新型光学异构体分离用分离剂及其制备方法

摘要

一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：该方法包括：用溶剂把光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物、负载在载体上的工序；除去溶剂的工序；洗涤除去分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物工序。

说明书

技术领域

本发明涉及新型光学异构体分离用分离剂及其制备方法，以及采用它的光学异构体分离方法，特别是涉及采用色谱法的光学异构体分离方法，提供一种在医药品、食品、农药、香料等分析中，对手性化合物具有高分离系数的进行光学分离的光学异构体分离技术。

背景技术

许多有机化合物的物理、化学性质完全相同，但存在生理活性不同的光学异构体。这是由于构成生物体的蛋白质及糖类本身几乎在所有情况下均是单独的光学异构体，因此，对其他光学异构体的作用方式不同，从而呈现生理活性差异。特别是，医药品的光学异构体之间往往发现其药效、毒性等方面的显著差别，所以，在医药品领域，该问题成为一个大问题。即使在厚生省的医药品制备指南中也记载了“该药物是外消旋化合物时，希望对各种异构体进行吸收、分布、代谢、排泄动态进行探讨”。

先前介绍的光学异构体，由于其物理、化学性质，例如沸点、熔点、溶解度等物性完全相同，采用通常的分离手段不能进行分析。这里对种类众多的光学异构体采用简便、精确的分析技术进行深入的研究。作为适应这些要求的分析方法，采用高效液相色谱法(HPLC)的光学分离方法，特别是采用HPLC用光学异构体分离柱的光学分离方法已取得进展。这里所说的光学异构体分离柱，可以采用不对称识别剂本身或不对称识别剂负载在适当的载体上的手性固定相。

作为手性固定相的例子，已开发出光学活性聚甲基丙烯酸三苯基甲酯(参照特开昭57-150432号公报)、纤维素、直链淀粉衍生物(参照特开昭60-40952号公报、特开昭60-108751号公报、特开昭60-142930号公报、特开昭63-178101号公报)、作为蛋白质的卵类粘蛋白(特开昭63-307829号公报)等。在这几种HPLC用手性固定相中，已知纤维素或直链淀粉衍生物负载在硅胶上的光学异构体分离柱对于种类极广泛的化合物来说，具有高的不对称识别能力(例如，冈本氏：Angew.Chem.Int.Ed.，1998，37，1020)。

在以进行光学纯度测定等分析为目的时，希望通过种类尽可能少的光学异构体分离柱，分离尽可能多的非特定种类的光学异构体化合物，所以，上述纤维素或直链淀粉衍生物负载在硅胶上的光学异构体分离柱作为实用的分离媒介而被接受。

近几年来，对HPLC用手性固定相和模拟移动床法组合成的工业规模光学活性体液相色谱法制备性分离进行了探讨(Phram Tech Japan，12，43(1996))，在这里不仅进行了分析，而且对制备性分离，即作为生产手段的色谱分离加以关注。

在该目的中，为了不仅简单谋求进行基线分离，而且谋求使色谱制备分离生产性提高，并降低生产成本，对限定的特定制备分离目的的目标化合物要进行更好的分离，即要求开发出具有极大分离系数α值的手性固定相。

另一方面，作为特异性识别特定目标化合物办法的分子铸型法已知已经问世。分子铸型的一般制作方法中，把目标化合物(客体)和进行非共价键型相互作用的单体在试管中用交联剂等使其反应而进行聚合，制成高分子化合物(主体)的方法是最一般的方法。另外，把客体和聚合物进行混合，在相互作用状态下使聚合物发生交联反应制得主体的方法是已知的方法(例如，G.Wulff等，Angew.Chem.，1972，84，364)。

已知采用这种分子铸型法得到的色谱用填充剂由于对客体具有高识别能力，一般对客体的吸附能力相当强，相应的洗脱峰宽广而钝化，无法满足色谱效率的要求。另外，采用分子铸型法得到的高分子化合物，形成的铸型受到破坏，而不能进行溶解操作，所以，通过粉碎等的处理，可以制成色谱用填充剂，但是，分级等操作繁琐，并且，粒径不均匀，因而使色谱效率降低。由于上述理由，采用分子铸型法的色谱用填充剂至今尚未实用。

本发明的目的是提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，该方法可以获得对分离对象化合物的分离性能大幅提高的光学异构体分离用分离剂。

本发明的另一目的是提供一种光学异构体分离用分离剂，其对分离对象化合物的分离性能大幅提高，同时，对原来不能分离的化合物也能进行分离。

本发明的又一目的是提供一种采用上述光学异构体分离用分离剂的色谱用固定相或连续式液相制备色谱用固定相，以及采用上述光学异构体分离用分离剂的光学异构体分离方法。

发明内容

本发明人发现，提高光学异构体分离用分离剂分离能力的方法是把光学异构体分离用分离剂加以改良，代替现在通用的选择使用展开剂的方法，具体是使用分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物来改良光学异构体分离用分离剂，由此可以大幅提高分离能力。

即，本发明提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：在把光学活性高分子化合物负载在载体上时，添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物。

本发明还提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：该方法包括：把光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物用溶剂负载在载体上的工序；除去溶剂的工序。

本发明还提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：该方法包括：把光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物用溶剂负载在载体上的工序；除去溶剂的工序；洗涤除去分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的工序。

本发明还提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：该方法包括：把光学活性高分子化合物用溶剂负载在载体上的工序；在上述载体上负载分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物工序；除去溶剂的工序。

本发明还提供一种新型光学异构体分离用分离剂的制备方法，其特征在于：该方法包括：把光学活性高分子化合物用溶剂负载在载体上的工序；在上述载体上负载分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的工序；除去溶剂的工序；洗涤除去分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的工序。

本发明提供一种光学异构体分离用分离剂，其中，在载体上负载光学活性高分子化合物，然后除去作为制备原料添加的、负载的分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物。

本发明提供一种采用上述光学异构体分离用分离剂的色谱用固定相或采用上述光学异构体分离用分离剂的连续式液相制备色谱用固定相、采用上述光学异构体分离用分离剂的光学异构体分离方法。

本发明的最佳实施方式

下面对本发明的新型光学异构体分离用分离剂的制备方法加以说明。

本发明的制备方法包括在载体上负载光学活性高分子化合物时，添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的工序，包括上述工序的制备方法可以举出具有下列工序的制备方法：

首先，在最初的工序中，用溶剂把具有光学活性的高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物负载在载体上。在本发明中，把具有光学活性的高分子化合物直接负载在载体上，但分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物不直接负载在载体上，而是通过物理或化学方法结合在光学活性高分子化合物上来间接负载在载体上。

在该工序中，适用的处理方法是：

(1)把具有光学活性的高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物制成溶剂溶液后，把载体浸渍在该溶液中或把该溶液涂布在载体上等，由此使该溶液和载体接触加以负载的方法；

(2)把具有光学活性的高分子化合物制成溶剂溶液后，把载体浸渍在该溶液中，由此使该溶液和载体接触，然后在该溶液中溶解分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物，或添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的溶剂溶液，由此接触载体加以负载的方法。

本发明中的所谓“负载”是指光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物被固定在载体上。该固定是光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物与载体之间通过物理吸附和/或化学结合进行的固定。

物理吸附，系指在载体表面和/或在载体具有的细孔内部进行的吸附。

化学结合包括：载体和光学活性高分子化合物的结合；物理吸附在载体上的部分光学活性高分子化合物和其余的光学活性高分子化合物及分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的结合；通过与交联剂的反应、与自由基发生剂的反应或光照射(γ射线等放射线照射，微波等电磁波照射)形成的载体与光学活性高分子化合物的结合等。

在载体与光学活性高分子化合物进行化学结合时，希望在后一工序，即，除去分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的工序之前或之后进行化学结合。

本发明中所用的光学活性高分子化合物可以列举：无光学活性取代基的(甲基)丙烯酸酯或(甲基)丙烯酰胺、有光学活性取代基的(甲基)丙烯酸酯或(甲基)丙烯酰胺、苯乙烯、乙炔等的聚合物或共聚物、多糖及其衍生物、肽、蛋白质等。

其中，优选对分离对象化合物具有不对称识别能力的高分子化合物，特别是已知具有不对称识别能力的(甲基)丙烯酸酯或(甲基)丙烯酰胺等的聚合物或共聚物、多糖及其衍生物、蛋白质等是优选的，更优选侧链具有光学活性取代基的(甲基)丙烯酰胺或(甲基)丙烯酸酯等的聚合物或共聚物、多糖及其衍生物，特别优选多糖衍生物。

本申请书中所谓(甲基)丙烯酸酯系指丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯，所谓(甲基)丙烯酰胺系指丙烯酰胺或甲基丙烯酰胺。

多糖，不管是合成多糖、天然多糖及天然物变成的多糖的任何一种，只要具有光学活性即可，但优选结合方式规则性高者。

上述多糖可以列举：β-1，4-葡聚糖(纤维素)、α-1，4-葡聚糖(直链淀粉、支链淀粉)、α-1，6-葡聚糖(右旋糖苷)、β-1，6-葡聚糖(ブスツラン)、β-1，3-葡聚糖(例如，カ一ドラン、裂裥菌素等)、α-1，3-葡聚糖、β-1，2-葡聚糖(冠瘿(Crown Gall)多糖)、β-1，4-半乳聚糖、β-1，4-甘露聚糖、α-1，6-甘露聚糖、β-1，2-果聚糖(旋复花粉)、β-2，6-果聚糖(左聚糖)、β-1，4-木聚糖、β-1，3-木聚糖、β-1，4-脱乙酰壳多糖、α-1，4-N-乙酰基脱乙酰壳多糖(几丁质)、支链淀粉、琼脂糖、藻酸等，另外，还包括含直链淀粉的淀粉。

其中，从易得到高纯度多糖的角度考虑，优选纤维素、直链淀粉、β-1，4-木聚糖、β-1，4-脱乙酰壳多糖、几丁质、β-1，4-甘露蜜、旋复花粉、カ一ドラン等，特别优选纤维素、直链淀粉。

多糖的数均聚合度(1个分子中所含的吡喃糖或呋喃糖环的平均数)在5以上，优选10以上，没有特定的上限，但从易于处理方面考虑，优选1000以下。

所谓多糖衍生物，系指上述多糖中的部分或全部羟基和具有能与羟基反应的官能团的化合物，通过酯键、尿烷键或醚键等结合的化合物。

在这里，作为具有能与羟基反应的官能团的化合物，只要是取代或未取代的芳香族、脂肪族、脂环式羧酸，酰氯化物、酸酐、酸酯等羧酸衍生物，取代或未取代的芳香族、脂肪族、脂环式异氰酸衍生物，醇或其他具有离去基团的化合物即可，而不管是否具有光学活性基团。

多糖衍生物优选多糖的酯衍生物、氨基甲酸酯衍生物，特别优选每个葡萄糖单元有0.1个以上酯键或尿烷键的多糖酯衍生物或氨基甲酸酯衍生物。

光学活性高分子化合物的用量如下：该化合物的负载量优选达到载体质量的1～100质量％的量，更优选达到5～60质量％的量，进一步优选达到10～40质量％的量。

本发明中所用的分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物可以举出下列(I)和(II)的化合物。

(I)作为光学异构体分离用分离剂时的分离对象化合物或其类似结构化合物。这里所谓的“类似结构化合物”是指下述化合物：该化合物具有与分离对象化合物的官能团类似的官能团，亚甲基数量可以增减，取代基可以增减，官能团位置不同，官能团种类不同，因此该化合物具有分子大小例如大1～5个左右碳原子或小1～5个左右碳原子的结构。例如，对1-苯基-2-丙醇，1-苯基乙醇、2-苯基-2-丙醇、1-苯基-2-丁醇、2-苯基-2-丁醇、3-苯基-2-丁醇、1-取代苯基-2-丙醇、1-(1-萘基)-2-丙醇、1-(2-吡啶基)-2-丙醇、1-环己基-2-丙醇等为类似结构化合物；对1-(1-萘基)-乙醇，1-(9-蒽基)-乙醇等为类似结构化合物。

另外，所谓“类似结构化合物”包括不对称碳原子周围环境类似的化合物。

(II)作为光学异构体分离用分离剂时不是分离对象化合物或其类似结构化合物的化合物，优选分子量为40～1000、更优选分子量为60～600的具有环状结构的化合物。

(I)和(II)的化合物是具有极性官能团的化合物，或具有苯环等涉及π电子相互作用的官能团的化合物，所述极性官能团为羟基、羰基、氨基、羧基等杂原子基团等。优选外消旋体(±)、光学活性体(+)或(-)。

(I)的化合物分子量为40以上，优选60～1000，更优选100～500。

相对于负载于载体上的光学活性高分子化合物的质量，分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物用量优选达到0.01～1000质量％的量，更优选达到0.01～200质量％的量，进一步优选达到0.01～30质量％的量。

本发明所用的载体可以列举多孔性有机载体或多孔无机载体，优选多孔性无机载体。作为多孔性有机载体，合适的物质可以列举聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯等高分子物质；作为多孔性无机载体，合适的物质可以列举二氧化硅、氧化铝、氧化镁、玻璃、高岭土、氧化钛、硅酸盐、羟磷灰石等。

特别优选的载体是硅胶，硅胶的粒径为0.1μm～10mm，优选1μm～300μm，更优选1～100μm，平均孔径为10～100μm，优选50～50000。为了排除残留硅烷醇的影响，优选硅胶表面进行表面处理，但即使完全不进行表面处理也无妨。

本发明中使用的溶剂，只要能溶解光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物即可，采用通常使用的有机溶剂也可。

所述溶剂可以列举：丙酮、甲乙酮、苯乙酮等酮类溶剂；乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、丙酸甲酯、乙酸苯酯等酯类溶剂；四氢呋喃、1，4-二噁烷、乙醚、叔丁基甲醚、苯甲醚等醚类溶剂；N，N-二甲基甲酰胺等酰胺类溶剂；N，N-二甲基咪唑啉酮等酰亚胺类溶剂；氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、1，2-二氯乙烷、五氟乙醇等卤类溶剂；戊烷、石油醚、己烷、庚烷、辛烷、苯、甲苯、二甲苯、均三甲苯等烃类溶剂；甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等醇类溶剂；醋酸、三氟醋酸、甲酸等酸类溶剂；苯酚、邻苯二酚等酚类溶剂；二乙胺、三乙胺、吡啶、苯胺等胺类溶剂。

采用这些溶剂配制光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的溶液时，对溶液浓度未作特别限定，在考虑和载体的接触负载处理的容易程度和后续步骤中溶剂的除去处理的基础上决定。

在下一工序中，除去使光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物负载在载体上的溶剂。

在该工序中，通过除去溶剂的处理，依然维持把光学活性高分子化合物直接负载在载体上，而把分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物间接负载在载体上的状态。

在下一工序中，把光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物在负载于载体上的状态下进行洗涤，除去分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物。

洗涤方法可以采用例如下述方法：用乙腈、乙醇、己烷、或己烷和乙醇的混合溶剂等，在0℃～回流温度之间的任何一个温度下进行回流。

采用回流法时，溶剂的用量为负载光学活性高分子化合物和分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物的载体质量的3～50倍左右。

在该工序的洗涤处理后，在最终作为光学异构体分离用分离剂时，分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物残留量在所述分离剂中优选为10质量％或以下，更优选2质量％或以下，进一步优选0.5质量％或以下。如在上述数值以下，作为杂质也可以含有分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物。

另外，在该工序的洗涤处理后，分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物也基本上被除去。

采用本发明的制备方法得到的光学异构体分离用分离剂是下述物质：把光学活性高分子化合物负载在载体上，然后除去作为制备原料添加的、被负载的分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物。

采用本发明的制备方法得到的光学异构体分离用分离剂中，分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物是上述(I)或(II)的化合物，在采用所述光学异构体分离用分离剂分离光学异构体时，希望由通过下式求出的分离系数(α)表示的分离性能可用式(A)或(B)表示：

分离系数(α)＝(较强保留的对映体的保留系数)/(较弱保留的对映体的保留系数)

保留系数(k’)＝[(对映体的保留时间)-(死时间)]/(死时间)

[此时，死时间是把三叔丁基苯的洗脱时间作为死时间]。

(A)α₁/α₂≥1.05(式中，α₂＝1.00)

(B)α₁/α₂≥1.05(式中，α₂＞1.00)

α₁：在制备工序中添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物而得到的光学异构体分离用分离剂的分离系数。

α₂：在制备工序中未添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物而得到的光学异构体分离用分离剂的分离系数，α₂＝1.00系指完全未被分离，而α₂＞1.00系指被分离。

式(A)表明α₂＝1.00，即，采用在制备工序中未添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物而得到的光学异构体分离用分离剂时，完全未分离的化合物的分离性能，在采用本发明的光学异构体分离用分离剂时提高5％以上。

式(B)表明α₂＞1.00，即，采用在制备工序未添加分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物而得到的光学异构体分离用分离剂时的分离性能，通过本发明的光学异构体分离用分离剂提高5％以上。在本发明中，通过式(B)定义的分离性能优选提高10％以上，更优选15％以上，进一步优选20％以上。

本发明的光学异构体分离用分离剂可用作气相色谱、液相色谱、薄层色谱、超临界色谱、毛细管电泳等色谱用固定相，但是，特别优选用作液相色谱用手性固定相。另外，也适于用作以模拟移动床式为代表的连续式液相制备色谱用固定相。采用本发明的分离剂可高效地分离光学异构体。

工业适用性

按照本发明，可以大幅提高光学异构体分离用分离剂的分离性能，特别适于用作色谱用固定相、连续式液相制备色谱用固定相。

实施例

通过实施例详细说明本发明，但本发明不限于这些实施例。

下文中化合物的表示是基于选自下列化合物1～16中的任何一种化合物，对于分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物及分离对象化合物，把空间构型(S，R)、旋光性(D，L)、外消旋体的表示和各化合物的序号加以组合，例如，化合物1具有S构型时，用S-1表示，而为外消旋体时用外消旋体-1表示。

化合物1                  化合物2                              化合物3              化合物4

化合物5                  化合物6                              化合物7              化合物8

化合物9                  化合物10                             化合物11             化合物12

化合物13                 化合物14                             化合物15            化合物16

实施例1

①载体(硅胶)的表面处理

通过公知的方法使多孔性硅胶(粒径7μm，微孔1000)与3-氨基丙基三乙氧基硅烷反应，进行氨基丙基硅烷处理。

②光学活性高分子化合物的合成

将处于绝对干燥状态的氯化锂15.0g溶于N，N-二甲基乙酰胺(DMAc)150ml中，配制成DMAc/LiCl溶液。

在氮气氛围中，往纤维素10.0g中添加上述DMAc/LiCl溶液150ml及吡啶150ml后，将所得混合物浸渍在100℃的油浴中，搅拌24小时，然后加入4-甲基苯甲酰氯50g，于100℃反应16小时。

把反应液滴加到2L甲醇中，使之再沉淀，通过离心分离得到下式表示的目的纤维素三(4-甲基苯甲酸酯)。

③光学异构体分离用分离剂的制备

将上述②中得到的纤维素三(4-甲基苯甲酸酯)0.8g和化合物(S-1)506.0mg[纤维素三(4-甲基苯甲酸酯)的葡萄糖单元的2倍摩尔当量]溶于二氯甲烷中，制成涂布漆(ド一プ)，把该涂布漆涂布在上述①中得到的硅胶3.2g上。涂布后，蒸去二氯甲烷，得到目的光学异构体分离用分离剂。往该分离剂中添加正己烷/2-丙醇的混合溶剂，充分搅拌后进行过滤，浓缩滤液，回收得到(S-1)495.6mg。

④HPLC用填充柱的制作

往长25cm、内径0.46cm的不锈钢柱中，通过采用正己烷/2-丙醇的混合溶剂的匀浆填充法填充上述③中得到的光学异构体分离用分离剂，得到光学异构体分离用分离柱。

光学异构体分离用分离剂中的S-1残留量：506.0-495.6＝10.4mg。

S-1的洗脱比率：495.6/506.0×100＝97.9％

光学异构体用分离柱的分离剂中的S-1残留量：

(506.0-495.6)/4000×100＝0.26％

实施例2

①载体(硅胶)的表面处理

与实施例1同法操作，得到进行过氨基丙基硅烷处理的硅胶。

②光学活性高分子化合物的合成

在氮气氛围中，往吡啶300ml中添加直链淀粉10.0g后，将所得混合物浸渍在100℃油浴中，往其中添加(S)-苯基乙基异氰酸酯50g，于100℃反应48小时。把反应液滴至2L甲醇中，使之再沉淀，通过离心分离得到下式表示的目的直链淀粉三[(S)-苯基乙基氨基甲酸酯]。

③光学异构体分离用分离剂的制备

把上述②中得到的直链淀粉三[(S)-苯基乙基氨基甲酸酯]0.8g和(S-1)435.65mg(直链淀粉三[(S)-苯基乙基氨基甲酸酯]的葡萄糖单元的2倍摩尔当量)溶于THF，配制成涂布漆，把该涂布漆涂布在上述①中得到的硅胶3.2g上。涂布后，蒸去THF，得到目的光学异构体分离用分离剂。往该分离剂中加入正己烷/2-丙醇的混合溶剂，充分搅拌后进行过滤，浓缩滤液，回收得到(S-1)416.0mg。

④HPLC用填充柱的制作

与实施例1同法操作，得到光学异构体用分离柱。

光学异构体分离用分离剂中的S-1残留量：19.6mg。

S-1的洗脱比率：95.5％

光学异构体用分离柱的分离剂中的S-1残留量：0.49％。

实施例3

①载体(硅胶)的表面处理

与实施例1同法操作，得到进行过氨基丙基硅烷处理的硅胶。

②光学活性高分子化合物的合成

与实施例2同法操作，得到以下式表示的目的纤维素三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。

③光学异构体分离用分离剂的制备

把上述②中得到的纤维素三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)0.8g和(S-1)435.9mg[纤维素三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的葡萄糖单元的2倍摩尔当量]溶于丙酮，配制成涂布漆，把该涂布漆涂布在上述①中得到的硅胶3.2g上。涂布后，蒸去丙酮，得到目的光学异构体分离用分离剂。往该分离剂中加入正己烷/2-丙醇的混合溶剂，充分搅拌后进行过滤，浓缩滤液，回收得到(S-1)420.6mg。

④HPLC用填充柱的制作

与实施例1同法操作，得到光学异构体用分离柱。

光学异构体分离用分离剂中的S-1残留量：15.3mg。

S-1的洗脱比率：96.5％

光学异构体用分离柱的分离剂中的S-1残留量：0.38％。

实施例4

①载体(硅胶)的表面处理

与实施例1同法操作，得到进行过氨基丙基硅烷处理的硅胶。

②光学活性高分子化合物的合成

与实施例2同法操作，得到以下式表示的目的直链淀粉三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。

③光学异构体分离用分离剂的制备

把上述②中得到的直链淀粉三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)0.8g和(S-1)436.3mg溶于乙酸乙酯配制成涂布漆，把该涂布漆涂布在上述①中得到的硅胶3.2g上。涂布后，蒸去乙酸乙酯，得到目的光学异构体分离用分离剂。往该分离剂中加入正己烷/2-丙醇的混合溶剂，充分搅拌后进行过滤，浓缩滤液，回收得到(S-1)427.6mg。

④HPLC用填充柱的制作

与实施例1同法操作，得到光学异构体用分离柱。

光学异构体分离用分离剂中的S-1残留量：8.7mg。

S-1的洗脱比率：98％

光学异构体用分离柱的分离剂中的S-1残留量：0.22％。

实施例5～24

用表1所示的分子量为1000或1000以下的具有不对称结构的化合物，分别按照与实施例1～3同样的制备方法，得到目的光学异构体分离用分离剂后，制得光学异构体分离用分离柱。

                             表1

  实施例    制备方法    (选自实施例1-3) 分子量为1000或1000以下的具 有不对称结构的化合物的种类    5    2    S-3    6    2    D-6    7    2    L-6    8    2    S-7    9    2    R-8    10    2    S-8    11    2    S-9    12    3    L-6    13    2    S-11    14    2    R-9    15    1    R-3    16    1    S-3    17    1    D-6    18    1    R-8    19    1    外消旋体-13    20    1    外消旋体-5    21    1    外消旋体-2    22    1    外消旋体-14    23    1    外消旋体-15    24    1    外消旋体-16

比较例1

与实施例1同法操作，得到目的光学异构体分离用分离剂后，制得光学异构体分离用分离柱，但不添加(S-1)。

比较例2

与实施例2同法操作，得到目的光学异构体分离用分离剂后，制得光学异构体分离用分离柱，但不添加(S-1)。

比较例3

与实施例3同法操作，得到目的光学异构体分离用分离剂后，制得光学异构体分离用分离柱，但不添加(S-1)。

比较例4

与实施例4同法操作，得到目的光学异构体分离用分离剂后，制得光学异构体分离用分离柱，但不添加(S-1)。

应用例1～45

采用实施例1～24、比较例1～4中得到的光学异构体用分离柱，通过液相色谱法(日本分光社制备的液相色谱装置)测定α值。测定条件：流动相：正己烷/2-丙醇＝90/10，流速：1.0ml/min，温度：25℃，检测波长：254nm。结果示于表2～4。

表中的判定为相同、类似或非类似，详细记于表后。表中α值的上升率(％)从式α₁-α₂/α₁×100求出。α＝1.00为完全不进行不对称识别，仅观察1个峰的状态。

                                          表2

   应   用   例  分子量为1000或1000  以下  的具有不对称结  构的化合物种类    分离对象    化合物   分离柱的种类   和α值   分离柱的种类   和α值  α值  的上  升率  (％)    种类 判定 实施例 α₁  比较例  α₂    1    S-1外消旋体-1相同    1 1.11    1  1.00    11    2    S-1外消旋体-1相同    2 4.24    2  3.73    14    3    S-1外消旋体-1相同    3 1.07    3  1.00    7    4    S-1外消旋体-2类似    4 1.05    4  1.00    5    5    S-3外消旋体-4类似    5 2.76    2  2.32    19    6    S-3外消旋体-5类似    5 3.51    2  2.45    43    7    D-6外消旋体-5类似    6 3.13    2  2.45    28    8    L-6外消旋体-4类似    7 2.78    2  2.32    20    9    L-6外消旋体-5类似    7 3.78    2  2.45    54    10    S-7外消旋体-2类似    8 1.17    2  1.00    17    11    S-7外消旋体-5类似    8 3.06    2  2.45    25    12    R-8外消旋体-2类似    9 1.29    2  1.00    29    13    R-8外消旋体-4类似    9 2.68    2  2.32    16    14    S-8外消旋体-2类似    10 1.22    2  1.00    22    15    S-8外消旋体-5类似    10 3.11    2  2.45    27    16    S-9外消旋体-4类似    11 2.79    2  2.32    20    17    S-9外消旋体-5类似    11 2.73    2  2.45    11    18    S-1外消旋体-2类似    2 1.12    2  1.00    12    19    S-1外消旋体-5类似    2 2.90    2  2.45    18

应用例4、18：不对称结构化合物和分离对象化的不对称碳原子都在苯基的连结部位，并且不对称碳原子的近邻(β位)碳原子都带有羰基，不对称碳原子附近的环境类似。

应用例5、8、16、19：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在羟基的的连结部位，不对称碳原子附近的环境类似。

应用例6、7、9：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在羟基的连结部位，不对称碳原子的邻位(α位)碳原子都是羰基，因此不对称碳原子附近的环境类似。

应用例10、12、14：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在氧原子的邻位(α位)，并且不对称碳原子近邻(β位)的碳都带有羰基，不对称碳原子周围的环境类似。

应用例11：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都与碳原子相连，分子内具有羰基，因此不对称碳原子附近的环境类似。

应用例13：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在三卤甲基取代基的连结部位，不对称碳原子附近的环境类似。

应用例15、17：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在氧原子的邻位(α位)，不对称碳原子附近都具有羰基，不对称碳原子附近的环境类似。

                                   表3

  应  用  例  分子量为1000或1000  以下的具有不对称结  构的化合物种类         分离对象         化合物    分离柱的种类    和α值    分离柱的种类    和α值  α值  的上  升率  (％)    种类  判定 实施例  α₁  比较例 α₂  20    L-6外消旋体-10非类似   12  2.68    3 2.43  10  21    S-11外消旋体-5非类似   13  2.92    2 2.45  19  22    S-3外消旋体-10非类似   5  1.73    2 1.38  25  23    S-3外消旋体-2非类似   5  1.26    2 1.00  26  24    S-3外消旋体-12非类似   5  1.98    2 1.71  16  25    D-6外消旋体-10非类似   6  1.54    2 1.38  12  26    D-6外消旋体-2非类似   6  1.21    2 1.00  21  27    L-6外消旋体-10非类似   7  1.71    2 1.38  24  28    L-6外消旋体-2非类似   7  1.31    2 1.00  31  29    L-6外消旋体-12非类似   7  1.98    2 1.71  16  30    R-8外消旋体-5非类似   9  3.69    2 2.45  51  31    R-8外消旋体-12非类似   9  2.01    2 1.71  18  32    S-8外消旋体-5非类似   10  3.11    2 2.45  27  33    R-9外消旋体-2非类似   14  1.06    2 1.00  6  34    S-9外消旋体-2非类似   11  1.08    2 1.00  8

  35    R-3外消旋体-12非类似    15  1.49    1  1.22  22  36    S-3外消旋体-12非类似    16  1.53    1  1.22  25  37    D-6外消旋体-12非类似    17  1.48    1  1.22  21  38    R-8外消旋体-4非类似    18  1.50    1  1.35  11

                                   表4

  应  用  例  分子量为1000或1000  以下的具有不对称结  构的化合物种类       分离对象       化合物分离柱的种类和α值      分离柱的种类      和α值  α值  的上  升率  (％)    种类  判定 实施例  α₁  比较例  α₂  39    外消旋体-13外消旋体-13相同    19  1.82    1  1.67   9  40    外消旋体-14外消旋体-14类似    19  1.61    1  1.35  19  41    外消旋体-5外消旋体-12非类似    20  1.41    1  1.22  16  42    外消旋体-2外消旋体-12非类似    21  1.52    1  1.22  25  43    外消旋体-14外消旋体-12非类似    22  1.48    1  1.22  21  44    外消旋体-15外消旋体-12非类似    23  1.46    1  1.22  20  45    外消旋体-16外消旋体-12非类似    23  1.43    1  1.22  17

应用例40：不对称结构化合物和分离对象化合物的不对称碳原子都在羟基的连结部位，整个分子结构包含类似于萘基、蒽基的稠合环，因此不对称碳原子附近的环境类似。