Morfogénesis In Vitro De Dioon Merolae De Luca, Sabato & Vázquez-torres (zamiaceae, Cycadales) A Partir De Megagametofitos Yembriones Cigóticos

摘要

A partir de explantes de embriones cigóticos y megagametofi-tos fueron inducidos cultivos organogénicos de Dioon merolae del estado de Chiapas (México), cicada en peligro de extinción. El medio de inducción Litz consistió en los macronutrientes del medio B5, los micronutrientes del medio MS y los compuestos orgánicos glutamina (400mg·l~(-1)) arginina (100mg·l~(-1)), asparagina (100mg·l~(-1)), sacarosa (60g·l~(-1)), gellan-gum (4g), y suplementado con 0; 0,45; 2,26; 4,52 y 9,05/μM ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), y 0; 2,32; 4,60; 9,30 y 13,90μM kinetina (K), con un arreglo de 5×5 con un diseño de bloque seleccionado al azar. Los cultivos fueron mantenidos en oscuridad a 25℃ y el callo fue subcultivado en medio fresco cada cuatro semanas. La ini- ciación del callo ocurrió en un amplio rango de combinaciones de reguladores de crecimiento en explantes de megagametofito. El callo en explantes de embriones cigóticos se formó en potas combinaciones. La formación de brotes adventicios ocurrió solo en callos que provenían de combinaciones con K y 2,4-D. A través del análisis histológico de secciones longitudinales de embriones cigóticos se detectaron células meristemáticas apicales de brote y raíz, y en megagametofitos la formación de elementos de conducción similares a traqueidas y raíces coral-oides. Esta técnica presenta gran potencial para la preservación de especies de cicadas en peligro de extinción.%Organogenic cultures were induced from zygotic embryo and megagametophyte explants of the Chiapas State (Mexico) endangered cycad species, Dioon merolae. The Litz induction medium consisted of B5 major salts, MS medium minor salts and the or-ganics glutamine (400mg·l~(-1)), arginine (100mg·l~(-1)), asparagines (100mg·l~(-1)), sucrose (60g·l~(-1)), gellan gum (4g), and supplemented with 0, 0.45, 2.26, 4.52 and 9.05μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 0, 2.32, 4.60, 9.30, 13.90μM kinetin (K), arranged as a 5×5 factorial in a randomized block design. Cultures were maintained in darkness at 25℃, and callus was sub-cultured onto fresh medium at 4 week intervals. Callus initia- tion occurred on a wide range of plant growth regulators (PGR) combinations from megagametophyte explants. In comparison, callus initiation from explanted zygotic embryos occurred on few PGR combinations. Adventitious shoot induction occurred from callus on formulations with K and 2,4-D. Through the histo-logical analysis of longitudinal sections of zygotic embryos were detected apical meristematic cells of the shoot and root and in megagametophytes the formation of elements similar to trache-ids and coralloid roots. This technique has a great potential for preservation of the highly endangered cycads.