遺伝子改変マウス作製技術——PITT/i-PITT法とEasi-CRISPR法

摘要

遺伝子改変マウスは,in vivoでの遺伝子機能解析やヒト疾患のモデル動物として世界中で幅広く活用されている.しかし,それらの作製には膨大な時間と労力を要するだけでなく,作製手法そのものにもいくつかの解決すべき問題点が残されていた.より優れた遺伝子改変マウスを少ない労力で作製するためには,“標的とした遺伝子座位を正確に,かつ効率よく改変することが望ましい”と考え，筆者らはこれまでに独自の遺伝子改変マウス作製技術,具体的には,受精卵への顕微注入を介して特定の遺伝子座位に目的遺伝子を挿入することを可能とするPITT/i-PITT法や，一本鎖DNAを利用して目的遺伝子を高効率に挿入可能なEasi-CRISPR法を開発してきた.これにより，再現性の高い目的遺伝子発現を示すトランスジェニック(Tg)マウスやノックダウン(KD)マウス,これまで作製が困難であったノックイン(KI)マウスやコンディショナルノックアウト(cKO)マウスなどの遺伝子改変マウスをより簡便に作製できるようになった.