红花黄色素注射用冻干制剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种红花黄色素注射用冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：（1）配液（2）粗滤（3）超滤（4）精滤（5）灌装（6）冻干。所述步骤（1）中采用的红花黄色素含羟基红花黄素A不少于20%，含总黄酮不少于80%。采用本发明精准的制备工艺，可以获取有效期延长至3年的红花黄色素制剂产品。

说明书

技术领域

本发明涉及红花黄色素临床应用的药剂的制备方法。

背景技术

红花，别名：草红、刺红花、杜红花、金红花。双子叶植物，菊科，干燥的管状花，长约1.5厘米，橙红色，花管狭细，先端5裂，裂片狭线形，长5～7毫米，雄蕊5枚，花药黄色，联合成管，高出裂片之外，其中央有柱头露出。具特异香气，味微苦。以花片长、色鲜红、质柔软者为佳。主产河南、浙江、四川等地。活血通经，去瘀止痛。活血通经药。花中含黄色素20-30%，含红色素0.3-0.6%，带壳饼粕中蛋白质含量为19%，去壳饼粕蛋白质含量为36%。

红花中的主要药效成分为红花黄色素，异名：红花黄；Saffower Yellower；Saffron；C.I.天然5号；

成分：红花黄A（SaffioninA）（C27H30O15）和红花黄B（Saffiomin B）及氧化物；

本色素分子式：C27H30O15

来源：由菊科植物红花（Carthamus tinctorius）的花瓣为原料，利用生物技术提取而成的天然色素。

性状：黄色粉末。

现有的红花黄色素制剂主要为注射用制剂，一般有效期为2年，如何提高其制剂有效期是急需解决的问题。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种红花黄色素注射用冻干制剂的制备方法，其采用精准的制备工艺，可以获取有效期延长的红花黄色素制剂产品。

一种红花黄色素注射用冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）配液：准确称取甘露醇置于浓配罐中，加占总注射用水质量90%的注射用水，搅拌使完全溶解，加入与甘露醇质量比例为1:1的红花黄色素，搅拌使完全溶解，调pH为7.0左右，搅拌使混合均匀；

（2）粗滤：步骤（1）得到的药液分别经1μm和0.45μm微孔滤膜加压粗滤，得药液A；再用占剩余总注射用水质量的10%注射用水注入浓配罐中，过滤冲洗，得药液B；

（3）超滤：将药液A过超滤，基本滤完后，采用药液B冲洗超滤器，合并滤液，计算超滤损失，再补加损失量的注射用水冲洗超滤，合并滤液至全量；

（4）精滤：采用0.22μm微孔滤膜过滤；

（5）灌装：将滤过后的药液分装于已经灭菌处理过的10ml西林瓶中；

（6）冻干：冻干在-35℃～-47℃条件下进行，在此条件下保温2～4小时；再在1.5×10^-1mbar以下的真空条件下，升温至-15℃，在-15℃保温1～3小时；继续升温至0℃，继续保温1～2小时；继续升温至5℃，保温1～2小时；最后以每半小时5℃的速度使温度升温至40℃，保温5～8小时，即可真空包装；

其中所述总注射用水的质量为红花黄色素和甘露醇总质量的10倍。

上述制备方法，其中所述步骤（1）中优选采用20%的NaOH水溶液调节pH值。

上述制备方法，若要达到有效期延长的技术效果，所用的红花黄色素必须含羟基红花黄素A不少于20%，含总黄酮不少于80%。一种可选的制备方法为：由如下步骤提取得到：

包括药材提取、大孔吸附树脂柱吸附、第一次洗脱、聚酰胺柱吸附、第二次洗脱、浓缩和喷雾干燥，其中，

药材提取，取红花药材，加8～10倍药材重量的水，69～71℃搅拌提取2次，每次1～1.5小时，滤过，合并两次提取液，冷却至室温；

大孔吸附树脂柱吸附，按照上柱样品量与树脂量为1：5的比例，以2～2.5bV/h的流速加入大孔吸附树脂柱中进行吸附；

第一次洗脱，使用50%乙醇作为洗脱液，以3～3.5bV/h的流速洗脱9个柱床体积，洗脱液用0.8%冰乙酸调至pH为3.5～4；

聚酰胺柱吸附，按照上柱样品量与聚酰胺量为1：15的比例，加入至聚酰胺柱中进行吸附；

第二次洗脱，依次采用50%乙醇、使用0.8%冰乙酸调节pH为3.5～4的水、纯化水和70%乙醇进行洗脱，分别洗脱1.5、1.5、3、2个柱床体积，收集洗脱液；

浓缩，洗脱液用聚砜膜超滤机浓缩，截留分子量为300，浓缩后进行喷雾干燥，得橙黄色红花黄色素。

优选地，洗脱液浓缩后采用截留分子量为10000的聚砜膜超滤机进行超滤，超滤液再进行喷雾干燥。

进一步，所述聚酰胺粒径为90目。

进一步，第二次洗脱操作中，50%乙醇用0.8%冰乙酸调节pH为3.5～4。

最后可以得到，含羟基红花黄素A不少于20%，含总黄酮不少于80%的红花黄色素产品。

采用本发明上述精准的制备工艺，可以获取有效期延长至3年的红花黄色素制剂产品。

具体实施方式

为进一步说明本发明，结合以下实施例具体说明：

红花黄色素提取工艺，步骤如下：

1、药材提取，取红花药材，加8～10倍药材重量的水，69～71℃搅拌提取2次，每次1～1.5小时，滤过，合并两次提取液，冷却至室温。

2、大孔吸附树脂柱吸附，按照上柱样品量与树脂量为1：5（W：V）的比例，以2～2.5bV/h的流速加入大孔吸附树脂柱中进行吸附。

3、第一次洗脱，使用50%（体积百分含量）乙醇作为洗脱液，以3～3.5bV/h的流速洗脱9个柱床体积，洗脱液用0.8%（体积百分含量）冰乙酸调至pH为3.5～4。

4、聚酰胺柱吸附，按照上柱样品量与聚酰胺量为1：15（W：V）的比例，加入至聚酰胺（90目）柱中进行吸附。

5、第二次洗脱，依次采用50%（体积百分含量）乙醇、使用0.8%（体积百分含量）冰乙酸调节pH为3.5～4的水、纯化水和70%（体积百分含量）乙醇进行洗脱，分别洗脱1.5、1.5、3、2个柱床体积，收集洗脱液，其中50%（体积百分含量）乙醇用0.8%（体积百分含量）冰乙酸调节pH为3.5～4。

6、浓缩，洗脱液用聚砜膜超滤机浓缩，截留分子量为300。

7、洗脱液浓缩后采用截留分子量为10000的聚砜膜超滤机进行超滤。

8、超滤液再进行喷雾干燥，得橙黄色红花黄色素，收率不少于2%，红花黄色素含羟基红花黄素A不少于20%，含总黄酮不少于80%。

下述实施例中使用的红花黄色素由以上步骤提取得到。

实施例1：

一种红花黄色素注射用冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）配液：准确称取甘露醇750g置于浓配罐中，加占总注射用水质量90%的注射用水，搅拌使完全溶解，加入红花黄色素750g，搅拌使完全溶解，用20%的NaOH水溶液调pH为7.0左右，搅拌使混合均匀；总注射用水质量为1.5kg。

（2）粗滤：步骤（1）得到的药液分别经1μm和0.45μm微孔滤膜加压粗滤，得药液A；再用占剩余总注射用水质量的10%注射用水注入浓配罐中，过滤冲洗，得药液B；

（3）超滤：将药液A过超滤，基本滤完后，采用药液B冲洗超滤器，合并滤液，计算超滤损失，再补加损失量的注射用水冲洗超滤，合并滤液至全量；

（4）精滤：采用0.22μm微孔滤膜过滤；

（5）灌装：将滤过后的药液分装于已经灭菌处理过的10ml西林瓶中，每支3g，规格：0.15g/支；

（6）冻干：冻干在-35℃～-47℃条件下进行，在此条件下保温2～4小时；再在1.5×10^-1mbar以下的真空条件下，升温至-15℃，在-15℃保温1～3小时；继续升温至0℃，直至等量药中干燥层移至瓶底，继续保温1～2小时；继续升温至5℃，保温1～2小时，使产品水线充分干燥。最后以每半小时5℃的速度使温度升温至40℃，保温5～8小时，即可真空包装。

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。