ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА RUN-ON ТРАНСКРИПЦИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ РЕГУЛЯЦИИ ЭКСПРЕССИИ ПЛАСТИДНОГО ГЕНОМА

摘要

В статье подробно описаны и проанализированы основные этапы метода run-on транскрипции, который позволяет изучать регуляцию скорости транскрипции ядерных, хлоропластных и митохон-дриальных генов, что очень важно для понимания механизма действия фитогормонов, света, температуры и других факторов. Метод включает выделение ДНК-содержащих органелл, транскрипцию in vitro в лизатах этих органелл в присутствии меченныхР предшественников РНК, выделение меченых вновь синтезированных транскринтов и их гибридизацию с нанесенными на специальную мембрану ген-специфическими фрагментами ДНК. В обзоре обсуждаются некоторые возможные проблемы в ходе проведения анализа, а также встречающиеся неточности при интерпретации полученных результатов. Несмотря на большие возможности этого метода, он практически не применяется российскими учеными, в том числе и в биологии растений. Цель данной работы заключается в том, чтобы способствовать быстрейшему внедрению метода run-on транскрипции в практику научных исследований физиологов растений России.