O-37 血液製剤の安全性向上を目指したB型肝炎ウィルスのIn vitro培養系の開発

摘要

【目的】B型肝炎ウィルス（以下HBV）は,血液製剤の安全性を確保上で重要なウィルスだが効率良く 増殖するin vitro培養系は,未だ開発されていない.そのため感染者由来の血漿やブタ由来の仮性狂犬 病ウィル（以下PRV）を用いて血液製剤の安全性評価のための試験が実施されている.PRVは，ヘル ペスウィルス科に属し厳密な意味でモデルウィルスとは言い難い.また将来的に倫理上,陽性血漿を 充分量確保することが困難になる可能性もある.in vitroでの培養が可能になれば,不活化法の評価に 必要な感染性を有するHBVや検出感度評価のためのHBVを充分量を得ることが可能になる.そこで 血液製剤の試験に応用可能なin vitro感染系の確立を目指した.【方法】感染性を有するHBV産生細胞 を得るためにHBV陽性血漿からPCRを用いて全長を増幅し,self-ligationによって環状二重鎖にして これを鋳型にRCA （rollingcircular amplification）を行い,全長のHBVがタンデムに多数連結した状 態のDNAをin vitroで合成した.