УЧАСТИЕ КАЛЬЦИЙ-НЕЗАВИСИМОЙ ФОСФОЛИПАЗЫ А2 В РЕГУЛЯЦИИ Са2 -СИГНАЛА, ВЫЗВАННОГО ИНГИБИТОРОМ КАЛЬМОДУЛИНА В ТИМОЦИТАХ КРЫСЫ

摘要

Ранее показано, что ингибитор кальмодулина калмидазолий в микромолярных концентрациях кратковременно активирует неселективный Са2+-канал в плазматической мембране клеток асцитной карциномы Эрлиха [Зинченко В Л и др. Биофизика. 2005. Т. 50. № 6, С. 1055-1069]. В настоящей работе с целью обнаружения Са2+-каналов данного типа в других клетках и выявления общих механизмов их регуляции изучено действие калмидазолия на тимоциты крысы. Показано, что калмидазолий вызывает двухфазное повышение содержания Са2+ в цитозоле тимоцитов, Обе фазы обусловлены входом Са снаружи и отражают активность неселективных Са2+-каналов, проницаемых для Мп2+ и Ni2+ Скорость и амплитуда быстрой фазы уменьшаются, а медленной фазы возрастают в присутствии специфических ингибиторов Са2+-независимой фосфолипазы А2 - броменоллактона и пальмитоилтри-фторметилкетона. Скорость и амплитуда быстрой фазы подавляется также арахидоновой кислотой, ингибитором липоксигеназы нордигидрогуаретиковой кислотой и не подавляется ингибитором Са2+-зависимой фосфолипазы А2 - бромфенацилбромидом, ингибитором циклооксигеназы индометаци-ном, специфическим ингибитором SOC-каналов гадолинием, ингибитором фосфолипазы С U73122. Скорость быстрой фазы слабо зависит от температуры. Скорость медленной фазы сильно зависит от температуры и растет при повышении температуры с Qw = 2. Амплитуда быстрой фазы Са2+-сигнала возрастает при понижении температуры за счет увеличения времени максимальной активности канала. Полученные данные указывают, что Са2+-независимая фосфолипаза А2 (iPLA2) является промежуточным звеном в пути активации калмидазолий-индуцированного неселективного Са2+-канала. Предполагается, что продукты iPLA2 (лизофосфолипид и арахидоновая кислота) действуют как активатор и ингибитор канала соответственно. Они имеют различное сродство к нему, что объясняет механизм двухфазного повышения концентрации Са2+ в цитозоле тимоцитов и увеличение времени нахождения канала в активном состоянии при понижении температуры.