一种促进春鹃种子萌发成苗的方法

摘要

本发明公开了一种促进春鹃种子萌发成苗的方法，包括：取春鹃的种子，用水浸种后进行消毒；消毒后，将所述的种子接种于培养基中进行催芽培养；种子萌发成苗后，将幼苗移栽至基质中继续培养；所述的培养基为含有0.4～0.6mg/L KT和0.03～0.06mg/LNAA的1/4MS培养基，或所述的培养基为含有1.8～2.2mg/L GA

说明书

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，是一种促进春鹃种子萌发成苗的方 法。

背景技术

杜鹃花为杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃花属(Rhododendron)植物，是 我国十大名花之一。杜鹃花是一个大属，全世界约有1000余种，而以亚 洲最多，约有850种，其中我国就有530余种。我国杜鹃花种类繁多，资 源丰富，种间差异较大。绿化用杜鹃花为木本花卉，是一种常绿小灌木。 根据花期的不同，可分为春鹃和夏鹃。春鹃具有很高的观赏价值，花大色 艳，萌发力强，耐修剪。成片种植，其景色尤为壮观。园林中应用广泛， 配植于树丛、林下、溪边、草坪及建筑物旁都可形成极美的景色。同时可 做盆栽和造型杜鹃。

春鹃种子极为细小，千粒重仅有0.05g左右，但每个果实种子数极多， 约有150-300粒，不同品种间差异很大。杜鹃花的繁殖主要以扦插、嫁接 为主。种子繁殖一般用于杂交育种。春鹃的种子可进行随采随播，约20-30 天出苗。

为了促进种子发芽，一般采用激素浸种的方式进行催芽，即将种子置 于一定浓度、一定种类(通常为赤霉素)的激素溶液中，浸种一段时间(通 常为24小时左右)后，再置于温室中发芽。但是该种方式发芽率通常比 较低，且激素的使用浓度高、使用量大。

种子繁殖是传统杂交育种的重要技术手段，杂交种需要通过种子进行 繁殖。杜鹃花为木本植物，生长缓慢，从播种到开花至少需要三年时间。 随采随播的方式，不能够精确统计杂交种子的活性、出芽率、生长势等， 用来判断种子质量的指标。若能解决上述问题，不仅能够为传统杂交育种 的种子快速成苗奠定理论和技术基础，同时可提高杂交种子的萌发率，使 得杂交种子生长更为健壮，为杂交后代的筛选奠定坚实的基础。

发明内容

本发明提供了一种促进春鹃种子萌发成苗的方法，可在较短时间内促 使春鹃种子萌发，且激素使用量少，萌发率高。

一种促进春鹃种子萌发成苗的方法，包括：

(1)取春鹃的种子，用水浸种后进行消毒；

(2)消毒后，将所述的种子接种于培养基中进行催芽培养；

(3)种子萌发成苗后，将幼苗移栽至基质中继续培养；

所述的培养基为含有0.4～0.6mg/L KT和0.03～0.06mg/LNAA的1/4MS 培养基，或所述的培养基为含有1.8～2.2mg/L GA₃和0.03～0.06mg/L NAA 的1/4MS培养基。

本申请将春鹃种子置于培养基中培养促使其发芽成苗，通过在培养基 中添加适宜种类、适宜浓度的激素，春鹃种子的发芽时间早，春鹃种子可 在较短的时间内达到较高的发芽率，且激素的使用量极少。

激素的种类、浓度对春鹃种子的发芽影响较大，试验证明，不同的激 素种类，春鹃种子完全发芽的时间及发芽率的差别很大，即使是同一种激 素，浓度的微弱变化也会对其产生影响。优选的，所述的培养基中，所述 NAA的浓度为0.05mg/L。

优选的，所述KT的浓度为0.5mg/L。培养26天春鹃种子即可完全萌 发，且发芽率可高达70％。

优选的，所述GA₃的浓度为2.0mg/L。GA₃为2mg/L时，培养7天， 春鹃种子开始萌发，培养29天春鹃种子即可完全萌发，且发芽率可高达 75％。

所述春鹃的品种为‘紫蝴蝶’，为保证发芽率，种子最好取自成熟未开 裂的绿色蒴果。

催芽培养前，需先浸种，浸种可促使春鹃种子提早发芽，浸种时，水 的温度一般为18～23℃，浸种的时间为20～30小时，水的温度较好的为 20℃，浸种的时间较好的为24小时。

适宜的温度和光照条件有利于春鹃种子萌发，一般，所述催芽培养的 温度为22～25℃，优选为24℃。所述催芽培养的光照条件为：光照强度为 2000～2500lx，光照时间为12～14h/d，优选的，光照强度为2500lx、光照 时间为12h/d。

幼苗长至3～5片真叶时，可将幼苗移栽至营养丰富的泥炭土中进行培 养，培养时，保持温度为18～22℃，湿度为60～80％。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明将春鹃种子置于培养基中培养促使其发芽成苗，通过在培养基 中添加适宜种类、适宜浓度的激素，春鹃种子的发芽时间早，且春鹃种子 在较短的时间内即可达到较高的发芽率，激素的使用量也较传统浸种的方 法少，节省成本。

本发明的方法操作简便，培养基配方简单，为以后的杂交育种工作以 及杂交品种鉴定提供技术支撑。

附图说明

图1为春鹃种子萌芽图。

图2为实施例1为实施例1春鹃播种示意图。

图3为实施例1为春鹃幼苗生根情况。

图4为实施例1为春鹃幼苗转移到进口育苗泥炭土中的生长情况。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步阐释。

实施例1

一种春鹃的种子快速萌发成苗的方法：

(1)种子准备

11月中下旬，在春鹃‘紫蝴蝶’蒴果成熟，但为尚未开裂的绿色蒴果时， 将其采下，用洗洁精水浸泡20-30min后，放在流水下冲洗1-2h。用软毛 刷轻轻刷洗蒴果表面的脏物后，用滤纸吸干蒴果表面的水分，用培养皿装 好(无需盖上培养皿盖子)。放到室内装有硅胶干燥剂的容器中，进行干 燥，直至蒴果自然开裂。

(2)浸种处理

浸种前，将开裂的蒴果剥开，无需对春鹃种子进行消毒。去杂后挑选 成熟饱满的种子，将其放在20℃的温水中浸泡24h。

(3)培养基配制与消毒

配制含有不同激素的培养基，并进行高压灭菌(有些激素需要在高压 灭菌后，加入到培养基中)。

CK组：

①1/4MS②1/4MS+0.05mg/L NAA；

KT组：

①1/4MS+0.05mg/L NAA+0.5mg/L KT②1/4MS+0.05mg/L NAA+1.0 mg/L KT③1/4MS+0.05mg/L NAA+2.0mg/L KT④1/4MS+0.5mg/L KT ⑤1/4MS+1.0mg/L KT⑥1/4MS+2.0mg/L KT；

GA₃组：

①1/4MS+0.05mg/L NAA+0.15mg/L GA₃②1/4MS+0.05mg/L  NAA+0.3mg/L GA₃③1/4MS+0.05mg/L NAA+0.6mg/L GA₃④ 1/4MS+0.05mg/L NAA+1.0mg/L GA₃⑤1/4MS+0.05mg/L NAA+2.0mg/L GA₃⑥1/4MS+0.15mg/L GA₃⑦1/4MS+0.3mg/L GA₃⑧1/4MS+0.6 mg/L GA₃⑨1/4MS+1.0mg/L GA₃⑩1/4MS+2.0mg/L GA₃

(4)种子消毒

取出浸好的种子，用滤纸吸干种子表面的水分。先用70％酒精浸泡30s， 用无菌水冲洗3-5次后，将种子浸泡于0.1％的升汞水中15-18min，再用 无菌水冲洗3-5次，每次冲洗时间不少于3min。消毒后用滤纸吸干种子表 面的水分。

(5)无菌播种

将消毒过的种子分别接种于不同培养基中，每个处理30粒，3次重复。 接种后将其放置于温度为24℃、光照强度为2500lx、光照时间为12h/d的 无菌培养室中培养。观察记录种子萌发时间、发芽率、发芽势。

(6)幼苗移栽

将具有2片子叶及3-5片真叶的幼苗转移到拌有多菌灵的泥炭土中。 泥炭土用穴盘盛装。每个小孔中移苗4-6个，有利于幼苗的生长。移苗完 成后放置在温度为20℃，湿度为60％-80％，光照时间为12h/d的人工气候 培养箱中继续培养。观察移栽后幼苗的生长速度及生长情况等。

不同处理下春鹃种子的萌发率，见表1、表2、表3。

表1CK组春鹃种子萌发的影响

表2激素KT对春鹃种子萌发的影响(KT组)

表3GA₃组春鹃种子萌发率(GA₃组)

由以上数据可以看出，在1/4MS培养基中加植物激素或者不加植物激 素均能诱导无菌种子发芽。同时，不同激素组合对无菌种子萌发的诱导效 果有显著差异。有些激素组合的诱导效果甚至不如1/4MS培养基的空白对 照。0.05mg/LNAA，能够诱导无菌种子提早萌发，同时提高种子萌发率。 GA₃2.0mg/L+NAA0.05mg/L+1/4MS组合，对于提高春鹃种子萌发率及加 快种子萌发速度效果显著，培养7天开始萌发，29天完全萌发，萌发率高 达75％。KT0.5+NAA0.05+1/4MS组合也具有较好的效果，培养11天开 始萌发，26天完全萌发，萌发率达70％。

对比例

人工气候培养箱中的春鹃种子萌发实验的具体过程如下：

(1)种子采收与实施例1相同。

(2)将种子从蒴果中剥离(不需要消毒)，分别用10、100、200、400、 600、800mg/L的GA₃溶液浸种，浸种时间为24h，以去离子水浸种24h 为对照。以上处理分别记为处理①、处理②、处理③、处理④、处理⑤、 处理⑥。每个处理50粒，3次重复。处理过的种子，用滤纸吸干后，置于 以滤纸作为发芽床的培养皿中进行培养，去离子水作为培养基质，时刻保 证滤纸的湿润。盖上培养皿盖子以保证湿度。并将其放置到温度为20℃、 湿度为80％-85％的人工气候培养箱中。每天注意水分情况，及时补充水分。 剔除发霉种子，并及时更换干净滤纸。观察记录种子萌发时间、发芽率、 发芽势。

(3)幼苗移栽

当种子长出两片真叶后将其转移至含有丰富有机质的泥炭土中，于 20℃、湿度为60％-80％，光照时间为12h/d的人工气候培养箱中继续培养， 观察移栽后幼苗的生长速度及生长情况等。

不同GA₃溶液浸种处理下，第一粒种子在播种后第8天开始萌芽。

不同处理下，春鹃种子的萌发率，见表4。

采用常规GA₃溶液浸种的方式，春鹃种子开始萌发的时间、完全萌发 的时间长于或与本申请培养基培养的方式相当，但是发芽率远低于本发 明，本发明的发芽率可达70％以上，而该对比例仅在60％左右，且对比例 使用的GA₃的浓度高，400～800mg/L的浓度才可达到60％左右的萌发率。