一种新的乌鸡白凤浓缩丸及制备方法

摘要

本发明涉及一种新的乌鸡白凤浓缩丸及制备方法，特别是采用了膜分离技术、冷冻干燥技术、超微粉碎技术，采用压制法或塑制法等工艺方法，使其在1000g丸剂中所包含的生药量提高到原来的3－4倍。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种新的乌鸡白凤浓缩丸，其配方及制备工艺，特别是采用了膜分离技术、冷冻干燥技术、超微粉碎技术，采用压制法或塑制法等工艺方法，使其在1000g丸剂中所包含的生药量提高到原来的3-4倍。

背景技术：

乌鸡白凤丸出自明代龚云林的《寿世保元》，2000版中国药典一部收载了该品种。全方以乌鸡(去毛爪肠)、人参、鹿角胶、牡蛎(煅)、白芍、当归、甘草、黄芪、鳖甲(制)、香附(醋制)、天冬、桑螵蛸、熟地、生地、川芎、鹿角霜、银柴胡、芡实(炒)、山药、丹参组成，具有补气养血、调经止带之功。用于气血两虚，身体瘦弱，腰膝酸软，月经不调，崩漏带下，为传统的妇科良药。

而普通工艺制备的乌鸡白凤浓缩丸处方为乌鸡(去毛爪肠)640g、人参128g、鹿角胶128g、牡蛎(煅)48g、白芍128g、当归144g、甘草32g、黄芪32g、鳖甲(制)64g、香附(醋制)128g、天冬64g、桑螵蛸48g、熟地黄256g、地黄256g、川芎64g、鹿角霜48g、银柴胡26g、芡实(炒)64g、山药128g、丹参128g，制备工艺为：取黄芪、当归、川芎、白芍、与乌鸡同置罐内，加入黄酒2000g，加盖密闭，蒸至乌鸡烂后捞出，鸡汤浓缩至适量，拌入桑螵蛸、同上述药物一起烘干后与香附、芡实、山药、银柴胡、鳖甲、鹿角霜、人参、特蛎、甘草、丹参、及鹿角胶(取鹿角胶84g制鹿角胶珠)共制成细粉备用；取地黄、熟地黄、天冬加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，放置后取上清液浓缩至相对密度为1.25-1.30(65℃)的清膏，并将鹿角胶44g烊化后加入混匀，得浓缩液，上述药粉用浓缩液泛丸，干燥，即得1000g的浓缩丸。该工艺制备的浓缩丸服用量大(一次9g，一日一次)、吸收慢、口味不佳。我们通过采用膜分离技术，除去药材中大量的杂质，减少乌鸡白凤丸的服用剂量，降低药物毒副作用，改善口感；通过应用冷冻干燥技术，改善难粉碎药材的物理性质，使其易于粉碎；通过运用超微粉碎技术，提高乌鸡白凤丸的某些药理作用指标。经上述工艺改进制备的乌鸡白凤丸临床疗效有所提高，副作用减少。

发明内容：

本发明提供了一种新的乌鸡白凤丸配方，配方如下：

乌鸡(去毛爪肠)1920g-2560g、人参384g-512g、鹿角胶384g-512g、牡蛎(煅)144g-192g、白芍384g-512g、当归432g-576g、甘草96g-128g、黄芪96g-128g、鳖甲(制)192g-256g、香附(醋制)384g-512g、天冬192g-256g、桑螵蛸144g-192g、熟地黄768g-1024g、地黄768g-1024g、川芎192g-256g、鹿角霜144g-192g、银柴胡78g-104g、芡实(炒)192g-256g、山药384g-512g、丹参384g-512g，优选的是：

乌鸡(去毛爪肠)1920g、人参384g、鹿角胶384g、牡蛎(煅)144g、白芍384g、当归432g、甘草96g、黄芪96g、鳖甲(制)192g、香附(醋制)384g、天冬192g、桑螵蛸144g、熟地黄768g、地黄768g、川芎192g、鹿角霜144g、银柴胡78g、芡实(炒)192g、山药384g、丹参384g，

以及，

乌鸡(去毛爪肠)2560g、人参512g、鹿角胶512g、牡蛎(煅)192g、白芍512g、当归576g、甘草128g、黄芪128g、鳖甲(制)256g、香附(醋制)512g、天冬256g、桑螵蛸192g、熟地黄1024g、地黄1024g、川芎256g、鹿角霜192g、银柴胡104g、芡实(炒)256g、山药512g、丹参512g、

以上配方中，药物的量是以生药量计算的，上述量可以制备成1000g左右的本发明的浓缩丸制剂。

以上量药材，在进行大规模生产时可增加它们的量，但它们之间的比例不变，对于特殊病人，可适当增加或减少其中某个或某些药材的量，以适应这些病人的需要，但增加或减少的量以仍然具有组方的特性功能为准，一般不超过上述量的一倍。

本发明还提供用以上配方制备乌鸡白凤浓缩丸的制备方法，包括以下步骤：

a、将处方中含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸汽蒸馏提取挥发油，提取后挥发油后的上述药材，并入步骤b再提取；

b、将人参、白芍、当归、甘草、黄芪、香附(醋制)、天冬、熟地黄、地黄、川芎、银柴胡、丹参，用水或醇提取有效成分，所得提取液浓缩，浓缩液经冷冻干燥得干粉；

c、将处方中乌鸡(去毛爪肠)、鹿角胶、牡蛎(煅)鳖甲(制)、桑螵蛸、鹿角霜经黄酒炮制蒸干，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥后，再经超微粉碎得微粉；

d、将挥发油，用天然高分子材料为囊材，经微囊化技术制备成微囊，洗涤低温干燥后制成微囊粉，或挥发油不制成干燥微囊粉，待用；

e、将步骤b的干粉、步骤c的微粉、步骤d的微囊粉混合均匀，得混合粉，或将步骤b的干粉、步骤c的微粉混合均匀，将步骤d的待用挥发油喷入，密闭一段时间，得混合粉；

f、将步骤e的混合粉用压丸机压制成丸，干燥、打光即得浓缩丸成品。以上步骤可分为两种工艺，工艺A和工艺B，其中的工艺A如下：

1、将处方中含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸汽蒸馏提取挥发油后，再将人参、白芍、当归、甘草、黄芪、香附(醋制)、天冬、熟地黄、地黄、川芎、银柴胡、丹参等十二味植物类药材，提取有效成分，所得提取液经纳滤膜浓缩后得浓缩液，再经冷冻干燥得干粉。

2、将处方中乌鸡(去毛爪肠)、鹿角胶、牡蛎(煅)鳖甲(制)、桑螵蛸、鹿角霜等六味动物类药材经黄酒炮制蒸干，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥后，再经超微粉碎得微粉；

3、将另提的挥发油，用天然高分子材料为囊材，经微囊化技术制备成微囊，洗涤低温干燥后得微囊粉；

4、将干粉、微粉、微囊粉混合均匀，用压丸机压制成丸，干燥、打光即得浓缩丸成品。

工艺B如下：

1、将处方中含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸汽蒸馏提取挥发油后，人参、白芍、当归、甘草、黄芪、香附(醋制)、天冬、熟地黄、地黄、川芎、银柴胡、丹参等植物类药材(山药、芡实除外)，提取有效成分，所得提取液经纳滤膜浓缩后得浓缩液，再经冷冻干燥得干粉；

2、将处方中动物类药材经黄酒炮制蒸干后，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥后，再经超微粉碎得微粉；

3、将以上微粉、干粉混匀，将另提的挥发油喷入，密闭2-6小时；

4、用制丸机制丸，干燥、打光，即得浓缩丸成品。

以上提取步骤可采用水提或醇提，也可采用水提醇沉或醇提水沉，所述醇优选的为医药用的乙醇，浓度可为30％-100％。所述天然高分子材料为明胶、阿拉伯胶。所述微囊化技术，是常规技术，可采用以下技术，将所提挥发油与4％阿拉伯胶溶液(体积比为1∶25)倒入组织捣碎机中，高速搅拌1分钟制得挥发油乳浊液，将4％明胶溶液(与阿拉伯胶等量体积)与乳浊液混合，搅拌10分钟，置37℃水浴中，不断搅拌，滴加10％醋酸溶液适量。调PH值为4，加入酸化蒸馏水(PH值4.5)200毫升稀释，不断搅拌降温至25℃，再置冰浴中降温至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氢氧化钠调PH值为8-9，继续搅拌1小时。静置，倾去上清液，微囊用蒸馏水洗至无甲醛味，低温干燥即得挥发油微囊粉。所述的超微粉碎可采用流能磨超微粉碎，所得的微粉粒度为3-20μm。

本发明的制剂为老的已经上市的制剂服用剂量的1/3-1/4，极大的减少服用量，方便服用。本发明收集原料药材的挥发油成分，更好的利用了原料药材的有效成分，保证药物疗效，用水提或醇提法并经过纳滤膜浓缩可除去其中的纤维素、蛋白质、果胶、树胶等无效的大分子有机杂质，可减少副作用，增强临床使用疗效。

以下通过实验说明本发明的有益效果。

药理药效比较实验

我们对乌鸡白凤丸(浓缩丸)实施例1(工艺A)、实施例2(工艺B)、老的普通工艺的三种制剂的补气养血、调经止血等药理药效以及毒性方面作用进行了以下比较研究。

材料和方法

1.1实验材料

1.1.1动物  昆明种健康小白鼠，体重18-22g，雄雌各半，随机分组，由江西医学院实验动物中心提供，合格证号021-9601。Wistar大鼠，体重200-250g，雄雌各半，随机分组，由江西医学院实验动物中心提供，合格证号021-9602。

1.1.2药物

乌鸡白凤丸(浓缩丸)实施例1(工艺A)、实施例2(工艺B)及普通工艺浓缩丸等由汇仁集团有限公司购买，实验前称取一定量，加水溶解至所需浓度，冰箱保存，供实验用。

注射用环磷酰胺：0.2g×5瓶，成人0.2g，每日一次，江西恒瑞医药股份有限公司，批号：01092821。取环磷酰胺1瓶(200mg)，加注射用水至50ml，现配现用；都氏试剂：碳酸氢钠1.0g，氰化钾0.05g高铁氰化钾0.2g，蒸馏水1000ml，测血红蛋白用。

1.1.3主要仪器，电子秒表，上海手表三厂生产；721分光光度计，上海分析仪器厂生产；光学显微镜，日本产(奥林巴斯)。

1.2实验方法与结果

1.2.1对急性失血性小鼠血虚模型的影响

取小白鼠，立即鼠尾采血测定Hb值(氰化高铁血红蛋白测定法)及RBC数(光学显微镜法)[2]，后将鼠尾伤口浸入37℃左右温水中，放血约0.5ml，造成急性失血性血虚模型。于失血后24小时，鼠尾采血测定Hb及RBC值，分别灌胃给药，连续7天，每日1次，末次给药后24小时鼠尾采血测定Hb及RBC。结果表明失血后小白鼠Hb、RBC值均显著低于失血前(P＜0.01＝。乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B及普通工艺组均能显著促进失血小白鼠的Hb及RBC值的恢复(P＜0.05＝。各制剂之间的作用类同。具体结果见表1、2。

表1 乌鸡白凤浓缩丸等对急性失血性血虚模型小鼠Hb的影响(g％)

                        剂量

组别        动物数g   生药/kg    失血前       失血后         治疗后

空白对照组    16        -      10.32±1.75    7.71±0.93    8.29±1.04

普通工艺      14       18.0    9.85±1.07     7.49±1.04    9.83±1.57^▲

工艺A低剂量   15       9.0     10.46±1.63    7.75±0.99    9.92±1.33^▲

工艺A高剂量   16       18.0    9.72±1.84     7.33±0.89    9.81±1.31^▲

工艺B低剂量   15       9.0     9.89±1.56     7.23±0.92    9.78±1.22^▲

工艺B高剂量   14       18.0    10.21±1.38    7.50±0.61    9.97±1.06^▲

与空白(给生理盐水)对照组相比，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。下同。

表2乌鸡白凤浓缩丸等对急性失血性血虚模型小鼠RBC的影响(×10¹²)

                    剂量

组别        动物数g   生药/kg    失血前        失血后        治疗后

空白对照组    16        -      7.32±0.81    5.74±0.61    6.84±0.75^▲

普通工艺      14       18.0    6.98±0.93    5.83±0.79    7.63±0.88^▲

工艺A低剂量   15       9.0     7.15±1.01    6.26±0.68    7.59±0.66^▲

工艺A高剂量   16       18.0    6.96±0.68    5.43±0.54    7.49±0.51^▲

工艺B低剂量   15       9.0     7.03±0.87    5.57±0.53    7.32±0.56^▲

工艺B高剂量   14       18.0    7.12±0.67    5.42±0.68    7.45±0.58^▲

1.2.2对小白鼠游泳时间的影响

取小白鼠，分别灌胃给药，连续7天，每日1次.末次给药前禁食12小时，自由饮水。末次给药后60分钟，将每只鼠尾负重2g回形针，放于水槽(水深25cm，水温20±0.5℃)中。计算动物自落水开始鼻孔沉入水中10秒不能浮出水面的时间(秒)，作为小鼠游泳时间指标。结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B的高低剂量组均可明显延长小鼠的游泳时间，但普通工艺组不能延长小鼠的游泳时间，工艺A、工艺B的作用均优于普通工艺组。具体结果见表3。

表3乌鸡白凤浓缩丸等对小白鼠游泳时间的影响

组别          动物数    剂量(g生药/kg)    游泳时间(S)

空白对照组     15            -          387.40±194.67

普通工艺       14           18.0        403.07±240.23

工艺A低剂量    10           9.0         657.76±253.75^▲☆★

工艺A高剂量    13           18.0        714.90±187.06^{▲▲☆☆★★}

工艺B低剂量    14           9.0         632.74±213.35^▲☆★

工艺B高剂量    12           18.0        684.09±166.60^{▲▲☆☆★★}

与普通工艺浓缩丸组相比，^★P＜0.05，^★★P＜0.01下同

1.2.3对小白鼠常压耐缺氧的影响

取小白鼠，分别灌胃给药，连续5天，每日1次给药后60分钟将小鼠放于125ml广口瓶中，封口，立即计时，记录动物死亡时间(秒)。结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B、普通工艺组均能显著延长小白鼠常压缺氧死亡时间，其中工艺B高剂量的作用最为明显，且其作用优于普通工艺组。具体结果见表4。

表4乌鸡白凤浓缩丸等对小鼠常压耐缺氧时间的影响

组别        动物数  剂量(g生药/Kg)    耐缺氧时间(S)      延长百分率(％)

空白对照组    16         -           634.07±102.47

普通工艺      16        18.0         803.06±123.10       12.66

A工艺低       16        9.0          836.50±127.13^▲        13.19

A工艺高       16        18.0         863.40±153.96^▲        13.61

B工艺低       16        9.0          860.51±137.13^▲        13.57

B工艺高       16        18.0         988.44±154.06^▲▲☆★15.58

1.2.4对环磷酰胺所致小鼠白细胞降低的影响

取小鼠，常规分组外加设环磷酰胺模型组，给药前先测外周血正常白细胞总数后，按组分别灌胃药物或生理盐水，连续7天。给药后第4天，除空白对照组外，其余均腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，再继续灌胃药物或生理盐水，注射环磷酰胺后第4、7天分别重复测查外周血白细胞总数。结果表明环磷酰胺可使小鼠白细胞(WBC)明显降低(与给环磷酰胺前及与空白对照组比较，均为P＜0.01＝，乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺对环磷酰胺所致小鼠白细胞总数低下，均有明显的提升作用；其中工艺A高剂量的作用最为明显，其作用明显优于普通工艺组。结果见表5。

表5乌鸡白凤浓缩丸等对环磷酰胺所致小刀WBC降低的作用(×10⁹)

组别           动物数    剂量    给环磷      给环磷酰            给环磷酰

                       g生药/kg  酰胺前      胺后4天             胺后7天

空白对照组       14      -       5.7±1.1    5.8±1.4            5.9±1.5

环磷酰胺模型组   14      -       5.7±2.1    2.9±0.4            3.5±0.4

普通工艺         16      18.0    5.8±1.1    2.3±0.4            4.8±0.6^※

A工艺低          14      9.0     5.7±2.0    3.6±0.3^※                  4.4±0.3^※

A工艺高          14      18.0    6.1±1.2    4.3±0.4^※※★☆          6.6±0.5^※※★☆

B工艺低          16      9.0     5.9±1.4    3.1±0.2            4.5±0.9^※

B工艺高          13      18.0    6.0±1.4    3.8±0.4^※                  5.2±0.5^※

与环磷酰胺模型组相比较，  ^※P＜0.05，^※※P＜0.01。下同。

1.2.5 对环磷酰胺所致小鼠胸腺系数、脾指数和肾上腺系数的影响：分组及给药方法等同1.2.4，动物在注射环磷酰胺第7天并取血后处死，取胸腺、脾脏和肾上腺称重，计算胸腺系数、脾指数和肾上腺系数，结果表明环磷酰胺可使小鼠的胸腺系数、脾指数和肾上腺上腺系数明显降低(与空白对照组比较，均为P＜0.01＝，乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺等对环磷酰胺所致小鼠胸腺系数、脾指数和肾上腺系数的降低等均无明显影响。结果见表6。

表6乌鸡白凤浓缩丸等对环磷酰胺所致小鼠胸腺系数、脾指数和肾上腺系数降低的影响(mg/g)

组别            动物      剂量      胸腺系数      脾指数       肾上腺系数

                 数    (g生药/kg)

空白对照组       14        -        2.97±0.54    3.32±0.85   0.45±0.12

环磷酰胺模型组   14        -        1.85±0.43    2.31±0.81   0.30±0.09

普通工艺         16       18.0      1.57±0.44    2.33±0.43   0.49±0.86

A工艺低          14       9.0       1.91±0.47    2.30±0.40   0.30±0.11

A工艺高          14       18.0      1.68±0.73    2.24±0.51   0.35±0.10

B工艺低          16       9.0       2.11±0.75    2.49±0.65   0.38±0.13

B工艺高          13       18.0      2.02±0.69    2.59±1.05   0.31±0.09

1.2.6对小鼠出血时间的影响

取小白鼠，给药同上，连续给药7天，末次给药后1小时，将小鼠断尾3mm，待血液自行流出开始计时，每隔30s用滤纸吸去血液1次，直至出血自然停止，计算各组出血时间。结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺等均能明显缩短正常小鼠出血时间，各制剂之间的作用无明显差异。具体结果见表7。

表7乌鸡白凤浓缩丸对小鼠出血时间的影响(min)

组别          动物数    剂量(g生药/kg)    出血时间    抑制率(％)

空白对照组     14            -            5.8±1.4

普通工艺       14          18.0           4.1±0.9^▲   29.3

工艺A低剂量    12          9.0            4.4±0.8^▲  24.1

工艺A高剂量    14          18.0           4.1±1.2^▲   29.3

工艺B低剂量    12          9.0            4.3±0.9^▲   25.8

工艺B高剂量    14          18.0           4.2±1.1^▲   27.6

1.2.7 对小鼠碳粒廓清能力的影响末次给药后30分钟，尾静脉注射印度墨汁0.1ml/10g体重，于注射后第2、8分钟用吸管(预先用肝素溶液湿润)，分别从眶后静脉丛取血20μl，溶于2ml 0.1％Na₂CO₃溶液中摇匀，置721型分光光度计在波长640nm下比色，测定光密度OD值，计算K和a，结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺等均能明显提高小鼠碳粒廓清能力(P＜0.05)，提示乌鸡白凤浓缩丸等对免疫功能有一定的增强作用；其中工艺A高剂量、工艺B高剂量的作用最为明显(P＜0.01)，且其作用明显优于普通工艺组。结果见表8。

            表8乌鸡白凤浓缩丸等对小鼠碳粒廓清功能影响

组别          剂量(g生药/kg)      K                    a

空白对照组        -          0.015±0.012          5.25±1.10

普通工艺         18.0        0.026±0.012^▲             6.38±1.10

A工艺低          9.0         0.033±0.016^▲             6.39±0.53

A工艺高          18.0        0.042±0.013^▲▲★☆     7.83±1.10

B工艺低          9.0         0.032±0.009^▲             6.83±1.19^▲

B工艺高          18.0        0.041±0.012^▲▲★☆     7.75±1.10^▲▲★☆

1.2.8对小鼠的镇痛作用观察

取小白鼠，分别灌胃给药，连续5天，每日1次，空白组和阳性对照组给同体积的生理盐水，第六天继续灌胃给药(此时间性对照组给度冷丁)，一小时后腹腔注射0.6％的冰醋本2ml/只，立即记时并注意观察小鼠的机体活动情况，观察并记录小鼠从给冰醋酸至产生扭体反应的时间和15分钟内小鼠产生扭体反应的次数，结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B及普通工艺组不能明显延长冰醋酸引起疼痛反应的潜伏期，但工艺A和工艺B组均能显著减少小鼠产生扭体反应的次数，其中工艺B高剂量的作用最为明显，其作用优于普通工艺组，具体结果见表9。 

              表9乌鸡白凤浓缩丸等对小鼠镇痛作用的观察

组别        动物数  剂量(g生药/kg)   潜伏期(min)       扭体次数

空白对照组    14         -           5.22±0.93       11.75±4.58

度冷丁        14        0.8          9.03±3.62^▲▲     2.60±2.03^{▲▲☆☆★★}

普通工艺      12        18.0         6.27±1.73       8.78±3.77

工艺A低剂量13    9.0    5.50±1.45    7.66±3.68^▲

工艺A高剂量12    18.0   4.83±2.17    7.45±3.03^▲

工艺B低剂量14    9.0    5.05±2.83    7.78±4.12^▲

工艺B高剂量13    18.0   5.25±1.36    5.78±2.63^▲▲☆★

1.2.9对大鼠离体子宫平滑肌的影响

调节电子水浴锅，保持恒温，麦氏浴槽内的台氏液为30ml，保持37±0.5℃；调整张力换能器，氧气发生器、BL-410生物信号采集处理系统等。

离体子宫平滑肌的制备：取250-280g的雌性大鼠，拉脱颈椎处死，立即剖开腹腔，取出子宫置入盛有冷的史密期液中，沿子宫壁分离脂肪，将子宫剪成2cm左右的段。

将子宫管两端穿线结扎，一端第于通气钩上，另一端系于肌张力换能器上，连接记录仪。通气调节速度为1-2个气泡/s(以不影响子宫平滑肌的自主舒缩运动为度)；观察正常子宫平滑肌运动，待舒缩稳定后，描记一段平滑肌的正常曲线，然后分别向浴槽中加入各种药液0.3ml观察子宫平滑肌的活动情况，描记舒缩曲线；每种药液做10个标本，电脑自动分析给药后15分钟的子宫活动频率，结果表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺等均能明显增加正常大鼠离体子宫平滑肌的活动上频率，但各制剂之间的作用无明显差异。具体结果见表10。

表10乌鸡白凤浓缩丸对大鼠离体子宫平滑肌的影响

组别         样本数    剂量(g生药/ml)    频率(次/min)

空白对照组     10           -            1.77±0.22

普通工艺       10         0.009          3.22±0.27^▲

工艺A低剂量    10         0.0045         2.98±0.40^▲

工艺A高剂量    10         0.009          3.21±0.55^▲

工艺B低剂量    10         0.0045         3.14±0.45^▲

工艺B高剂量    10         0.009          3.36±0.58^▲

乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B和普通工艺等药理药效试验研究的结果表明，在生药给药量相同的情况下，使用工艺A、工艺B除去药材中大量的杂质，大大减少服用剂量，使其减少到原有剂量的1/4后，所制得的浓缩丸剂与普通工艺一样，仍具有明显的补血止血、抗应激、镇痛和增强免疫功能等作用，有一定的促进子宫收缩的能力，而且与普通工艺制备的乌鸡白凤浓缩丸相比，工艺A在抗应激的延长小鼠游泳时间、提升环磷酰胺所致小鼠WBC降低和增强免疫功能等方面的作用更为明显；工艺B在抗应激的延长小鼠游泳时间和耐缺氧、以及镇痛作用、增强免疫功能等方面的作用更为明显。

此外，我们还对乌鸡白凤浓缩丸做了急性毒性试验(MTD法)研究。在小鼠灌胃给药未测出LD50的情况下，24小时内灌胃三次，测得小鼠灌胃A、B两种工艺浓缩丸最大给药量为420g/kg，相当于拟临床人用量的1200倍，为普通工艺制备的乌鸡白凤浓缩丸的4倍。

此试验表明A、B两种工艺浓缩丸能显著降低药物的毒副作用。

临床研究：

乌鸡白凤浓缩丸主要由乌鸡、人参、山药、当归、熟地等药物组成，具有补气养血、调经止带之功，主要适用于妇女气血亏损、阴精不足而致妇科诸症，并且近年来涌现了一些新用法，如内科用于血小板减少症、再生障碍性贫血、男性乳房增生性疾病、神经性耳鸣等症，男性科用于精液不液化、阳痿等，此外还在皮肤科、眼科有所应用。为观察其疗效，我们对工艺A、B乌鸡白凤浓缩丸进行以下临床研究。

一、妇科疾病

组别分型  例数  显效   例 好转例 无效例   总有效率工艺A组原发性痛经    58    27    18    13    77.60％工艺B组原发性痛经    62    26    18    18    71.0％普通工艺组原发性痛经    50    20    11    19    62.0％工艺A组续发性痛经    51    27    14    10    80.4％工艺B组续发性痛经    50    28    15    7    86.0％普通工艺组续发性痛经    61    33    14    14    77.0％工艺A组功能性子宫出血    68    29    34    5    92.6％工艺B组功能性子宫出血    75    35    31    9    88.0％普通工艺组功能性子宫出血    54    25    19    10    81.5％工艺A组虚证带下病    60    52    4    4    93.3％工艺B组虚证带下病    40    30    6    4    90.0％普通工艺组虚证带下病    53    31    16    6    88.7％

显效：症状消失，体征检查均  恢复正常或减轻

好转：症状及体征均减轻。

无效：治疗后症状，体征，检查均改善。

二、男性精液不液化

组别   例数 治愈例 显效例 好转例 无效例   总有效率工艺A组工艺B组普通工艺组    54    44    60    24    21    25    15    14    17    12    6    7   3   3   11    94.4％    93.2％    88.7％

治愈：配偶怀孕。

显效：配偶虽末怀孕，但精液常规检查连续2次均出现液化时间30min内，精液、前列腺液有关指标均正常。

有效：治疗后精液液化时间和粘稠度较治疗前明显缩短，精液、前列腺液有关指标明显好转。

无效：治疗前后以上指标无变化。

三、血小板减少症

组别分型  例数 治愈例 有效例 无效例 总有效率工艺A组原发性血小板减少性紫癜  107    85    22    0  100.0％工艺B组原发性血小板减少性紫癜  112    82    30    0  100.0％普通工艺组原发性血小板减少性紫癜  94    68    26    0  100.0％

治愈：临床症状消失，BPC计数，BT CT\ BT、CT、毛细血管脆性试验恢复正常。随访无复发。

有效：临床症状消失，2年内复发，复发后每次用药仍有效。

无效：临床指标无变化。

通过对以上的临床研究表明乌鸡白凤浓缩丸工艺A、工艺B、普通工艺对妇科、男性病等疾病都有明显的疗效，而工艺而工艺A临床总有效率比工艺B较高。

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明。

实施例1：

1、配方

参照《中华人民共和国药典》411页(2000版)“乌鸡白凤丸”所规定的药材及用量比例，处方定为乌鸡(去毛爪肠)2560g、人参512g、鹿角胶512g、牡蛎(煅)192g、白芍512g、当归576g、甘草128g、黄芪128g、鳖甲(制)256g、香附(醋制)512g、天冬256g、桑螵蛸192g、熟地黄1024g、地黄1024g、川芎256g、鹿角霜192g、银柴胡104g、芡实(炒)256g、山药512g、丹参512g、制得1000g浓缩丸成品。

1、制备工艺

含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸汽蒸馏提取挥发油后，与其他植物药材(人参、黄芪、白芍、天冬、甘草、地黄、熟地黄、银柴胡、丹参)一起分别用水为溶媒提取水溶性有效成分，提取液经纳滤膜浓缩(压力为15-20kg)得浓缩液(相对密度1.0-1.1)，再经冷冻干燥约25-36小时得干粉备用；

动物药材(乌鸡、鹿角胶、牡蛎、鳖甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黄酒(约1∶1)炮制蒸干约24小时，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥32-36小时，含水量控制在3％以下，再经流能磨超微粉碎得微粉(粒度为3-20μm)。将所提挥发油与4％阿拉伯胶溶液(体积比为1∶25)倒入组织捣碎机中，高速搅拌1分钟制得挥发油乳浊液，将4％明胶溶液(与阿拉伯胶等量体积)与乳浊液混合，搅拌10分钟，置37℃水浴中，不断搅拌，滴加10％醋酸溶液适量。调PH值为4，加入酸化蒸馏水(PH值4.5)200毫升稀释，不断搅拌降温至25℃，再置冰浴中降温至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氢氧化钠调PH值为8-9，继续搅拌1小时。静置，倾去上清液，微囊用蒸馏水洗至无甲醛味，低温干燥即得挥发油微囊粉。将上述微粉、干粉、挥发油微囊粉混合均匀，用压丸机压制成丸，干燥、打光，即得浓缩丸成品。

实施例2：

1、配方

与实施例1相同

2、制备工艺

含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸气蒸馏提取挥发油后，与其他植物药材(人参、黄芪、白芍、天冬、甘草、地黄、熟地黄、银柴胡、丹参)一起分别用水为溶媒提取水溶性有效成分，提取液经纳滤膜浓缩(压力为15-20kg)得浓缩液(相对密度1.0-1.1)，再经冷冻干燥约25-36小时得干粉备用；动物药材(乌鸡、鹿角胶、牡蛎、鳖甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黄酒(约1∶1)，密闭，蒸煮约24小时，取蒸煮稠膏，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥32-36小时，含水量控制在3％以下，再经流能磨超微粉碎得微粉(粒度为3-20μm)，将以上微粉、干粉混合均匀，喷入挥发油密闭约4小时，用制丸机制丸，干燥、打光即得浓缩丸成品。

实施例3：

1、配方

与实施例1相同

2、制备工艺

含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸气蒸馏提取挥发油后，与其他植物药材(人参、黄芪、白芍、天冬、甘草、地黄、熟地黄、银柴胡、丹参)一起用95％乙醇为溶媒提取酯溶性有效成分，提取液经纳滤膜浓缩(压力为15-20kg)得浓缩液(相对密度1.0-1.1)，再经冷冻干燥约25-36小时得干粉备用；

动物药材(乌鸡、鹿角胶、牡蛎、鳖甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黄酒(约1∶1)，密闭，蒸煮约24小时，取蒸煮稠膏，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥32-36小时，含水量控制在3％以下，再经流能磨超微粉碎得微粉(粒度为3-20μm)，将以上微粉、干粉混合均匀，喷入挥发油密闭约4小时，用制丸机制丸，干燥、打光即得浓缩丸成品。

实施例4：

1、配方

与实施例1相同

2、制备工艺

含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸气蒸馏提取挥发油后，与其他植物药材(人参、黄芪、白芍、天冬、甘草、地黄、熟地黄、银柴胡、丹参)一起用乙醇为溶媒提取酯溶性有效成分，提取液经纳滤膜浓缩(压力为15-20kg)得浓缩液(相对密度1.0-1.1)，再经冷冻干燥约25-36小时得干粉备用；

动物药材(乌鸡、鹿角胶、牡蛎、鳖甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黄酒(约1∶1)，密闭，蒸煮约24小时，取蒸煮稠膏，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥32-36小时，含水量控制在3％以下，再经流能磨超微粉碎得微粉(粒度为3-20μm)，将以上微粉、干粉混合均匀，喷入挥发油密闭约4小时，用制丸机制丸，干燥、打光即得浓缩丸成品。

实施例5：

1、配方

参照《中华人民共和国药典》411页(2000版)“乌鸡白凤丸”所规定的药材及用量比例，处方定为乌鸡(去毛爪肠)1920gg、人参384g、鹿角胶384g、牡蛎(煅)144g、白芍384g、当归432g、甘草96g、黄芪96g、鳖甲(制)192g、香附(醋制)384g、天冬192g、桑螵蛸144g、熟地黄768g、地黄768g、川芎192g、鹿角霜144g、银柴胡78g、芡实(炒)192g、山药384g、丹参384g，制得1000g浓缩丸成品。

2、制备工艺

含挥发油的植物药材(当归、香附、川芎)经水蒸汽蒸馏提取挥发油后，与其他植物药材(人参、黄芪、白芍、天冬、甘草、地黄、熟地黄、银柴胡、丹参)一起分别用水为溶媒提取水溶性有效成分，提取液经纳滤膜浓缩(压力为15-20kg)得浓缩液(相对密度1.0-1.1)，再经冷冻干燥约25-36小时得干粉备用；

动物药材(乌鸡、鹿角胶、牡蛎、鳖甲、桑螵蛸、鹿角霜)加黄酒(约1∶1)炮制蒸干约24小时，与山药、芡实粗粉混合，经冷冻干燥32-36小时，含水量控制在3％以下，再经流能磨超微粉碎得微粉(粒度为3-20μm)。将所提挥发油与4％阿拉伯胶溶液(体积比为1∶25)倒入组织捣碎机中，高速搅拌1分钟制得挥发油乳浊液，将4％明胶溶液(与阿拉伯胶等量体积)与乳浊液混合，搅拌10分钟，置37℃水浴中，不断搅拌，滴加10％醋酸溶液适量。调PH值为4，加入酸化蒸馏水(PH值4.5)200毫升稀释，不断搅拌降温至25℃，再置冰浴中降温至10℃以下，加37％甲醛，并用20％氢氧化钠调PH值为8-9，继续搅拌1小时。静置，倾去上清液，微囊用蒸馏水洗至无甲醛味，低温干燥即得挥发油微囊粉。将上述微粉、干粉、挥发油微囊粉混合均匀，用压丸机压制成丸，干燥、打光，即得浓缩丸成品。