一种利用紫外分光光度法测定来苏儿中甲酚含量的方法

摘要

一种利用紫外分光光度法测定来苏儿中甲酚含量的方法。本发明的技术方案要点是，（1）先选择无水乙醇作为溶剂；（2）吸取一定量的甲酚置于容量瓶内，用无水乙醇作溶剂稀释定容，精密配置系列浓度的甲酚溶液作为甲酚标准溶液，同法，用溶剂稀释来苏儿样品，配置出各种浓度的来苏儿样品稀释液；（3）以无水乙醇做空白溶剂，在测定波长处测定甲酚标准溶液的吸光度，以标准浓度对吸光度进行线性回归，建立来苏儿中甲酚含量测定的标准曲线方程；（4）以无水乙醇做空白溶剂，在测定波长处测定来苏儿样品稀释液的吸光度，并代入标准曲线方程，计算出来苏儿中的甲酚浓度。本发明具有仪器操作简单，检测速度快的优点。

说明书

技术领域：

    本发明涉及消毒剂含量测定技术，具体涉及一种利用紫外分光光度法测定来苏儿中甲酚含量的方法。

背景技术：

    来苏儿又名甲酚皂溶液，是一种传统的酚类环境消毒剂，主要用于器械、场地、厩舍、排泄物等消毒。来苏儿的功效成分是甲酚，甲酚又称煤酚，是从煤焦油中分馏得到的邻位、间位和对位3种甲酚异构体的混合物，其杀菌作用较强，在适当浓度下，能杀灭大多数繁殖型病原菌。来苏儿中甲酚的含量测定方法通常采用的是各种色谱条件下的气相色谱法。为了规范这些方法，在2005年版的《中华人民共和国药典》（二部）中规定了该方法的试样制备和操作步骤。但是，该方法在应用过程中存在所需气相色谱仪价格昂贵，试剂成本高，仪器操作复杂，检测时间长，不适于生产企业快速检测等缺点。 

在利用甲酚原料生产来苏儿的过程中，以及在来苏儿成品保存过程中，虽然各种标准为了确定甲酚在来苏儿中的含量，分别测定了各种同分异构体的含量，但是各种标准并没有规定各甲酚同分异构体在来苏儿中的含量或比例，即不需要分别控制邻位、间位和对位3种甲酚异构体在体系中的各自组分比例。因此，利用气相色谱法测定甲酚含量的方法更适合于对生产原料甲酚的生产质量质控，以生产出质量合格的甲酚原料，而不适合于来苏儿生产和存放过程中甲酚含量的快速测定。如何使用较为简便的技术手段、采取较低的检测成本快速准确地测定来苏儿中甲酚含量的方法是当前的一个难题。

发明内容：

本发明的目的是设计一种无需昂贵仪器、操作简便、检测快速、结果准确、易于推广的来苏儿中甲酚含量测定方法。

本发明的技术方案是，一种利用紫外分光光度法测定来苏儿中甲酚含量的方法，其特征在于：（1）先选择无水乙醇作为溶剂；（2）精密吸取一定量的甲酚置于容量瓶内，用无水乙醇作溶剂稀释定容，精密配置系列浓度的甲酚溶液作为甲酚标准溶液，4℃保存备用，同法，用溶剂稀释来苏儿样品，精密配置出各种浓度的来苏儿样品稀释液；（3）以无水乙醇做空白溶剂，在测定波长处测定甲酚标准溶液的吸光度，以标准浓度对吸光度进行线性回归，建立来苏儿中甲酚含量测定的标准曲线方程；（4）以无水乙醇做空白溶剂，在测定波长处测定来苏儿样品稀释液的吸光度，并代入标准曲线方程，计算出来苏儿中的甲酚浓度。所述的甲酚标准溶液由分析纯级甲酚配置。所述的测定波长为278 nm。虽然甲酚是邻位、间位和对位3种同分异构体的混合物，但以无水乙醇作空白溶剂，利用紫外分光光度仪在200～400 nm范围内扫描发现，各种甲酚同分异构体均在检测波长278nm处具有较好的紫外吸收。因此，根据甲酚的这一紫外吸收图谱特征，确定其含量测定的波长为278 nm。

本发明具有以下优点或积极效果：

（1）本发明无需购置昂贵的仪器，仅需常用的紫外分光光度仪，仪器操作简单，检测速度快，对仪器操作人员无特殊技术要求。

（2）本发明不需要各种甲酚同分异构体的对照品和特殊溶剂等特殊试剂，而是利用质优价廉易购的分析纯级混合甲酚作为对照品，检测成本低廉，方法易于推广。 

（3）本发明不需要分别测定各种甲酚同分异构体的含量，即可确定甲酚在来苏儿中的含量。

（4）本发明适易于来苏儿生产和存放过程中甲酚含量的快速测定。

附图说明：

图1是采用实施例所述方法得到的甲酚标准溶液的紫外吸收图谱，

图2是采用实施例所述方法建立的来苏儿中甲酚含量测定的标准曲线方程。

具体实施方式：

详细描述实施例，

（1）精密吸取一定量的分析纯级甲酚置于容量瓶内，用无水乙醇作溶剂稀释定容，精密配置系列浓度的甲酚溶液作为甲酚标准溶液，4℃保存备用。同法，用无水乙醇稀释来苏儿样品，精密配置出来苏儿样品稀释液，4℃保存备用。

（2）以无水乙醇作为空白溶剂，在278 nm处测定甲酚标准溶液的吸光度，以标准浓度（C）对吸光度（A）进行线性回归，建立来苏儿中甲酚含量测定的标准曲线方程。

（3）以无水乙醇作为空白溶剂，在278 nm处测定来苏儿样品稀释液的吸光度后，代入标准曲线方程，计算出来苏儿中的甲酚浓度。

为进一步说明本发明的具体使用效果，以下采用试验数据来加以验证。

试验例1  标准曲线方程的建立

按照实施例，精密吸取一定量的分析纯级甲酚置于容量瓶内，用无水乙醇作溶剂稀释定容，精密配置甲酚浓度分别为0.005、0.008、0.01、0.02、0.03、0.04和0.05 μL/mL的溶液作为甲酚标准溶液，4℃保存备用。

以无水乙醇作空白溶剂，在278 nm处分别测定各甲酚标准溶液的吸光度（A），以对照品浓度（C）对A进行线性回归，建立来苏儿中甲酚含量测定的标准曲线方程为：A=19.076C + 0.0006（R² = 0.9996，n = 10），甲酚浓度在0.005～0.05 uL/mL范围内线性关系良好（见说明书附图，图2）。该方法的检测限为0.0006 uL/mL。

试验例2  精密度试验  

取同批号的来苏儿样品稀释液，在278 nm处重复测定6次吸光度，计算相对标准偏差（RSD），试验结果见表1。由表1可知，精密度试验RSD为1.66%，小于2.0%，表明该方法的精密度高。

表1 精密度试验结果

试验例3  重复性试验  

配制浓度相同的来苏儿样品稀释液6份，在278 nm处分别测定吸光度，计算相对标准偏差（RSD），试验结果见表2。由表2可知，重复性试验结果的RSD为1.71%，小于2.0%，表明该方法的重复性良好。

表2 重复性试验结果

试验例4  回收率试验  

取已知浓度为0.01uL/mL的来苏儿样品稀释液3份，分别加入浓度为0.005、0.01和0.03 uL/mL的甲酚标准溶液，然后在278 nm波长处测定吸光度，由校准曲线方程计算实测值，根据加样回收率 =（加样后测定值－已知的供试液含量）/ 对照品含量×100%公式，计算回收率、平均回收率和相对标准偏差（RSD），试验结果见表3。3种浓度溶液的平均回收率为100.89（±1.65）%，RSD为1.64%。

表 3  回收率试验结果         （n=3）

试验例5  样品含量测定

依照《中华人民共和国药典》2005年版（二部），分别制备3个批次的来苏儿样品，并用无水乙醇精密稀释成来苏儿样品稀释液，在278 nm波长处测定吸光度，代入标准曲线方程，计算出来苏儿样品中的甲酚含量及标示量。结果表明，利用该方法测定的甲酚标示量结果与《中华人民共和国药典》2005年版（二部）中要求的甲酚标示量结果一致。