ХАРАКТЕРИСТИКА НЕИММОРТАЛИЗОВАННОЙ ЛИНИИ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ЭПИКАРДИАЛЬНОЙЖИРОВОЙ ТКАНИ ЧЕЛОВЕКА

摘要

Охарактеризована новая неиммортализованная линия мезенхимных стволовых клеток (МСК) из эпикар-диальной жировой ткани человека (ADH-MSC), полученная от 50-летнего донора в процессе аортокоро-нарного шунтирования. В процессе длительного культивирования (пассажи 8—16) постепенно увеличивается доля стареющих клеток. В целом, полученные результаты подтверждают ограниченный срок жизни клеток линии ADH-MSC, характерный для неиммортализованных клеточных популяций. Кариотипический анализ показал, что на раннем 8-ом пассаже имеет место нормальный кариотип человека, но уже к пассажу 12 существенно увеличивается кариотипическая гетерогенность, усиливающаяся к пассажу 16 и превышающая допустимый уровень хромосомных нарушений в нормальных МСК. Показано образование новых структурных вариантов кариотипа (СВК). Обнаружено преимущественное участие короткого плеча одного из гомологов хромосомы 21 в клональных и неклональных перестройках, а также в дицентриках по типу теломерных ассоциаций. Показано уменьшение частоты полиплоидов в процессе длительного культивирования. На пассажах 8 и 16 выявлена высокая экспрессия поверхностных антигенов, характерных для МСК человека (CD44, CD73, CD90, виментин, CD105, HLA-ABC) и отсутствие экспрессии CD34, CD45, HLA-DR. На 8-м пассаже присутствуетзначительная экспрессия маркера ранней дифференци-ровки ЭСК — SSEA-4, которая существенно снижается на пассаже 16. На пассажах 8 и 16 клетки линии ADH-MSC способны с одинаковой интенсивностью дифференцироваться в остеогенном и хондрогенном*на-правлениях. Интенсивность адипогенной дифференцировки снижается к пассажу 16. В целом, представленные результаты подтверждают статус МСК для полученной линии и свидетельствуют осущественных изменениях, происходящих в процессе раннего репликативного старения,связанных, возможно, с измененным микроокружением, в котором находились клетки донора с заболеванием сердца. Раннее старение и кариотипическая нестабильность могут быть связаны и с более значительными нарушением системы репарации ДНК клеток ADH-MSC по сравнению с другими линиями.