タンパク質リン酸化の解析

摘要

今回は，タンパク質リン酸化の解析法を紹介する．といっても，様々な問題点があり，まだまだ解決されなければいけない点も多い．ここでは，プロトコルシリーズの最後として，筆者らがタンパク質リン酸化の解析に使用しているプリカーサースキャン法による測定法とそのプロトコルを紹介することにする．タンパク質リン酸化を始めとする翻訳後修飾の解析では，通常細胞を放射性同位元素を用いてラベルし，そのラベルの取り込みを測定することが通常行われる．タンパク質リン酸化では，［32p］でラベルする．細胞や動物個体では放射性の無機リン酸を，試験管中でのリン酸化ではラベルしたATPを用いて，リン酸化部位を標識する．質量分析による解析のメリットは，このようなプレラベルをする必要がないことである．