一种胎儿脐血清眼药水及其应用

摘要

本发明公开了一种胎儿脐血清眼药水，其中，包括胎儿脐血清和保养液。

说明书

本发明涉及药物类，具体地说是指一种由胎儿脐血清组成的眼药水及其应用。

角膜病是一种对视力危害较大的眼科常见病，多发于青壮年，对社会生产劳动力影响大，是目前国内外致盲率较高的眼病之一，目前较好的治疗角膜疾病的药物为牛血清制剂，但其价格昂贵，在国内没有生产，并且其仅用于局部滴用不能作结膜下注射。

随着基础医学和现代科学技术的不断进步，近十年来角膜病的研究有了新的发展。角膜病的免疫学研究已成为一个新的热点，研究发现，许多角膜病均与机体的免疫状态存在着密切联系。如发现蚕蚀性角膜溃疡边缘部角膜变性等均与自身免疫功能的紊乱有明显关系。而脐血应用在治疗免疫功能缺陷疾病的作用已被确认。

另外，发现表皮生长因子(EGF)、纤维连结蛋白、纤维蛋白溶酶原激活剂(t-PA)等具有生理活性的物质有治疗各种角膜创伤的明显作用，这引起了人们的关注。有人报导用表皮生长因子注射十血清点眼，角膜上皮生长迅速，对一些角膜病的治疗收到了良好效果。根据国外文献关于胎儿血清对某些组织的刺激作用报告中指出：胚胎血与成年人血不同，研究证实胎盘血对皮肤骨骼及机体各种功能的修复显示生物活性，胎血清对各种器官的修复具有刺激作用。已知新生儿脐血免疫蛋白含量接近成人水平，足月新生儿脐血IYG含量已达到母体水平，甚至比母体高5-10％，研究表明LAK活性在免疫监视中具有关键的重要性。 Chin和Montagna等均证实新生儿脐血LAK细胞活性等同或高于成人LAK活性，而胎儿活性更高，由于免疫疗法是辅佐治疗恶性肿瘤和严重感染不容忽视的环节，因而脐血高活性的LAK细胞将为治疗提供了较高的应用价值和丰富的来源。目前脐血移植已用于某些免疫缺陷病的治疗，但在角膜疾病的治疗上来见报导。

本发明所提供的胎儿脐血清眼药水其组成包括胎儿脐血清和保养液两种组份，其比例为2∶1(重量比)。

本发明所提供的胎儿脐血清眼药水其所选用的脐血清的提取来源及方法为：体检化验合格且婴儿发育正常的健康产妇为脐血清采集对象；采集方法为：新生儿娩出后，立即用二把无菌止血钳在距脐轮3-5cm处夹住脐带，用无菌剪刀在两钳中剪断脐带，采血者用碘酒、酒精棉球消毒脐带后，将采血针刺入脐静脉，借助宫缩力使血液流入全封闭式袋中，经高速离心后备用。

本发明所提供的胎儿脐血清眼药水中的保养液的组成包括枸橼酸、枸橼酸钠、无水葡萄糖和蒸馏水(新鲜)溶液，其中各组份含量为：将1.33克枸橼酸钠、0.47克枸橼酸、3.0克无水葡萄糖溶于100mL新鲜的蒸馏水中，并混合均匀形成该保养液。

本发明中，将上述的胎儿脐血清和保养液按2∶1(体积比)混合，离心分离后备用。

另外，脐血清的采集过程、保养液的制备以及两者的混合均在无菌条件下进行。

经临床实验证明，本发明的胎儿脐血清眼药水对角膜疾病具有显著的疗效，这可能与脐血清中的各种优质成份有关，尤其是脐血清中的大量集落刺激因子及多种生长因子对组织修复起着很重要的作用。以往脐血清是一种被人们丢弃的废物，现在本发明将此来源广泛，便于采集保存的脐血清应用到治疗角膜疾病，不仅开创了治疗的新途径，而且收到良好的疗效，费用少，具有重大的社会效益和经济效益。

下面通过胎儿脐血清在治疗角膜疾病中的动物实验与临床应用研究结果对本发明的眼药水进行进一步说明。

胎儿脐血清在治疗角膜疾病中的动物实验：

一、实验目的：

通过实验动物观察胎儿脐血清在角膜疾病治疗中的作用，从而探索角膜疾病治疗的新的有效方法。

二、材料与方法

(1)、动物选择：采用新西兰白兔30只，雌雄各半，体重2.5-3.0kg，分甲实验组与乙对照组，各组15只兔子，分别编号标记，单笼颗粒饮料喂养，均以左眼为实验部位。

(2)、实验方法：实验动物行左眼角膜上皮层划伤后接种金黄色葡萄球菌，三日后送验结膜囊细菌培养，随机抽取甲乙组两只摘除眼球行病理检查结果显示所造病理模型成功。两组兔子均作肉眼检查及裂隙灯检查。甲组兔子于接种细菌四天后开始行结膜下注射脐血清0.3cc，隔日一次，脐血清滴眼一日一次，乙组兔子滴用氯霉素、利福平眼药水每日一次。

(3)、观察方法：治疗三日后分别行细菌培养，肉眼观察，裂隙灯检查，组织切片等观察。

三、实验结果：

(1)、细菌培养甲乙两组实验动物三日后送验结膜囊细菌培养，送验结果均为金黄色葡萄球菌感染。经治疗两周后送验甲乙两组实验动物结膜囊细菌培养，甲组实验动物结膜囊无细菌生长，乙组对照组实验动物仍有部分金黄色葡萄球菌生长。

治疗前甲、乙两组动物结膜囊分泌物作细菌培养，均有金黄色葡萄球菌生长，说明造型均匀可靠。

脐血与氯霉素、利福平眼药水疗效对比

        细菌培养情况

  组别   例数  有细菌生长  无细菌生长甲组  脐血   13    0  (4.5)    13 (8.5)

               T  1.1 T       1.2乙组 氯霉素  13    9  (4.5)    4  (8.5)

 利福平        T  2.1      T  2.2合计         26       9           17经作X²检验计算X²值X²＝13.77V＝(R-1)(C-1)＝(2-1)(2-1)-1查X界值表X²0.001，1＝6.63  今X²＝13.77＞X²0.01故P＜0.01差别有高度显著性故脐血在消除角膜炎症方面较氯霉素+利福平眼药水具明显的优势。

(2)、肉眼观察接种三日后，肉眼可见甲乙组实验动物左眼均有大量脓性分泌物，球结膜充血水肿，角膜均可见灰白色溃疡形成，甲组实验动物经治疗一周后即可见球结膜充血水肿明显减轻，角膜溃疡部分修复，乙组对照组动物球结膜充血水肿稍减轻，角膜溃疡修复不明显。经治疗两周后，甲组实验动物球结膜无充血水肿，角膜溃疡已全部愈合，角膜光滑透明，乙组对照组动物球结膜仍轻度充血水肿，角膜溃疡部分修复。

(3)、裂隙灯检查：接种三日后裂隙灯下可见两组动物均左眼球结膜睫状充血水肿，角膜上皮损伤面粗糙，角膜上均可见灰白色溃疡，部分动物溃疡已浸润及实质层。经用脐血治疗一周后裂隙灯检查，甲组动物球结膜充血水种明显减轻，角膜溃疡已部分修复，乙组对照组经用药物治疗后，球结膜水肿充血较前稍减轻，角膜溃疡无明显改变。经用脐血治疗两周后裂隙灯检查，甲组动物球结膜无充血水肿，角膜上皮较粗糙，溃疡已完全修复，乙组动物经用药物治疗后，结膜仍轻度充血，角膜溃疡部分修复。

(4)、组织切片：接种三日后，送验甲乙两组各一只实验动物眼球，病理报告显示：甲乙两眼球角膜前上皮新生，中央区域坏死，脓疡形成，大量淋巴细胞、炎细胞浸润，角膜浅层广泛变性。两组实验动物经分别治疗两周后，再送验甲乙两组各一只眼球，病理报告显示为甲组实验动物眼球角膜上皮修复完整，余未见明显病理改变，乙组对照组眼球角膜部分上皮脱落消失，角膜中央部脓疡，旁可见炎性肉芽组织。

胎儿脐血清在治疗角膜疾病中的动物实验：

自一九九五年五月我们将胎儿脐血清用于临床治疗角膜疾病患者，已取得随访访结果的有30例，其中男16例，女14例，年龄20-60岁，角膜溃疡11例，角膜炎19例。 

一、治疗方法：

我们将胎儿脐血清清分为注射及滴用两种，角膜溃疡患者行1％地卡因表面麻醉后，结膜下注射脐血清0.5cc，三日一次，脐血清滴眼一日三次，角膜炎患者应用脐血清滴眼一日三次。

二、观察方法

治疗前后分别行肉眼观察，裂隙灯检查等观察。

(1)、肉眼观察：角膜溃疡病人可见结膜囊脓性分泌物球结膜不同程度睫状充血水肿，角膜不同程度溃疡。

(2)、裂隙灯检查：裂隙灯下可见不同程度角膜莹光素染色着色，溃疡浸润。

三、治疗结果：

经治疗一周后角膜溃疡病人，自觉症状明显好转，患眼检查结膜充血水肿明显减轻，角膜溃疡缺损处有部分修复。经两周治疗后，角膜溃疡完全愈合，角膜炎患者经治疗一周后效果显著，十天后治愈。通过30例患者与传统方法作对照，结果显示脐血清在治疗角膜疾病中治愈时间比传统治疗方法平均缩短1-2周，治疗费用减少50％，总有效率达98％。