蝎抗心律失常肽及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种蝎抗心律失常肽及其制备方法和应用,该活性肽的氨基酸序列为GYIRGSNGCLWGNEGCNKECKGFGYCWTWGLACWCEGLTWKSESNTCG。制备蝎抗心律失常肽包括设计PCR引物,用PCR从东亚钳蝎蝎毒cDNA库中扩增抗心律失常肽基因片段,并通过表达载体转化到大肠杆菌中表达,其特征是:设计的PCR上游引物含小肠激酶酶切位点,用PCR扩增的抗心律失常肽基因片段经过限制性内切酶酶切,克隆到pGEX－5x－1表达载体中,转化到大肠杆菌BL21中获得重组大肠杆菌BL21(pGEX/BmKIM),经IPTG诱导后,经谷胱甘肽转移酶亲和层析柱纯化,用小肠激酶酶切表达所得的融合蛋白,并脱盐而得到可溶的抗心律失常肽。本发明具有高效抗心律失常活性,所得到的重组肽是可溶性的,而且产量高,可在制备抗心律失常肽药中广泛应用。