Kininogenase activity in plasma membranes and cell organelles from rabbit kidney cortex: Subcellular localization of renal kallikrein by free-flow electrophoresis and density-gradient fractionation

摘要

Kininogenase activity in plasma membranes and cell organelles from rabbit kidney cortex: Subcellular localization of renal kallikrein by free-flow electrophoresis and density-gradient fractionation. Subcellular fractions were prepared from a rabbit kidney cortex homogenate by density gradient and free-flow electrophoresis techniques. After enzymatic and morphologic characterization, we determined the kininogenase activity in the different fractions. This activity was present in those plasma membranes that also contained high specific activities of Na-K-ATPase and in lysosomal-like particles. No activity was found in the lumen, that is, the microvillous part of the proximal tubule cell. The kallikrein-like nature of this kininogenase activity was established by several methods.Activité kininogènasique dans les membranes plasmatiques et les organelles cellulaire de cortex de rein de lapin: Localisation subcellulaire de la kallikréine par d'électrophorèse en flux libre et de fractionnement par gradient de centrifugation. Les fractions subcellulaires ont été préparées à partir de cortex de rein de lapin utilisant les techniques de gradient de centrifugation et d'electrophorèse en fiux libre. L'activité kininogènasique à été déterminée dans les différentes fractions après traitement enzymatique et characterisation morphologique. L'activité à été trouvée dans les fractions plasmatiques contenant également de hautes activités spécifiques Na-K-ATPasiques et dans les particles "lysosome-like." Aucune activité n'a été retrouvée dans les zones luminales, i.e., les microvillosités des cellules tubulaires proximales. La nature "kallikrein-like" de cette activité kininogènasique à été établie par différentes methodes.