一种北细辛种子的贮藏方法

摘要

本发明公开了一种北细辛种子的贮藏方法，包括如下步骤：种子处理：对采收后的北细辛种子进行处理使其含水量为60-65%；混合：将处理后的种子与含水量为60-65%的辅料混合，其中所述辅料为河沙与锯末的混合物；种子贮藏：将种子与辅料的混合物置于能够透气的容器中在4℃下贮藏，贮藏期间维持种子的含水量始终为60-65%。本发明在果实、种子处理和种子贮藏过程中严格控制温度，有效防止了种子劣变，保证了贮藏后的种子活力接近于鲜种子的活力水平；可使北细辛种子贮藏4年以上，贮藏后的种子萌发率高达90%以上；有效地延长了北细辛种子寿命，显著延长了北细辛作为短命种子的存活年限；贮藏种子方法简单，贮藏投入成本较低。

说明书

技术领域

本发明涉及种子贮藏领域，尤其涉及一种北细辛种子的贮藏 方法。

背景技术

北细辛是东北地区大宗道地中药材，种植面积很大，为《中 华人民共和国药典》（2010年版）中细辛类药材的正品。除了 用于风寒感冒、头痛、牙痛、痹痛、鼻渊流涕、寒饮咳喘、口舌 生疮等病证的临床医疗外，还可作为工业原料制成高效、低毒、 无污染的白蚁防治剂、蚊虫驱逐剂、植物性农药等，因此其国内 外市场非常广阔。

北细辛的繁殖方式以种子繁殖为主，但其种子极易失水或吸 水，从新鲜的成熟果实中剥离的种子含水量约为62.4%（自然成 熟时含水量），经水洗后，种子含水量在70%～75%，在常温下 （背阴处）摊晾1天，种子含水量就会下降到40%以下。失水后 的种子若处理不当，就极易失活，从而丧失萌发能力。而且北细 辛种子，不耐0℃以下低温，也不耐25℃以上高温，与顽拗性种 子十分相似。

北细辛果实在6月下旬成熟，由于种子不耐25℃以上高温和 脱水，采收后的果实或种子若处理温度和通风条件不当，种子就 容易失活，丧失萌发能力。因此在生产上，北细辛种子只能随采 随播，不能储藏，更不能进行长距离的运输，严重阻碍北细辛的 种子经营。此外，种子不能得到有效贮藏，若由于自然原因，错 过北细辛的关键播种繁殖期，就会造成优良种质不能继代繁殖， 给北细辛的生产造成巨大损失。此外，这种不易贮藏的特性也不 利于种子细胞代谢活动趋于静止或休眠状态从而能够避避恶劣 的自然环境条件，得以存活或确保种系繁衍，也阻碍对北细辛种 子的特性的深入研究。

经研究认为：北细辛种子为胚形态后熟和生理后熟型种子， 新采收的北细辛种子不具胚或只具有球形胚，在常温下沙藏，经 过5周～6周的时间完成种胚形态后熟过程，种子便开始萌发， 萌发后的种子经过低温、完成生理后熟后，才能出苗。由于新采 收的种子，若不进行有效处理或立即播种，种子活力就极易丧失， 到目前为止，在生产实践或科学研究中，仅以常温下沙藏北细辛 种子的方法，可使种子活力延长30天左右，但此方法不能阻止 种胚形态后熟进程。

申请人曾对北细辛种子贮藏进行大量研究，采用了常温背阴 处保湿贮藏法、常温阴干低温通风或密闭贮藏、25℃恒温吹风干 燥低温贮藏、低温阴干低温贮藏等方法，但这些方法均未实现北 细辛种子的中长期贮藏。因此，到目前为止，还没有可长期贮藏 北细辛种子的良好方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可中、长期贮藏北细辛种子的方 法，以满足科研、生产、经营的需要。

为实现上述目的，本发明提供了一种北细辛种子的贮藏方法， 包括如下步骤：

种子处理：对采收后的北细辛种子进行处理使其含水量为 60-65%；

混合：将处理后的种子与含水量为60-65%的辅料混合，其 中所述辅料为河沙与锯末的混合物；

种子贮藏：将种子与辅料的混合物置于能够透气的容器中在 4℃下贮藏，贮藏期间维持种子的含水量始终为60-65%。

可选地，根据本发明的贮藏方法，所述辅料中，所述河沙与 所述锯末的体积比为3:1。

可选地，根据本发明的贮藏方法，所述种子与所述辅料以体 积比1:2的比例混合。

可选地，根据本发明的贮藏方法，所述河沙的粒径为24目 -120目，所述锯末的粒径为24目-80目。

可选地，本发明所述的贮藏方法，所述种子处理包括如下步 骤：

果实采摘：北细辛果实自然成熟后，剥开果皮检查，果肉粉 质，种子黄褐色，无乳浆，便采摘果实；

果实处理：将采收后的果实在温度低于25℃的背阴处放置2 天，待果实变软开裂后，将变软的果实放进容器中用水温低于 25℃的清水进行搅拌清洗，在清洗过程中将飘浮在水上层的果皮 果肉及不成熟的瘪种子清理出去，反复清洗多次，最后选留沉在 水底层的成熟饱满种子；

种子浮水处理：将清洗好的种子放到具有孔径为1mm的网 状物上，置于温度低于25℃的背阴处5～10分钟，沥干浮水，使 种子含水量达到60-65%。

可选地，根据本发明的贮藏方法，所述锯末为松木锯末。

本发明的有益效果为：

1、果实处理和种子贮藏过程中严格控制温度，有效防止了 种子劣变，保证了贮藏后的种子活力接近于鲜种子的活力水平。

2、可使北细辛种子贮藏4年以上，贮藏后的种子萌发率高 达90%以上。

3、有效地延长了北细辛种子寿命，显著延长了北细辛作为 短命种子的存活年限。

4、为具有形态后熟和生理后熟且容易发生劣变的一类种子 的贮藏提供了新方法，开辟了新途径。

5、贮藏种子方法简单，贮藏材料和设备容易获得，使得贮 藏投入成本较低，容易被广大细辛种植户、种子经营与科研单位 接受和采纳。

附图说明

通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和 益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出 优选实施方式的目的，而并不认为是对本发明的限制。在附图中：

图1为本发明所述北细辛种子的贮藏方法的流程示意图。

具体实施方式

下面结合附图和具体的实施方式对本发明作进一步的描述。

本发明提供了一种有效、低廉、简便的北细辛种子贮藏方法。 图1示出本发明所述北细辛种子的贮藏方法的流程示意图。如图 1所示，本发明贮藏方法的包括如下步骤：

（1）果实采摘

6月下旬，北细辛果实自然成熟后，剥开果皮检查，果肉粉 质，种子黄褐色，无乳浆，便采摘果实。

（2）果实处理

采收后的果实在背阴处（温度低于25℃）放置2天，待果 实变软开裂后，在缸等容器内，用水温低于25℃的清水清洗种 子。将变软的果实放进容器中，再放进清水进行搅拌清洗，在清 洗过程中将飘浮在水上层的果皮果肉及不成熟的瘪种子清理出 去，反复清洗多次，最后选留沉在水底层的成熟饱满种子。

（3）种子浮水处理

由于北细辛种子非常容易吸水和失水，所以，在种子清洗过 程中，北细辛种子含水量显著升高，因此，将洗好的种子放到具 有孔径为1mm网状物（纱网）上，置于背阴处（温度低于25℃） 3分钟，沥干浮水，使种子含水量达到60-65%，优选为62%（接 近于果实自然成熟时种子的时含水量）。

（4）辅料处理

将河沙先过二号筛（24目），再过七号筛（120目），将锯 末先过二号筛（24目），再过5号筛（80目）。将河沙与锯末 分别润湿至含水量为60-65%，优选为62%。然后将河沙与锯末 以体积比为3:1的比例混匀。所述锯末优选使用松木锯末。由于 锯末吸水性较强，如果其与河沙的比例大的话，容易造成上部种 子严重缺水，下部种子严重浸水腐烂，因此两者的比例尤为重要。 申请人经过大量实验研究发现，河沙与锯末的体积比为3:1时， 既能保证种子的透气性又能保证种子的水分，对种子的贮藏效果 最好，而其他比例则达不到该效果，例如，河沙与锯末体积比为 1:1或1:2时，上部种子均发生失水现象，而底部种子发生腐烂， 严重影响种子的贮藏效果。因此，本发明中，河沙与锯末的体积 比务必选择为3:1，以保证种子的贮藏效果。

（5）种子与辅料混合

将所述的沥干浮水的种子与所述辅料以体积比为1:1-1:3（优 选为1:2）的比例拌匀。

（6）种子贮藏

将种子与辅料的混合物置于能够透气的容器中在4℃下贮藏。 一般选用带盖的容器，将种子与辅料的混合物放入容器中后将容 器加盖，但不能密封，以保证容器可以透气同时还减少水分散失。 将容器放入恒温为4℃的贮藏设备中贮藏。贮藏期间上下颠倒容 器，避免容器底部积水。在长期贮藏期间，观察容器内种子和辅 料的湿度，确保种子的含水量在60-65%。

为了验证本发明所述贮藏方法的贮藏效果，申请人进行了如 下对比试验：

将所述经过浮水处理的种子不加辅料直接放入加盖容器中， 在恒温为4℃、10℃、15℃环境条件下贮藏；

将所述经过浮水处理的种子与细河沙以体积比为1:2的比例 拌匀后放入加盖容器中，在恒温为4℃、10℃、15℃环境条件下 贮藏；

将所述经过浮水处理的种子与松木锯末以体积比为1:2的比 例拌匀后放入加盖容器中，在恒温为4℃、10℃、15℃环境条件 下贮藏；

将所述经过浮水处理的种子与河沙和锯末的混合物以体积 比为1:2的比例拌匀后放入加盖容器中，在恒温为4℃、10℃、 15℃环境条件下贮藏。

采用上述4种方法贮藏种子1个月后，观察贮藏效果，结果 如下表1所示。

表14种贮藏方法贮藏的种子1个月后的贮藏效果

由表1结果可看出，以体积比为3:1的河沙和锯末的混合物 作为辅料对种子的贮藏效果最好，种子没有发生失水或发霉腐烂 等情况，而采用河沙或锯末作为辅料或不加辅料贮藏种子时，种 子均因出现失水、腐烂等现象而有所损失。贮藏温度上，在4℃ 条件下贮藏种子的贮藏效果最佳，种子完好，也没有出现萌发， 最大程度地保证了种子的贮藏质量，而贮藏温度为10度和15度 时，种子均出现不同程度的萌发，尤其是在15度时，种子全部 萌发，无法实现预期的贮藏效果。因此，将河沙与锯末以体积比 为3:1的混合物作为辅料，4℃条件下贮藏种子的方法为最佳方 法。该温度条件和辅料的搭配有利于增加种子透气性、有效调节 贮藏种子的水分、预防霉菌滋生，从而使得贮藏的种子效果最好。

申请人还对上述最佳贮藏条件下的种子进行活力和萌发率 的后续检验。

贮藏种子活力与萌发率检测

①种子活力检测

采用TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑)法对不同贮藏时间的 种子的生活力进行检测。

称取1g TTC，加入少量95%乙醇助溶后，用蒸馏水稀释定 容至200ml，配置成0.5%的TTC染色液，避光保存。取上述以 河沙与锯末的混合物（河沙与锯末体积比为3:1）作为辅料在4℃ 下进行贮藏的种子，洗去表面辅料，用25℃的温水浸种2h，使 种子充分吸胀。将吸胀的种子100粒，用单面刀沿种子胚中心线 纵切为两半，其中一半置于培养皿中，加入0.5%TTC溶液，以 覆盖种子为宜，置于25℃恒温箱中染色过夜，观察浸种胚是否 为红色。另100个半粒置于沸水中5min以杀死胚，同样加入 0.5%TTC，置于25℃恒温箱中染色处理作为对照观察，设置3 个重复，计数种胚被染成红色的种子数（活种子百分率（%）= （染成红色的种子粒数/实验种子数）×100%），种子活力数值 为3次重复的平均值。具体结果如下表2所示。

表2：经过不同贮藏时间后北细辛种子的活力

表2中结果表明，采用本发明贮藏方法贮藏的种子，其活力 平均值在90%以上。

②种子萌发率检测

选用清洁干净、无菌无毒、吸水性强、韧性好的滤纸，在培 养皿中铺3层滤纸，用蒸馏水将滤纸润湿，将上述以河沙与锯末 的混合物（河沙与锯末体积比为3:1）作为辅料在4℃下贮藏的 种子整齐摆放于铺有3层滤纸的直径为9cm的培养皿中，每个 培养皿中100～120粒种子，4个重复。种子萌发试验过程中均保 持培养皿中的滤纸湿润。

将摆放有种子的培养皿置于HPG-280BX光照培养箱中，白 天（8:00-20:00）给予光照，光照强度为1级，晚上（20:00-8:00） 无光照处理。培养箱中温度设置为恒温15℃、20℃、25℃和变 温15/25℃，以该5种温度条件进行萌发试验。每个温度处理设 3次重复。种子萌发以胚根出现为标志。萌发过程中，从第4周 开始进行萌发率计数，以后每1周调查1次萌发率并进行详细记 录，萌发率为3次重复平均值。检测得到的种子萌发率结果如下 表3所示。

表3不同培养温度下种子的动态萌发率

由表3内结果可看出，每次测得的种子萌发率平均值均能够 达到94%以上。

除了上述辅料的配比、种子贮藏的温度，根据本发明提出的 北细辛种子的贮藏方法可选因素较多，例如果实的处理温度、种 子的水洗温度等，据此可以设计出多种实施例。为了具体的描述 各种工艺参数对本发明效果的影响，选择以下实施例进行示例性 说明。

实施例1

北细辛果实自然成熟后，剥开果皮检查，果肉粉质，种子黄 褐色，无乳浆，便采摘果实。将采摘后的果实在最高温度为24℃ 的背阴处放置2天使其变软开裂。然后在塑料盆中用水温为21℃ 清水对果实进行清洗，筛选得到饱满成熟的种子。再将清洗好的 种子放到网勺里，放置在温度为23℃的背阴处5～10分钟，沥干 浮水，使种子含水量达到62%。

将河沙与锯末以体积比为3:1的比例混合形成辅料，将辅料 润湿至含水量达到62%。然后，将种子与辅料以体积比为1:2的 比例拌匀后放入深度为14cm的加盖的小铁桶内。将小铁桶置于 恒温为4℃的冰箱中贮藏。贮藏期间上下颠倒，避免小铁桶底部 积水。

在贮藏时间为6个月和1年时，分别对贮藏的北细辛种子在 培养箱中的萌发率进行了检测；以及，贮藏时间为1年时，检测 了种子田间播种后的萌发率。

①光照培养箱中萌发率检测

选用清洁干净、无菌无毒、吸水性强、韧性好的滤纸，在培 养皿中铺3层滤纸，用胶头滴灌滴水，将滤纸润湿，将种子整齐 摆放于铺有3层滤纸的直径为9cm的培养皿中，每个培养皿中 100～120粒种子，4个重复。种子萌发试验中均保持培养皿中的 湿润。

将摆放有种子的培养皿置于HPG-280BX光照培养箱中，白 天（8:00-20:00）给予光照，光照条件为1级光照、晚上（20:00-8:00） 无光照处理，培养箱中温度为恒温15℃、25℃和变温15℃/25℃， 每个温度处理设3次重复。种子萌发以胚根出现为标志。萌发过 程中，从第4周开始进行萌发率计数，以后每1周调查1次萌发 率并进行详细记录，萌发率为3次重复平均值。两个贮藏时间下 种子的萌发率如表4和表5所示。

表4：贮藏半年后种子的萌发率

表5：贮藏1年后种子的萌发率

②田间播种萌发率检测

贮藏时间为1年时，将贮藏的种子播种于田间，给予自然地 温变温条件萌发，种子萌发以胚根出现为标志。萌发过程中，从 第4周开始进行萌发率计数，以后每1周调查1次萌发率并进行 详细记录，具体方法为：从田间取出的种子，采用4分法分离后， 取其中1份，调查500粒种子并分成4组，调查每组种子的萌发 率，然后取平均值。检测得到的具体结果如下表6中所示。

表6：贮藏1年的种子播种于田间后的萌发率

由上述实施实例中数据可看出，种子分别贮藏6个月和1年 后，实验室测定萌发率可达到93%以上，种子贮藏1年后，田间 试验萌发率为90%左右。

实施例2

北细辛果实自然成熟后，剥开果皮检查，果肉粉质，种子黄 褐色，无乳浆，便采摘果实。将采摘后的果实在最高温度为22℃ 的背阴处放置3天使其变软开裂。然后在塑料盆中用水温为21℃ 清水对果实进行清洗，筛选得到饱满成熟的种子。将清洗好的种 子放到网勺里，放置在温度为24℃的背阴处5～10分钟，沥干浮 水，使种子含水量达到62%。

将河沙与锯末以体积比为3:1的比例混合形成辅料，将辅料 润湿至含水量达到62%。然后，将种子与辅料以体积比为1:2的 比例拌匀后放入深度为14cm的加盖的小铁桶内。将小铁桶置于 恒温为4℃的冰箱中贮藏。贮藏期间上下颠倒，避免小铁桶底部 积水。

在贮藏时间为2年和2.5年时，分别对贮藏的北细辛种子在 培养箱中的萌发率进行检测；以及，贮藏时间为2.5年时，检测 了种子在室内营养钵中的萌发率。

①光照培养箱中萌发试验检测

选用清洁干净、无菌无毒、吸水性强、韧性好的滤纸，在培 养皿中铺3层滤纸，用胶头滴灌滴水，将滤纸润湿，将种子整齐 摆放于铺有3层滤纸的直径为9cm的培养皿中，每个培养皿中 100～120粒种子，4个重复。种子萌发试验中均保持培养皿中的 湿润。

将摆放有种子的培养皿置于HPG-280BX光照培养箱中，白 天（8:00-20:00）给予光照，光照条件为1级光照、晚上（20:00-8:00） 无光照处理，培养箱中温度为恒温15℃、20℃、25℃和变温 15℃/25℃。培养贮藏2年的种子时，采用恒温20℃和变温15℃/25℃ 两种培养温度；培养贮藏2.5年的种子时，采用15℃、25℃和变 温15℃/25℃三种培养温度，每个温度处理设3次重复。种子萌 发以胚根出现为标志。萌发过程中，从第4周开始进行萌发率计 数，以后每1周调查1次萌发率并进行详细记录，萌发率为3次 重复平均值。两个贮藏时间下种子的萌发率如下表7和表8所示。

表7：贮藏2年时种子的萌发率

表8：贮藏2.5年时种子的萌发率

②室内营养钵中萌发试验检测

贮藏时间为2.5年时，将贮藏的种子洗净辅料后，播种于10 个营养钵内，在室内培养（种子萌发期间，室内最高温度24℃， 最低气温16℃）。调查种子萌发率，从第4周开始进行萌发率 计数，以后每1周调查1次萌发率并进行详细记录。具体方法是： 从营养钵中取出的种子，采用4分法分离后，取其中1份，调查 360粒种子并分为3组，调查各组的种子萌发率，然后取平均值， 即得种子萌发率，具体结果如下表9所示。

表9：贮藏2.5年的种子室内播种的萌发率

实施例3

北细辛果实自然成熟后，剥开果皮检查，果肉粉质，种子黄 褐色，无乳浆，便采摘果实。将采摘后的果实在最高温度为20℃ 的背阴处放置2天使其变软开裂。然后在塑料盆中用水温为21℃ 清水对果实进行清洗，筛选得到饱满成熟的种子。将清洗好的种 子放到网勺里，放置在温度为21℃的背阴处5～10分钟，沥干浮 水，使种子含水量达到62%。

将河沙与锯末以体积比为3:1的比例混合形成辅料，将辅料 润湿至含水量达到62%。然后，将种子与辅料以体积比为1:2的 比例拌匀后放入深度为14cm的加盖的小铁桶内。将小铁桶置于 恒温为4℃的冰箱中贮藏。贮藏期间上下颠倒，避免小铁桶底部 积水。

在贮藏时间为3.5和4年时，分别对贮藏的北细辛种子在培 养箱中的萌发率进行检测；以及，贮藏时间为4年时，检测了种 子田间播种后的萌发率。

①光照培养箱中萌发率检测

选用清洁干净、无菌无毒、吸水性强、韧性好的滤纸，在培 养皿中铺3层滤纸，用胶头滴灌滴水，将滤纸润湿，将种子整齐 摆放于铺有3层滤纸的直径为9cm的培养皿中，每个培养皿中 100～120粒种子，4个重复。种子萌发试验中均保持培养皿中的 湿润。

将摆放有种子的培养皿置于HPG-280BX光照培养箱中，白 天（8:00-20:00）给予光照，光照条件为1级光照、晚上（20:00-8:00） 无光照处理，培养箱中温度为恒温18℃、25℃和变温15℃/25℃， 每个温度处理设3次重复。种子萌发以胚根出现为标志，萌发过 程中，从第4周开始进行萌发率计数，以后每1周调查1次萌发 率并进行详细记录，萌发率为3次重复平均值。两个贮藏时间下 种子的萌发率如下表10和表11所示。

表10：贮藏3.5年后种子的萌发率

表11：贮藏4年后种子的萌发率

②田间播种萌发率检测

贮藏时间为4年时，将贮藏的种子播种于田间，给予自然地 温变温条件萌发，种子萌发以胚根出现为标志。萌发过程中，从 第4周开始进行萌发率计数，以后每1周调查1次萌发率并进行 详细记录，具体方法为：从田间取出的种子，采用4分法分离后， 取其中1份，调查500粒种子并分成4组，调查每组种子的萌发 率，然后取平均值。检测得到的具体结果如下表12中所示。

表12：贮藏4年的种子播种于田间后的萌发率

由上述实施实例中数据可看出，种子贮藏4年后，实验室测 定萌发率可达到90%以上，田间试验萌发率90%左右。

本发明采用以河沙和锯末以体积比为3:1混合而成的辅料， 再以种子与辅料体积比为1:2的比例在4℃条件下，在加盖容器 中贮藏北细辛种子，至少可以贮藏种子4年，贮藏4年后，种子 萌发率仍可达90%以上。因此，本方法是有效、低廉、简便的北 细辛种子贮藏方法。

应该注意的是，上述实施例对本发明进行说明而不是对本发明进 行限制，并且本领域技术人员在不脱离所附权利要求的范围的情 况下可设计出替换实施例。在权利要求中，不应将位于括号之间 的任何参考符号构造成对权利要求的限制。单词“包含”不排除存 在未列在权利要求中的元件或步骤。