一种具有镇痛和抗炎活性的化合物,其制备方法及应用

摘要

本发明公开了具有通式I的化合物其制备方法以及它们作为镇痛剂和抗炎剂的应用。通式I中当R

说明书

技术领域

本发明涉及一种人工合成的化合物，及其制备方法和应用，特别涉及一种对2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸的羧基进行修饰而得到的化合物、本发明还涉及其制备方法以及它们在制备作为镇痛剂和抗炎剂药物中的应用。 

背景技术

疼痛不仅是许多疾病的并合症，而且自身已经被看作是一类疾病。从疾病层面上讲，由各种各样的疼痛造成的生活质量下降波及了最大量的人群。由于有效的镇痛剂往往与依赖性相联系，所以发明新的无依赖性的镇痛剂具有重要价值。发明人曾经指出咪唑母核具有镇痛活性。咪唑母核的氨基酸衍生物应该具有相似性。按照这种构想，发明人发现咪唑母核的氨基酸衍生物确实具有镇痛活性且具有抗炎活性。于是，发明人提出本发明。 

发明内容

本发明的所要解决的第一个技术问题是，提供具有通式I的R₁为苄基代表的化合物5a-s或其可药用盐： 

式中，R₁为苄基； 

式中，AA为Ile残基、Val残基、Leu残基、Ala残基、Gly残基、Phe残 基、Tyr残基、Trp残基、Asp-OBzl残基、Glu-OBzl残基、Ser残基、ω-Boc-Lys残基、Asn残基、Gln残基、Thr残基、Cys-(t-Bu)残基、Met残基、Arg-NO₂残基或Pro残基。 

其中，Bzl表示苄基(benzyl group)，t-Bu表示叔丁基。 

对所合成的通式I中R₁为苄基代表的化合物(5a-s)进行编号： 

5a中AA为Ile残基、5b中AA为Val残基、5c中AA为Leu残基、5d中AA为Ala残基、5e中AA为Gly残基、5f中AA为Phe残基、5g中AA为Tyr残基、5h中AA为Trp残基、5i中AA为Asp-OBzl残基、5j中AA为Glu-OBzl残基、5k中AA为Ser残基、5l中AA为ω-Boc-Lys残基、5m中AA为Asn残基、5n中AA为Gln残基、5o中AA为Thr残基、5p中AA为Cys-(t-Bu)残基、5q中AA为Met残基、5r中AA为Arg-NO₂残基和5s中AA为Pro残基。 

以上编码号只是为了方便描述，并无任何对发明的限制意义。 

本发明的所要解决的第二个技术问题是，提供具有通式I的R₁为氢代表的化合物6a-s或其可药用盐： 

式中，R₁为氢基； 

式中，AA为Ile残基、Val残基、Leu残基、Ala残基、Gly残基、Phe残基、Tyr残基、Trp残基、Asp残基、Glu残基、Ser残基、Lys残基、Asn残基、Gln残基、Thr残基、Cys残基、Met残基、Arg残基或Pro残基。 

对所合成的通式I中R₁为氢代表的化合物6a-s进行编号： 

6a中AA为Ile残基、6b中AA为Val残基、6c中AA为Leu残基、6d中AA为Ala残基、6e中AA为Gly残基、6f中AA为Phe残基、6g中AA为Tyr残基、6h中AA为Trp残基、6i中AA为Asp残基、6j中AA为Glu残基、6k中AA为Ser残基、6l中AA为Lys残基、6m中AA为Asn残基、6n中AA为Gln残基、6o中AA为Thr残基、6p中AA为Cys残基、6q中AA为Met残基、 6r中AA为Arg残基和6s中AA为Pro残基。 

以上编码号只是为了方便描述，并无任何对发明的限制意义。 

本发明所要解决的第三个技术问题是提供通式化合物5a-s和6a-s的制备方法，该方法包括： 

(1)2-硝基丙烷在氢氧化钠(6.0M)中滴加Br₂，加入乙醇在84℃反应制备2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷； 

(2)2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷在四氢呋喃和水中在9℃与锌粉混合后，2小时内滴加氯化铵和水，于10℃搅拌1小时然后保存在4℃16小时。用四氢呋喃和乙醚提取制备2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷； 

(3)2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷和3-硝基苯甲醛室温反应16小时得到4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)咪唑-1，3-二醇； 

(4)4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)四氢咪唑-1，3-二醇与无水硫酸镁在四氢呋喃中于80℃反应24小时制备4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-醇； 

(5)在NaH存在下溴乙酸乙酯与4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-醇反应制备乙基-2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸； 

(6)乙基-2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸在甲醇和氢氧化钠(2.0M)中于0℃反应制备2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸； 

(7)在DCC、HOBt和NMM存在下将2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸与氨基酸苄酯偶联，制备2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酰氨基酸苄酯5a-s； 

(8)在甲醇和氢氧化钠(2.0M)中脱去2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酰氨基酸苄酯中的苄基制备2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酰氨基酸6a-s。 

该制备方法可以用图1的路线概括。 

本发明所要解决的第四个技术问题是提供了所述的化合物或其可药用盐在制备镇痛和抗炎药物中的应用。 

一种用于制备治疗疼痛和炎症药物的组合物，由有效量的所述的化合物5a-s、6a-s或其可药用盐和药学上可接受的载体或辅料组成。 

本发明所要解决的第五个技术问题是在小鼠甩尾模型上评价本发明的化合物的镇痛活性。 

本发明所要解决的第六个技术问题是在小鼠二甲苯耳后致炎模型上评价本发明的化合物的抗炎活性。 

附图说明

图1为1-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基)氧乙酰基-L-氨基酸的合成路线。 

i)Br₂，NaOH；ii)Zn和NH₄Cl；iii)3-硝基苯甲醛；iv)无水MgSO₄；v)NaOH和BrCH₂CO₂C₂H₅；vi)NaOH(4M)和甲醇；vii)DCC，HOBt和NMM.5a中AA为Ile残基、5b中AA为Val残基、5c中AA为Leu残基、5d中AA为Ala残基、5e中AA为Gly残基、5f中AA为Phe残基、5g中AA为Tyr残基、5h中AA为Trp残基、5i中AA为Asp-OBzl残基、5j中AA为Glu-OBzl残基、5k中AA为Ser残基、5l中AA为ω-Boc-Lys残基、5m中AA为Asn残基、5n中AA为Gln残基、5o中AA为Thr残基、5p中AA为Cys-(t-Bu)残基、5q中AA为Met残基、5r中AA为Arg-NO₂残基和5s中AA为Pro残基。6a中AA为Ile残基、6b中AA为Val残基、6c中AA为Leu残基、6d中AA为Ala残基、6e中AA为Gly残基、6f中AA为Phe残基、6g中AA为Tyr残基、6h中AA为Trp残基、6i中AA为Asp残基、6j中AA为Glu残基、6k中AA为Ser残基、6l中AA为Lys残基、6m中AA为Asn残基、6n中AA为Gln残基、6o中AA为Thr残基、6p中AA为Cys残基、6q中AA为Met残基、6r中AA为Arg残基和6s中AA为Pro残基。 

具体实施方式

为了进一步阐明本发明，下面给出一系列实施例。必须指出的是，这些实施例完全是例证性的。给出这些实施例的目的是为了充分明示本发明的意义和内容，决不对本发明造成任何形式的限制。 

实施例1制备  2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷 

34.5g(0.39mol)2-硝基丙烷在65ml氢氧化钠(6.0M)中滴加10ml(0.19mol)Br₂，在-5℃反应1小时，加入128ml乙醇在84℃反应3小时，转移到 400ml冰水中得到无色结晶25g(73％)。 

实施例2制备  2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷 

17.6g 2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷在300ml四氢呋喃和50ml水中在9℃与27g锌粉混合后，2小时内滴加43g氯化铵和150ml水，于10℃搅拌1小时然后保存在4℃16小时。泥膏状物过滤，得到的固体用四氢呋喃(100ml×4)和乙醚(50ml×3)提取得到59g过滤物。得到的溶液除去四氢呋喃后加入50gNaCO₃，30g NaCl后用400ml氯仿提取得到9.4g(63％)2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷。 

实施例3制备  4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)咪唑-1，3-二醇 

296mg(2mmol)2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷和302mg(2mmol)3-硝基苯甲醛在3ml甲醇中室温反应16小时过滤得到421mg 4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)咪唑-1，3-二醇。Mp 179-181℃.EI-MS(m/z)281[M]⁺.IR(KBr)3315，1530，1360，1600，875，790，685cm^-1.¹H NMR(DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.03(s，2H)，7.77(s，1H)，7.57(d，J＝7.5Hz，1H)，7.34(d，J＝6.0Hz，1H)，7.04(dd，J＝8.7Hz，J＝8.1Hz，1H)，4.19(s，1H)，0.52(s，12H). 

实施例4制备  4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-醇 

281mg 4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)四氢咪唑-1，3-二醇与360mg无水硫酸镁在40ml无水四氢呋喃中于80℃反应24小时，过滤除掉MgSO₄后除去甲醇，柱层析得到174mg淡黄色化合物。Mp 97-99℃.EI-MS(m/z)263[M]⁺.IR(KBr)3345，1602，1513，1455，1370，811，790，680cm^-1.¹HNMR(CDCl₃-d₆)：δ/ppm＝8.55(s，1H)，8.22(d，J＝7.20Hz，1H)，7.99(d，J＝7.21Hz，1H)，7.55(t，J＝7.21Hz，1H)，2.65(s，1H)，1.15(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例5制备  乙基-2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸 

在80mg NaH存在下500mg 4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-醇在四氢呋喃中0℃反应30分钟，滴加0.3ml溴乙酸乙酯室温搅拌5小时后过滤，减压除去四氢呋喃后用200ml乙酸乙酯溶解，用饱和NaHCO₃(50ml×3)和 饱和NaCl(50ml×2)洗涤，乙酸乙酯用无水Na₂SO₄干燥，过滤，旋干滤液后柱层析得到529mg黄色油状物。ESI/MS(m/z)350[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(s，1H)，8.34(m，1H)，8.09(d，J＝7.8Hz，1H)，7.74(t，J＝7.8Hz，1H)，4.70(s，2H)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，1.22(s，6H)，1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，1.13(s，6H). 

实施例6制备  2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸 

2.0g乙基-2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸在20ml甲醇和4ml氢氧化钠(4M)中于0℃反应2小时后，调节pH到2，减压除去甲醇，用乙酸乙酯(50ml×3)提取后乙酸乙酯用无水Na₂SO₄干燥，过滤，减压除去乙酸乙酯得到1.6g黄色粉末。Mp 66-69℃；ESI/MS(m/z)320[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-7.5(c＝1.2，CH₃OH).¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(s，1H)，8.32(m，1H)，8.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.74(t，J＝7.8Hz，1H)，4.71(s，2H)，1.20(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例7制备  苄基-(2S，3S)-3-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-nitrophenyl)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸5a 

在0℃时，500mg DCC、270mg HOBt与642mg 2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二氢咪唑-1-基氧)乙酸反应半小时后加入2mmol异亮氨酸苄酯，氮甲基吗啉调节pH到8，反应完毕过滤，滤液减压除去四氢呋喃，溶解在200ml乙酸乙酯中，用饱和NaHCO₃(50ml×3)和饱和NaCl(50ml×2)洗涤，乙酸乙酯用无水Na₂SO₄干燥，过滤，减压除去乙酸乙酯后柱层析得到925mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)525[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(t，J＝3.0Hz，1H)，8.33(m，1H)，8.18(d，J＝8.1Hz，1H)，8.12(d，J＝8.1Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.35(m，5H)，5.12(m，2H)，4.53(s，2H)，4.28(dd，J＝8.1Hz，J＝6.3Hz，1H)，1.78(m，1H)，1.32(m，2H)，1.20(s，6H)，1.12(s，6H)，0.991(m，6H). 

实施例8制备  苄基(2S)-3-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸5b 

按照实施例7的操作，得到650mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z) 511[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.47(m，1H)，8.35(dd，J＝8.4Hz，J＝2.1Hz，1H)，8.21(d，J＝8.1Hz，1H)，8.15(d，J＝7.8Hz，1H)，7.74(t，J＝7.8Hz，1H)，7.36(m，5H)，5.13(s，2H)，4.58(s，2H)，4.23(dd，J＝8.1Hz，J＝6.3Hz，1H)，2.06(m，1H)，1.23(s，6H)，1.11(s，6H)，0.83(d，J＝6.6Hz，3H)，0.82(d，J＝6.6Hz，3H). 

实施例9制备  苄基(2S)-4-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸5c 

按照实施例7的操作，得到500mg标题化合物，为淡黄色固体。¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(s，1H)，8.32(d，J＝8.4Hz，1H)，8.25(d，J＝7.5Hz，1H)，8.11(d，J＝7.5Hz，1H)，7.71(t，J＝7.8Hz，1H)，7.34(m，5H)，5.10(s，2H)，4.49(s，2H)，4.35(m，1H)，1.56(m，3H)，1.20(s，6H)，1.12(s，6H)，0.85(d，J＝3.9Hz，3H)，0.80(d，J＝4.2Hz，3H). 

实施例10制备  苄基(2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5d 

按照实施例7的操作，得到425mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)483[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(t，J＝1.8Hz，1H)，8.32(d，J＝6.6Hz，2H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.34(m，5H)，5.11(s，2H)，4.50(s，2H)，4.33(t，J＝7.2Hz，1H)，1.28(d，J＝7.2Hz，3H)，1.20(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例11制备  苄基(2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)乙酸5e 

按照实施例7的操作，得到810mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)469[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(m，1H)，8.33(m，1H)，8.23(t，J＝7.5Hz，1H)，8.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝7.8Hz，1H)，7.36(m，5H)，5.11(s，2H)，4.53(s，2H)，3.89(d，J＝6.0Hz，2H)，1.22(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例12制备  苄基(2S)-3-苯基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟 基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5f 

按照实施例7的操作，得到810mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)559[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.40(m，1H)，8.32(dd，J＝8.1Hz，J＝1.5Hz，2H)，8.27(d，J＝7.8Hz，1H)，7.68(t，J＝7.8Hz，1H)，7.28(m，10H)，5.08(s，2H)，4.57(m，1H)，4.43(s，2H)，3.06(dd，J＝13.5Hz，J＝6.0Hz，1H)，2.95(dd，J＝13.5Hz，J＝8.7Hz，1H)，1.10(s，12H). 

实施例13制备  苄基(2S)-3-(4-羟基苯基)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5g 

按照实施例7的操作，得到952mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)573[M-H]^-.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝9.22(s，1H)，8.42(t，J＝1.9Hz，1H)，8.32(dd，J＝8.4Hz，J＝2.1Hz，1H)，8.14(d，J＝8.1Hz，1H)，8.07(d，J＝7.5Hz，1H)，7.69(t，J＝8.1Hz，1H)，7.34(m，3H)，7.29(m，2H)，6.93(d，J＝8.4Hz，2H)，6.62(d，J＝6.5Hz，2H)，5.08(m，2H)，4.52(m，1H)，4.45(s，2H)，2.93(dd，J＝14.0Hz，J＝6.0Hz，1H)，2.84(dd，J＝13.5Hz，J＝8.4Hz，1H)，1.15(s，6H)，1.12(m，6H). 

实施例14制备  苄基(2S)-3-(1-氢-吲哚-3-yl)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5h 

按照实施例7的操作，得到962mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)598[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝10.87(s，1H)，8.39(m，1H)，8.31(dd，J＝8.1Hz，J＝3.0Hz，1H)，8.11(d，J＝7.5Hz，1H)，8.03(d，J＝7.8Hz，1H)，7.63(t，J＝8.1Hz，1H)，7.44(d，J＝7.8Hz，1H)，7.31(m，4H)，7.20(m，2H)，7.06(m，2H)，6.95(t，J＝7.2Hz，1H)，5.05(m，2H)，4.63(dd，J＝13.8Hz，J＝7.2Hz，1H)，4.46(s，2H)，3.20(dd，J＝14.4Hz，J＝6.0Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.4Hz，J＝7.5Hz，1H)，1.10(s，12H). 

实施例15制备  (2S)-二苄基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁二酸5i 

按照实施例7的操作，得到980mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)617[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(t，J＝1.5Hz，1H)， 8.37(m，2H)，8.08(d，J＝7.8Hz，1H)，7.70(t，J＝8.1Hz，1H)，7.32(m，10H)，5.08(s，2H)，5.05(s，2H)，4.81(dd，J＝14.1Hz，J＝6.3Hz，1H)，4.50(s，2H)，2.91(dd，J＝16.5Hz，J＝6.0Hz，1H)，2.81(dd，J＝16.5Hz，J＝6.3Hz，1H)，1.17(s，6H)，1.07(s，6H). 

实施例16制备  (2S)-二苄基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊二酸5j 

按照实施例7的操作，得到600mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)631[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(s，1H)，8.30(m，2H)，8.09(d，J＝7.2Hz，1H)，7.68(t，J＝7.8Hz，1H)，7.34(m，10H)，5.11(s，2H)，5.07(s，2H)，4.49(s，2H)，4.39(m，1H)，2.39(t，J＝7.5Hz，2H)，2.07(m，1H)，1.91(m，1H)，1.19(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例17制备  苄基-(2S)-3-羟基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5k 

按照实施例7的操作，得到600mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)499[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(m，1H)，8.31(dd，J＝8.1Hz，J＝3.0Hz，1H)，8.01(d，J＝7.8Hz，1H)，8.03(d，J＝7.8Hz，1H)，7.72(t，J＝7.8Hz，1H)，7.35(m，5H)，5.13(s，2H)，4.61(m，2H)，4.43(m，1H)，3.75(s，1H)，3.63(m，1H)，1.21(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例18制备  苄基-(2S)-6-叔丁氧羰基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)己酸5l 

按照实施例7的操作，得到1100mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)640[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(t，J＝4.8Hz，1H)，8.32(dd，J＝7.5Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.23(d，J＝7.5Hz，1H)，8.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.36(m，5H)，6.73(t，J＝5.1Hz，1H)，5.11(s，2H)，5.00(s，2H)，4.28(m，1H)，2.85(dd，J＝12.6Hz，J＝6.3Hz，2H)，1.78(m，2H)，1.68(m，2H)，1.36(s，9H)，1.31(m，2H)，1.21(s，6H)，1.23(s，6H). 

实施例19制备  苄基-(2S)-4-氨基-4-氧-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5- 二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸5m 

按照实施例7的操作，得到852mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)526[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(m，1H)，8.31(m，1H)，8.18(d，J＝8.1Hz，1H)，8.08(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.42(s，1H)，7.33(m，5H)，6.95(s，1H)，5.09(s，2H)，4.71(dd，J＝13.72Hz，J＝5.4Hz，1H)，4.51(s，2H)，2.59(t，J＝4.5Hz，2H)，1.19(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例20制备  苄基-(2S)-5-氨基-5-氧-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸5n 

按照实施例7的操作，得到832mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)540[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(m，1H)，8.37(m，2H)，8.01(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.35(m，5H)，7.24(s，1H)，6.77(s，1H)，5.11(s，2H)，4.49(s，2H)，4.32(m，1H)，2.09(m，2H)，1.96(m，1H)，1.81(m，1H)，1.21(s，6H)，1.09(s，6H). 

实施例21制备  苄基-(2S，3R)-3-羟基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸5o 

按照实施例7的操作，得到700mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)513[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(m，1H)，8.32(dd，J＝8.1Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.82(d，J＝7.6Hz，1H)，7.72(t，J＝7.8Hz，1H)，7.36(m，5H)，5.13(m，2H)，4.62(s，2H)，4.37(dd，J＝8.1Hz，J＝3.9Hz，1H)，4.17(m，1H)，1.21(s，6H)，1.13(s，6H)，1.02(d，J＝6.3Hz，3H). 

实施例22制备  苄基-(2S)-3-(叔丁基硫)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸5p 

按照实施例7的操作，得到470mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)569[M-H]^-.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.42(t，J＝1.8Hz，1H)，8.32(dd，J＝8.1Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.24(d，J＝8.1Hz，1H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝7.8Hz，1H)，7.36(m，5H)，5.12(s，2H)，4.53(m，1H)，4.52(s，2H)，2.87(m，1H)，2.76(m，1H)，1.26(s，6H)，1.22(s，9H)，1.13(s，6H). 

实施例23制备  苄基-(2S)-4-(甲基硫)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸5q 

按照实施例7的操作，得到842mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)543[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(m，1H)，8.32(d，J＝7.2Hz，2H)，8.11(d，J＝8.1Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.35(m，5H)，5.12(s，2H)，4.55(s，2H)，4.47(m，1H)，2.42(m，2H)，1.99(s，3H)，1.93(m，2H)，1.21(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例24制备  苄基-(2S)-5-(3-硝基胍基)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸5r 

按照实施例7的操作，得到1102mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)613[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.48(m，1H)，8.43(m，1H)，8.33(m，2H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.96(m，2H)，7.71(t，J＝7.8Hz，1H)，7.35(m，5H)，5.11(s，2H)，4.51(s，2H)，4.34(m，1H)，3.12(dd，J＝12.3Hz，J＝6.3Hz，2H)，1.76(m，1H)，1.64(m，1H)，1.47(m，2H)，1.20(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例25制备  苄基-(2S)-1-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰基)吡咯烷-2-羧酸5s 

按照实施例7的操作，得到500mg标题化合物，为淡黄色固体。ESI/MS(m/z)509[M+H]⁺.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(m，1H)，8.32(d，J＝8.1Hz，1H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.71(t，J＝8.1Hz，1H)，7.34(m，5H)，5.11(m，2H)，4.73(s，2H)，4.35(m，1H)，3.50(m，2H)，2.16(m，1H)，1.89(m，3H)，1.21(s，6H)，1.09(s，6H). 

实施例26制备  (2S，3S)-3-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸6a 

在0℃时将1mmol 5a溶解在20ml甲醇2ml NaOH(4M)中，反应1小时后用饱和硫酸氢钾调节pH到2，减压除去甲醇和水后柱层析得到320mg 6a，为淡黄色固体。Mp 75-76℃；ESI/MS(m/z)433[M-H]^-.[α]₂₀^D＝0.3(c＝1.1，CH₃OH).IR(KBr)：3413，2971，2905，2877，1682，1533，1451，1349，1214，1158，1062，902，823，718，573cm^-1.¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(m， 1H)，8.32(dd，J＝8.1Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.73(d，J＝8.1Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.17(m，1H)，1.75(m，1H)，1.40(m，2H)，1.22(s，6H)，1.13(s，6H)，0.81(m，6H). 

实施例27制备  (2S)-3-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸6b 

按照实施例26的操作，得到450mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 90-92℃；ESI/MS(m/z)419[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-18.7(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3210，2970，2925，2870，2699，1734，1684，1536，1460，1352，1205，1109，1011，887，829，700cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.90(s，1H)，8.81(m，1H)，8.50(dd，J＝8.4Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.42(d，J＝8.1Hz，1H)，8.38(d，J＝8.2Hz，1H)，7.93(t，J＝8.1Hz，1H)，4.84(s，2H)，4.09(dd，J＝5.7Hz，J＝8.4Hz，1H)，2.03(m，1H)，1.47(s，6H)，1.42(s，6H)，0.85(d，J＝6.6Hz，6H). 

实施例28制备  (2S)-4-甲基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸6c 

按照实施例26的操作，得到401mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 112-120℃；ESI/MS(m/z)433[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-44.9(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3800，3216，2959，2680，2694，1682，1624，1585，1448，1351，1202，1160，1103，902，825，700cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.61(s，1H)，8.45(d，J＝7.8Hz，1H)，8.27(t，J＝7.5Hz，2H)，7.82(t，J＝7.8Hz，1H)，4.62(s，2H)，4.20(m，1H)，1.50(m，3H)，1.35(s，6H)，1.27(s，6H)，0.88(d，J＝3.9Hz，3H)，0.81(d，J＝4.2Hz，3H). 

实施例29制备  (2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6d 

按照实施例26的操作，得到270mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 80-90℃；ESI/MS(m/z)391[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-2.7(c＝1.3，CH₃OH).IR(KBr)：3404，2980，2972，1672，1612，1532，1452，1351，1158，1059，905，823，717，573cm^-1；¹HNMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.39(s，1H)，8.23(d，J＝6.3Hz，1H)，8.19(d，J＝5.7Hz，1H)，7.73(m，2H)，4.48(s，2H)，3.94(m，1H)，1.23(m，6H)，1.22(s， 3H)，1.13(s，6H). 

实施例30制备  (2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)乙酸6e 

按照实施例26的操作，得到400mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 172-176℃；ESI/MS(m/z)377[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-5.7(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3431，3086，2983，2960，1726，1682，1606，1535，1444，1348，1223，1164，1120，1064，888，822，712，555cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(m，1H)，8.32(d，J＝8.1Hz，1H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.86(m，1H)，7.73(t，J＝7.8Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.68(d，J＝5.4Hz，2H)，1.23(s，6H)，1.15(s，6H). 

实施例31制备  (2S)-3-苯基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6f 

按照实施例26的操作，得到586mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 140-143℃；ESI/MS(m/z)467[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-2.4(c＝1.1，CH₃OH).IR(KBr)：3411，3201，2980，2903，2885，2683，1736，1681，1533，1448，1350，1217，1164，1120，1064，902，825，732，679cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.88(m，1H)，8.50(s，1H)，8.39(d，J＝8.1Hz，1H)，8.15(m，2H)，7.74(t，J＝8.1Hz，1H)，7.24(m，5H)，4.52(s，2H)，4.44(m，1H)，3.07(dd，J＝13.8Hz，J＝4.8Hz，1H)，2.88(dd，J＝13.8Hz，J＝9.0Hz，1H)，1.19(s，12H). 

实施例32制备  (2S)-3-(4-羟基苯基)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6g 

按照实施例26的操作，得到327mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 79-82℃；ESI/MS(m/z)483[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-0.6(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3399，2980，2932，1672，1619，1532，1445，1351，1231，1166，1113，830，709，539cm^-1； ¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.74(s，1H)，9.18(s，1H)，8.42(s，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，8.07(d，J＝7.5Hz，1H)，7.86(d，J＝7.5Hz，1H)，7.70(t，J＝7.8Hz，1H)，6.93(d，J＝8.1Hz，2H)，6.61(d，J＝8.1Hz，2H)，4.45(s，2H)，4.39(m，1H)，2.93(dd，J＝13.5Hz，J＝4.5Hz，1H)，2.78(m，1H)，1.15(m，12H). 

实施例33制备  (2S)-3-(1-氢吲哚-3-基)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6h 

按照实施例26的操作，得到374mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 128-137℃；ESI/MS(m/z)506[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-11.8(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3399，3061，2981，2929，1676，1628，1533，1443，1351，1228，1162，1100，745，706，551cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.76(s，1H)，10.83(s，1H)，8.43(s，1H)，8.31(d，J＝7.5Hz，1H)，8.04(d，J＝7.8Hz，1H)，7.85(d，J＝7.5Hz，1H)，7.65(t，J＝8.1Hz，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，1H)，7.31(d，J＝7.8Hz，1H)，7.06(m，2H)，6.94(t，J＝7.5Hz，1H)，4.53(m，1H)，4.43(s，2H)，3.18(m，1H)，3.05(dd，J＝14.7Hz，J＝7.5Hz，1H)，1.14(m，12H). 

实施例34制备  (2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁二酸6i 

按照实施例26的操作，得到500mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 130-140℃；ESI/MS(m/z)435[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-6.8(c＝1.1，CH₃OH).IR(KBr)：3420，2986，2873，1734，1691，1536，1354，1172，1041，887，830，750，702cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.69(m，2H)，8.74(s，1H)，8.54(d，J＝7.8Hz，1H)，8.42(d，J＝7.8Hz，1H)，8.34(m，1H)，7.89(t，J＝7.8Hz，1H)，4.75(s，2H)，4.51(dd，J＝14.4Hz，J＝6.0Hz，1H)，2.65(m，2H)，1.41(s，6H)，1.36(s，6H). 

实施例35制备  (2S)-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸6j 

按照实施例26的操作，得到230mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 54-58℃；ESI/MS(m/z)449[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-20.4(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3330，3112，2984，2865，1740，1541，1357，1250，1026，906，824，701，636，515cm^-1；¹HNMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.24(m，2H)，8.67(s，1H)，8.48(d，J＝7.5Hz，1H)，8.38(m，1H)，8.30(m，1H)，7.86(m，1H)，4.69(s，2H)，4.20(m，1H)，2.23(m，2H)，1.96(m，1H)，1.77(m，1H)，1.38(s，6H)，1.31(s，6H). 

实施例36制备  (2S)-3-羟基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6k 

按照实施例26的操作，得到327mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 86-91℃；ESI/MS(m/z)407[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-7.0(c＝1.4，CH₃OH).IR(KBr)：3410，3086，3979，2933，2876，1672，1532，1441，1350，1228，1159，1065，902，823，714，572cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.41(s，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，8.01(d，J＝7.2Hz，1H)，7.34(m，2H)，4.54(s，2H)，4.28(m，1H)，3.67(m，1H)，3.55(m，1H)，1.24(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例37制备  (2S)-6-氨基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)己酸6l 

先将化合物5l溶解在乙酸乙酯中，加入盐酸乙酸乙酯后反应，反应完毕抽干溶剂，再按照实施例26的操作，得到372mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 64-66℃；ESI/MS(m/z)448[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-21.2(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3392，3220，2982，2723，1734，1684，1535，1352，1206，1159，1107，1020，883，826，698，507cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.82(m，1H)，8.62(m，2H)，8.43(d，J＝8.1Hz，1H)，8.14(m，2H)，7.94(t，J＝7.8Hz，1H)，4.78(s，2H)，4.11(m，1H)，2.71(m，2H)，1.65(m，1H)，1.56(m，2H)，1.44(m，12H)，1.34(m，3H). 

实施例38制备  (2S)-4-氨基-4-氧-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸6m 

按照实施例26的操作，得到326mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 89-92℃；ESI/MS(m/z)436[M+H]⁺.[α]₂₀^D＝0.6(c＝1.3，CH₃OH).IR(KBr)：3370，3230，3111，2982，2850，1737，1678，1540，1450，1357，1244，1170，1028，906，829，702，638，517cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝9.48(s，1H)，8.77(s，1H)，8.61(d，J＝8.1Hz，1H)，8.32(t，J＝6.9Hz，2H)，7.96(t，J＝7.8Hz，1H)，7.38(s，1H)，6.90(s，1H)，4.80(s，2H)，4.50(m，1H)，2.51(m，2H)，1.48(s，6H)，1.41(s，6H). 

实施例39制备  (2S)-5-氨基-5-氧-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸6n 

按照实施例26的操作，得到378mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 61-63 ℃；ESI/MS(m/z)448[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-13.7(c＝1.1，CH₃OH).IR(KBr)：3413，3301，2950，2875，1739，1630，1541，1357，1285，1243，1169，1028，637，516cm^-1； ¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝10.74(m，1H)，8.77(s，1H)，8.61(d，J＝8.1Hz，1H)，8.44(d，J＝7.2Hz，1H)，8.34(d，J＝7.5Hz，1H)，7.96(t，J＝8.1Hz，1H)，7.23(s，1H)，6.80(s，1H)，4.77(s，2H)，4.14(m，1H)，2.08(m，2H)，1.94(m，1H)，1.76(m，1H)，1.49(s，6H)，1.41(s，6H). 

实施例40制备  (2S，3R)-3-羟基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸6o 

按照实施例26的操作，得到280mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 121-123℃；ESI/MS(m/z)421[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-2.0(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3406，2979，2920，1668，1611，1532，1408，1351，1159，1080，811，716，579cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.40(m，1H)，8.32(d，J＝8.1Hz，1H)，8.09(d，J＝7.5Hz，1H)，7.74(t，J＝8.1Hz，1H)，7.43(m，1H)，4.51(s，2H)，3.89(m，2H)，1.23(s，6H)，1.13(s，6H)，0.84(m，3H). 

实施例41制备  (2S)-3-巯基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丙酸6p 

先将化合物5p溶解在乙酸乙酯中，加入盐酸乙酸乙酯后反应，反应完毕抽干溶剂，再按照实施例26操作，得到204mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp117-118℃；ESI/MS(m/z)425[M+H]⁺.[α]₂₀^D＝-52.8(c＝1.3，CH₃OH).IR(KBr)：3381，3240，3105，2944，1743，1668，1540，1451，1356，1289，1240，1170，1031，829，703，637，516cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝12.10(m，1H)，8.77(s，1H)，8.60(d，J＝8.1Hz，1H)，8.48(d，J＝7.8Hz，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，7.93(m，1H)，4.81(s，2H)，4.40(m，1H)，3.06(m，1H)，2.84(m，1H)，1.48(s，6H)，1.41(s，6H). 

实施例42制备  (2S)-4-甲基硫-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)丁酸6q 

按照实施例26的操作，得到393mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 59-63℃；ESI/MS(m/z)451[M-H]^-.[α]₂₀^D＝1.0(c＝1.1，CH₃OH).IR(KBr)：3406，2978， 2923，1679，1533，1442，1350，1228，1163，1117，1063，714，570cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(m，1H)，8.33(d，J＝6.9Hz，1H)，8.12(d，J＝7.5Hz，1H)，8.09(m，1H)，7.73(t，J＝8.1Hz，1H)，4.51(s，2H)，4.29(m，1H)，2.40(m，2H)，2.00(s，3H)，1.96(m，1H)，1.84(m，1H)，1.22(s，6H)，1.13(s，6H). 

实施例43制备  (2S)-5-胍基-2-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰胺基)戊酸6r 

按照实施例26的操作后，将得到的化合物用甲醇溶解，加入钯/碳催化氢解后得到300mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 68-75℃；ESI/MS(m/z)478[M+H]⁺.[α]₂₀^D＝-11.2(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3384，3450，2983，1671，1535，1354，1267，1173，1037，641，517cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(s，1H)，8.32(d，J＝6.9Hz，1H)，8.11(d，J＝6.6Hz，1H)，7.97(d，J＝5.7Hz，1H)，7.73(m，2H)，7.11(m，4H)，4.51(s，2H)，4.18(m，1H)，3.07(m，2H)，1.73(m，1H)，1.58(m，1H)，1.43(m，2H)，1.23(s，6H)1.13(s，6H). 

实施例44制备  (2S)-1-(2-(4，4，5，5-四甲基-2-(3-硝基苯基)-4，5-二羟基咪唑-1-基氧)乙酰基)吡咯烷-2-羧酸6s 

按照实施例26的操作，得到220mg标题化合物，为淡黄色固体。Mp 112-115℃；ESI/MS(m/z)417[M-H]^-.[α]₂₀^D＝-64.9(c＝1.2，CH₃OH).IR(KBr)：3420，3087，2978，2850，2780，1727，1656，1532，1445，1349，1268，1162，1082，822，718cm^-1；¹H NMR(BHSC-300，DMSO-d₆)：δ/ppm＝8.43(s，1H)，8.33(m，1H)，8.12(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73(t，J＝8.1Hz，2H)，4.70(m，2H)，4.21(m，1H)，3.45(m，2H)，2.07(m，2H)，1.86(m，2H)，1.24(s，6H)，1.12(s，6H). 

实施例45  小鼠光辐射热甩尾法评价6a-s的镇痛作用 

雄性ICR小鼠(20±2g)，实验前在实验温度下饲养一天。将小鼠装入特制的固定筒内，尾部暴露于外。测痛时以小型聚光灯产生的光束照射鼠尾，用秒表计从照射开始到甩尾反应潜伏期(tail flick latency，TFL)。调节聚光灯与鼠尾距离使剌激强度较为灵敏TFL为2-6s。实验开始时先测3次，每次间隔5min，取均值作为基础痛阈。将本发明的化合物溶解在水中，灌胃给药，按每次灌胃量为0.2ml以及10μmol/kg剂量调节浓度。每次试验设生理盐水组作平行对照。为防止皮肤 烫伤，光照截止时间10s，间隔30min复测TFL以观察药物镇痛时效关系。以痛阈提高率评定药物镇痛强度：PTV＝AAPT/BPT(PTV＝痛阈提高率，BPT＝基础痛阈值，AAPT＝给药后痛阈值-基础痛阈值)。得到的结果列入表1。结果表明本发明的化合物具有明确的镇痛作用。 

表1  化合物6a-s的镇痛作用 

痛阈提高率用均数±SD％表示。n＝12；NS＝生理盐水；阿司匹林剂量：167μmol/kg；化合物4的剂量：130μmol/kg；6a-s的剂量：10μmol/kg；a)与NS比较p＜0.05；b)与NS比较p＜0.01；c)与化合物4比较p＜0.05；d)与NS比较p＜0.01，与化合物4比较p＜0.05；e)与化合物4比较p＜0.01；f)与NS和化合物4比较p＜0.01g)与NS比较p＜0.05，与化合物4比较p＜0.01；h)与NS和化合物4比较p＜0.05. 

实施例46  不同剂量6g的镇痛作用 

采用实施例45的小鼠光辐射热甩尾模型评价了10μmol/kg、3.3μmol/kg和1.0μmol/kg三种剂量6g的镇痛作用。结果列入表4。结果表明6g剂量依赖地显示镇痛作用。 

表2  不同给药剂量下6g的镇痛作用 

n＝12，a＝与NS比较，p＜0.05，b＝与NS比较，p＜0.01，c＝与化合物4比较，p＜0.05，d＝与化合物4比较，p＜0.01. 

实施例47  小鼠二甲苯耳致炎模型评价6a-s的抗炎作用 

雄性ICR小鼠(20±2g)，实验前在实验温度下饲养一天。将本发明的化合物溶解在水溶液中，每次实验设生理盐水组作平行对照，灌胃给药，按每次灌胃量为0.2ml以及10μmol/kg剂量调节浓度。给药后半小时将30μL二甲苯均匀涂抹在小鼠右耳上，涂抹完毕2小时后处死小鼠，立即剪下双侧耳朵，将两只耳朵对齐后用7mm打孔器打下二片，称量得到两只耳朵的差重。得到的结果列入表3。结果表明本发明的化合物具有明确的抗炎作用。 

表3  化合物6a-s的抗炎作用 

n＝12；NS＝生理盐水，阿司匹林剂量：167μmol/kg；化合物4的剂量：130 μmol/kg；化合物6a-s的剂量＝10μmol/kg；a)与NS比较p＜0.05；b)与NS比较p＜0.01；c)与NS和化合物4比较p＜0.01；d)与NS和化合物4比较p＜0.01，与阿司匹林比较p＞0.05. 

实施例48  不同剂量6g的抗炎作用 

采用实施例47的小鼠二甲苯耳致炎模型模型评价了10μmol/kg、3.3μmol/kg和1.0μmol/kg三种剂量6g的抗炎作用。结果列入表4。结果表明6g剂量依赖地显示抗炎作用。 

表4  不同给药剂量下6g的抗炎作用 

n＝12，a)与3.3μmol/kg及1.0μmol/kg比较p＜0.01；b)与1.0μmol/kg比较p＜0.01. 

以上所述仅为本发明的优选实施例，对本发明而言仅是说明性的，而非限制性的；本领域普通技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效变更，但都将落入本发明的保护范围内。