法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2016-06-29
授权
授权
2015-02-25
实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/02 申请日:20140926
实质审查的生效
2015-01-28
公开
公开
技术领域
本发明涉及植物花粉活力的鉴定技术领域,具体涉及一种鉴定凤梨花粉活 力的方法。
背景技术
花粉的采集、贮藏以及对它活力的鉴定是植物杂交育种的重要环节,花粉 活力的高低大大影响了自交和杂交的成功率。目前鉴定花粉活力的方法已有多 种,主要有显微镜形态观测法、氯化三苯基四氮唑染色法(TTC染色法)和碘- 碘化钾染色法(I-KI染色法)、离体萌发法等。其中离体萌发法是测定花粉活力 最简单、可靠的方法。因为花粉萌发率是衡量花粉生活力状况的重要指标,同 时花粉管的长度在一定程度上也反映了该花粉的生活力状况。目前用的离体萌 发法均采用固体培养基,需要进行溶液配制、分装、灭菌、凝固等步骤,过程 较麻烦、耗时长,而且必须提前准备。
发明内容
本发明目的是,针对现有花粉离体萌发法存在有固体培养基需提前配制、 分装、灭菌、凝固等步骤,过程麻烦、耗时长等缺陷,提出一种简单、快速、 准确鉴定凤梨花粉活力的方法。
本发明目的通过以下技术方案得以实现:
一种鉴定凤梨花粉活力的方法,该方法按如下步骤进行:
(1)配制培养液:每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和5-10mg硼酸,混合 均匀并调ph至6.4-6.6后,备用;
(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片,再将培养液倒入培养皿 中至刚淹没载玻片的顶面;
(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存0-24h的凤梨花粉后,盖上玻璃 培养皿的盖子,在20-30℃室温中静置2-4小时;
(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察5-7个视野中花粉的萌发情况, 统计获得花粉的平均萌发率,筛选出花粉萌发率在50%-90%以上的批样花粉。
本发明的有益效果是:
1、本发明对凤梨花粉活力的鉴定改常规的固体培养基为液体培养法,该培 养液的配制简单,不需要经过灭菌、冷却、凝固等耗时、复杂的步骤,可随配 随用;所用的培养皿、载玻片等都是实验室的常用物品,比较方便;
2、在培养皿中平卧放置一载玻片,既利于显微镜观察,又可使花粉不致于 沉入培养液底部而影响萌发;
3、本发明通过观察花粉的萌发情况即可统计、鉴定出凤梨花粉的活力,具 有可靠、直观、快捷的特点。
附图说明
图1凤梨花粉活力鉴定的装置示意图
其中,1-花粉、2-载玻片、3-玻璃培养皿、4-培养液
图2凤梨花粉活力鉴定装置的侧面示意图
其中,1-花粉、2-载玻片、3-玻璃培养皿、4-培养液
具体实施方式
通过以下实施例并结合附图对本发明作进一步的详细描述,但本发明的内容 并不局限于此。
对实施例所涉试剂和仪器的说明:
显微镜为莱卡公司生产的Leica M205C
实施例1:
一种鉴定凤梨花粉活力的方法,该方法按如下步骤进行:
(1)配制培养液:每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和7.5mg硼酸,混合 均匀并调ph至6.4后,备用;
(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片,再将培养液倒入培养皿 中至刚淹没载玻片的顶面;
(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存5h的凤梨花粉后,盖上玻璃培 养皿的盖子,在25℃室温中静置3小时;
(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察5个视野中花粉的萌发情况,统 计获得花粉的平均萌发率,筛选出花粉平均萌发率在90%以上的批样花粉。
实施例2:
(1)配制培养液:每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和5mg硼酸,混合均 匀并调ph至6.5后,备用;
(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片,再将培养液倒入培养皿 中至刚淹没载玻片的顶面;
(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存14h的凤梨花粉后,盖上玻璃培 养皿的盖子,在20℃室温中静置4小时;
(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察6个视野中花粉的萌发情况,统 计获得花粉的平均萌发率,筛选出花粉萌发率在75%以上的批样花粉。
实施例3:
(1)配制培养液:每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和10mg硼酸,混合均 匀并调ph至6.6后,备用;
(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片,再将培养液倒入培养皿 中至刚淹没载玻片的顶面;
(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存24h的凤梨花粉后,盖上玻璃培 养皿的盖子,在30℃室温中静置2小时;
(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察7个视野中花粉的萌发情况,统 计获得花粉的平均萌发率,筛选出花粉萌发率在50%以上的批样花粉。
机译: 在一种或多种花粉粒中区分,分离和分类包含一种或多种目的遗传元素的花粉粒的方法,以确定一种或多种花粉粒的生存力,鉴定具有目的遗传成分的植物并鉴定空气的方法花粉粒的基因型
机译: 一种鉴定和确定细胞活力的方法
机译: 一种鉴定和确定细胞活力的方法