用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂及其制备方法，属于兽药领域。本发明的乳头封闭剂由40wt%-75wt%的无毒金属化合物、2wt%-10wt%的栀子苷以及10wt%-50wt%的凝胶基质组成；其中凝胶基质由70wt%-90wt%的分散介质、5wt%-12wt%的凝胶剂、2wt%-5wt%的助悬剂、0.1wt%-0.3wt%的抗氧剂和0.04wt%-0.15wt%的防腐剂组成。本发明乳头封闭剂中有效成分栀子苷与无毒金属化合物相互配合，对于干奶期奶牛乳房炎治愈率高，且有效缓解了临床型乳房炎的炎症反应。

说明书

技术领域

本发明涉及兽药技术领域，特别涉及一种用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂及其制备方法。

背景技术

乳房炎是奶牛的一种常见多发病，是影响奶牛业发展的最主要疾病之一，不仅使泌乳量和乳产品质量降低，甚至造成乳房损伤，给奶牛业造成巨大的经济损失。目前，世界约有2.2亿头奶牛，其中1/3的奶牛患有各种类型的乳腺炎，每年因乳腺炎的损失高达350亿美元，仅美国的损失就达20亿美元。根据30年来的调查研究资料显示，我国奶牛乳房炎平均检出率为50%~70%，乳区平均阳性率为20%~40%。虽然近几年奶牛养殖技术和管理水平的不断提高，但奶牛乳房炎发病率依然居高不下。

奶牛干乳期是奶牛体内胎儿迅速生长发育需要较多营养的阶段，也是进一步改善奶牛的营养状况，保证下一个泌乳期能更好、更持久地产乳的必要条件。而干乳期发生乳房炎，可导致奶牛产后初乳期发生乳房炎，由此造成产后2-3个月内的泌乳高峰期奶牛泌乳性能得不到充分表现，严重时则使泌乳母牛丧失泌乳能力而被淘汰。

奶牛在长期机械挤奶的过程中，会由于挤奶杯衬垫老化，密封不严、挂杯时间过长等因素而造成“过挤”现象，从而导致乳头孔外翻或乳头括约肌和角蛋白受损形成开放性的乳头，极易受到环境病原菌尤其是大肠埃希菌的入侵而导致乳房炎的发生。即使是正常的乳头导管在挤乳后大约2h才能恢复到闭合状态，在这个时间段如果饲养管理方式不当，如挤奶后奶牛躺卧时间过长、牛床及护栏环境卫生不佳，都会造成环境致病菌感染引发乳房炎。

乳头孔封闭剂是一种疏水型油性基质凝胶剂，可以在乳头孔形成物理性屏障，防止了环境致病菌的侵入。临床实际应用多与抗生素联用时，可对乳房内寄生菌起到很好的杀灭作用，但临床研究表明，抗生素在杀灭病原菌的同时可诱导细菌内毒素的大量释放，从而在乳房局部引起发热疼痛、乳房肿胀、乳汁体细胞数增多，严重时休克等一系列的炎症病理反应，且治愈率低。

发明内容

为解决现有乳头封闭剂与抗生素联用而引发乳房发热疼痛、肿胀、乳汁体细胞增多等炎症病理反应且治愈率低的问题，本发明提供了一种用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂及其制备方法。本发明的乳头封闭剂用于防治由细菌内毒素及环境致病菌所引起的干乳期奶牛乳房炎，且不会引发奶牛乳房发热疼痛、肿胀、乳汁体细胞增多等炎症病理反应。

本发明的技术方案为：

一种用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂，由40wt%-75 wt%的无毒金属化合物、2 wt %-10 wt %的栀子苷以及10 wt %-50 wt %的凝胶基质组成；其中所述凝胶基质由70 wt %-90 wt %的分散介质、5 wt %-12 wt %的凝胶剂、2 wt %-5 wt %的助悬剂、0.1wt %-0.3 wt %的抗氧剂和0.04 wt %-0.15 wt %的防腐剂组成。无毒金属化合物可形成物理屏障。本发明的乳头封闭剂中所用凝胶基质基质为缓释凝胶剂，缓慢释放栀子苷，能够保证奶牛安全度过干奶期。

优选的，由55wt%-65 wt%的无毒金属化合物、4wt %-6 wt %的栀子苷以及25wt %-35wt %的凝胶基质组成。

进一步的，由60wt%的无毒金属化合物、5wt %的栀子苷以及30wt %的凝胶基质组成。

优选的，所述无毒金属化合物选自碱式硝酸铋、二氧化钛、氧化锌、硫酸钡中的至少一种。

作为优选方案，所述分散介质为液体石蜡、分馏椰子油、注射用大豆油、中碳链脂肪酸甘油酯、油酸乙酯中的一种或其组合；所述凝胶剂为单硬脂酸铝、硬脂酸铝、双硬脂酸铝、硬脂酸镁、氢化蓖麻油、卡波姆中的一种或其组合；所述助悬剂为二氧化硅、羊毛脂、单硬脂酸甘油酯、凡士林、蜂蜡、乳化蜡中的一种或其组合；所述抗氧剂为2,6-二叔丁基对甲酚、叔丁基羟基茴香醚、维生素E、没食子酸丙酯中的一种或其组合；所述防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、苯甲酸、山梨酸钾、邻苯基苯酚中的一种或其组合。

所述用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂的制备方法，具体步骤为：

1）将所述无毒金属化合物和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径为10-40μm；

2）将凝胶剂、助悬剂、抗氧剂、防腐剂均匀分散在分散介质中，得凝胶基质；

3）将步骤1）微粉处理后的栀子苷均匀分散于所述凝胶基质中；

4）分批加入1/3处方量的所述无毒金属化合物，边加边搅拌，加完该1/3处方量的无毒金属化合物后持续搅拌10-30min；将剩余2/3处方量的无毒金属化合物分批加入，加完后持续搅拌10-30min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀；

5）分装并密封，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

优选的，步骤1）中采用气流式粉碎机进行微粉处理。

进一步的，步骤1）中微粉处理至粒径为10-25μm。

优选的，步骤2）中所述均匀分散采用超声分散或加热条件下分散。

本发明的有益效果为：

本发明的乳头封闭剂能够显著提高奶牛干乳期乳房炎的治愈率，有效缓解了临床型乳房炎的炎症反应；本发明能够有效降低乳汁中的体细胞数，对于由细菌内毒素所引起的临床型乳房炎有很好的治疗作用，是一种理想的用于奶牛干乳期乳房炎防治的乳头封闭剂药物。

具体实施方式

实施例1

1）将碱式硝酸铋和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取26.43g液体石蜡放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入硬脂酸铝2.5g、二氧化硅1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、邻苯基苯酚0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g碱式硝酸铋，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g碱式硝酸铋后持续搅拌20min；再分批加入45.0g碱式硝酸铋，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例2

1）将碱式硝酸铋和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取39.93g液体石蜡放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入硬脂酸铝4.0g、二氧化硅1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、邻苯基苯酚0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入15.0g碱式硝酸铋，每批加入1.5g，边加边搅拌，加完该15.0g碱式硝酸铋后持续搅拌20min；再分批加入35.0g碱式硝酸铋，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例3

1）将碱式硝酸铋和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取17.43g液体石蜡放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入硬脂酸铝1.5g、二氧化硅1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、邻苯基苯酚0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入25.0g碱式硝酸铋，每批加入2.5g，边加边搅拌，加完该25.0g碱式硝酸铋后持续搅拌20min；再分批加入50.0g碱式硝酸铋，每次加入2.5g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例4

1）将碱式硝酸铋和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取28.93g液体石蜡放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入硬脂酸铝2.5g、二氧化硅1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、邻苯基苯酚0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取2.5g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g碱式硝酸铋，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g碱式硝酸铋后持续搅拌20min；再分批加入45.0g碱式硝酸铋，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例5

1）将碱式硝酸铋和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取23.93g液体石蜡放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入硬脂酸铝2.5g、二氧化硅1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、邻苯基苯酚0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取7.5g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g碱式硝酸铋，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g碱式硝酸铋后持续搅拌20min；再分批加入45.0g碱式硝酸铋，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例6

1）将二氧化钛和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取26.43g分馏椰子油放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入单硬脂酸铝2.5g、羊毛脂1.0g、2,6-叔丁基羟基茴香醚0.05g、山梨酸钾0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g二氧化钛，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g二氧化钛后持续搅拌20min；再分批加入45.0g二氧化钛，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例7

1）将氧化锌和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取26.43g注射用大豆油放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入双硬脂酸铝2.5g、凡士林1.0g、没食子酸丙酯0.05g、尼泊金甲酯0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g氧化锌，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g氧化锌后持续搅拌20min；再分批加入45.0g氧化锌，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

实施例8

1）将硫酸钡和栀子苷分别进行微粉处理，至粒径不大于25微米（μm）；

2）取26.43g油酸乙酯放入250ml烧杯中，升温至140℃，依次加入卡波姆2.5g、蜂蜡1.0g、2,6-二叔丁基对甲酚0.05g、苯甲酸0.02g，加热搅拌至完全溶解，使其成凝胶基质，冷水浴降温至40℃以下；

3）取5.0g步骤1）微粉处理后的栀子苷并置于凝胶基质中，超声分散，并于高剪切分散乳匀机乳匀10min；

4）分批加入20.0g硫酸钡，每批加入2.0g，边加边搅拌，加完该20.0g硫酸钡后持续搅拌20min；再分批加入45.0g硫酸钡，每次加入2.0g，边加边搅拌，加完后持续搅拌20min；最后在高剪切分散乳化机中乳匀30min；

5）检查粒度，符合要求（粒径>25μm的颗粒不超过10%），即得所述的防治干奶期奶牛乳房炎的乳头封闭剂，按每支4g灌装，密封保存，得用于预防奶牛干乳期乳房炎的乳头封闭剂成品。

临床药效试验研究

1.材料

1.1试验药物

对照组：将栀子苷替换为苄星氯唑西林，按具体实施例1工艺配制而成。

试验组：按具体实施例1配制而成。

1.2试验动物

选取某大型奶牛养殖厂临床型乳房炎自然发病病例共计60头。

表1试验分组

 2.试验方法

2.1给药方案：奶牛干奶期最后一次挤奶后清洁、消毒乳头后给药，每个乳区乳头孔注入试验药物。

2.1疗效评价指标

2.1.1 治愈 全身症状消失，食欲恢复正常；患病乳区红、肿、热、痛等症状完全消失；

2.1.2 有效 全身症状基本消失，食欲恢复正常；患病乳区红、肿、热、痛等症状明显改善或减轻；

2.1.3 无效 全身症状未消失甚至加重；患病乳区症状无明显改善甚至加重。

2.2日产奶量及体细胞数（SCC）监测

对治愈奶牛产犊后1周内的平均日产奶量及体细胞数（SCC）进行监测。

3.临床疗效试验结果

表3临床疗效试验结果

      4. 产奶量及乳成分监测

4-1治愈奶牛平均日产奶量测定结果              

 表4-2治愈奶牛乳汁平均体细胞数测定结果

5.试验结论

上述试验结果表明，本发明含栀子苷的乳头封闭剂，与添加抗生素对照组相比，能够显著提高奶牛干乳期乳房炎的治愈率，有效缓解了临床型乳房炎的炎症反应；体细胞数（SCC）是衡量乳汁中病原微生物及细菌内毒素的重要指标，体细胞数越高，说明在乳房内受致病菌及内毒素所引起的免疫应答反应愈强烈，从产犊后1周内乳汁中平均体细胞数结果可以看出，本发明的乳头封闭剂，能够有效降低乳汁中的体细胞数，对于由细菌内毒素所引起的临床型乳房炎有很好的治疗作用，是一种理想的用于奶牛干乳期乳房炎防治的乳头封闭剂药物。