Activated pericyte attenuates endothelial functions: nitric oxide - cGMP rescues activated pericyte-associated endothelial dysfunctions

摘要

Hepatic stellate cells are liver-specific pericytes and exist in close proximity with endothelial cells. The activation of liver pericytes is intrinsic to liver pathogenesis, and leads to endothelial dysfunction, including the low bioavailability of nitric oxide (NO). However, the role of nitric oxide in pericyte-endothelium cross-talk has not yet been elucidated. This work examines the cellular mechanism of action of NO in pericyte-mediated endothelial dysfunction. We used in vitro coculture and conditioned medium systems to study the effects of activated liver pericytes on endothelial function, and an egg yolk vascular bed model was used to study the effects of activated pericytes on angiogenesis. This study also demonstrates that activated pericytes attenuate the migration, proliferation, permeability, and NO production of endothelial cells. Our results demonstrate that activated pericytes restrict angiogenesis in egg yolk vascular bed models, and NO supplementation recovers 70% of the inhibition. Our results also demonstrate that supplementation with NO, sildenafil citrate (phosphodiesterase inhibitor), and 8-bromo-cGMP (cGMP analog) partially recovers activated-pericyte-mediated endothelium dysfunction. We conclude that NO-cGMP alleviates activated-pericyte-associated endothelial dysfunction, including angiogenesis, in a cGMP-dependent manner.Les cellules stellaires hépatiques sont équivalentes aux péricytes dans le foie et vivent à proximité des cellules endothéliales. L'activation des péricytes hépatiques est un problème complexe dans la pathogenèse hépatique reliée aux dysfonctions endothéliales, dont la faible biodisponibilité d'oxyde nitrique. Cependant, le rôle de l'oxyde nitrique dans la relation péricyte-endothélium n'est pas encore élucidé. Le présent travail dissèque les mécanismes moléculaires de l'action de l'oxyde nitrique dans la dysfonction endothéliale dépendante des péricytes. Une co-culture in vitro et des systèmes de milieux conditionnés ont été utilisés pour étudier les effets de péricytes hépatiques activés sur les fonctions endothéliales. Un modèle de lit vasculaire vitellin a été employé pour étudier les effets des péricytes activés sur l'angiogenèse. La présente étude démontre aussi que les péricytes activés diminuent la migration, la prolifération et la perméabilité des cellules endothéliales ainsi que la production d'oxyde nitrique par ces dernières. Les résultats démontrent que les péricytes activés inhibent l'angiogenèse dans les modèles de lit vasculaires vitellins et qu'une supplémentation en oxyde nitrique permet de lever 70% de l'inhibition. De plus, les résultats de ce travail montrent qu'une supplémentation en oxyde nitrique, en citrate de sildénafil (inhibiteur de la phosphodiestérase) et en 8 bromo GMPc (analogue du GMPc) permet d'éliminer partiellement les dysfonctions endothéliales dépendantes des péricytes activés. Cette étude conclut que l'oxyde nitrique/GMPc allège les dysfonctions endothéliales associées aux péricytes activés, incluant les effets sur l'angiogenèse de façon dépendante du GMPc.