CONFIRMATION OF MELOIDOGYNE HAPLA ON STRAWBERRY IN FLORIDA USING MOLECULAR AND MORPHOLOGICAL TECHNIQUES [IDENTIFICACIóN DEL NEMATODE NODULADOR MELOIDOGYNE HAPLA, EN FRESA EN FLORIDA MEDIANTE MéTODOS MORFOLóGICOS Y MOLECULARES]]

摘要

Nyoike, T.W., T. Mekete, R. McSorley, E. Weibelzahl-Karigi, and O. E. Liburd. 2012. Identification of the root-knot nematode, Meloidogyne hapla, on strawberry in Florida using morphological and molecular methods. Nematropica 42:253-259. Morphological and molecular studies were conducted to identify a root-knot nematode that was found on strawberry roots growing in Marion County, Florida, and on strawberry transplants imported from nurseries in Ontario, Canada. In early spring 2011, strawberry plants growing in the field were observed showing localized stunting and galled roots. Soil samples collected from the field revealed a very high number of Meloidogyne infective juveniles (232 J2/100cc soil) in one block but relatively low numbers in two other blocks. Morphological studies based on perineal patterns of root-knot females collected from the field-strawberry roots and from strawberry transplants (received from nurseries in October 2011) were conducted. The perineal patterns indicated that they were Meloidogyne hapla Chitwood. Polymerase Chain Reaction (PCR) amplification of the region between COII and 16S rRNA of the mitochdrial DNA produced a single fragment ca 540 bp. Restriction digestion of the amplified PCR products with Dra1 enzyme produced two fragments at 200 and 250 bp indicating that the root-knot nematode in the field and on transplant strawberry plants was M. hapla. DNA sequencing of the internal transcribed spacer (ITS) region produced a single fragment ca 990 bp and a BLAST search in the Genbank revealed that the species was 98% identical to other known M. hapla sequences in the Genbank. This study ascertains that M. hapla recorded on strawberry plants in the field was imported with the transplants from the nurseries in Ontario, Canada. M. hapla, is commonly found in cooler climates and high altitudes, and has been reported as a common pest for strawberries in northeastern United States. Implications of importing nematode-infected strawberry transplants are discussed.Nyoike, T.W., T. Mekete, R. McSorley, E. Weibelzahl-Karigi, and O. E. Liburd. 2012. Identificación del nematode nodulador Meloidogyne hapla, en fresa en Florida mediante métodos morfológicos y moleculares. Nematropica 42:253-259. Se realizaron estudios morfológicos y moleculares para identificar un nematodo agallador encontrado en raíces de fresa en el condado de Marion, Florida y en trasplantes de fresa importados de viveros de Ontario, Canadá. A principios de la primavera de 2011, se observaron en el campo rodales de plantas de fresa con enanismo y raíces agalladas. Muestras de suelo recolectadas de este campo revelaron un número muy alto de juveniles infectivos de Meloidogyne (232 J2/100cc suelo) en uno de los bloques pero relativamente bajo en los otros dos bloques. Se llevaron a cabo estudios morfológicos basados en el patrón perineal de las hembras del nematodo utilizando muestras de raíces de fresa recolectadas en el campo y raíces de trasplantes de fresa (recibidos de viveros en Octubre 2011). El patrón perineal indicó que las hembras eran Meloidogyne hapla Chitwood. La amplificación de la región entre COII y el 16S rRNA del DNA mitocondrial mediante la reacción en cadena de la polimerasa produjo un solo fragmento de aprox. 540 bp. La digestión del producto amplificado de la PCR con la enzima Dra1 produjo dos fragmentos a 200 y 250 bp, lo que indicaba que la especie de Meloidogyne encontrada en el campo y en los trasplantes era M. hapla. La secuenciación del DNA de la región ITS confirmó la identidad de M. hapla con un 98% de similitud con otras especies conocidas de M. hapla depositadas en el Genbank. Este estudio confirma que M. hapla en las plantas de fresa en el campo fue importada con los trasplantes procedentes de Ontario, Canadá. M. hapla se encuentra comúnmente en climas más fríos y altitudes altas y se ha citado como una plaga común de la fresa en el noreste de los Estados Unidos de América. Se discute las implicaciones de importar