使用质谱检测至少一种碳青霉烯抗性机制的方法

摘要

本发明涉及通过质谱检测样品中至少一种微生物针对至少一种抗菌剂的至少一种抗性标记的方法，其特征在于抗菌剂是碳青霉烯，且所述抗性标记是蛋白质或肽。优选地，所述蛋白质或肽是来自所述微生物的蛋白质。

说明书

本发明涉及微生物学领域。更精确地说，本发明涉及用质谱检测样品 中至少一种微生物对碳青霉烯抗性的至少一种机制的方法。

自从巴斯德发现了微生物以来，微生物体以显微镜和生化分析来研究。 这些传统的方法通常冗长乏味，因此很久以来一直在寻找其他分析方法。 这就是为什么J.Anhalt和C.Fenselau从1975年起发起了以质谱分析细菌 [1]。

随着这一初步工作，气相色谱与质谱联用的方法被用于微生物细胞壁 中脂肪酸的研究[2]。这项技术广泛采用的英语术语是FAME，即脂肪酸甲 酯(Fatty Acid Methyl Ester)。现在成为一种分类学研究的参考方法。尽管如 此，它的应用局限于某些特定的以皂化、水解和分离的方法处理样品的实 验室。

在1996年，M.Claydon等[3]以及T.Krishnamurthy和P.Ross[4]的工作 证明可以用MALDI-TOF(矩阵辅助的激光解吸离子化-渡越时间，Matrix  Assisted Laser Desorption Ionization–Time Of Flight)质谱鉴别不同的细菌 种。该分析结合了获取质谱和解释专业软件。十分简单并且可以在几分钟 内得出结果。尽管如此，现在还只是应用在药物分析的实验室[5]。其临床 应用现在还局限于鉴别细菌和酵母的种类，还没有常规应用于鉴别抗菌剂 抗性。

为了保证最优化的病患护理，对诸如抗生素等抗菌剂的抗性的鉴别是 重要的要素。

推荐其他质谱方法，特别是串联质谱，以满足这些需要。例如，可以 引用C.Fenselau等关于用四极子-TOF(Q-TOF)鉴别β-内酰胺酶的工作[6]。

尽管如此，这些研究结果是通过通过研究仪器获得的，要求高素质的 人员，无法应用于日常临床。通常大于1小时/样品的分析时间与微生物分 析实验室的工作量是不相容的。

最近，S.Hofstadler等[7]提出了一种结合PCR扩增微生物基因组和电 喷射-TOF(ESI-TOF)检测PCR产物的方法。这种方法现在是全自动的[8]。 尽管如此，它要求PCR扩增，其具有分子生物学固有的瑕疵，即提取产量， 探针成本等问题。

在这一背景下，本发明的目的在于提出一种检测碳青霉烯抗性机制的 方法，以克服现有技术的不足，也就是提供一种廉价的方法，特别是与分 子生物学相比，不使用每个种特异的试剂，在短时间内(少于1小时)得出结 果，不要求高素质人员而能够应用于日常临床。

为了这个目的，本发明提出了一种通过质谱检测样品中至少一种微生 物对至少一种抗菌剂的至少一种抗性机制的新方法，其特征在于：抗菌剂 是碳青霉烯；以及检测针对至少一类碳青霉烯抗生素的所述抗性机制的标 记是蛋白质和/或多肽。

优选地，抗性标记是来自于所述至少一种微生物的蛋白质。有利的是， 几种不同抗菌剂的抗性标记可以同时检测。

如PCT/FR2010/052181中所示，在检测抗性机制标记之前或同时，所 述微生物的类型和/或毒力标记能够通过质谱以相同的方法检测。

至少一种碳青霉烯类抗菌剂的抗性标记理解为以所述性质为特征的蛋 白质来源的分子。碳青霉烯是属于β-内酰胺家族的抗生素，其主要代表是 亚胺培南、美罗培南、厄他培南和多利培南。这些分子被Bush和Jacoby 分类的β-内酰胺酶2df、2f和3a分解([9]，Antimicrobial Agents and  Chemotherapy,2010；54(3):969-976)。

确定对至少一种抗菌剂的抗性理解为确定微生物被抗菌剂杀死的敏感 性。当科和种不同时抗性机制涉及的蛋白也将不同。

β-内酰胺酶——β-内酰胺抗性细菌酶——的命名法未标准化。既根据一 级结构分为四类(A到D)，也按照靶底物和对抑制剂的抗性功能性分组(作 为概述，见前述Bush and Jacoby[9])。对分子分类，测序技术使更精确的分 类成为可能：例如，已经描述了TEM蛋白的183种变体(标记为TEM-i，i 从1到183)。对于功能性分类，前述Bush and Jacoby提出了新的功能性亚 组：

-第一组酶是属于C类分子的头孢菌素酶。CMY和FOX是质粒携带 的酶，属于这个亚组。

-第二组酶属于A类和D类分子。这个组自我再分为亚组2b、2be、 2br、2ber、2d、2de、2df、2f等。CTX-M(2be)和TEM(包括2be、2br)是属 于这个亚组的酶。2b亚组对应被克拉维酸、sulfobactam或三唑巴坦抑制的 广谱的β-内酰胺酶。2be亚组对应同样也被克拉维酸、sulfobactam或三唑 巴坦抑制的超广谱的β-内酰胺酶(ESBL)。2br亚组对应2b亚组中对克拉维 酸、sulfobactam或三唑巴坦的抑制不敏感的β-内酰胺酶。2bf亚组包括对碳 青霉烯超广谱的OXA。2f组对应碳青霉烯酶β-内酰胺酶，例如KPC。

-第三组包含水解碳青霉烯的金属-β-内酰胺酶，例如IMP、VIM、SPM、 GIM、SIM、AIM、KHM、DIM或NDM。

NDM-1β-内酰胺酶于2010年被描述(Kumarasamy et al.,2010,Lancet  Infect.Dis.,10:597-602)。相当于一种金属-β-内酰胺酶，赋予对除氨曲南外 所有β-内酰胺的抗性。

KPCβ-内酰胺酶于2001年在美国被描述(Yigit et al.,2001,Antimicrobio. Agents Chemother.,45:1151-1161)，随后遍及世界。相当于A类β-内酰胺酶， 赋予对头孢菌素和碳青霉烯的抗性，尤其是对亚胺培南和美罗培南。

IMPβ-内酰胺酶于1994年在日本被描述(Osano et al.,1994, Antimicrobio.Agents Chemother.,38:71-78)，随后遍及世界。相当于金属-β- 内酰胺酶，赋予对头孢菌素和碳青霉烯的抗性，但是对替莫西林和氨曲南 无效。

VIMβ-内酰胺酶与1999年在欧洲被描述(Lauretti et al.,1999, Antimicrobio.Agents Chemother.,43:1584-1590)，随后遍及世界。相当于金 属-β-内酰胺酶，赋予对头孢菌素和碳青霉烯的抗性，但是对氨曲南无效。

第一个GESβ-内酰胺酶与1998年在法属圭亚那被分离(Poirel et al., 2000,Antimicrobio.Agents Chemother.,43:622-632)。这种酶(GES-1)赋予 ESBL抗性。从耐受GESβ-内酰胺酶的细菌的第二次分离于2000年在南非 完成(Poirel et al.,2001,Antimicrobio.Agents Chemother.,45:2598-2603)。这种 酶(GES-2)赋予对诸如亚胺培南的头孢菌素和碳青霉烯的抗性。

INDβ-内酰胺酶首次描述于1999年(Bellais et al.,1999,FEMS Microbio. Lett.,171:127-132)。相当于金属-β-内酰胺酶，赋予对头孢菌素和碳青霉烯 的抗性。

SMEβ-内酰胺酶首次描述于1994年(Naas et al.,1994,Antimicrobio. Agents Chemother.,38:1262-1270)。相当于A类β-内酰胺酶，赋予对头孢菌 素和碳青霉烯的抗性。

OXAβ-内酰胺酶(或oxacillinases)对应D类β-内酰胺酶。根据其的初级 序列，其能够赋予对头孢菌素或对头孢菌素和碳青霉烯的抗性(Poirel et al., 2010,Antimicrobio.Agents Chemother.,54:24-38)。

本发明的方法可以用于检测细菌中对于碳青霉烯的抗性机制。因此， 例如，可以根据本发明的方法在其中找到对碳青霉烯的抗性机制的细菌的 非穷举性实例有：大肠杆菌(Escherichia coli)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella  pneumoniae)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、鲍氏不动杆菌 (Acinetobacter baumannii)、芽孢杆菌(Bacillus spp)、嗜麦芽寡养单胞菌 (Stenotrophomonas maltophilia)、气单胞菌(Aeromonas spp)、脆弱拟杆菌 (Bacteroides fragilis)、假单胞菌(Pseudomonas otitidis)以及阴沟肠杆菌 (Enterobacter cloacae)，更广泛地说，携带blaNDM-1或blaKPC抗性基因的肠 杆菌科(Enterobacteriaceae)微生物。应该进一步注意的是已知抗碳青霉烯的 菌株也对头孢菌素和青霉素有抗性。

因此，根据本发明的方法也使检测对所述抗生素的抗性机制成为可能。

本发明的方法可以应用的样品是任何容许含有靶微生物的样品。样品 可以是生物学来源的，无论是动物，蔬菜还是人。在这个实施方式中，相 当于生物流体样品(例如全血、血清、血浆、尿液、脑脊液、组织分泌物)、 组织样品或者分离的细胞。在细菌β-内酰胺抗性机制的标记能够用于检测 或者在分析前可以进行富集、提取、浓缩、纯化、培养等根据本领域技术 人员已知的方法制备的样品可以使用。

样品可以是工业来源或者根据非穷举的列表可以是空气样品、水样品、 表面样品、制成品的一部分或者食物产品。在食物样品中，简单来说，可 以包括乳制品(酸奶、奶酪)样品、肉、鱼、蛋、水果、蔬菜、水、饮料(牛 奶、果汁、苏打水等)。这些食物样品还可以来自酱或即食餐。最后，食物 样品可以来自动物饲料，例如动物膳食。

在质谱检测的上游，优选地，待分析的样品经过预处理使样品中存在 的完整蛋白质片段化而产生多肽，例如用蛋白酶消化或化学试剂反应。事 实上，裂解蛋白质可以通过物理化学、生物学或者两者结合处理来实现。 在可用的处理中，可以提及以羟自由基处理，特别是H₂O₂。羟自由基处理 导致肽键的切开在任何蛋白质的肽键位置随机发生。羟自由基浓度决定裂 解数，以及所得到的肽段的长度。还可以用其他化学处理，例如特异性在 甲硫氨酰残基羧基处切开肽键的溴化氰(CNBr)处理。也可以在三氟乙酸中 加热蛋白质溶液到1000℃进行天冬氨酰残基上的部分酸裂解。

尽管如此，酶解处理蛋白优先于物理化学处理，因为其更能保护蛋白 结构并且更易控制。“酶解”意味着一个或者多个酶在正确的条件下单独 或联合的反应。实施蛋白水解的酶，即蛋白酶在特定位置切割蛋白。每种 蛋白酶一般识别一种氨基酸序列，并总是进行同样的切割。某些蛋白酶识 别一个氨基酸或两个氨基酸的序列并在其间裂解，而其他蛋白酶只识别更 长的序列。这些蛋白酶可以是内切蛋白酶或外切蛋白酶。在已知的蛋白酶 中，包括如在WO2005/098071中描述的：

-特异性酶，例如胰蛋白酶(trypsin)在Arg和Lys的羧基处切断肽键， 细胞内溶素(endolysin)在赖氨酸羰基处裂解肽键，糜蛋白酶(chymotrypsin) 在芳香残基(Phe、Tyr和Trp)羧基处水解肽键，胃蛋白酶(pepsin)在芳香残基 (Phe、Tyr和Trp)氨基处切割，来源于Staphylococcus aureus V8菌株的蛋白 酶V8在Glu残基羧基处裂解肽键；

-非特异性酶，例如来自细菌Bacillus thermoproteolyticus的嗜热菌蛋 白酶(thermolysin)在疏水氨基酸(Xaa-The、Xaa-Ile、Xaa-Phe)氨基端水解肽 键，属于细菌蛋白酶的枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)和链霉蛋白酶(pronase)实 际上水解所有肽键并能在控制的反应条件(酶浓度和反应时间)下把蛋白转 化成寡肽。

如果反应模式可以兼容，有些蛋白酶可以同时或相继使用。在本发明 范围内，样品的消化优选的由蛋白酶执行，例如胰蛋白酶。

用化学试剂或蛋白酶产生多肽能通过溶液中简单反应的方法实现。还 可以通过微波炉[10]或高压[11]，甚至使用超声仪器[12]实现。在后面的三 个实施方式中，方案快了很多。

在如此获得的多肽中，蛋白特异性的多肽被称为蛋白质代表性 (proteotypic)肽，也就是将要被质谱分析的。

根据本发明细菌对碳青霉烯的抗性机制标记是来自可以在其中找到抗 碳青霉烯机制的细菌的蛋白。尤其是，所述蛋白被优选地使用酶，更优选 地使用胰蛋白酶消化成多肽。

相似的是，含有细菌抗碳青霉烯机制特征性蛋白标记的样品可以预处 理以达到纯化的目的。纯化预处理可以在如上所述的多肽产生步骤之前或 之后进行。

样品纯化处理在本领域技术人员中是众所周知的，尤其是采用离心、 过滤、电泳或层析技术。这些分离技术可以单独使用或者彼此联用以获得 多维的分离。例如，多维层析可以如T.Fortin等[13]或H.Keshishian等[14] 所述，通过离子交换层析和反相层析的联用来实现。在这些文章中，层析 介质可以是柱或者筒(固相萃取)。蛋白质代表性肽的电泳或层析级份(或一 维或多维层析的保留时间)是每种肽的特征，因此采用这些技术使选择蛋白 质代表性肽或多肽进行分析成为可能。这样区别产生的多肽可以增加后续 质谱分析的特异性。

目的在于分离多肽的电泳或层析技术的一个变形在于特异性纯化N-糖 肽([15]以及专利申请WO2008/066629)。尽管如此，这样的纯化只可以定量 进行了N-糖基化的翻译后修饰的多肽。不是所有的蛋白都会糖基化，这限 制了其应用。

作为分析和检测不同类型分子的有力工具，用于本发明方法的质谱是 本领域技术人员所共知的。一般来说，任何可以被电离的分子都可以根据 其分子量由质谱仪检测。根据被测分子的自然状态，无论蛋白还是代谢源， 某些质谱技术会更合适。然而，无论用质谱方法检测什么，后面都包括把 靶分子电离为所谓分子离子的步骤，即本实施方式中，电离特征标记的步 骤和分离质谱获得的分子离子的步骤。

因此，所有的质谱包含：

-用于电离待分析样品中存在的标记的电离源，即给予这些标记正或 负电荷；

-用于根据其荷质比分离电离标记或分子离子质量分析仪；

-用于测量分子离子直接产生的信号或以后述方法自分子离子产生的 离子的检测仪。

电离步骤(采用质谱所必需的)可以通过任何本领域技术人员已知的方 法进行。电离源可以使待分析分子转化成气态的并且电离的状态。电离源 可以用正电荷模式研究阳离子，或者负电荷模式研究阴离子。存在几种类 型的电离源，可基于要寻找的结果和要分析的分子使用这些电离源。尤其 是包括：

-电子电离(EI)、化学电离(CI)和解吸化学电离(DCI)；

-快原子轰击(FAB)、亚稳态原子轰击(MAB)或离子轰击(SIMS， LSIMS)；

-电感耦合等离子体(ICP)；

-大气压化学电离(APCI)和大气压光电离(APPI)；

-Electronebulisation或点喷射(ESI)；

-矩阵辅助激光解吸/电离(MALDI)、表面活化激光解吸/电离(SELDI) 或硅解吸/电离(DIOS)；

-与亚稳态种相互作用的电离/解吸(DART)。

具体而言，电离进行如下：把含有靶分子的样品导入电离源，在此分 子在气态下被离子化并转化成对应最初分子的分子离子。电喷射电离(ESI) 源可以通过使分子从液态逐渐变气态而电离。在正电荷模式中，如此得到 的存在于液相中的对应于分子的有1、2甚至3或者更多的额外质子的分子 离子带有1、2甚至3或者更多的电荷。例如，当靶分子是一种蛋白，分离 靶蛋白后获得的蛋白质代表性肽使用电喷射源在正电荷模式的电离产生气 相的带1、2甚至3或者更多的额外质子多肽离子，其带有1、2甚至3或 者更多的电荷，并可以从液相移动到气相[16]。这类源尤其适合先用反相液 相色谱分离获得的靶分子或蛋白质代表性肽。然而，样品中存在的分子的 电离得率(ionisation yield)会随着浓度和存在的不同物种的天然状态而改变。 这一现象导致了本领域技术人员所周知的矩阵效应。

MALDI电离源可以使来自固态样品的分子电离。

根据荷质比分离离子化标记的步骤在质量分析器中进行，本领域技术 人员公知的任何质量分析器都适用。其可以由低分辨率分析器、四极子 (quadripole或quadrupole(Q))、3D离子陷阱(iron trap，IT)或线性离子陷阱 (linear iron trap、LIT)也称离子陷阱、高分辨率分析器组成，高分辨率分析 器使其可以测量被分析物的确切质量，并且特别使用了连接于扇形电场的 扇形磁场、渡越时间(TOF)、傅里叶变换离子回旋加速(FT-ICR)、轨道阱。

依靠其荷质比的分子离子的分离可以只进行一次(单质谱或MS)，或者 可以进行几次连续的分离。当执行了两次连续的MS分离时，该分析被称 为MS/MS或MS²。当执行了三次连续的MS分离时，该分析被称为 MS/MS/MS或MS³，一般地说，当执行了n次连续的MS分离时，该分析 被称为MSⁿ。

在使用了几次连续的分离的技术之中，检测或分析单一靶分子的选择 反应监测(Selected Reaction Monitoring，SRM)模式，或者检测或分析数种靶 分子的多反应监测(Multiple Reaction Monitoring，MRM)模式是MS²分离的 具体应用。近似地，MRM³模式是MS/MS/MS分离的具体应用。这就称为 靶向质谱。

在单MS模式检测的情况下，所得到的的分子离子的荷质比与待检测 的分子有关。在MS/MS模式检测的情况下，与MS分析相比，基本上要添 加两步：

-分子离子(后称为前体离子，precursor ions)的破碎，以产生所谓第一 代碎片离子(fragment ions)，以及

-根据其与前体离子荷质比(m/z)相应的质量(m/z)₂、比例(m/z)₁分离所 谓的第一代碎片离子。

因此，这样获得的第一代碎片离子的荷质比与待测的靶分子有关。第 一代碎片离子是来源于前体离子，经过破碎步骤，并且其荷质比m/z不同 于前体离子的一种离子。

(m/z)₂和(m/z)₁对被称为转换(transitions)，代表待测的典型离子。

待测的与靶分子有关的典型离子的选择是由本领域技术人员根据标注 方法进行的。在再现性和可靠性方面，其选择有利于带来最敏感、最特异 以及最有鲁棒性的实验可能性。在所发展的用于选择蛋白质代表性肽 (m/z)₁的方法中，选择基本上是基于响应强度的。更具体地说，可以参考 V.Fusaro et al.[17]。本领域技术人员使用诸如来自Applied Biosystems或 MRMaid的MIDAS和MRM Pilot软件[18]的市场上可以买到的软件可以预 测所有可能的转换对。还可以使用F Desiere et al.[19]构建的称为 PeptideAtlas的数据库编辑科学界所描述的所有肽的MRM转换。 PeptideAtlas数据库可以在因特网上免费使用。对于非蛋白质分子，也可以 使用数据库，例如可通过Applied Biosystems公司(美国)的Cliquid软件进入 的数据库。

一种选择蛋白质代表性肽的(m/z)₂和(m/z)₁的替换方法在于使用在其他 研究中得到的MS/MS破碎光谱。例如，该研究可以是蛋白质组分析发现和 坚定生物标记的各阶段。这一方法是由Thermo Scientific在用户会议中提出 的[18]。这使得从通过SIEVE软件(Thermo Scientific)检测而鉴定的肽产生 候选转换清单成为可能。J.Mead等[18]详细说明了选择离子的(m/z)₂和 (m/z)₁确定标准如下：

-必须避免有内部裂解位点的肽，即内部有赖氨酸和精氨酸的肽，除非 赖氨酸或精氨酸后是脯氨酸；

-必须避免有天冬酰胺或谷氨酰胺的肽，因为会脱氨基；

-必须避免N端有谷氨酰胺或谷氨酸的肽，因为会自发环化；

-必须避免有甲硫氨酸的肽，因为会被氧化；

-必须避免有半胱氨酸的肽，因为会在潜在的变性、还原和封闭硫醇功 能的步骤中被不可逆转的修饰；

-有脯氨酸的肽被认为是有利的，因为会产生在MS/MS中非常强烈单 峰的集中片段。然而，非常强烈的单峰片段并不能证实复杂混合物 中转换的同一性。事实上，只有同时出现几个特征碎片才可以证明 所找的前体离子确实被检测到；

-必须避免在临近C端的位置(位置n-1)或相对于C端的第二位(位置 n-2)为脯氨酸的肽，因为在这种情况下一般认为第一代肽片段太小而 不具备充分特异性；

-优选地选择比前体(m/z)₁更大的片段以增强特异性。为了这一目的， 必须选择双电荷前体离子和最集中的(m/z)₁大于前体的第一代离子 片段，即单电荷第一代碎片离子。

对所选的前体离子的破碎是在破碎单元中进行的，例如三连四极子模 型、离子陷阱模型或渡越时间模型，这些也能分离离子。破碎的进行照例 是在电场中与惰性气体(例如氩气和氮气)碰撞，用强光源进行光激发或者光 分解，与电子或放射物碰撞，应用潜在的差异(例如在渡越时间管中)，或者 其他的活化模式。电场的性质决定了破碎的强度和性质。因此，在由惰性 气体存在时应用的电场，例如在四极子中，决定了提供给离子的碰撞能。 本领域技术人员将优化碰撞能以提高待测的转换的敏感性。举例来说，在 AB SCIEX5500质谱(Applied Biosystems公司，美国福斯特城)的 q2中，可以于5到180e-V之间改变碰撞能。相似地，本领域技术人员将 优化碰撞步骤的持续时间和激发能(例如在离子陷阱中)以进行最敏感的实 验。举例来说，在AB SCIEX5500质谱(Applied Biosystems公司) 的Q3中，持续时间(称为激发时间)在0.010到50ms之间，激发能在0到1 (任意单位)之间可以进行改变。

最后，在常规仪器中检测所选典型离子，特别是使用探测器和处理系 统的方法。探测器收集离子并产生电信号，其强度取决于收集的离子的数 量。得到的信号随后被放大以使其可以被计算机处理。计算机数据处理可 以集合地转换质谱探测器得到的信息。

SRM模式甚或MRM模式的原理是特别地选择一个前体离子，将其破 碎，然后特别地选择一个碎片离子。对于这些应用，三连四极子或偶联的 三连四极子/离子陷阱仪器被普遍使用。

在用于MS²模式的三连四极子(Q1q2Q3)的个案中，以分析或检查靶蛋 白为目的，第一个四极子(Q1)可以根据荷质比(m/z)过滤在较早的消化步骤 中获得的待测蛋白质特有的蛋白质代表性肽相应的分子离子。只有与要找 的蛋白质代表性肽荷质比相同的肽才被散发到第二个四极子(q2)并作为接 下来破碎的前体离子，这里的荷质比被称为(m/z)₁。q2分析器能够使荷质比 为的肽破碎成为第一代碎片离子。破碎一般通过前体肽与诸如氮气或氩气 的惰性气体在q2中碰撞获得。第一代碎片离子散发到第三个四极子(Q3)中， 其根据特定的称为(m/z)₂的荷质比过滤第一代碎片离子。只有荷质比与要找 的蛋白质代表性肽的(m/z)₂相同的碎片离子被散发到探测器中以检测甚或 定量。

当本发明的方法采用的质谱是串联质谱(MS/MS spectrometry)(MS²、 MS³、MS⁴或MS⁵)时，可以将几个质量分析器连在另一个上。例如，第一 个分析器分离离子，碰撞单元使其可以破碎离子，第二个分析器分离碎片 离子。诸如离子陷阱和FT-ICR的某些分析器把几个分析器组合成一个，使 其可以破碎离子并直接分析碎片。

根据本发明优选的实施方式，本发明的方法包括以下特征中的一个或 几个：

-为得到至少一种抗菌剂的潜在抗性的属性而采用的质谱是MS/MS 谱，其有利于产生待检测或定量的分子特异的碎片，因而有利于向 试验方法提供极大的特异性；

-MS/MS谱是MRM，这有利于利用质谱仪的几十毫秒的分析循环时间， 使其能够以高度的敏感性以多路复用方式检测或定量大量不同的分 子。

-同时优选地，在适用的情况下，类型属性和毒力因子的确定和对至少 一种抗菌剂的抗性的标记的确定是在同一个质谱设备中进行的，这 有利于减少分析时间和设备的花费，还会促进结果的处理和产出。

除确定抗菌剂的抗性外，还需要鉴别待测样品中的微生物。

鉴别微生物的方法是本领域技术人员公知的，例如Murray P.R.等在临 床微生物学手册(Manual of Clinical Microbiology)2007年第九版中所描述的 那样，尤其是在第一卷第三部分第十五和十六章关于细菌和酵母、第二卷 第六部分第八十二章关于病毒、第二卷第十部分第一百三十五章关于原生 动物的内容中。作为常规鉴别方法的例子，上述内容可以包括生物属性的 确定，例如，用Vitek2(bioMérieux)鉴别卡，甚或以基于某些基因的存在和 其序列的研究的鉴别标准，使用分子生物学技术。

鉴别可以从鉴别的样品直接进行，或者可以通过本领域技术人员公知 的方法用为要找的微生物种量身定做的最适培养基和培养条件培养样品中 含有的微生物，如Murray P.R.等在临床微生物学手册(Manual of Clinical  Microbiology)2007年第九版第一卷第三部分第十四章所描述的，特别是在 第一卷第四部分第二十一章中关于细菌、第二卷第六部分第八十一张关于 病毒、第二卷第八部分第一百一十七章关于酵母和第二卷第十部分第一百 三十四章关于原生动物的内容中。

因此，一般来说，在使用生物化学方法鉴别样品中细菌的情况下，首 先需要获得纯培养物形式的细菌，例如在接种于琼脂之后。在特定情况下 分子生物学(PCR)可以直接用于待分析样品。

除了培养微生物，还可以用活化表面的方法直接从样品中捕获以浓缩 微生物。W.-J.Chen等[10]描述了这样一种方法，他们以添加有活化表面的 磁珠Fe₃O₄/TiO₂捕获了不同种的细菌。还可以用其他方法进行捕获，例如 用凝集素(lectin)，或者抗体，或者万古霉素捕获。捕获可以浓缩微生物，从 而减少甚至排除培养步骤。这相当大的节省了时间。

鉴别还可以用质谱进行，根据前面描述的技术，优选用MS、MS/MS 甚或用构成本发明一个具体实施方式的连接了MS/MS谱的MS。在这种情 况下，样品也可以经受培养的步骤，例如接种到琼脂上。

MS鉴别方法的使用的进步在于可以在几分钟内得以实现，而且要求单 分析器的质谱仪，也就是说比串联质谱MS/MS的设备简单。。

通过连接了MS/MS谱的MS鉴别方法的使用也是更进步的。可以检查 MS所发现的离子的同一性，这样就提高了分析的特异性。

MRM型MS/MS鉴别方法的使用的好处在于比常规的连接了MS/MS 谱的MS方法更敏感更简单。这种方法既不要求高性能软件以处理获得MS 谱和MS/MS谱之间的信息，也不要求在设置连接MS和MS/MS谱的机器 参数时做改变。

如S.Vaidyanathan等[26]或者R.Everley等[27]描述的那样，用MS鉴 别的方法可以和电喷射源一起用于层析分离后的粗样品。这样，不同的m/z 范围可以鉴别微生物。S.Vaidyanathan等使用了200到2000Th之间的范围， 而R.Everley等使用了620到2450Th之间的范围。质谱还可以去卷积以获 取蛋白的质量而不依靠其电荷状态。因此R.Everley等使用大约5,000到 50,000Da之间的质量。或者，使用MS的鉴别方法也可以如Claydon等[3] 和T.Krishnamurthy与P.Ross[4]所描述的那样采用添加MALDI-TOF。分析 结合了质谱的获取和专业软件的翻译。非常简单且能够在几分钟内得以实 现。这种鉴别方法在医学分析实验室中越来越广泛传播。

通过样品中存在的其蛋白采用连接MS/MS的MS鉴别细菌被很多团队 广泛应用。举例来说，上述包括Manes N.等[29]最近的工作，他们研究肠道 沙门氏菌(Salmonella enterica)的肽组(peptidome)，或者R.Nandakumar等 [30]或L.Hernychova等[31]的工作，他们了细菌的以胰蛋白酶进行蛋白消化 后的蛋白质组。传统的方法包括ⅰ)获得质谱，ⅱ)依次选择质谱中获得的有 强烈信号的每个前体离子，ⅲ)依次破碎每个前体离子并获得其MS/MS谱， ⅳ)通过诸如Mascot(Matrix Science、London、United Kingdom)或SEQUEST (Thermo Scientific、Waltham、United States of America)的软件查询诸如 SWISS-PROT或NCBI的蛋白质数据库，以鉴别有很大可能性与MS/MS谱 发现的肽相匹配的肽。如果鉴别出种特征的蛋白质或多肽，这种方法就可 以导致微生物的鉴别。

使用质谱的一个优势在于，在细菌对β-内酰胺抗性机制的标记的实施 方式中，其对定量分子尤其有效。有鉴于此，使用了电流强度检测，其与 靶分子的量是成比例的。因此，测量的电流强度可以作为定量方法使确定 存在的靶分子的量成为可能，这个量的特征在于以国际标准单位mol/m³或 kg/m³、或者这些单位的倍数或分数、或者国际标准单位的通常的派生物(其 中包括倍数或分数)表达。举一个非限制性的例子，定量方法的特征单位诸 如ng/ml或fmol/l。

然而，必须进行标定以使相当于检测的离子所引发的电流强度的测量 的峰面积与待测的靶分子的量相关联。为了这个目的，在本发明的架构中， 采用质朴中常用的标定。MRM实验通常以添加外参或者优选地添加内参 (例如T.Fortin等[13]所描述的)来标定。如果靶分子是使分析感兴趣的分子 成为可能的蛋白质代表性肽，定量方法和靶蛋白质代表性肽(继而是感兴趣 的蛋白)的量的关联是通过相对于其检测的量已知的标准信号标定测量到的 信号而获得的。标定可以用标定曲线进行，例如以连续的注射不同浓度的 标准蛋白质代表性肽(外标定)，或者优选的用重肽(heavy peptide)作为内参 进行内标定，例如根据如下所述的AQUA、QconCAT或PSAQ法。“重肽” 理解为蛋白质代表性肽相应的肽，但是其中的一或几个碳12原子(¹²C)被碳 13(¹³C)取代，并且/或者一或几个氮14原子(¹⁴N)被氮15(¹⁵N)取代。

在美国专利申请2004/0229283中也提出将重肽用作内参(AQUA)。原理 是以含有较天然的同位素更重的同位素的氨基酸人工合成蛋白质代表性 肽。例如，这些氨基酸是通过以碳13(¹³C)取代碳12原子(¹²C)，或者以氮 15(¹⁵N)取代氮14原子(¹⁴N)获得的。如此合成的人工肽(AQUA)具有与天然 肽严格相同的物理化学性质(除了更大的质量)。通常在质谱分析的上游，例 如在引起感兴趣的蛋白的裂解的处理和处理后获得的肽的分馏步骤之间， 人工肽以给定浓度添加到样品。这样，AQUA肽与待分析的天然肽在肽分 馏期间共纯化。于是，这两种肽被同时注入质谱仪以检测。然后它们在电 离源中经历同样的电离得率。天然肽和已知浓度的AQUA肽的峰面积的比 较，可以计算天然肽的浓度，从而得到待测蛋白的浓度。AQUA技术的一 个变型由J.-M.Pratt等[32]以QconCAT的名称提出。这个变型在专利申请 WO2006/128492中也进行了描述。它由连接各种AQUA肽和产生重重组蛋 白形式的人工多肽组成。重组蛋白以含有重同位素的氨基酸合成。用这种 方法可以以较低的开销获得标定同时进行的几个蛋白的检测的参照。 QconCAT参照一开始即被加入，在引起蛋白的裂解的处理上游，如果存在 蛋白质分馏、变性、还原和封闭蛋白硫醇功能的步骤，则在其之前。因此， QconCAT参照与天然蛋白经历同样的引发蛋白裂解的处理周期，这使其可 以从引发蛋白裂解的步骤开始顾及得率。事实上，天然蛋白的处理，尤其 是消化可能并不完全。在这种情况下，使用AQUA参照会导致低估天然蛋 白的量。因此为了完全的检测，可能从引发蛋白裂解的步骤开始顾及得率 是重要的。然而，V.Brun等[33]表示QconCAT参照有时不能完全再现处理 的得率，尤其是消化天然蛋白，无疑是因为与QconCAT蛋白的三维构象不 同。

在此之后，V.Brun等[33]提出使用被称为PSAQ的方法，并在专利申 请WO2008/145763中进行描述。在这个实施方式中，内参是与天然蛋白的 序列相同的重组蛋白，但以中氨基酸合成。合成实在体外以重氨基酸进行 的。这一参照具有与天然肽严格相同的物理化学性质(除了更大的质量)。参 照一开始即被加入，当存在蛋白分馏步骤时，则在其之前。PSAQ展现出与 天然蛋白同样的处理得率，尤其是消化处理。如果进行肽分馏步骤，裂解 后获得的重肽也与天然肽共纯化。于是，两种肽同时被注入质谱仪以定量 分析。然后，它们在电离源中经历相同的电离得率。PSAQ方法中比较天然 肽和参照肽可以顾及分析方法中所有步骤地计算待测蛋白的浓度。

所有这些名为AQUA、QconCAT或PSAQ或其他标定技术，用于质谱 分析尤其是MRM或MS分析的技术可以用于在本发明构架范围内进行标 定。

优选地，根据本发明，检测方法中所用的质谱是MS/MS。更加优选地， 质谱是MRM。

本发明的方法可以检测对碳青霉烯的抗性，其特征在于检测至少一种 肽作为抗性标记。优选地，所述抗性标记肽从蛋白质NDM、KPC、GES、 IMP、IND、SME、VIM或OXA中选择。

具体而言，检测一种由NDM蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其 特征在于检测至少一种选自NDM蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.1和 SEQ ID No.1078到SEQ ID No.1080的肽。

SEQ ID No.1:

MELPNIMHPVAKLSTALAAALMLSGCMPGEIRPTIGQQMETGDQRFGDLVFRQLAPNVWQHT SYLDMPGFGAVASNGLIVRDGGRVLVVDTAWTDDQTAQILNWIKQEINLPVALAVVTHAHQD KMGGMDALHAAGIATYANALSNQLAPQEGMVAAQHSLTFAANGWVEPATAPNFGPLKVFYPG PGHTSDNITVGIDGTDIAFGGCLIKDSKAKSLGNLGDADTEHYAASARAFGAAFPKASMIVM SHSAPDSRAAITHTARMADKLR

SEQ ID No.1078

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SEQ ID No.1079

MELPNIMHPVAKLSTALAAALMLSGCMPGEIRPTIGQQMETGDQRFGDLVFRQLAPNVWQHT SYLDMPGFGAVASNGLIVRDGGRVLLVDTAWTDDQTAQILNWIKQEINLPVALAVVTHAHQD KMGGMDALHAAGIATYANALSNQLAPQEGLVAAQHSLTFAANGWVEPATAPNFGPLKVFYPG PGHTSDNITVGIDGTDIAFGGCLIKDSKAKSLGNLGDADTEHYAASARAFGAAFPKASMIVM SHSAPDSRAAITHTARMADKLR

SEQ ID No.1080

MELPNIMHPVAKLSTALAAALMLSGCMPGEIRPTIGQQMETGDQRFGDLVFRQLAPNVWQHT SYLDMPGFGAVASNGLIVRDGGRVLVVDTAWTDDQTAQILNWIKQEINLPVALAVVTHAHQD KMGGMDALHAAGIATYANALSNQLAPQEGMVAAQHSLTFAANGWVEPATAPNFGPLKVFYPG PGHTSDNITVGIDGTDIAFGGCLIKDSKAKSLGNLGDADTEHYAASARAFGAAFPKASMIVM SHSAPDSRAAITHTARMADKLR

优选地，所述从序列为SEQ ID No.2到SEQ ID No.9和SEQ ID No.1083 的肽中选择的肽定义如下：

优选地，抗性标记是NDM标记，选自序列为SEQ ID No.2、SEQ ID  No.3、SEQ ID No.5、或SEQ ID No.7的肽。

检测一种由KPC蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于 检测至少一种选自KPC蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.10到SEQ ID  No.19和SEQ ID No.1084到SEQ ID No.1093的肽。

SEQ ID No.10:

MSLYRRLVLLSCLSWPLAGFSATALTNLVAEPFAKLEQDFGGSIGVYAMDTGSGATVSYRAE ERFPLCSSFKGFLAAAVLARSQQQAGLLDTPIRYGKNALVPWSPISEKYLTTGMTVAELSAA AVQYSDNAAANLLLKELGGPAGLTAFMRSIGDTTFRLDRWELELNSAIPGDARDTSSPRAVT ESLQKLTLGSALAAPQRQQFVDWLKGNTTGNHRIRAAVPADWAVGDKTGTCGVYGTANDYAV VWPTGRAPIVLAVYTRAPNKDDKHSEAVIAAAARLALEGLGVNGQ

SEQ ID No.11:

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SEQ ID No.12:

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SEQ ID No.13:

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SEQ ID No.14:

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SEQ ID No.15:

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SEQ ID No.16:

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SEQ ID No.17:

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SEQ ID No.18:

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SEQ ID No.19:

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SEQ ID No.1084

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SEQ ID No.1085

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SEQ ID No.1086

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SEQ ID No.1087

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SEQ ID No.1088

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SEQ ID No.1089

MSLYRRLVLLSCLSWPLAGFSATALTNLVAEPFAKLEQDFGGSIGVYAMDTGSGATVSYRAE ERFPLCSSFKGFLAAAVLARSQQQAGLLDTPIRYGKNALVPWSPISEKYLTTGMTVAELSAA AVQYSDNAAANLLLKELGGPAGLTAFMRSIGDTTFRLDRWELEMNSAIPGDARDTSSPRAVT ESLQKLTLGSALAAPQRQQFVDWLKGNTTGNHRIRAAVPADWAVGDKTGTCGVYGTANDYAV VWPTGRAPIVLAVYTRAPNKDDKHSEAVIAAAARLALEGLGVNGQ

SEQ ID No.1090

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SEQ ID No.1091

MSLYRRLVLLSCLSWPLAGFSATALTNLVAEPFAKLEQDFGGSIGVYAMDTGSGATVSYRAE ERFPLCSSFKGFLAAAVLARSQQQAGLLDTPIRYGKNALVRWSPISEKYLTTGMTVAELSAA AVQYSDNAAANLLLKELGGPAGLTAFMRSIGDTTFRLDRWELELNSAIPGDARDTSSPRAVT ESLQKLTLGSALAAPQRQQFVDWLKGNTTGNHRIRAAVPADWAVGDKTGTCGVYGTANDYAV VWPTGRAPIVLAVYTRAPNKDDKYSEAVIAAAARLALEGLGVNGQ

SEQ ID No.1092

RLVLLSCLSWPLAGFSATALTNLVAEPFAKLEQDFGGSIGVYAMDTGSGATVSYRAEERFPL CSSFKGFLAAAVLARSQQQAGLLDTPIRYGKNALVPWSPISEKYLTTGMTVAELSAAAVQYS DNAAANLLLKELGGPAGLTAFMRSIGDTTFRLDRWELELNSAIPGDARDTSSPRAVTESLQK LTLGSALAAPQRQQFVDWLKGNTTGNHRIRAAVPADWAVGDKTGTCGAYGTANDYAVVWPTG RAPIVLAVYTRAPNKDDKYSEAVIAAAARLALEGLG

SEQ ID No.1093

SLYRRLVLLSCLSWPLAGFSATALTNLVAEPFAKLEQDFGGSIGVYAMDTGSGATVSYRAEE RFPLCSSFKGFLAAAVLARSQQQAGLLDTPIRYGKNALVRWSPISEKYLTTGMTVAELSAAA VQYSDNAAANLLLKELGGPAGLTAFMRSIGDTTFRLDRWELELNSAIPGDARDTSSPRAVTE SLQKLTLGSALAAPQRQQFVDWLKGNTTGNHRIRAAVPADWAVGDKTGTCGGYGTANDYAVV WPTGRAPIVLAVYTRAPNKDDKHSEAVIAAAARLALEGLGVNGQ

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.20到SEQ ID No.33 和SEQ ID No.1094到SEQ ID No.1097的肽：

优选地，抗性标记是KPC标记，选自序列为SEQ ID No.20、SEQ ID  No.21、SEQ ID No.23、SEQ ID No.25、SEQ ID No.28、SEQ ID No.29、 SEQ ID No.31、或SEQ ID No.32的肽。

检测一种由GES蛋白的表达引发的抗碳青霉烯和/或头孢菌素的机 制，其特征在于检测至少一种选自GES蛋白及其不同序列变体SEQ ID  No.34到SEQ ID No.50的肽。

SEQ ID No.34

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMGDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.35

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SEQ ID No.36

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SEQ ID No.37

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SEQ ID No.38

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SEQ ID No.39

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SEQ ID No.40

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SEQ ID No.41

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SEQ ID No.42

MRFIHALLLAGTAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRTAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL CDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMGDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.43

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVKWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMNDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.44

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKESEMSDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.45

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMSDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGARNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.46

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAEIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMSDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.47

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVKWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMGDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGARNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.48

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRTAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVKWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMGDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.49

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRTAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVKWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMSDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGTCANGGRNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

SEQ ID No.50

MRFIHALLLAGIAHSAYASEKLTFKTDLEKLEREKAAQIGVAIVDPQGEIVAGHRMAQRFAM CSTFKFPLAALVFERIDSGTERGDRKLSYGPDMIVEWSPATERFLASGHMTVLEAAQAAVQL SDNGATNLLLREIGGPAAMTQYFRKIGDSVSRLDRKEPEMGDNTPGDLRDTTTPIAMARTVA KVLYGGALTSTSTHTIERWLIGNQTGDATLRAGFPKDWVVGEKTGACANGARNDIGFFKAQE RDYAVAVYTTAPKLSAVERDELVASVGQVITQLILSTDK

优选地，所述肽选自定义如下的序列为SEQ ID No.51到SEQ ID No.79 的肽：

在临床意义栏，ESBL和carba条目对应GESβ-内酰胺酶活性，而相应 的肽可以检测该酶活性。因此，检测到carba肽将证明能够水解碳青霉烯的 碳青霉烯酶β-内酰胺酶的存在。

如果没有检测到被称为carba的肽，检测到被称为ESBL的肽将证明能 够超广谱(ESBL)的水解青霉素、诸如头孢菌素Ⅱ和头孢噻吩的第一代头孢 菌素和至少一种来自诸如头孢噻肟、头孢他啶的氧亚氨基β-内酰胺或诸如 氨曲南的单环β-内酰胺类的抗生素的β-内酰胺酶的存在。

检测一种由GES蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于检 测至少一种选自序列为SEQ ID No.51、59、60、61、64、70、73、74、76、 79的抗性标记carba肽。

检测一种由IMP蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于检 测至少一种选自IMP蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.80到SEQ ID  No.105的肽。

SEQ ID No.80:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPSHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.81:

MKKLSVFFMFLFCSIAASGEALPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGASYWLVKKKIEIFYPGPGHTPDNVVVWLPEHRVLFGGCFVKPYGLGNL GDANLEAWPKSAKLLVSKYGKAKLVVPSHSEVGDASLLKRTLEQAVKGLNESKKLSKPSN

SEQ ID No.82:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAEPLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVDAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFGGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNLVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANLEAWPKSAKLLISKYGKAKLVVPSHSEAGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKLSN

SEQ ID No.83:

MKKLFVLCVCFLCSITAAGAALPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYKIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSEIGDASLLKRTWEQAVKGLNESKKPSQPSN

SEQ ID No.84:

MSKLFVFFMFLFCSITAAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNTEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGASYWLVKKKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPENRVLFGGCFVKPYGLGNL GDANVEAWPKSAKLLMSKYGKAKLVVPSHSEVGDASLLKRTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.85:

MSKLFVFFMFLFCSITAAGESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVIPKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTAKDTENLVNWFVERGYRIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKYSFSGVSYWLVKKKIEVFYPGPGHAPDNVVVWLPENRVLFGGCFVKPYGLGNL GDANLEAWPKSAKLLMSKYSKAKLVVPSHSDIGDSSLLKLTWEQTVKGFNESKKSTTAH

SEQ ID No.86:

MKKLFVLCVFFFCNIAVAEESLPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVKGWSVVTKHGLVVLVKNDA YLIDTPITAKDTEKLVNWFVERGYKIKGSISTHFHGDSTAGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDNKVQAKHSFNGVSYSLIKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGYL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSDIGDVSLLKRTWEQAVKGLNESKKSSQPSD

SEQ ID No.87:

MNKLSVFFMFMFCSITAAGESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNTEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGGSYWLVNNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPENRVLFGGCFVKPYGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSETGNASLLKLTWEQAVKGLKESKKPSLPSN

SEQ ID No.88:

MKKLFVLCVFFLCNIAAADDSLPDLKIEKLEKGVYVHTSFEEVKGWGVVTKHGLVVLVKNDA YLIDTPITAKDTEKLVNWFIEHGYRIKGSISTHFHGDSTAGIEWLNSQSISTYASELTNELL KKDNKVQATNSFSGVSYSLIKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSEIGNASLLQRTWEQAVKGLNESKKPLQPSS

SEQ ID No.89:

MKKLFVLCVFLFCSITAAGESLPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVILVNTDA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNDLL KQNGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPYGLGNL DDANVVAWPHSAEILMSRYGNAKLVVPSHSDIGDASLLKLTWEQAVKGLKESKKPSEPSN

SEQ ID No.90:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFKEVNGWGVVPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPSHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.91:

MKKLFVLCVCFLCSITAAGAALPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYKIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYVKAKLVVSSHSEIGDASLLKRTWEQAVKGLNESKKPSQPSN

SEQ ID No.92:

MKKLFVLCVCFLCSITAAGAALPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYKIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSEIGDASLLKRTWEQAVKGLNESRKPSQPSN

SEQ ID No.93:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL SDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPGHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.94:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAEPLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVFPKHGLVVLVDAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFGGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNLVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANLEAWPKSAKLLISKYGKAKLVVPSHSEAGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKLSN

SEQ ID No.95:

MKKLFVLCVFVFCSITVAGETLPNLRVEKLEEGVYVHTSYEEVKGWGVVTKHGLVVLIGADA YLIDTPFTAKDTEKLVNWFVERGYKIKGTVSSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFDGVSYWLAKDKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKEILFGGCFVKPHGLGNL GDANLEAWPESAKILMEKYGKAKLVVSGHSETGDATHLKRTWEQAVKGLKESKKTLQPSN

SEQ ID No.96:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIGWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPGHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.97:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVVPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPGHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.98:

MSKLSVFFIFLFCSIATAAESLPDLKIEKLDEGVYVHTSFEEVNGWGVFPKHGLVVLVNAEA YLIDTPFTAKDTEKLVTWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSRSIPTYASELTNELL KKDGKVQATNSFSGVNYWLVKNKIEVFYPGPGHTPDNVVVWLPERKILFGGCFIKPYGLGNL GDANIEAWPKSAKLLKSKYGKAKLVVPSHSEVGDASLLKLTLEQAVKGLNESKKPSKPSN

SEQ ID No.99:

MKKLFVLCIFLFCSITAAGASLPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTAKDTEKLVNWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASVLTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPKNKILFGGCFVKPYGLGNL DDANVEAWPHSAEKLISKYGNAKLVVPSHSDIGDASLLKLTWEQAVKGLNESKKSNTVH

SEQ ID No.100:

MKKLFVLCVCFLCSITAAGAALPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVFSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYKIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYVKAKLVVSSHSEIGDASLLKRTWEQAVKGLNESKKPSQPSN

SEQ ID No.101:

MKKLFVLCIFLFCSITAAGASLPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVASKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTAKDTEKLVNWFVERGYKIKGSISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASVLTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPKNKILFGGCFVKPYGLGNL DDANVEAWPHSAEKLISKYGNAKLVVPSHSDIGDASLLKLTWEQAVKGLNESKKSNTVH

SEQ ID No.102:

MKKLFVLCVCFLCSITAAGARLPDLKIEKLEEGVYVHTSFEEVNGWGVVSKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYKIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKDGKVQAKNSFSGVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPDGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYVKAKLVVSSHSEIGDASLLKRTWEQAVKGLNESKKPSQPSN

SEQ ID No.103:

MKKLFVLCIFLFLSITASGEVLPDLKIEKLEEGVYLHTSFEEVSGWGVVTKHGLVVLVNNDA YLIDTPFTNKDTEKLVAWFVGRGFTIKGSVSSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKNGKVQATNSFSGVSYWLVKNKIEIFYPGPGHTQDNVVVWLPENKILFGGCFVKPDGLGNL DDANLKAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSGHSEIGNASLLKLTWEQAVKGLKESKKPLLPSN

SEQ ID No.104:

MKKLFVLCVCFFCSITAAGAALPDLKIEKLEEGVFVHTSFEEVNGWGVVTKHGLVVLVNTDA YLIDTPFTATDTEKLVNWFVERGYEIKGTISSHFHSDSTGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKSGKVQAKYSFSEVSYWLVKNKIEVFYPGPGHTQDNLVVWLPESKILFGGCFIKPHGLGNL GDANLEAWPKSAKILMSKYGKAKLVVSSHSEKGDASLMKRTWEQALKGLKESKKTSSPSN

SEQ ID No.105:

MKKLFVLCIFLFCSITAAGESLPDLKIEKLEDGVYVHTSFEEVNGWGVVTKHGLVFLVNTDA YLIDTPFAAKDTEKLVNWFVERGYKIKGSISSHFHSDSSGGIEWLNSQSIPTYASELTNELL KKNGKVQAKNSFSGVSYWLLKNKIEIFYPGPGHTQDNVVVWLPEKKILFGGCFVKPYGLGNL DDANVEAWPHSAEILMSRYGNAKLVVPSHSDVGDASLLKLTWEQAVKGLKESKKPSQPSN

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.106、SEQ ID No.108 到SEQ ID No.130、SEQ ID No.133到SEQ ID No.173、SEQ ID No.175到 SEQ ID No.180的肽：

检测一种由IND蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于检 测至少一种选自IND蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.181到SEQ ID  No.187的肽。

SEQ ID No.181:

MKKSIRFFIVSILLSPFASAQVKDFVIEPPIKNNLHIYKTFGVFGGKEYSANSMYLVTKKGV VLFDVPWEKIQYQSLMDTIKKRHNLPVVAVFATHSHDDRAGDLSFFNNKGIKTYATAKTNEF LKKDGKATSTEIIKTGKPYRIGGEEFVVDFLGEGHTADNVVVWFPKYNVLDGGCLVKSNSAT DLGYIKEANVEQWPKTINKLKAKYSKATLIIPGHDEWKGGGHVEHTLELLNKK

SEQ ID No.182:

MKKSIQLLMMSMFLSPLINAQVKDFVIEPPVKPNLYLYKSFGVFGGKEYSANAVYLTTKKGV VLFDVPWQKEQYQTLMDTIQKRHHLPVIAVFATHSHDDRAGDLSFYNQKGIKTYATAKTNEL LKKDGKATSTEIIKTGKPYKIGGEEFMVDFLGEGHTVDNVVVWFPKYKVLDGGCLVKSRTAT DLGYTGEANVKQWPETMRKLKTKYAQATLVIPGHDEWKGGGHVQHTLDLLDKNKKPE

SEQ ID No.183:

MKKSIQLLMMSMFLSPLINAQVKDFVIEPPVKPNLYLYKSFGVFGGKEYSANAVYLTTKKGV VLFDVPWQKEQYQTLMDTIQKRHHLPVIAVFATHSHDDRAGDLSFYNQKGIKTYATAKTNEL LKKDGKATSTEIIKTGKPYKIGGEEFMVDFLGEGHTVDNVVVWFPKYKVLDGGCLVKSRTAT DLGYTGEANVKQWPETMRKLKTKYAQATLVIPGHEEWKGGGHVQHTLDLLDKNKKPE

SEQ ID No.184:

MKKRIQFFMVSMMLSSLFSAQVKDFVIEPPIKKNLHIYKTFGVFGGKEYSANSVYLVTQKGV VLFDVPWEKVQYQSLMDTIQKRHNLPVIAVFATHSHDDRAGDLSFFNNKGIKTYATSKTNEF LKKDGKATSTEIIKTGKPYRIGGEEFVVDFLGEGHTADNVVVWFPKYNVLDGGCLVKSKAAT DLGYIKEANVEQWPKTINKLKSKYSKASLVIPGHDEWKGGGHVKHTLELLNKK

SEQ ID No.185:

MRKNVRIFTVLSLFLINFFNAQARDFVIEQPFGKQLYLYKTFGVFDGKEYSTNALYLVTKKG VVLFDVPWQKTQYQSLMDTIKKRHNLPVIAVFATHSHSDRAGDLSFYNKKGIPTYATAKTNE LLKKEGKATSSKLTKIGKKYKIGGEEFTVDFLGEGHTADNVVVWFPKYNVLDGGCLVKSSAA VDLGYTGEANVEQWPATMKKLQAKYPSTAKVIPGHDEWKGNDHVKHTLELLDQQKQ

SEQ ID No.186:

MKKRIQFFMVSMMLAPMFNAQVKDFVIEPPIKNNLHIYKTFGVFGGKEYSANSVYLVTKKGV VLFDVPWEKAQYQSLMDTIKKRHNLPVIAVFATHSHDDRAGDLSFFNNKGIKTYATSKTNEF LKKDGKATSTEIIKTGKPYRIGGEEFTVDFLGEGHTADNVVVWFPKYNVLDGGCLVKSNSAT DLGYIKEANVEQWPITIDKLKAKYSKATLIIPGHDDWKGGGHVEHTLELLNKK

SEQ ID No.187:

MKRRIQFFMVSMMLTPLFSAQVKDFVIEPPIKKNLYIYKTFGVFGGKEYSANSVYLVTKTGV VLFDVPWEKAQYQSLMDTIKKRHNLPVVAVFATHSHDDRAGDLSFFNNKGIKTYATPKTNQF LKRDGKATSTELIKPGKPYRFGGEEFVVDFLGEGHTADNVVVWFPKYKVLDGGCLVKSNSAT DLGYIKEANLEQWPKTMHKLKTKYSEAVLIIPGHDEWKGGGHVEHTLELLDKK

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.188到SEQ ID  No.197、SEQ ID No.200、SEQ ID No.201、SEQ ID No.203到SEQ ID No.262 的肽：

检测一种由SME蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于检 测至少一种选自SME蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.263到SEQ ID 

No.265的肽。

SEQ ID No263:

MSNKVNFKTASFLFSVCLALSAFNAHANKSDAAAKQIKKLEEDFDGRIGVFAIDTGSGNTFG YRSDERFPLCSSFKGFLAAAVLERVQQKKLDINQKVKYESRDLEYHSPITTKYKGSGMTLGD MASAALQYSDNGATNIIMERFLGGPEGMTKFMRSIGDNEFRLDRWELELNTAIPGDKRDTST PKAVANSLNKLALGNVLNAKEKAIYQNWLKGNTTGDARIRASVPADWVVGDKTGSCGAYGTA NDYAVIWPKNRAPLIVSIYTTRKSKDDKHSDKTIAEASRIAIQAID

SEQ ID No.264:

MSNKVNFKTASFLFSVCLALSAFNAHANKSDAAAKQIKKLEEDFDGRIGVFAIDTGSGNTFG YRSDERFPLCSSFKGFLAAAVLERVQQKKLDINQKVKYESRDLEYYSPITTKYKGSGMTLGD MASAALQYSDNGATNIIMERFLGGPEGMTKFMRSIGDNEFRLDRWELELNTAIPGDKRDTST PKAVANSLNKLALGNVLNAKVKAIYQNWLKGNTTGDARIRASVPADWVVGDKTGSCGAYGTA NDYAVIWPKNRAPLIVSIYTTRKSKDDKHSDKTIAEASRIAIQAID

SEQ ID No.265:

MSNKVNFKTASFLFSVCLALSAFNAHANKSDAAAKQIKKLEEDFDGRIGVFAIDTGSGNTFG YRSDERFPLCSSFKGFLAAAVLERVQQKKLDINQKVKYESRDLEYHSPITTKYKGSGMTLGD MASAALQYSDNGATNIIMERFLGGPEGMTKFMRSIGDNEFRLDRWELELNTAIPGDKRDTST PKAVANSLNKLALGNVLNAKVKAIYQNWLKGNTTGDARIRASVPADWVVGDKTGSCGAIGTA NDYAVIWPKNRAPLIVSIYTTRKSKDDKHSDKTIAEASRIAIQAID

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.266到SEQ ID  No.287的肽：

检测一种由VIM蛋白的表达引发的抗碳青霉烯的机制，其特征在于检 测至少一种选自VIM蛋白及其不同序列变体SEQ ID No.288到SEQ ID  No.313的肽。

SEQ ID No.288:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.289:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATKSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGSEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.290:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVHELSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.291:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRKAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVLALSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVTAHKNRSVAE

SEQ ID No.292:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATRSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGSEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.293:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSARRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.294:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSIRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.295:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQYVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.296:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGSEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.297:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSSEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVHELSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.298:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVHELSSTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.299:

MLKVISSLLFYMTASLMAVASPLAHSGESRGEYPTVSEIPVGEVRLYQIDDGVWSHIATHTF DGVVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGTKNTVALLAEIEKQIGLPVTRSVSTHFHDDRVGGVD ALRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEVPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVLELSRTSAGNVADADLAEWPGSVERIQQHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHTNRSVAE

SEQ ID No.300:

MFKLLSKLLVYLTASMMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.301:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLFGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.302:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWLHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.303:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSSTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.304:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSAKVLYGGCAVHELSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.305:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSLTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.306:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRKAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVLALSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.307:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHISTQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVHELSSTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.308:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVLELSRTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.309:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEVEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDL LKHTTNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.310:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVHELSSTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

SEQ ID No.311:

MFQIRSFLVGISAFVMAVLGSAAYSAQPGGEYPTVDDIPVGEVRLYKIGDGVWSHIATQKLG DTVYSSNGLIVRDADELLLIDTAWGAKNTVALLAEIEKQIGLPVTRSISTHFHDDRVGGVDV LRAAGVATYTSPLTRQLAEAAGNEVPAHSLKALSSSGDVVRFGPVEVFYPGAAHSGDNLVVY VPAVRVLFGGCAVHEASRESAGNVADANLAEWPATIKRIQQRYPEAEVVIPGHGLPGGLELL QHTTNVVKTHKVRPVAE

SEQ ID No.312:

MFKLLSKLLVYLTASIMAIASPLAFSVDSSGEYPTVSEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATRSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLANEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVVYVPS ASVLYGGCAIYELSRTSAGNVADADLAEWPTSIERIQQHYPEAQFVIPGHGLPGGLDLLKHT TNVVKAHTNRSVVE

SEQ ID No.313:

MLKVISSLLVYMTASVMAVASPLAHSGEPSGEYPTVNEIPVGEVRLYQIADGVWSHIATQSF DGAVYPSNGLIVRDGDELLLIDTAWGAKNTAALLAEIEKQIGLPVTRAVSTHFHDDRVGGVD VLRAAGVATYASPSTRRLAEAEGNEIPTHSLEGLSSSGDAVRFGPVELFYPGAAHSTDNLVV YVPSANVLYGGCAVLELSSTSAGNVADADLAEWPTSVERIQKHYPEAEVVIPGHGLPGGLDL LQHTANVVKAHKNRSVAE

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.314到SEQ ID  No.346的肽：

检测一种由OXA蛋白的表达引发的抗碳青霉烯和/或头孢菌素的机 制，其特征在于检测至少一种选自OXA蛋白及其不同序列变体SEQ ID  No.347到SEQ ID No.508的肽。

SEQ ID No.347:

MSRLLLSGLLATGLLCAVPASAASGCFLYADGNGQTLSSEGDCSSQLPPASTFKIPLALMGY DSGFLVNEEHPALPYKPSYDGWLPAWRETTTPRRWETYSVVWFSQQITEWLGMERFQQYVDR FDYGNRDLSGNPGKHDGLTQAWLSSSLAISPEEQARFLGKMVSGKLPVSAQTLQYTANILKV SEVEGWQIHGKTGMGYPKKLDGSLNRDQQIGWFVGWASKPGKQLIFVHTVVQKPGKQFASIK AKEEVLAALPAQLKKL

SEQ ID No.348:

IACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKEYLPASTFKI PNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIAREVGEVRMQ KYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQLIVKEALVTE AAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLPLRKSIPTKI MESEGIIGG

SEQ ID No.349:

MKKILLLHMLVFVSATLPISSVASDEVETLKCTIIADAITGNTLYETGECARRVSPCSSFKL PLAIMGFDSGILQSPKSPTWELKPEYNPSPRDRTYKQVYPALWQSDSVVWFSQQLTSRLGVD RFTEYVKKFEYGNQDVSGDSGKHNGLTQSWLMSSLTISPKEQIQFLLRFVAHKLPVSEAAYD MAYATIPQYQAAEGWAVHGKSGSGWLRDNNGKINESRPQGWFVGWAEKNGRQVVFARLEIGK EKSDIPGGSKAREDILVELPVLMGNK

SEQ ID No.350:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNAGPSTSNGDYWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.351:

MQRSLSMSGKRHFIFAVSFVISTVCLTFSPANAAQKLSCTLVIDEASGDLLHREGSCDKAFA PMSTFKLPLAIMGYDADILLDATTPRWDYKPEFNGYKSQQKPTDPTIWLKDSIVWYSQELTR RLGESRFSDYVQRFDYGNKDVSGDPGKHNGLTHAWLASSLKISPEEQVRFLRRFLRGELPVS EDALEMTKAVVPHFEAGDWDVQGKTGTGSLSDAKGGKAPIGWFIGWATRDDRRVVFARLTVG ARKGEQPAGPAARDEFLNTLPALSENF

SEQ ID No.352:

MKTFAAYVIIACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLP LRKSIPTKIMESEGIIGG

SEQ ID No.353:

IACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKEYLPASTFKI PNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQITREVGEVRMQ KYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQLIVKEALVTE AAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLPLRKSIPTKI MESEGIIGG

SEQ ID No.354:

IACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKEYLPASTFKI PSAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIAREVGEVRMQ KYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQLIVKEALVTE AAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLPLRKSIPTKI MESEGIIGG

SEQ ID No.355:

MIIRFLALLFSAVVLVSLGHAQEKTHESSNWGKYFSDFNAKGTIVVVDERTNGNSTSVYNES RAQQRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFHVFRWDGAKRSFAGHNQDQNLRSAMRNSTVWV YQLFAKEIGENKARSYLEKLNYGNADPSTKSGDYWIDGNLAISANEQISILKKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAKRDWILRAKTGWDGQMGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRMEDLHK REAIARAILQSVNALPPN

SEQ ID No.356:

MAIRIFAILFSTFVFGTFAHAQEGMRERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQTDRVILVFDQV RSEKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAARDEFQVFRWDGIKRSFAAHNQDQDLRSAMRNSTVWI YELFAKEIGEDKARRYLKQIDYGNADPSTSNGDYWIDGNLAIAAQEQIAFLRKLYHNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRIGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.357:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPSAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.358:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.359:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFGLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.360:

MKNTIHINFAIFLIIANIIYSSASASTDISTVASPLFEGTEGCFLLYDASTNAEIAQFNKAK CATQMAPDSTFKIALSLMAFDAEIIDQKTIFKWDKTPKGMEIWNSNHTPKTWMQFSVVWVSQ EITQKIGLNKIKNYLKDFDYGNQDFSGDKERNNGLTEAWLESSLKISPEEQIQFLRKIINHN LPVKNSAIENTIENMYLQDLDNSTKLYGKTGAGFTANRTLQNGWFEGFIISKSGHKYVFVSA LTGNLGSNLTSSIKAKKNAITILNTLNL

SEQ ID No.361:

ANIIYSSASASTDISTVASPLFEGTEGCFLLYDVSTNAEIAQFNKAKCATQMAPDSTFKIAL SLMAFDAEIIDQKTIFKWDKTPKGMEIWNSNHTPKTWMQFSVVWVSQEITQKIGLNKIKNYL KDFDYGNQDFSGDKERNNGLTEAWLESSLKISPEEQIQFLRKIINHNLPVKNSAIENTIENM YLQDLENSTKLYGKTGAGFTANRTLQNGWFEGFIISKSGHKYVFVSALTGNLGSNLTSSIKA KKNAITIL

SEQ ID No.362:

IFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPVRSKKRYSPAST FKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWVYELFAKEIGDD KARRYLKKIDYGNAYPSTSNGDYWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFRVEHQRLVKDLM IVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFKREAIVRAIL

SEQ ID No.363:

MIIRFLALLFSAVVLVSLGHAQDKTHESSNWGKYFSDFNAKGTIVVVDERTNGNSTSVYNES RAQQRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFHVFRWDGAKRSFAGHNQDQNLRSAMRNSTVWV YQLFAKEIGENKARSYLEKLNYGNADPSTKSGDYWIDGNLAISANEQISILKKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAKRDWILRAKTGWDGQMGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRMEDLHK REAIARAILQSVNALPPN

SEQ ID No.364:

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVEKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMGVTPQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMSGSIRNEITYKLLENLGII

SEQ ID No.365:

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMGVTPQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMTGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.366:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKADINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALKM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.367:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNADPSTSNGDYCIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAIL

SEQ ID No.368:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.369:

MAIRFLTILLSTFFLTSFVHAQEHVLERSDWKKFFSDLRAEGAIVISDERQAEHALLVFGQE RAAKRYSPASTFKLPHTLFALDADAVRDEFQVFRWDGVKRSFAGHNQDQDLRSAMRNSAVWV YELFAKEIGKDKARHYLKQIDYGNADPSTIKGDYWIDGNLEISAHEQISFLRKLYRNQLPFQ VEHQRLVKDLMITEAGRNWILRAKTGWEGRFGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRTDDLFK REAIARAILRSIDALPPN

SEQ ID No.370:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNADPSTSNGDYWIEGSIAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.371:

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMGVTPQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMSGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.372:

MAIRFLTILLSTFFLTSFVHAQEHVLERSDWKKFFSDLRAEGAIVISDERQAEHALLVFGQE RAAKRYSPASTFKLPHTLFALDADAVRDEFQVFRWDGVKRSFAGHNQDQDLRSAMRNSAVWV YELFAKEIGEDKARRYLKQIDYGNADPSTIKGDYWIDGNLEISAHEQISFLRKLYRNQLPFQ VEHQRLVKDLMITEAGRNWILRAKTGWEGRFGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRTDDLFK REAIARAILRSIDALPPN

SEQ ID No.373:

MAIRFFTILLSTFFLTSFVYAQEHVVIRSDWKKFFSDLQAEGAIVIADERQAKHTLSVFDQE RAAKRYSPASTFKIPHTLFALDADAVRDEFQVFRWDGVNRSFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKDIGEDKARRYLKQIDYGNVDPSTIKGDYWIDGNLKISAHEQILFLRKLYRNQLPFK VEHQRLVKDLMITEAGRSWILRAKTGWEGRFGWWVGWIEWPTGPVFFALNIDTPNRTDDLFK REAIARAILRSIDALPPN

SEQ ID No.374:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVERIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALN MEMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.375:

MAIQIFAILFSTFVLATFAHAQDGTLERSDWGKFFSDFQAKGTIVVADERQADHAILVFDQA RSMKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVKRSFAGHNKDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDGKARRYLKQIGYGNADPSTSHGDYWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYQNDLPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGSMGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIARAILLSIEALPPNPAVHSDAAR

SEQ ID No.376:

MKNTIHINFAIFLIIANIIYSSASASTDISTVASQLFEGTEGCFLLYDASTNAEIAQFNKAK CAAQMAPDSTFKIALSLMAFDAEIIDQKTIFKWDKIPKGMEIWNSNHTPKTWMQFSVVWVSQ EITQKIGLNKIKNYLKDFDYGNQDFSGDKERNNGLTEAWLESSLKISPEEQIQFLRKIINHN LPVRNSAIENTIDNMYLQDLENSTKLYGKTGAGFTANRTLQNGWFEGFIISKSGHKYVFVSA LTGSLGSNLTSSIKAKKNAITILNTLNL

SEQ ID No.377:

MLLFMFSIISFGNENQFMKEIFERKGLNGTFVVYDLKNDKIDYYNLDRANERFYPASSFKIF NTLIGLENGIVKNVDEMFYYYDGSKVFLDSWAKDSNLRYAIKVSQVPAYKKLARELGKERMQ EGLNKLNYGNKEIGSEIDKFWLEGPLKISAMEQVKLLNLLSQSKLPFKLENQEQVKDITILE KKDDFILHGKTGWATDNIVVPIGWFVGWIETSDNIYSFAINLDISDSKFLPKREEIVREYFK NINVIK

SEQ ID No.378:

MRVLALSAVFLVASIIGMPAVAKEWQENKSWNAHFTEHKSQGVVVLWNENKQQGFTNNLKRA NQAFLPASTFKIPNSLIALDLGVVKDEHQVFKWDGQTRDIATWNRDHNLITAMKYSVVPVYQ EFARQIGEARMSKMLHAFDYGNEDISGNVDSFWLDGGIRISATEQISFLRKLYHNKLHVSER SQRIVKQAMLTEANGDYIIRAKTGYSTRIEPKIGWWVGWVELDDNVWFFAMNMDMPTSDGLG LRQAITKEVLKQEKIIP

SEQ ID No.379:

MLSRYSKTLAFAVVACTLAISTATAHAELVVRNDLKRVFDDAGVSGTFVLMDITADRTYVVD PARAARSIHPASTFKIPNSLIAFDTGAVRDDQEVLPYGGKPQPYEQWEHDMALPEAIRLSAV PIYQEVARRVGFERMQAYVDAFDYGNRQLGSAIDQFWLRGPLEISAFEEARFTSRMALKQLP VKPRTWDMVQRMLLIEQQGDAALYAKTGVATEYQPEIGWWAGWVERAGHVYAFALNIDMPRE GDMAKRIPLGKQLMRALEVWPAP

SEQ ID No.380:

MRPLLFSALLLLSGHTQASEWNDSQAVDKLFGAAGVKGTFVLYDVQRQRYVGHDRERAETRF VPASTYKVANSLIGLSTGAVRSADEVLPYGGKPQRFKAWEHDMSLRDAIKASNVPVYQELAR RIGLERMRANVSRLGYGNAEIGQVVDNFWLVGPLKISAMEQTRFLLRLAQGELPFPAPVQST VRAMTLLESGPGWELHGKTGWCFDCTPELGWWVGWVKRNERLYGFALNIDMPGGEADIGKRV ELGKASLKALGILP

SEQ ID No.381:

MNKGLHRKRLSKRLLLPMLLCLLAQQTQAVAAEQTKVSDVCSEVTAEGWQEVRRWDKLFESA GVKGSLLLWDQKRSLGLSNNLSRAAEGFIPASTFKLPSSLIALETGAVRDETSRFSWDGKVR EIAVWNRDQSFRTAMKYSVVPVYQQLAREIGPKVMAAMVRQLEYGNQDIGGQADSFWLDGQL RITAFQQVDFLRQLHDNKLPVSERSQRIVKQMMLTEASTDYIIRAKTGYGVRRTPAIGWWVG WLELDDNTVYFAVNLDLASASQLPLRQQLVKQVLKQEQLLP

SEQ ID No.382:

MNTIISRRWRAGLWRRLVGAVVLPATLAATPAAYAADVPKAALGRITERADWGKLFAAEGVK GTIVVLDARTQTYQAYDAARAEKRMSPASTYKIFNSLLALDSGALDNERAIIPWDGKPRRIK NWNAAMDLRTAFRVSCLPCYQVVSHKIGRRYAQAKLNEVGYGNRTIGGAPDAYWVDDSLQIS AREQVDFVQRLARGTLPFSARSQDIVRQMSIVEATPDYVLHGKTGWFVDKKPDIGWWVGWIE RDGNITSVAINIDMLSEADAPKRARIVKAVLKDLKLI

SEQ ID No.383:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTFWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQIFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGAEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.384:

MRVLALSAVLVVASIVGMPAMANEWQEKPSWNTHFSEHKAQGVIVLWNENKQQGFTNNLKRA NQAFLPASTFKIPNSLIALDLGVVKDEHQVFKWDGQTRDIAAWNRDHDLITAMKYSVVPVYQ EFARQIGQARMSKMLHAFDYGNEDISGNLDSFWLDGGIRISATEQVAFLRKLYHNKLHVSER SQRIVKQAMLTEANSDYIIRAKTGYSTRIEPQIGWWVGWVELDDNVWFFAMNMDMPTADGLG LRQAITKEVLKQEKIIP

SEQ ID No.385:

MKKITLFLLFLNLVFGQDKILNNWFKEYNTSGTFVFYDGKTWASNDFSRAMETFSPASTFKI FNALIALDSGVIKTKKEIFYHYRGEKVFLSSWAQDMNLSSAIKYSNVLAFKEVARRIGIKTM QEYLNKLHYGNAKISKIDTFWLDNSLKISAKEQAILLFRLSQNSLPFSQEAMNSVKEMIYLK NMENLELFGKTGFNDGQKIAWIVGFVYLKDENKYKAFALNLDIDKFEDLYKREKILEKYLDE LVKKVKNDG

SEQ ID No.386:

MSKKNFILIFIFVILISCKNTEKISNETTLIDNIFTNSNAEGTLVIYNLNDDKYIIHNKERA EQRFYPASTFKIYNSLIGLNEKAVKDVDEVFYKLMAKSFLESWAKDSNLRYAIKNSQVPAYK ELARRIGIKKMKENIEKLDFGNKSIGDSVDTFWLEGPLEISAMEQVKLLTKLAQNELQYPIE IQKAISDITITRANLHITLHGKTGLADSKNMTTEPIGWFVGWLEENDNIYVFALNIDNINSD DLAKRINIVKESLKALNLLK

SEQ ID No.387:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALKM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.388:

MNIQALLLITSAIFISACSPYIVTANPNYSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRIGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGISSSVRKEITYRGLEQLGIL

SEQ ID No.389:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKGEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.390:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.391:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.392:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQEVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.393:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGEKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.394:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDKKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWNGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQHEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.395:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKTTTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.396:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTAVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGTPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.397:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLPRRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.398:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEKLGIL

SEQ ID No.399:

MNIKTLLLITSTIFISACSPYIVTANPNHSTSKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASIEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEIFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSLKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.400:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAISVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLAGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.401:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASALPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.402:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGEKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGSVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.403:

MNIKTLLLITSTIFISACSPYIVTANPNHSTSKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASIEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEIFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSLKAQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.404:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDKKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.405:

MNIKTLLLITSAIFISACSHYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFTYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.406:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.407:

MNIKALLLITSTIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALISLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.408:

MNIQALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPHGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.409:

MNIKALFLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.410:

MKLLKILSLVCLSISIGACAEHSMSRAKTSTIPQVNNSIIDQNVQALFNEISADAVFVTYDG QNIKKYGTHLDRAKTAYIPASTFKIANALIGLENHKATSTEIFKWDGKPRFFKAWDKDFTLG EAMQASTVPVYQELARRIGPSLMQSELQRIGYGNMQMGTEVDQFWLKGPLTITPIQEVKFVY DLAQGQLPFKPEVQQQVKEMLYVERRGENRLYAKSGWGMAVDPQVGWYVGFVEKADGQVVAF ALNMQMKAGDDIALRKQLSLDVLDKLGVFHYL

SEQ ID No.411:

MNIKALLLITSTIFISACSPYIVTANPNHSTSKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEIFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSLKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.412:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIRQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEMNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.413:

MKLLKILSLVCLSISIGACAEHSMSRAKTSTIPQVNNSIIDQNVQALFNEISGDAVFVTYDG QNIKKYGTHLDRAKTAYIPASTFKIANALIGLENHKATSTEIFKWDGKPRFFKAWDKDFTLG EAMQASTVPVYQELARRIGPSLMQSELQRIGYGNMQIGTEVDQFWLKGPLTITPIQEVKFVY DLAQGQLPFKPEVQQQVKEMLYVERRGENRLYAKSGWGMAVDPQVGWYVGFVEKADGQVVAF ALNMQMKAGDDIALRKQLSLDVLDKLGVFHYL

SEQ ID No.414:

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMDVTPQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMSGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.415:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNADPSTSNGDYWIESSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.416:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.417:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAILVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.418:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDKKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWNGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.419:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGEKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.420:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTTNPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNTDIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.421:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIQVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.422:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGEKRLFPEWEKNMTLGDAM KASALPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.423:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEMNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.424:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGEKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFPLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.425:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGGDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.426:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAILVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.427:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.428:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKTTTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.429:

MSKKNFILIFIFVILISCKNTEKISNETTLIDNIFTNSNAEGTLVIYNLNDDKYIIHNKERA EQRFYPASTFKIYNSLIGLNEKAVKDVDEVFYKYNGEKVFLESWAKDSNLRYAIKNSQVPAY KELARRIGLKKMKENIEKLDFGNKSIGDSVDTFWLEGPLEISAMEQVKLLTKLAQNELPYPI EIQKAVSDITILEQTYNYTLHGKTGLADSKNMTTEPIGWFVGWLEENDNIYVFALNIDNINS DDLAKRINIVKESLKALNLLK

SEQ ID No.430:

MSKKNFILIFIFVILTSCKNTEKISNETTLIDNIFTNSNAEGTLVIYNLNDDKYIIHNKERA EQRFYPASTFKIYNSLIGLNEKAVKDVDEVFYKYNGEKVFLESWAKDSNLRYAIKNSQVPAY KELARRIGLKKMKENIEKLDFGNKSIGDSVDTFWLEGPLEISAMEQIKLLTKLAQNELPYPI EIQKAVSDITILEQTYNYTLHGKTGLADSKNMTTEPIGWFVGWLEENDNIYVFALNIDNINS DDLAKRINIVKESLKALNLLK

SEQ ID No.431:

LLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQQSYGND LARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAMKASAIP VYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLANKTLPF SQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLNLEMKKG IPSSVRKEITYKSL

SEQ ID No.432:

LLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQQSYGND LARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAMKASAIP VYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLANKTLPF SQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTEWVVQPQGNIVAFSLNLEMKKG IPSSVRKEITYKSL

SEQ ID No.433:

MTVRRLSCALGAALSLSALGGGPVQAAVLCTVVADAADGRILFQQGTQQACAERYTPASTFK LAIALMGADAGILQGPHEPVWNYQPAYPDWGGDAWRQPTDPARWIKYSVVWYSQLTAKALGQ DRFQRYTSAFGYGNADVSGEPGKHNGTDGAWIISSLRISPLEQLAFLRKLVNRQLPVKAAAY ELAENLFEAGQADGWRLYGKTGTGSPGSNGVYTAANAYGWFVGWARKDGRQLVYARLLQDER ATRPNAGLRARDELVRDWPAMAGAWRP

SEQ ID No.434:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNVLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQEVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.435:

MKTFAAYVIIACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKE YLPASTFKIPSAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLP LRKSIPTKIMESEGIIGG

SEQ ID No.436:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.437:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTTNPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNTDIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.438:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAVPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNQQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.439:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEMTYKSLEQLGIL

SEQ ID No.440:

MNKYFTCYVVASLFFSGCTVQHNLINETQSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTTWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVERIDFGNAEIGQQVDNFWLIGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEENNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.441:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALN MEMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.442:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFLLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.443:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGDADPSTSNGDYWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.444:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDKKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKASTTEVFKWNGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVKSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.445:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKHVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.446:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKHVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.447:

MKKFILPILSISTLLSVSACSSIQTKFEDTFHTSNQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKKGKN ISTYGNNLTRAHTEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTTEIFKWDGKKRSYPMWEKDMTLGDA MALSAVPVYQELARRTGLDLMQKEVKRVGFGNMNIGTQVDNFWLVGPLKITPIQEVNFADDF ANNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEFNGSKIYAKSGWGMDVTPQVGWLTGWVEKSNGEKVAFSL NIEMKQGMPGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.448:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQEVQDEVQSILFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.449:

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMGVTSQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMSGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.450:

MRVLALSAVFLVASIIGMPAVAKEWQENKSWNAHFTEHKSQGVVVLWNENKQQGFTNNLKRA NQAFLPASTFKIPNSLIALDLGVVKDEHQVFKWDGQTRDIATWNRDHNLITAMKYSVVPVYQ EFARQIGEARMSKMLHAFDYGNEDISGNVDSFWLDGGIRISATEQISFLRKLYHNKLHVSER SQRIVKQAMLTEANGDYIIRAKTGYSARIEPKIGWWVGWVELDDNVWFFAMNMDMPTSDGLG LRQAITKEVLKQEKIIP

SEQ ID No.451:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAVPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGLDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.452:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAVPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGLDVNLQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.453:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEKLGIL

SEQ ID No.454:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIRNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.455:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDSKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.456:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDGVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.457:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDSKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAILVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.458:

MKLLKILSLVCLSISIGACAEHSMSRAKTSTIPQVNNSIIDQNVQALFNEISADAVFVTYDG QNIKKYGTHLDRAKTAYIPASTFKIANALIGLENHKATSTEIFKWDGKPRFLKAWDKDFTLG EAMQASTVPVYQELARRIGPSLMQSELQRIGYGNMQIGTEVDQFWLKGPLTITPIQEVKFVY DLAQGQLPFKPEVQQQVKEMLYVERRGENRLYAKSGWGMAVDPQVGWYVGFVEKADGQVVAF ALNMQMKAGDDIALRKQLSLDVLDKLGVFHYL

SEQ ID No.459:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDVKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.460:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGALVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.461:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELMMKSLKQLNII

SEQ ID No.462:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLAGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.463:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDERNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.464:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEKSNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.465:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASTRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.466:

MKKFILPIFSISILLSLSACSSIQTKFEDTFHISNQKHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN ISSYGNNLVRAHTEYVPASTFKMLNALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRSYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQDLARRIGLNLMQKEVKRVGFGNMNIGTQVDNFWLIGPLKITPIQEVNFADDL ANNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMDVSPQVGWLTGWVEKSNGEKVSFSL NIEMKQGMSGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.467:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIAVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.468:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAI KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.469:

MKILIFLPLLSCLGLTACSLPVSSLPSQSISTQAIASLFDQAQSSGVLVIQRDQQVQVYGND LNRANTEYVPASTFKMLNALIGLQHGKATTNEIFKWDGKKRSFTAWEKDMTLGQAMQASAVP VYQELARRIGLELMQQEVQRIQFGNQQIGQQVDNFWLVGPLKVTPKQEVQFVSALAREQLAF DPQVQQQVKAMLFLQERKAYRLYVKSGWGMDVEPQVGWLTGWVETPQAEIVAFSLNMQMQNG IDPAIRLEILQQALAELGLYPKAEG

SEQ ID No.470:

MHKHMSKLFIAFLAFLLSVPAAAEDQTLAELFAQQGIDGTIVISSLHNGKTFIHNDPRAKQR FSTASTFKILNTLISLEEKAISGKDDVLKWDGHIYDFPDWNRDQTLESAFKVSCVWCYQALA RQVGAEKYRNYLRKSVYGELREPFEETTFWLDGSLQISAIEQVNFLKKVHLRTLPFSASSYE TLRQIMLIEQTPAFTLRAKTGWATRVKPQVGWYVGHVETPTDVWFFATNIEVRDEKDLPLRQ KLTRKALQAKGIIE

SEQ ID No.471:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGTDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.472:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAILVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGLDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.473:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIQVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.474:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAMPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.475:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.476:

MRVLALSAVFLVASIIGMPAVAKEWQENKSWNAHFTEHKSQGVVVLWNENKQQGFTNNLKRA NQAFLPASTFKIPNSLIALDLGVVKDEHQVFKWDGQTRDIATWNRDHNLITAMKYSVVPVYQ EFARQIGEARMSKMLHAFDYGNEDISGNVDSFWLDGGIRISATEQISFLRKLYHNKLHVSER SQRIVKQAMLTEANGDYIIRAKTGYDTKIGWWVGWVELDDNVWFFAMNMDMPTSDGLGLRQA ITKEVLKQEKIIP

SEQ ID No.477:

MSKKNFILIFIFVILISCKNTEKTSNETTLIDNIFTNSNAEGTLVIYNLNDDKYIIHNKERA EQRFYPASTFKIYNSLIGLNEKAVKDVDEVFYKYNGEKVFLESWAKDSNLRYAIKNSQVPAY KELARRIGLEKMKENIEKLDFGNKNIGDSVDTFWLEGPLEISAMEQVKLLTKLAQNELPYPI EIQKAVSDITILEQTDNYTLHGKTGLADSENMTTEPIGWLVGWLEENNNIYVFALNIDNINS DDLAKRINIVKESLKALNLLK

SEQ ID No.478:

MNIKALFLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.479:

MNIKALFLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPSSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKMYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.480:

MNIKALFLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEIAYKSLEQLGIL

SEQ ID No.481:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNADPSTSNGDCWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.482:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWVVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.483:

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEYHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.484:

MAIRFLTILLSTFFLTSFVHAQEHVVVRSDWKKFFSDLQAEGAIVIADERQAEHALLVFGQE RAAKRYSPASTFKLPHTLFALDAGAVRDEFQVFRWDGVKRSFAGHNQDQDLRSAMRNSAVWV YELFAKEIGEDNARRYLKQIDYGNADPSTIKGNYWIDGNLEISAHEQISFLRKLYRNQLPFQ VEHQRLVKYLMITEAGRNWILRAKTGWEGRFGWWIGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRTDDLFK REAIARAILRSIDALPPN

SEQ ID No.485:

MRVLALSAVFLVASIIGMPAVAKEWQENKSWNAHFTEHKSQGVVVLWNENKQQGFTNNLKRA NQAFLPASTFKIPNSLIALDLGVVKDEHQVFKWDGQTRDIAAWNRDHDLITAMKYSVVPVYQ EFARQIGEARMSKMLHAFDYGNEDISGNVDSFWLDGGIRISATQQIAFLRKLYHNKLHVSER SQRIVKQAMLTEANGDYIIRAKTGYSTRIEPKIGWWVGWVELDDNVWFFAMNMDMPTSDGLG LRQAITKEVLKQEKIIP

SEQ ID No.486:

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKSQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.487:

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDVKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAISVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.488:

MAIRIFAILFSIFSLATFAHAQEGTLERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQADRAMLVFDPV RSKKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAVRDEFQIFRWDGVNRGFAGHNQDQDLRSAMRNSTVWV YELFAKEIGDDKARRYLKKIDYGNADPSTSNGDYWIEGSLAISAQEQIAFLRKLYRNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGSVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.489:

MKTIAAYLVLVFYASTALSESISENLAWNKEFSSESVHGVFVLCKSSSNSCTTNNAARASTA YIPASTFKIPNALIGLETGAIKDERQVFKWDGKPRAMKQWEKDLKLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEIRMQKYLNLFSYGNANIGGGIDKFWLEGQLRISAFNQVKFLESLYLNNLPASKANQL IVKEAIVTEATPEYIVHSKTGYSGVGTESSPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNESKLP SRKSISTKIMASEGIIIGG

SEQ ID No.490:

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTFWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKLACATNNLARASK EYLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQIFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQI AREVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQ LIVKEALVTEAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGAEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.491:

MAIRIFAILFSTFVFGTFAHAQEGMRERSDWRKFFSEFQAKGTIVVADERQTDRVILVFDQV RSEKRYSPASTFKIPHTLFALDAGAARDEFQVFRWDGIKRSFAAHNQDQDLRSAMRNSTVWI YELFAKEIGEDKARRYLKQIDYGNADPSTSNGDYWIDGNLAIAAQEQIAFLRKLYHNELPFR VEHQRLVKDLMIVEAGRNWILRAKTGWEGRMGWWVGWVEWPTGPVFFALNIDTPNRMDDLFK REAIVRAILRSIEALPPNPAVNSDAAR

SEQ ID No.492:

MKTFAAYVIIACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGSQNISGGIDKFWLEDQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLP LRKSIPTKIMESEGIIGG

SEQ ID No.493

MNKYFTCYVVASLFLSGCTVQHNLINETPSQIVQGHNQVIHQYFDEKNTSGVLVIQTDKKIN LYGNALSRANTEYVPASTFKMLNALIGLENQKTDINEIFKWKGEKRSFTAWEKDMTLGEAMK LSAVPVYQELARRIGLDLMQKEVKRIGFGNAEIGQQVDNFWLVGPLKVTPIQEVEFVSQLAH TQLPFSEKVQANVKNMLLLEESNGYKIFGKTGWAMDIKPQVGWLTGWVEQPDGKIVAFALNM EMRSEMPASIRNELLMKSLKQLNII

SEQ ID No.494

MKKLSVLLWLTLFYCGTIWAQSTCFLVQENQTVLKHEGKDCNKRFAPESTFKIALSLMGFDS GILKDTLNPEWPYKKEYELYLNVWKYPHNPRTWIRDSCVWYSQVLTQQLGMTRFKNYVDAFH YGNQDISGDKGQNNGLTHSWLSSSLAISPSEQIQFLQKIVNKKLSVNPKAFTMTKDILYIQE LAGGWKLYGKTGNGRQLTKDKSQKLSLQHGWFIGWIEKDGRVITFTKHIADSKKHVTFASFR AKNETLNQLFYLINELEK

SEQ ID No.495

MNIKTLLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEVHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSPKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.496

MKFRHALSSAFVLLGCIAASAHAKTICTAIADAGTGKLLVQDGDCGRRASPASTFKIAISLM GYDAGFLRNEHDPVLPYRDSYIAWGGEAWKQPTDPTRWLKYSVVWYSQQVAHHLGAQRFAQY AKAFGYGNADVSGDPGQNNGLDRAWIGSSLQISPLEQLEFLGKMLNRKLPVSPTAVDMTERI VESTTLADGTVVHGKTGVSYPLLADGTRDWARGSGWFVGWIVRGNQTLVFARLTQDERKQPV SAGIRTREAFLRDLPRLLAAR

SEQ ID No.497

MKFRHALSSAFVLLGCIAASAHAKTICTAIADAGTGKLLVQDGDCGRRASPASTFKIAISLM GYDAGFLRNEHDPVLPYRDSYIAWGGEAWKQPTDPTRWLKYPVVWYSQQVAHHLGAQRFAQY AKAFGYGNADVSGDPGQNNGLDRAWIGSSLQISPLEQLEFLGKMLNRKLPVSPTAVDMTERI VESTTLADGTVVHGKTGVSYPLLADGTRDWARGSGWFVGWIVRGKQTLVFARLTQDERKQPV SAGIRTREAFLRDLPRLLAAR

SEQ ID No.498

MRGKHTVILGAALSALFAGAAGAQMLECTLVADAASGQELYRKGACDKAFAPMSTFKVPLAV MGYDAGILVDAHNPRWDYKPEFNGYKFQQKTTDPTIWEKDSIVWYSQQLTRKMGQKRFAAYV AGFGYGNGDISGEPGKSNGLTHSWLGSSLKISPEGQVRFVRDLLSAKLPASKDAQQMTVSIL PHFAAGDWAVQGKTGTGSFIDARGAKAPLGWFIGWATHEERRVVFARMTAGGKKGEQPAGPA ARDAFLKALPDLAKRF

SEQ ID No.499

MKFRHALSSAFVLLGCIAASAHAKTICTAIADAGTGKLLVQDGDCGRRASPASTFKIAISLM GYDAGFLRNEHDPVLPYRDSYIAWGGEAWKQPTDPTRWLKYSVVWYSQQVAHHLGAQRFAQY AKAFGYGNADVSGDPGQNNGLDRAWIGSSLQISPLEQLEFLGKMLDRKLPVSPTAVDMTERI VESTTLADGTVVHGKTGVSYPLLADGTRDWARGSGWFVGWIVRGKQTLVFARLTQDERKQPV SAGIRTREAFLRDLPRLLAAR

SEQ ID No.500

MKFRHALSSAFVLLGCIAASAHAKTICTAIADAGTGKLLVQDGDCGRRASPASTFKIAISLM GYDAGFLRNEHDPVLPYRDSYIAWGGEAWKQPTDPTRWLKYSVVWYSQQVAHHLGAQRFAQY AKAFGYGNADVSGDPGQNNGLDRAWIGSSLQISPLEQLEFLGKMLNRKLPVSPTAVDMTERI VESTTLADGTVVHGKTGVSYPLLADGTRDWARGSGWFVGWIVRGKQTLVFARLTQDERKQPV SAGIRTREAFLRDLPRLLAAR

SEQ ID No.501

MKTFAAYVIIACLSSTALAGSITENTSWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNDLARASKE YLPVSTFKIPSAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLTLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLYLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKETEVYFFAFNMDIDNESKLP LRKSIPTKIMESEGIIGG

SEQ ID No.502

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGKKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.503

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVSANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKNMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVNPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.504

MKTFAAYVITACLSSTALASSITENTFWNKEFSAEAVNGVFVLCKSSSKSCATNNLARASKE YLPASTFKIPNAIIGLETGVIKNEHQVFKWDGKPRAMKQWERDLSLRGAIQVSAVPVFQQIA REVGEVRMQKYLKKFSYGNQNISGGIDKFWLEGQLRISAVNQVEFLESLFLNKLSASKENQL IVKEALVTEAAPEYLVHSKTGFSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNENKLP LRKSIPTKIMASEGIIGG

SEQ ID No.505

MKTIAAYLVLVFFAGTALSESISENLAWNKEFSSESVHGVFVLCKSSSNSCTTNNATRASTA YIPASTFKIPNALIGLETGAIKDARQVFKWDGKPRAMKQWEKDLTLRGAIQVSAVPVFQQIA RDIGKKRMQKYLNLFSYGNANIGGGIDKFWLEGQLRISAVNQVKFLESLYLNNLPASKANQL IVKEAIVTEATPEYIVHSKTGYSGVGTESNPGVAWWVGWVEKGTEVYFFAFNMDIDNESKLP SRKSIPTKIMASEGIIIGG

SEQ ID No.506

MKKFILPIFSISILVSLSACSSIKTKSEDNFHISSQQHEKAIKSYFDEAQTQGVIIIKEGKN LSTYGNALARANKEYVPASTFKMLIALIGLENHKATTNEIFKWDGKKRTYPMWEKDMTLGEA MALSAVPVYQELARRTGLELMQKEVKRVNFGNTNIGTQVDNFWLVGPLKITPVQEVNFADDL AHNRLPFKLETQEEVKKMLLIKEVNGSKIYAKSGWGMGVTPQVGWLTGWVEQANGKKIPFSL NLEMKEGMSGSIRNEITYKSLENLGII

SEQ ID No.507

MNIKALLLITSAIFISACSPYIVTANPNHSASKSDDKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIHQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWNGQKRLFPEWEKDMTLGDAM KASAIPVYQDLARRIGLELMSNEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

SEQ ID No.508

MNIKALLLITSAISISACSPYIVTANPNHSASKSDEKAEKIKNLFNEAHTTGVLVIQQGQTQ QSYGNDLARASTEYVPASTFKMLNALIGLEHHKATTTEVFKWDGQKRLFPEWEKDMTLGDAI KASAIPVYQDLARRIGLELMSKEVKRVGYGNADIGTQVDNFWLVGPLKITPQQEAQFAYKLA NKTLPFSQKVQDEVQSMLFIEEKNGNKIYAKSGWGWDVDPQVGWLTGWVVQPQGNIVAFSLN LEMKKGIPSSVRKEITYKSLEQLGIL

优选地，所述肽选自如下定义的序列为SEQ ID No.509到SEQ ID  No.523、SEQ ID No.525到SEQ ID No.572、SEQ ID No.574到SEQ ID  No.604、SEQ ID No.606到SEQ ID No.618、SEQ ID No.620到SEQ ID  No.696、SEQ ID No.698到SEQ ID No.1077、SEQ ID No.1098到SEQ ID  No.1109的肽：

在临床意义栏，2d、2de和2df条目对应OXAβ-内酰胺酶功能亚组， 而相应的肽可以检测所述酶。因此，检测到2df肽将证明能够水解碳青霉烯 的碳青霉烯酶β-内酰胺酶的存在。

2de条目将证明存在能够超广谱(ESBL)的水解青霉素、诸如头孢菌素Ⅱ 和头孢噻吩的第一代头孢菌素和至少一种来自诸如头孢噻肟、头孢他啶的 氧亚氨基β-内酰胺或诸如氨曲南的单环β-内酰胺类的抗菌剂的β-内酰胺 酶。

OXA条目证明在亚组2d、2de和2df中的至少两组之间的一种普通肽。 相应的肽证明存在OXAβ-内酰胺酶以及存在至少针对青霉素和第一代头孢 菌素的抗性机制。

检测OXA蛋白引发的针对碳青霉烯的抗性机制的特征在于检测选自 序列为SEQ ID No.510、511、512、513、514、520、521、522、523、525、 527、530、532、537、541、542、543、544、545、546、547、548、549、 550、551、552、556、557、558、559、560、561、562、574、579、581、 582、583、584、592、596、597、598、599、600、601、602、607、608、 609、628、631、632、633、635、636、644、646、647、649、650、655、 656、661、662、667、674、675、682、689、690、698、713、714、719、 720、722、727、729、730、741、746、748、750、751、752、755、756、 757、758、763、764、767、768、772、775、781、782、790、792、793、 794、795、796、797、798、801、809、811、812、813、814、816、819、 824、832、834、837、838、847、851、852、853、854、855、856、857、 858、859、860、862、868、869、870、874、875、876、877、879、880、 881、882、894、895、898、902、903、904、906、907、908、911、912、 913、914、915、919、920、922、923、927、929、937、938、939、945、 946、948、949、950、951、954、956、957、959、962、964、967、969、 971、972、974、975、979、980、985、988、990、993、994、995、996、 997、1000、1001、1002、1003、1004、1005、1006、1007、1011、1013、 1015、1017、1018、1019、1023、1027、1030、1032、1033、1034、1035、 1036、1037、1038、1039、1040、1042、1047、1048、1051、1052、1057、 1058、1060、1070、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、 1106、1107、1108、1109的至少一种抗性标记carba肽。

某些肽序列在一些抗性机制中是共同的。因此，下列序列是相同的：

SEQ ID No.24和SEQ ID No.287。

在所有实施方式中，上述序列代表存在针对青霉素、头孢菌素(包括第 三代，例如头孢噻肟和头孢他啶)、单环β-内酰胺类和碳青霉烯的抗性机制 的表达。

本说明书后续部分给出的所述方法的非限制性的实施例将显现本发明 的方法及其进步。

实施例1：以生物化学特征谱(Biochemical profile)从样品中鉴别微生物

1.在培养基上培养样品

根据微生物的种，最适培养基和最适培养条件是不同的。默认样品接 种在不同的培养基上：

○绵羊血Columbia琼脂(bioMérieux ref.43041)，在35℃，有氧或无 氧的气氛下培养18到24小时；

○TSA琼脂(bioMérieux ref.43011)，在37℃培养18到24小时。

2.鉴别微生物

鉴别进行如下：

1.选择分离的克隆

2.在无菌条件下，将3mL灭菌的盐水溶液(0.45-0.50%NaCl、pH4.5-7.0) 移到透明的塑料(聚苯乙烯)检测管

3.使用搅拌棒或灭菌的棉签，将足够数量的克隆移到第2步制备的盐 溶液管中，以来自于的有刻度的DENSICHEK调节细菌悬 液处于0.50到0.63McFarland之间

4.将细菌悬液管和鉴别卡置于卡盘(cartridge)上

5.将卡盘放入到仪器中

6.填装、密封、孵育和读出操作是自动的

7.获得生物化学特征谱

8.通过与已知菌株的生物化学特征谱比较，以系统进行鉴别

实施例2：通过微生物富集制备初级尿样

以下的方案分16步进行(第5到12步可选，如果富集的样品接着会根 据实施例4起的方法处理，则可以将其略去)：

1.以2000g离心5ml受污染的尿液30秒

2.收取上清

3.15000g离心5分钟

4.弃上清

5.以3mL蒸馏水重悬洗涤沉淀

6.15000g离心5分钟

7.弃上清

8.将沉淀置于溶剂(丙酮v:甲醇v=8:1)中做1/10稀释

9.-20℃静止1小时

10.15000g离心5分钟

11.弃上清

12.将沉淀置于溶剂(丙酮v:甲醇v=8:1)中做1/10稀释

13.-20℃静止1小时

14.15000g离心5分钟

15.弃上清

16.沉淀组成了微生物富集的样品

实施例3：以MALDI-TOF鉴别来自样品的微生物

鉴别进行如下：

1.移取添加了1μl白金耳的一份根据实施例1获得的微生物克隆或根 据实施例2获得的富集样品，并均匀沉积在MALDI-TOF质谱的盘 上

2.以1μl基质覆盖沉积物。所用基质为HCCA(alpha-cyano- 4-hydroxycinnamic acid)的有机溶剂(50%乙腈和2.5%三氟乙酸)饱和 溶液

3.室温下干燥

4.将盘置于质谱仪中

5.获得质谱

6.将获得的谱与已知库中的谱对比

7.比较获得的峰和已知库中的峰以鉴别微生物

实施例4：以ESI-TOF鉴别样品中的微生物

鉴别进行如下：

1.获得根据实施例1获得的微生物克隆或根据实施例2获得的富集样 品的样品，并悬浮在100μl蒸馏水中

2.3000g离心5min

3.弃上清

4.重悬于100μl蒸馏水中

5.3000g离心5min

6.弃上清

7.重悬于100μl乙腈、蒸馏水和甲酸(50/50/0.1%)混合液

8.以孔径0.45μm的滤器过滤

9.在单MS模式下注入质谱仪

10.获得质谱

11.将获得的谱与已知库中的谱对比

12.参考对照谱以鉴别微生物

实施例5:从微生物中获得消化的蛋白

下面的方法通常分17步进行：

1.获得根据实施例1获得的微生物克隆或根据实施例2获得的富集样 品的样品，并悬浮在10到100μl6M盐酸胍溶液(含50mM Tris-HCl， pH=8.0)

2.加入二硫苏糖醇(DTT)，终浓度达到5mM

3.95℃水浴还原20分钟

4.管在室温下冷却

5.加入碘乙酰胺，终浓度达到12.5mM

6.室温下避光烷基化40分钟

7.以50mM NH₄HCO₃溶液(pH=8.0)稀释6倍，获得盐酸胍终浓度1M

8.加入1μg胰蛋白酶

9.37℃消化6小时到一夜

10.加入甲酸至pH低于4以终止反应

11.以含0.5%体积甲酸的水定容样品体积到1mL

12.以1mL甲醇，再以1mL含0.1%体积甲酸的水平衡Waters Oasis HLB 柱

13.样品在重力下沉积

14.以1mL含0.1%体积甲酸的水洗涤

15.以1mL混合液(80%甲醇和20%含0.1%体积甲酸的水)洗脱

16.以SPD2010蒸发器(Thermo Electron Corporation、 Waltham、Massachusetts、United States of America)浓缩洗脱液2小 时以上，以获得约100μL的体积

17.然后将洗脱液置于不少于250μL含0.5%体积甲酸的水溶液中

实施例6：鉴别对NDM-1β-内酰胺的抗性

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam1到Sam9。菌种的 鉴别在表1中列出。

表1：

名称 菌种 Sam1 肺炎克雷伯菌 Sam2 C.freundii Sam3 鲍氏不动杆菌 Sam4 A.caviae Sam5 C.braakii Sam6 阴沟肠杆菌 Sam7 P.rettgeri Sam8 大肠杆菌 Sam9 肺炎克雷伯菌

样品Sam1到Sam9对应含有NDM-1抗性机制(微肠杆菌科，假单胞菌， 不动杆菌等)。然后用以下方法搜索该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后体积为50μL的消化的蛋白根据如下 情况被注入和分析：

·来自于Dionex公司(Sunnyvale、United States of America)的Dionex  Ultimate3000层析通道。

·Waters BEH130C18柱，内径2.1mm，长100mm，粒径3.5μm(Waters、 Saint-Quentin En Yvelines、France)。

·溶剂A：水+0.1%甲酸。

·溶剂B：ACN+0.1%甲酸。

HPLC梯度定义于后续的表2：

表2：

时间(分) 流量(μl) 溶剂A(%) 溶剂B(%) 0 300 98 2 3 300 98 2 34 300 54.6 45.4 35 300 0 100 55 300 0 100 55.1 300 98 2 74 300 98 2

·来自于层析通道的洗脱液直接注入Applied Biosystems(Foster City、 United States of America)的5500质谱仪的电离源。

·来自于微生物蛋白消化的肽用质谱仪以MRM模式分析。只有表3中 的肽被检测到。有鉴于此，表3中的碎片被检测到。

表3：

前体肽的电荷状态、保留时间、碎片离子类型和转换即Q1中的(m/z)₁和Q3中的(m/z)₂在表3中显示。表3中还显示了用于打碎前体离子的碰撞 能。

·其他使用的机器参数如下：

测量每个转换和每个研究的微生物的获得的面积。认为面积大于等于 2500(任意单位)的所有转换是阳性的并且在表4中标记1。认为面积小于 2500的所有转换是阴性的并且在表4中标记0。如果没观察到信号峰，转 换被标记为阴性。

表4：

转换编号 Sam1 Sam2 Sam3 Sam4 Sam5 Sam6 Sam7 Sam8 Sam9 1 1 1 1 1 1 1 0 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 3 1 1 0 1 1 1 0 1 1 4 1 1 1 1 1 1 1 1 1 5 1 1 1 1 1 1 1 1 1 6 1 1 0 1 1 1 1 1 1 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 1 1 1 1 1 1 1 1 1 11 1 1 1 1 1 1 1 1 1 12 1 1 1 1 1 1 1 1 1 13 0 0 0 0 0 0 0 0 0 14 0 0 0 0 0 0 0 0 0 15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 16 1 1 0 1 1 0 0 0 1 17 1 1 0 1 1 1 1 0 1 18 1 1 0 1 1 0 1 0 1 19 0 0 0 0 0 0 0 0 0 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21 0 0 0 0 0 0 0 0 0 22 0 0 0 0 0 0 0 0 0 23 0 0 0 0 0 0 0 0 0 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0

然后将阳性转换的数量相加并在表5中列出：

表5：

名称 菌种 阳性转换数 Sam1 肺炎克雷伯菌 12 Sam2 C.freundii 12 Sam3 鲍氏不动杆菌 7 Sam4 A.caviae 12 Sam5 C.braakii 12 Sam6 阴沟肠杆菌 10 Sam7 P.rettgeri 9 Sam8 大肠杆菌 9 Sam9 肺炎克雷伯菌 12

样品Sam1到Sam9包含多于6个阳性转换，因此它们含有表达NDM-1 蛋白的细菌。于是，Sam1到Sam9的细菌抗青霉素、头孢菌素和碳青霉烯。

实施例7：鉴别对KPCβ-内酰胺的抗性：

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam62到Sam73。菌种 的鉴别在表6中列出。

表6：

名称 菌种 Sam62 肺炎克雷伯菌 Sam63 肺炎克雷伯菌 Sam64 肺炎克雷伯菌 Sam65 肺炎克雷伯菌 Sam66 肺炎克雷伯菌 Sam67 肺炎克雷伯菌 Sam68 肺炎克雷伯菌 Sam69 肺炎克雷伯菌 Sam70 肺炎克雷伯菌 Sam71 肺炎克雷伯菌 Sam72 肺炎克雷伯菌 Sam73 肺炎克雷伯菌

样品Sam62到Sam73对应包含KPC抗性机制的菌种。以如下方法检 测其机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表7中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表7：

使用表8中列出的参数检测表7中提到的转换。

表8：

测量每个转换和每个所研究的微生物获得的面积。当同一个肽的三个 转换的面积大于或等于表8中描述的阳性阈值时，认为肽的检测为阳性， 并在表9中标记为“1”。当至少一个转换包含小于表8中描述的阳性阈值的 面积时，认为没有检测到相应的肽，并在表9中标记为“0”。

表9：

样品Sam68到Sam73包含至少一个KPC特征性转换。因此，样品Sam68 到Sam73中的细菌表达β-内酰胺酶，这给予这些样品对青霉素、头孢菌素(包 括诸如头孢噻肟和头孢他啶的第三代头孢菌素)、单环β-内酰胺和碳青霉烯 的抗性。

样品Sam62到Sam67不含有KPC特征性转换。因此，样品Sam62到 Sam67中的细菌不表达KPCβ-内酰胺酶，可能对碳青霉烯类抗生素敏感。

实施例8：鉴别对NDM-1或KPCβ-内酰胺的抗性：

对应包含NDM-1或KPC抗性机制的中的样品可以采用如下方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表10中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表10：

2f条目显示存在来自于2f亚组(根据Bush和Jacoby分类[Antimicrob  Agents Chemother.2010Mar；54(3):969-76.Epub2009Dec7.Updated  functional classification of beta-lactamases.])的能水解碳青霉烯的碳青霉烯酶 β-内酰胺酶。

3a条目显示存在来自于3a亚组(根据Bush和Jacoby分类[9])的能水解 上述青霉素、头孢菌素和碳青霉烯的金属β-内酰胺酶。

以表11中列出的参数检测表10中提到的转换。

表11：

当同一个肽的至少两个转换的面积大于或等于表11中描述的阳性阈值 时，认为肽段检测是阳性的。当多于两个同一个肽的转换的面积小于表11 中描述的阳性阈值时，认为没有检测到相应的肽。

当检测到至少一种对应于NDM-1抗性机制的肽时，样品中含有表达 NDM-1蛋白的细菌。这些细菌抗青霉素、头孢菌素和碳青霉烯。

当检测到至少一种对应于KPC抗性机制的肽时，样品中含有表达KPC 蛋白的细菌。这些细菌抗青霉素、头孢菌素(包括诸如头孢噻肟和头孢他啶 的第三代头孢菌素)、单环β-内酰胺和碳青霉烯。

实施例9：鉴别对INDβ-内酰胺的抗性:

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam84到Sam88。种的 鉴别在表12中列出。

表12：

名称 菌种 Sam84 C.indologenes Sam85 C.indologenes Sam86 C.indologenes Sam87 C.indologenes Sam88 C.indologenes

样品Sam84到Sam88对应包含IND抗性机制的菌种。然后用以下方 法检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表13中的肽代替表3中的肽进行分析。

表13：

所用的其他机器参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表13中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 14中标记为“1”。当转换的面积小于表13中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表14中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表14：

样品Sam84到Sam88含有至少一个IND特征性肽。因此，样品Sam84 到Sam88中存在的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予它们对青霉素、头孢菌素 和碳青霉烯的抗性。

实施例10：鉴别对GES β-内酰胺的抗性：

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam89和Sam90。种的 鉴别在表15中列出。

表15：

名称 菌种 Sam89 大肠杆菌 Sam90 绿脓假单胞菌

样品Sam89和Sam90对应含有GES抗性机制的菌种。然后以如下方法 检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表16中的肽代替表3中的肽进行分析。

表16：

所用的其他机器参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表16中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 17中标记为“1”。当转换的面积小于表16中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表17中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表17：

样品Sam89和Sam90包含至少一个碳青霉烯酶表型的特征性肽。因此， 存在于样品Sam89和Sam90中的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予其对青霉素、 头孢菌素和碳青霉烯的抗性。

实施例11：鉴别对SMEβ-内酰胺的抗性：

根据实施例1、3或4的方法鉴别样品Sam91到Sam95。菌种的鉴别在 表18中列出。

表18：

名称 菌种 Sam91 S.marcescens Sam92 S.marcescens Sam93 S.marcescens Sam94 S.marcescens Sam95 S.marcescens

样品Sam91到Sam95对应含有SME抗性机制的菌种。然后以如下方 法检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表19中的肽代替表3中的肽进行分析。

表19：

所用的其他机器参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表19中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 20中标记为“1”。当转换的面积小于表19中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表20中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表20：

样品Sam91到Sam95包含至少一个碳青霉烯酶表型的特征性肽。因此， 存在于样品Sam91到Sam95中的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予其对青霉素、 头孢菌素和碳青霉烯的抗性。

实施例12：鉴别对IMPβ-内酰胺的抗性：

样品对应的含有IMP抗性的菌种可以用如下的方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表21中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表21：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于2500时，认为肽的检测是阳性的，并标记为“1”。当至少一个转 换的面积小于2500时，认为没有检测到对应的肽，并标记为“0”。

实施例13：鉴别对KPCβ-内酰胺的抗性：

样品对应的含有KPC抗性的菌种可以用如下的方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表22中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表22：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于2500时，认为肽的检测是阳性的，并标记为“1”。当至少一个转 换的面积小于2500时，认为没有检测到对应的肽，并标记为“0”。

实施例14：鉴别对NDMβ-内酰胺的抗性：

样品对应的含有NDM抗性的菌种可以用如下的方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表23中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表23：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于2500时，认为肽的检测是阳性的，并标记为“1”。当至少一个转 换的面积小于2500时，认为没有检测到对应的肽，并标记为“0”。

实施例15：鉴别对VIMβ-内酰胺的抗性：

样品对应的含有NDM抗性的菌种可以用如下的方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表24中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表24：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于2500时，认为肽的检测是阳性的，并标记为“1”。当至少一个转 换的面积小于2500时，认为没有检测到对应的肽，并标记为“0”。

实施例16：鉴别对OXAβ-内酰胺的抗性：

样品对应的含有OXA抗性的菌种可以用如下的方法检测。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6检测表25中的肽代替 表3中的肽进行分析。

表25：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于2500时，认为肽的检测是阳性的，并标记为“1”。当至少一个转 换的面积小于2500时，认为没有检测到对应的肽，并标记为“0”。

实施例17：鉴别对IMPβ-内酰胺的抗性:

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam145到Sam154。种 的鉴别在表26中列出。

表26：

名称 种 Sam145 鲍氏不动杆菌 Sam146 鲍氏不动杆菌 Sam147 大肠杆菌 Sam148 肺炎克雷伯菌 Sam149 肺炎克雷伯菌 Sam150 绿脓假单胞菌 Sam151 绿脓假单胞菌 Sam152 绿脓假单胞菌 Sam153 绿脓假单胞菌 Sam154 P.putida

样品Sam145到Sam154对应包含IMP抗性机制的菌种。然后用以下方 法检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表27中的肽代替表3中的肽进行分析。

表27：

所用的其他机器参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表27中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 28中标记为“1”。当转换的面积小于表27中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表28中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表28：

样品Sam145到Sam154包含至少一个IMP的特征性肽。因此，存在于 样品Sam145到Sam154中的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予其对青霉素、头 孢菌素和碳青霉烯的抗性。

实施例18：鉴别对OXA-48β-内酰胺的抗性:

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam155到Sam164。种 的鉴别在表29中列出。

表29：

样品Sam155到Sam164对应包含OXA-48抗性机制的菌种。然后用以 下方法检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表30中的肽代替表3中的肽进行分析。

表30：

所用机器的其他参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表30中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 31中标记为“1”。当转换的面积小于表30中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表31中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表31：

样品Sam155到Sam164包含至少一个OXA-48组的特征性肽。因此，

存在于样品Sam155到Sam164中的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予其对青霉 素、第一代和第二代头孢菌素(不对广谱的头孢菌素)和碳青霉烯的抗性。

实施例19：鉴别对VIMβ-内酰胺的抗性:

根据实施例1、3或4中的一个的方法鉴别样品Sam165到Sam170。菌 种的鉴别在表32中列出。

表32：

名称 菌种 Sam165 绿脓假单胞菌 Sam166 大肠杆菌 Sam167 鲍氏不动杆菌complex Sam168 A.junii Sam169 大肠杆菌 Sam170 肺炎克雷伯菌肺炎亚种

样品Sam165到Sam170对应包含VIM抗性机制的菌种。然后用以下 方法检测该机制。

根据实施例5处理每个样品，然后根据实施例6(除非在本实施例剩下 的部分中另作说明)检测表33中的肽代替表3中的肽进行分析。

表33：

所使用的其他机器参数如下：

测量每个转换和每个所研究的微生物的所获得的面积。当转换的面积 大于或等于表33中描述的阳性阈值时，认为转换的检测是阳性的，并在表 34中标记为“1”。当转换的面积小于表33中描述的阳性阈值时，认为没有 检测到转换，并在表34中标记为“0”。

对于一个给定的肽，当至少三个转换被标记为“1”时，认为检测到该肽。

表34：

样品Sam165到Sam170包含至少一个VIM组的特征性肽。因此，存 在于样品Sam165到Sam170中的细菌表达β-内酰胺酶，这赋予其对青霉素、 头孢菌素和碳青霉烯的抗性。

在实施例6到11中描述的检测方法尤其有效，因为它们可以检测大量 的肽，同时检测一种或多种碳青霉烯酶引发的一种或多种抗性机制的存在。

进一步，检测进行时间短，少于一小时。事实上，只有3到34分钟之 间的梯度部分对分析是有用的。进一步，检测的肽的保留时间都在34分钟 以下。

另外，实施例6到11描述的检测方法比分子生物学方法更有效，因为 它们检测基因表达的产物，而不是基因本身。如果基因不表达，或者表达 太弱不足以带来有效的抗性，抗性的检测可能没有任何临床意义。检测抗 性机制的特征蛋白的特征性肽则没有这个缺点。

令人意外的是，上述实施例显示，用质谱可以获得特异性检测样品中 微生物对至少一种抗菌剂的抗性机制的存在所必需的敏感性，而不需要采 用分子生物学方法所常用扩增方法。

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