НОВЫЙ ПОДХОД К ВЫЯВЛЕНИЮ ГЕНОВ, КОНТРОЛИРУЮЩИХ БИОГЕНЕЗ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ДРОЖЖЕЙ Saccharomyces cerevisiae

摘要

Ген MCD4 дрожжей Saccharomyces cerevisiae кодирует фермент, который, по-видимому, катализирует реакцию присоединения фосфоэтаноламина к первому остатку маннозы в молекуле предшественни-ка(ов) гликозилфосфатидилинозита. Однако значение этой модификации неясно. Кроме того, фено-типические проявления некоторых мутаций в гене MCD4 не связаны очевидным образом с нарушением синтеза гликозилфосфатидилинозита, что указывает на наличие у белка Mcd4p дополнительных функций. С целью прояснения функций этого белка предпринят поиск генов, мутации в которых ле-тальны или полулетальны в комбинации с мутацией ssu21 в гене MCD4. Найдено шесть таких мутаций. Некоторые из них приводят к возникновению чувствительностик додецилсульфату натрия и/или калькофлюору белому. Клонированы гены, способные комплементировать проявления двух из шести мутаций: MNN9, продукт которого участвует в формировании внешних цепей N-связанного глика-нового компонента секретируемых белков, и GWT1, кодирующий белок эндоплазматического рети-кулума, вовлеченный в синтез гликозилфосфатидилинозита. Полученные данные свидетельствуют о том, что в обоих случаях снижение жизнеспособности может быть связано с дефектом биогенеза клеточной стенки и нарушением сворачивания секретируемых белков. Использованный подход может быть применен для поиска новых генов, контролирующих биогенез клеточной стенки.