钛表面粗糙度对牙周韧带细胞早期附着影响的免疫荧光观察

摘要

目的:观察牙周韧带细胞在不同纯钛表面粗糙度的早期附着情况.方法:24个纯钛片分别按100,280,400,800目水砂纸顺序打磨.将样品分为4组:单纯机械处理(A组);单纯机械处理+65%硝酸(100 °C,1 h)处理(B组);单纯机械处理+100 μm Al2O3喷砂处理(C组);单纯机械处理+100 μm Al2O3喷砂+65%硝酸(100 °C,1 h)处理(D组).每组样品6个.采用TR240便携式表面粗糙度仪测定表面粗糙度.实验方法:样品在DMEM中预置30 m后接种第3代的细胞,分别于30 min,60 min,120 min,240 min,1天,3天,7天取出钛片,PBS冲洗以除去未贴附细胞,2.5%戊二醛固定30 min.取出钛片,1%醋酸处理30 s,PBS清洗,0.01%丫啶橙(g/mL)染色4 min,PBS冲洗,最后由0.1 M CaCl2分色30 s,于荧光显微镜下观察不同粗糙度表面对细胞的粘附情况.结果:①各组纯钛表面的粗糙度:B组、C组、D组纯钛表面的粗糙度低于A组[分别为(0.4065±0.0046),(0.3588±0.0118),(0.0087±0.0022),(0.5995±0.0083)],差异有显著性意义(P<0.001);C组、D组纯钛表面的粗糙度低于B组,差异有显著性意义(P<0.001);D组纯钛表面的粗糙度低于C组,差异有显著性意义(P<0.001).4组间方差分析结果表明,组间差异有显著性意义(P<0.0001).②牙周韧带细胞在纯钛表面早期附着的荧光观察:随着时间的推移,各组早期附着在纯钛表面的牙周韧带细胞增多,细胞增殖良好.四组不同纯钛表面粗糙度的荧光观察显示:钛表面粗糙度大,细胞附着较少;钛表面粗糙度小,细胞附着较致密些.结论:钛表面粗糙度越小,牙周韧带细胞早期附着越多,有利于细胞粘附和增殖.