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Validação in vitro e in vivo da viabilidade de eritrócitos suínos estocados para estabelecer um modelo experimental de transfusão homóloga de hemácias: estudo piloto

机译:体外和体内验证储存的红细胞的能力,以建立同源红细胞输注的实验模型:先导研究

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摘要

Objetivo: Para desenvolver modelos experimentais de transfusão de hemácias, o primeiro passo é assegurar a viabilidade dos eritrócitos transfundidos. Avaliamos a viabilidade de eritrócitos transfundidos com validação in vitro e in vivo de eritrócitos suínos homólogos armazenados por 14 dias. Métodos: Neste estudo piloto, o sangue coletado de um suíno Agroceres® foi estocado em duas unidades de hemácias. A validação in vivo foi realizada pela marcação dos eritrócitos com Na2 51CrO4 e recuperação dos eritrócitos viáveis após 24 horas da infusão em um animal autólogo e quatro homólogos. A validação in vitro foi realizada na avaliação basal e após 14 dias, pela mensuração da hemoglobina, hematócrito, índice de hemólise e hemoglobina livre em seis unidades de hemácias. Foi realizada uma esplenectomia post-mortem para avaliar o sequestro esplênico de eritrócitos, e a radioatividade das amostras de sobrenadante foi contada para avaliar a hemólise intravascular. Resultados: Após 14 dias de estocagem, as unidades de hemácias tinham volumes menores e concentração total de hemoglobina equivalente em comparação aos padrões humanos. A concentração de hemoglobina livre aumentou de 31,0±9,3 para 112,4±31,4mg/dL (p0,001) e o índice de hemólise aumentou de 0,1±0,1 para 0,5±0,1% (p0,001). Entretanto, esses testes se encontravam dentro da faixa aceitável para os padrões humanos. A percentagem de radioatividade nas amostras de sobrenadante foi similar na avaliação basal e após 24 horas, afastando, assim, a presença de hemólise significante. Não se encontraram evidências de sequestro esplênico de eritrócitos radioativos. Conclusão: Hemácias suínas estocadas por 14 dias são viáveis e podem ser utilizadas em estudos experimentais de transfusão. Esses experimentos de validação são importantes para ajudar os investigadores a estabelecerem modelos experimentais de transfusão.
机译:目的:建立红细胞输注实验模型,第一步是确保红细胞的生存能力。我们用保存14天的同源猪红细胞的体外和体内验证评估了输血红细胞的生存能力。方法:在该初步研究中,从Agroceres®猪收集的血液存储在两个红细胞单元中。通过用Na 2 51CrO 4标记红细胞并在自体动物和四个同源物中输注24小时后回收活红细胞来进行体内验证。在基线和14天后,通过测量6个单位的红细胞中的血红蛋白,血细胞比容,溶血指数和游离血红蛋白来进行体外验证。进行死后脾切除术以评估脾红细胞隔离,并计数上清液的放射性以评估血管内溶血。结果:储存14天后,与人体标准品相比,RBC单位的体积和总血红蛋白浓度较小。游离血红蛋白浓度从31.0±9.3增加到112.4±31.4mg / dL(p <0.001),溶血指数从0.1±0.1增加到0.5±0, 1%(p <0.001)。但是,这些测试在人类标准的可接受范围内。在基线和24小时后,上清液样品中的放射性百分比相似,因此排除了明显的溶血现象。没有证据表明脾脏螯合放射性红细胞。结论:储存14天的猪红细胞是可行的,可用于实验性输血研究。这些验证实验对于帮助研究者建立实验性输血模型非常重要。

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