大肠杆菌表达的膜联蛋白V或其衍生物的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种大肠杆菌表达的膜联蛋白V或其衍生物的分离纯化方法。该方法是对表达膜联蛋白V或其衍生物的大肠杆菌菌体依次进行破菌工艺、粗提工艺以及精制工艺。破菌工艺为先进行反复冻融破碎，再进行渗透压冲击破碎。精制工艺为先进行疏水层析，再进行阴离子交换层析；或者先进行阴离子交换层析，再进行疏水层析。阴离子交换层析采用的填料为结合有DEAE配基或者Q配基的琼脂糖，或者为结合有DEAE配基或者Q配基的聚甲基丙烯酸酯。疏水层析采用的填料为结合有苯基或者丁基或者辛基的琼脂糖，或者为结合有苯基或者丁基或者辛基的聚甲基丙烯酸酯。本发明的分离纯化方法成本较低，得到的目标蛋白纯度≥95%。