南非醉茄粉末、绿茶、98％多酚、45％EGCG和姜黄提取物以及95％姜黄素的含草药的组合物。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含假马齿苋提取物、45％假马齿苋皂素，水飞蓟提取物、70-80％水飞蓟素，南非醉茄粉末、绿茶、98％多酚、45％EGCG、和姜黄提取物95％姜黄素，其浓度如下表7所示。

                    表7Protandim II的组分

  活性成分  量  占总活性成分的重量百分比(重量％)  假马齿苋提取物  45％假马齿苋皂素  150mg  22.2  水飞蓟提取物，  70-80％水飞蓟素  225mg  33.3  南非醉茄粉末  150mg  22.2  绿茶，98％多酚，45％EGCG  75mg  11.1  姜黄提取物，95％姜黄素  75mg  11.1  总计  675mg  99.9

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-50重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-30重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约22重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-60重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-50重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约33重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-50重量％的南非醉茄粉末。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-30重量％的南非醉茄粉末。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约22重量％的南非醉茄粉末。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的2.5重量％-25重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-15重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约11重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的2.5重量％-25重量％的绿茶(98％多酚，45％EGCG)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-15重量％的绿茶(98％多酚，45％EGCG)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约11重量％的绿茶(45％多酚)。

在本发明含草药的组合物的一些具体实施方案中，如表8所述该组合物包含如上述表7所总结的活性成分以及积雪草粉末、银杏叶提取物和芦荟粉末。

                    表8.Protandim I的组分

 活性成分  量  占总活性成分的重量百分比  (重量％) 假马齿苋提取物，45％假马齿苋 皂素  150mg  12.77 水飞蓟提取物，70-80％水飞蓟素  275mg  23.4 南非醉茄粉末  150mg  12.77 积雪草粉末  150mg  12.77 姜黄提取物，95％姜黄素  75mg  6.38 绿茶98％多酚，45％EGCG  75mg  6.38 银杏叶提取物  150mg  12.77 芦荟粉末  150mg  12.77 总计  1175mg  100

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-50重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-30重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约22重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约12重量％的假马齿苋提取物(45％假马齿苋皂素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-60重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-50重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约33重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约23重量％的水飞蓟提取物(70-80％水飞蓟素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-50重量％的南非醉茄粉末。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的10重量％-30重量％的南非醉茄粉末。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约22重量％的南非醉茄粉末。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约12重量％的南非醉茄粉末。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的2.5重量％-25重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-15重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约11重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约6重量％的姜黄提取物(95％姜黄素)。

在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的2.5重量％-25重量％的绿茶(98％多酚，45％EGCG)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含约占活性成分总量的5重量％-15重量％的绿茶(98％多酚，45％EGCG)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约11重量％的绿茶(45％多酚)。在一个具体实施方案中，本发明含草药的组合物包含至少占活性成分总量的约6重量％的绿茶(45％多酚)。

在该组合物的一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约5重量％-约50重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，所述积雪草粉末存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约10重量％-约30重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，积雪草粉末提取物存在的浓度为该组合物的活性成分总干重的至少约12重量％。

在该组合物的一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约5重量％-约50重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约10重量％-约30重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，所述银杏叶提取物存在的浓度为该组合物的活性成分总干重的至少约12重量％。

在该组合物的一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约5重量％-约50重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为至少占该组合物的活性成分总干重的约10重量％-约30重量％。在该组合物的一个具体实施方案中，所述芦荟粉末存在的浓度为该组合物的活性成分总干重的至少约12重量％。

在一些具体实施方案中，本发明含草药的组合物配制成包含至少一种赋形剂，例如碳酸钙、交联羧甲基纤维素钠、磷酸二钙、硬脂酸镁、微晶纤维素、改性纤维素、二氧化硅以及硬脂酸。

                    等同(EQUIVALENTS)

尽管参照其特定的具体实施方案对本发明加以描述，但应理解可以对其进一步加以改变。此外，本申请有意覆盖本发明的任何变更、应用、或修改，包括诸如在本发明所属领域已知的或常规的实践的范围内，以及属于所附的权利要求的范围内的那些不同于本说明公开的内容。