ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИНИИ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТ ВЫДЕЛЕННОЙ ИЗ ПУЛЬПЫ МОЛОЧНОГО ЗУБА ЧЕЛОВЕКА

摘要

Получена и охарактеризована новая неиммортализованная клеточная линии из пульпы молочного зуба ребенка, названная MSC-DP. Анализ основныххарактеристик проводили на 6-м и 25-м пассажах. В процессе длительного культивирования постепенно увеличивается доля стареющих клеток согласно активности Р-галактозидазы. На 25-м пассаже по сравнению с более ранними пассажами существенно увеличивается экспрессия маркера CD264, повышенный уровень которой также характеризует клетки, вступившие в активную фазу репликативного старения. Эффективность клонирования клеток MSC-DP существенно уменьшается в процессе длительного культивирования. Кривые роста свидетельствуют об активной пролиферации клеточной линии на 6-м пассаже и значительном снижении индекса пролиферации к 25-му пассажу. Кариотипический анализ на 6-м и 25-м пассажах показал наличие нормального кариотипа человека: 46, XX. Существенные различия в кариотипической структуре между пассажами 6 и 25 связаны с наличием значительного количества дицентрических хромосом по типу теломерных ассоциаций на позднем пассаже с преимущественным участием длинного плеча хромосомы 14. На 6-м и 25-м пассажах выявлены экспрессия поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых клеток (МСК) человека (CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC) и отсутствие экспрессии CD34, CD45 и HLA-DR. Маркер недифференцированных эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) человека — SSEA-4 — экспрессируется только на 6-м пассаже. Показано, что клетки линии MSC-DP обладают способностью дифференцироваться в остеогенном и хондрогенном направлениях. Способность к муль-типотентной дифференцировке клеток MSC-DP подтверждается экспрессией гена нейрональной диф-ференцировки. В целом представленные результаты подтверждают статус МСК для полученной линии и свидетельствуют о существенных изменениях, происходящих в процессе репликативного старения.