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【24h】

Evaluation of real time PCR technique to diagnosis of human T-lymphotropic virus type I (HTLV-I) in patients in the Hematologia da Funda??o Hemope Hospital, in Northeastern Brazil

机译:实时PCR技术对巴西东北部血吸虫病医院的I型人T淋巴细胞病毒(HTLV-I)诊断的评估

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摘要

Como os genomas provirais do HTLV-I e HTLV-II exibem grande homologia, há uma expressiva sororeatividade cruzada. Assim, a detec??o de anticorpos anti-HTLV-I/II embora caracterize infec??o viral, n?o permite estabelecer distin??o entre os agentes. Os testes moleculares empregados para o diagnóstico dos vírus HTLV-I/II, baseiam-se na pesquisa de seqüências gen?micas provirais permitindo o diagnóstico da infec??o antes de aparecer sinal ou sintoma. A carga proviral de HTLV pode ser determinada através da utiliza??o da PCR em tempo real, uma técnica rápida e com menor risco de contamina??o que a PCR simples ou nested PCR. Analisamos, 63 amostras do Hospital HEMOPE, das quais 33 foram de indivíduos com sorologia reagente para HTLV e 30 de doadores de sangue, para determinar o tipo de vírus e a carga proviral. A sensibilidade da PCR qualitativa em rela??o ao ELISA foi de 87,9% (IC 95%: 70,9-96,0%) e a especificidade foi de 100% (IC 95%: 85,9-100,0%). A sensibilidade e especificidade da PCR em tempo real foram de 100% (IC 95%: 86,7-100,0%) e 96,67% (IC 95%: 80,9-99,8%), respectivamente. A carga proviral variou entre 13 cópias/106 células PBMC e 343820 cópias/106 células PBMC. Nosso estudo também observou que os indivíduos com PET/MAH tiveram carga proviral mais elevada que a dos indivíduos assintomáticos. A utiliza??o da PCR em tempo real na rotina clínica dos indivíduos infectados poderá desempenhar um papel relevante na identifica??o do vírus e na determina??o da carga proviral, contribuindo para direcionar um tratamento adequado.
机译:由于HTLV-I和HTLV-II省级基因组表现出极大的同源性,因此存在表达交叉反应性。因此,抗-HTLV-I / II抗体的检测虽然表征了病毒感染,但却无法区分这些药物。用于诊断HTLV-I / II病毒的分子测试基于对前病毒基因序列的搜索,从而可以在征兆或症状出现之前诊断出感染。 HTLV的前病毒载量可以通过使用实时PCR来确定,这是一种快速技术,与简单PCR或巢式PCR相比,污染风险较小。我们分析了来自医院HEMOPE的63个样本,其中33个来自具有HTLV反应性血清学的个体,另外30个来自献血者,以确定病毒的类型和前病毒载量。与ELISA相关的定性PCR灵敏度为87.9%(95%CI:70.9-96.0%),特异性为100%(95%CI:85.9-100), 0%)。实时荧光定量PCR的敏感性和特异性分别为100%(95%CI:86.7-100.0%)和96.67%(95%CI:80.9-99.8%)。前病毒载量在13拷贝/ 106 PBMC细胞和343820拷贝/ 106 PBMC细胞之间变化。我们的研究还发现,患有PET / MAH的个体比无症状个体具有更高的前病毒负荷。在感染者的临床常规中使用实时PCR可能在病毒的鉴定和前病毒载量的确定中起着重要作用,有助于指导适当的治疗。

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