ОСОБЕННОСТИ ГЛИКОЗИЛИРОВАНИЯ БЕЛКОВ В СПОРАХ МИКРОСПОРИДИИ PARANOSEMA (ANTONOSPORA) GRYLLI

摘要

Длительная адаптация микроспоридий - обширной группы родственных грибам одноклеточных микроорганизмов - к внутриклеточному паразитизму привела к чрезвычайной минимизации функционального аппарата клетки. Например, разнообразие углеводов, входящих в состав гликопротеинов и про-теогликанов паразитов, вероятно, ограничивается лишь наличием 0-связанных цепей, состоящих из остатков маннозы. Это предположение основано на обнаружении в геноме микроспоридии человека Еп-cephalitozoon cuniculi трех генов, ответственных за 0-маннозилированне белков при отсутствии ферментов, участвующих в N-гликозилировании. В работе предпринято изучение особенностей гликозилирова-ния белков в спорах микроспоридии Paranosema grylli, развивающейся в жировом теле двупятнистого сверчка Gryllus bimaculaius. Разделение белков спор в геле и их окрашивание в присутствии периодата и реагента Шиффа показали, что отдельные гликопротеины P. gryili являются высокогликозилированны-ми, а наибольшую интенсивность окраски проявил основной белок полярной трубки РТР1. Обработка экстрагированного материала N-гликозидазой F и гибридизация с лектином WGA, конъюгированным с пероксидазой хрена, не показали присутствия в спорах P. grylli N-гликозилированных белков. В то же время избирательно экстрагированный основной белок оболочки спор Р40 специфично распознавался лектином GNA, сшитым с агарозными шариками. Предобработка р40 а- и (5-маннозидазами значительно снижала эффективность связывания. Поскольку лектин GNA специфичен по отношению к терминальным остаткам маннозы, это свидетельствует в пользу О-маннозилирования основного белка оболочки споры микроспоридий. Несмотря на интенсивное гликозилирование PTPI, экстрагированные белки полярной трубки P. grylli не показали специфичного связывания с GNA-агарозой, что оставляет вопрос об особенностях их гликозилирования открытым. Сопоставление полученных данных с результатами расшифровки генома Е. cuniuculi позволяет сделать яывод о том, что минимизация аппарата гликозилирова-ння белков микроспоридий является обшей особенностью этой группы паразитов.