ЭУКАРИОТИЧЕСКИЙ ФАКТОР ТЕРМИНАЦИИ ТРАНСЛЯЦИИ eRFl СВЯЗЫВАЕТСЯ С ПРОТЕИНФОСФАТАЗОЙ 2А И ДОСТАВЛЯЕТ ЕЕ К РИБОСОМЕ

摘要

При очистке протеинфосфатазы типа 2А (РР2А) из скелетных мышц кролика выделены три белка: собственно фосфатаза - тример, состоящий из каталитической (РР2Ас), структурной (PR65a/Aa) и регуляторной (PR55a/Ba) субъединиц, фактор терминации трансляции первого класса (eRFI) и еще один белок с молекулярной массой 55 кДа [EMBO J., 15, 101-112], Опыты с использованием дрожжевой двугибридной системы показали, что eRFl взаимодействует с РР2Аса, но не взаимодействует ни с PR65a/Aa, ни с PR55a/Ba. Во взаимодействие eRFl-PP2Aca в дрожжах вовлечены N-концевой фрагмент РР2Аса, включающий 50 аминокислотных остатков, и С-концевой фрагмент eRFl, соответствующий участку, лежащему между аминокислотами 338 и 381. Присутствие комплекса eRFl-PP2Aca-PR65a/Aa в клетках COS1 показано иммунологичес-ки с использованием антител 12СА5 и экстрактов клеток COS1, трансфецированных eRFl, содержавшим дополнительный9-аминокислотный фрагмент гемаглютинина вируса гриппа (НА), В полисомах из клеток COS1, сверхэкспрессирующих HA-eRFl, активность РР2А в несколько раз выше, чем в полисомах из контрольных клеток. В системе in vitro не обнаружено влияния РР2Ас, а также димерного и тримерного белка РР2А на скорость терминации трансляции. Высказано предположение, что eRFl представляет собой новую субъединицу-мишень для РР2А, которая обеспечиваетконтакт этой фосфатазы с предполагаемым субстратом на рибосоме. Остается невыясненным, подвергаются ли дефосфорилированию участвующие втерминации белковые факторы.