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【24h】

Atividade proteolítica de isolados de Metarhizium anisopliae sobre substratos cuticulares e n?o-cuticulares

机译:拟南芥分离物对表皮和非表皮基质的蛋白水解活性

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摘要

Cigarrinhas s?o as principais pragas da pastagem e da cana-de-a?úcar, destacando-se os gêneros Deois e Mahanarva. Essas pragas vêm causando sérios danos a estas culturas na regi?o de Tangará da Serra, MT, Brasil. O fungo Metarhizium anisopliae é considerado um eficiente agente para o controle biológico de insetos, possuindo vários fatores de virulência, incluindo a produ??o de proteases, consideradas fundamentais no processo de penetra??o através da cutícula do inseto. Este trabalho tem como objetivos analisar a produ??o de proteases extracelulares a partir de isolados de M. anisopliae, utilizando substratos cuticulares e n?o-cuticulares, e verificar a influência desses substratos na express?o dessas enzimas. Foram utilizados 4 isolados de M. anisopliae obtidos na regi?o de Tangará da Serra e o isolado R3 BB 40, empregado para o controle biológico das cigarrinhas da cana-de-a?úcar pelas Usinas Itamarati (Nova Olímpia / MT). A atividade enzimática foi determinada através do índice de Rela??o Enzimática (IRE) em Meio Mínimo (MM), sem glicose, acrescido de caseína, gelatina e cutícula de adultos de Mahanarva fimbriolata e Deois flavopicta. Os isolados UNEMAT 03, UNEMAT 04, UNEMAT 05, UNEMAT 06 e R3-BB-40 apresentaram valores de IRE que variaram de 1,82 ± 0,062 a 2,16 ± 0,027 frente ao substrato gelatina e de 1,60 ± 0,076 a 2,08 ± 0,063 em caseína. Para os substratos cuticulares, houve crescimento das col?nias, porém n?o apresentaram revela??o de halo (IRE.= 1). Todos os isolados apresentaram IRE frente ao substrato gelatina>caseína>cutícula, destacando-se os isolados R3-BB-40 e UNEMAT 05. Existe uma variabilidade genética entre os isolados quanto à produ??o de proteases extracelulares e, sob tais condi??es, as cutículas n?o demonstraram ser substrato adequado para a detec??o de atividade proteolítica.
机译:蚱hopper是牧场和甘蔗的主要害虫,尤其是德瓦伊斯(Deois)和玛哈纳瓦(Mahanarva)属。这些有害生物已严重损害了巴西MT坦加拉达塞拉地区的这些作物。被认为是一种对昆虫进行生物控制的有效药剂,其具有多种毒力因子,包括蛋白酶的产生,被认为是穿透昆虫角质层的基础。这项工作旨在分析使用表皮和非表皮底物,从分离的分枝杆菌中分离出胞外蛋白酶,并验证这些底物对这些酶表达的影响。使用了在Tangaráda Serra地区获得的4种分离的支原体分枝杆菌和R3 BB 40分离株,用于Itamarati植物(NovaOlímpia/ MT)对甘蔗叶蝉的生物控制。酶活性是使用最低培养基(MM)中的酶比(IRE)指数确定的,该培养基中不含葡萄糖,另外还添加了来自Mahanarva fimbriolata和Deois flavopicta成年人的酪蛋白,明胶和角质层。分离株UNEMAT 03,UNEMAT 04,UNEMAT 05,UNEMAT 06和R3-BB-40对明胶底物的IRE值范围为1.82±0.062至2.16±0.027,而从1.60±0.076至2 ,酪蛋白为08±0.063。对于表皮基质,菌落生长,但没有显示晕圈(IRE。= 1)。所有分离株均表现出针对明胶>酪蛋白>角质层底物的IRE,突出显示了分离株R3-BB-40和UNEMAT05。分离株之间是否存在关于细胞外蛋白酶产生的遗传变异性?因此,尚未显示出表皮是检测蛋白水解活性的合适底物。

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